13-滷代-3,15-二氧代赤黴酸酯及其製備方法

2023-10-17 01:31:24 3

專利名稱：13-滷代-3,15-二氧代赤黴酸酯及其製備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥衛生和化學領域的藥用化合物，特別是一種13-滷代-3， 15-二氧代赤黴酸酯及其製備方法。 背景糹支術癌症是嚴重威脅人類健康的一類疾病。目前用於治療癌症的主要手段是化學 療法。臨床應用的化療藥物絕大多數都有使患者噁心、嘔吐、白細胞下降、骨 髓抑制等毒副作用，影響了病人情緒及身體健康，因而大大限制了化療藥物的 臨床應用。因此，尋找高活性，無毒或低毒副作用的抗癌化合物成為新藥研究 的一項重要課題。赤黴素是一類廣泛存在於植物和微生物體內、具有植物生長促進或植物生 長抑制生物活性的四環二萜類化合物，以商業化發酵生產的赤黴素(如GA3、 GA4、 GA7)為原料進行結構改造和修飾，以期發現具有更好植物生長促進或植 物生長抑制活性以及其它諸如抗菌、抗癌等新活性的赤黴素及其衍生物有著重 要的學術價值和實用價值。在本發明前期的研究中，本申請的發明人以赤黴酸(GA3)為原料合成得到 的3位和15位同時被氧化成羰基的赤黴酸衍生物具有很強的抗癌活性，同時對 正常細胞毒性很低，該項成果已於2004年申請了專利並獲得授權，專利號 ZL200410021939。在本發明中我們又對此類結構的13位進行了進一步衍生化研 究。發明內容本發明的目的是提出一種具有結構通式(I)的化合物13-卣代-3， 15-二氧 代赤黴酸酯及其製備方法，該類化合物具有抗癌作用。式中W為曱基、2個碳到5個碳的烷基、苄基;W為氟、氯、溴、碘。本發明合成了系列13位卣代的3， 15-二氧代赤黴酸酯類化合物，經抗癌活性實驗證明，這些化合物具有較強的抗腫瘤活性和對正常細胞的低毒性。 本發明的目的是這樣實現的以3， 13， 15-三羥基赤黴酸酯(1)或3, 13， 15-三羥基赤黴酸節酯(2)為起始原 料，(1)或(2)參照專利ZL200410021939中的方法製備。(1)或(2)在低極性溶劑 中低溫下加入二曱亞碸與適當比例的草醯氯或二曱亞碸與適當比例的氯化亞碸 形成的氧化劑，氧化3位和15位羥基為3, 15-二羰基的同時，13位同時發生 氯代反應生成具有結構通式(I)的化合物(3)或(4)。所述的低極性溶劑為苯、曱苯、二氯甲烷、三氯曱烷、正已烷、環已烷、 石油醚，用量為10-100mL溶劑/g底物；以二曱亞碸與草醯氯或二曱亞石風與氯 化亞碸在-7(TC至-40。C下形成的化合物為氧化劑，加入侍氧化和氯代的底物 後反應5-30分鐘，再加入三乙胺進行反應5-30分鐘。所述的化合物用量按摩爾比為底物/二曱亞石風/草醯氯或氯化亞^風/三乙胺 =1/2 ~ 50/2 ~ 6/4 ~ 100。採用各化合物用量按摩爾比為底物/二曱亞碸/草醯 氯/三乙胺=1/10/5/14。以化合物(1)或(2)製備(3)或(4)的步驟如下:式中(l)= CH3; 2國5個石灰的烷基，(2) Rq = PhCH2 ,(3) R = CH3; 2-5個碳的烷基，(4) R！ = PhCH2, a) DMSO， C10CCOCl，NEt3/CH2Cl2或DMSO,SOCl2,NEt3/CH2Cl2。 13-氯-3， 15_二氧> 赤黴酸酯(3)或(4)在四氫呋喃、乙腈、丙酮、N, N-二甲基曱醯胺、二曱亞碸、六曱基磷醯三胺等極性非質子性溶劑中與氟化鈉、 氟化鉀、氟化銨、四丁基氟化銨等氟化試劑反應得到13-氟-3， 15-二氧代赤黴 酸酯(5)或(6),反應溶劑採用丙酮，反應溫度採用丙酮回流溫度；氟化試劑 採用氟化鉀，反應中各化合物的用量按摩爾比為底物/氟化鉀=1/2~50/，丙 酮用量為10-100 mL /mmol底物，化合物(5)或(6)的製備如下，式中(3)的R廣CH3;2-5個碳的烷基，(4)的= PhCH2, (5)的R,CH3;2-5個碳的烷基，(6)R,-PhCH2，b) KF/CH3COCH3。 13-溴-3， 15-二氧代赤黴酸酯(7)和(8)是分別以13-氯-3， 15-二氧代 赤黴酸酯(3)或(4)為原料，在極性非質子性溶劑，如四氫呋喃、丙酮、乙 醚、乙腈、二曱亞碸、N， N-二曱基曱醯胺、六曱基磷醯三胺等中與溴化鈉、溴 化鉀、溴化鋰，四丁基溴化銨等溴化試劑反應製備，反應溶劑採用乙腈，溴化 試劑採用溴化鋰，反應溫度採用乙腈回流溫度，反應中化合物的用量按摩爾比 為底物/溴化鋰=1/2~50,乙腈用量為10~100 mL /mmo1底物，(7)或(8) 的製備如下，式中(3)的R^CH3;2-5個碳的烷基，(4)的R4 = PhCH2 , (7)的R！ = CH3; 2-5個碳的烷基，(8)的R, = PhCH2c ) UBr/CH3CN13會3, 15-二氧代赤黴酸酯(7)或(8)，亦可由ZL200410021939中的 方法製備的13-羥基-3， 15-二氧代赤黴酸酯(11)或(12)與三溴化磷、吡啶 在二氯曱烷中反應製備，反應中各化合物的用量按摩爾比為底物/吡啶/三溴 化磷-1/1~ 20/0. 35 ~2， 二氯曱烷用量為10~100 mL /mmo1底物，反應溫度採 用-10°C~0°C。製備反應式如下(11) R！ = CH3; 2-5個碳的烷基 (7) R！ = CH3; 2-5個碳的烷基(12) R！ = PhCH2 (8)= PhCH2d) PBr3/CH2Cl213-碘-3， 15-二氧代赤黴酸酯(9)和(10)是分別以13-氯-3， 15-二氧代 赤黴酸酯(3)或(4)為原料，在極性非質子性溶劑，如四氫呋喃、丙酮、乙 醚、乙腈、二甲亞碸、N, N-二曱基曱醯胺、六曱基磷醯三胺等中與碘化鈉、碘 化鉀、碘化鋰，四丁基碘化銨等碘化試劑反應製備，反應溶劑採用乙腈，石典化 試劑採用碘化鈉，反應溫度採用乙腈回流溫度，反應中化合物的用量按摩爾比 為底物/硪化鈉=1/2~50,乙腈用量為10-100 mL /mmol底物，(9)或(10) 的製備如下，(3) R = CH3; 2-5個碳的烷基 (9) R！ =CH3; 2-5個碳的烷基(4) & = PhCH2 (10) R4 = PhCH2 e) NaI/CH3CN13-硪-3, 15-二氧代赤黴酸酯(9)或(10)亦可由ZL200410021939中的 方法製備的13-羥基-3， 15-二氧代赤黴酸酯(11)或(12 )與三苯基膦、碘和咪唑在二氯甲烷中反應製備目標物，反應中化合物的用量按摩爾比為底物/咪 唑/碘-1/2~30/1~5， 二氯曱烷用量為10 ~ 100 mL/mmo1底物，反應溫度採用 -10°C~(TC。 (9)或(10)的製備如下，(11) R, = CH3; 2-5個石岌的烷基 (9) R！ = CH3; 2-5個石友的烷基(12) = PhCH2 (10)= PhCH2f) PPh3， imidazole, I2/ CH2C12 13-羥基-3， 15-二氧代赤黴酸酯(11)和(12)除按ZL200410021939中 的方法製備外，還可由13-氯-3, 15-二氧代赤黴酸酯(3)或(4)在丙酮、乙 腈、四氬呋喃、二氯曱烷等極性非質子性溶劑中與水和碳酸氳鈉、碳酸鈉、碳 酸銀、三乙胺、二異丙基乙基胺等減反應製備。採用丙酮作為溶劑，用量為10 ~ 100 mL /mmo1底物；採用碳酸銀作為鹼；反應溫度採用丙酮回流溫度；反應中 化合物的用量按摩爾比為底物/碳酸銀=1/1~2;採用水用量按體積為丙酮體 積的1/4，丙酮用量採用5 10mL/mmol底物。(11)或(12 )的製備步驟如下(3) R！ = CH3; 2-5個碳的烷基 (11) R！ = CH3; 2-5個碳的烷基(4) & = PhCH (12)= PhCHg) Ag2C03， H20/CH3COCH3 具有結構通式(I)的化合物與至少一種藥物上可接受的賦形劑或載體制 得的藥物組合可用於治療癌症。
具體實施方式
以下結合實施方式列舉本發明的典型化合物，但本發明並不僅限於這些實 施例或被這些實施例所限制。化合物3 13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸曱酯製備過程如下混合二曱亞碸(7.6 g， lOOmmol)和二氯曱烷(30mL),冷卻至-70°C，攪拌 下滴加草醯氯(6. 35g， 50隱o1 )， 5分鐘左右加完，控制反應溫度為-7(TC至-40。C之間。草醯氯加入10分鐘後滴加3,13,15-三羥基赤黴酸甲酯(3. 76g， lOmmol )與二氯曱垸(20mL)和二曱亞碸(4 mL)配成的溶液，5分鐘左 右加完後，在-7(TC至-40。C之間攪拌反應20分鐘。再加入三乙胺(14. 14g，140mmo1)，繼續在-7(TC至-40。C之間攪拌反應15分鐘，糹敬去冷浴， 自然升溫至室溫。反應液轉入分液漏鬥中，加入冰冷卻的乙酸乙酯(60 mL)，依 次用水冷卻的鹽酸(2N, 70mL x 1 )洗和水(30mL x 2 )洗，分出有才幾層，加無水 硫酸鈉乾燥，過濾除去乾燥劑，減壓蒸出溶劑至幹，得黃色固體3. 79g,矽膠柱 層析(正己烷/乙酸乙酯=4 / l)純化得白色結晶3.45 g,收率87. 9 %。 元素分析C2。HwC106計算值(°/。) C， 61.47; H, 4.90; Cl， 9.07 實測值(°/。) C， 61.45; H， 4.93; Cl， 9.06服R (CDCU 300MHz): 5 7. 19 (d， J=9. 4Hz， 1H), 6. 23(S， 1H) ， 6. 07 (d， J=9.4Hz， 1H), 5. 87(s, 1H)， 3. 63(s, 3H) ， 3. 62 (d， J=10. 2Hz， 1H)， 2. 82 (d, J=10.2Hz， 1H)， 2. 79(d， J=ll. 5Hz， 1H), 2.69-2.62 (m， 1H)， 2.50(d， J=ll. 5Hz, 1H)， 2. 40—2. 10(m， 4H), 1.88(m, 1H), 1. 33(s， 3H).13CNMR(CDCl3，500MHz): 5 200.35， 191.08， 172.71， 170.23， 150.73， 145. 81: 129.75， 121.41， 89.17， 65.95， 65.45, 61.28， 60.54， 52.49， 48.87, 47.25， 41.60， 39.86， 18.02， 11.93.化合物413-氯-3， 15-二氧代赤黴酸節酯以3， 13， 15-三幾基赤黴酸卡酯(4. 52g， lOmmol )為起始原料，製備方法(反 應步聚、投料摩爾比、加料順序、反應溫度等)與化合物3 (13-氯-3， 15-二氧 代赤黴酸甲酯)的製備類同，最終得到淺黃色固體產物粗品4. 43g，矽膠柱層析 (正己烷/乙酸乙酯=8/ l)純化得白色結晶4.15 g，收率88.7%,。 元素分析CmH23C106計算值(％): C， 66.88; H， 4.97; Cl， 7.59 實測值(％): C， 66.85; H， 5.00; Cl， 7.58^麗R (CDCh， 300MHz): 5 7. 35-7. 20 (m, 5H) ， 7. 18(d， J=9. 4Hz， 1H)，6. 16(s， 1H)， 6. 07(d, J=9. 4Hz， 1H), 5. 84 (s， IH)， 5. 05 (s, 2H) ， 3. 65 (d， J=10.4Hz， IH)， 2. 86(d， J=10. 4Hz， IH)， 2. 77(d， J=ll. 5Hz， IH)， 2. 70-2.62 (m: IH)， 2. 46(d， J=11.5Hz， IH)， 2. 38—2. 09 (m， 4H) ， 1.93—1.79 (m， 1H)， 1. 33(s， 3H)."C NMR (CDC13， 75MHz): 5 200.42， 191.06， 172.69， 169.61, 150.82， 145.79， 134.92， 129.77, 129.70, 128.67, 128.63， 121.26， 89.17, 67.58， 65.90, 65.45， 61.24， 60.60， 49.04， 47.32， 41.60， 39.73， 18.04， 12.01.化合物5 13-氟-3， 15-二氧代赤黴酸甲酯混合13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸曱酯(3 ， 391mg，lmmo1)、氟化鉀(1. 51g， 25. 6mmo1)和50 mL丙酮，回流反應50小時，減壓蒸出溶劑至幹，加入20mL 二氯曱烷和10mL水，充分攪拌後分出有機層，水層再用二氯曱烷(10mLx2) 萃取，合併有機層，飽和鹽水(1GmL)洗後，加無水硫酸鈉乾燥，過濾除去幹 燥劑，減壓蒸出溶劑至幹，得黃色油狀物390mg,矽膠柱層析(正己烷/乙酸乙 酉旨=3/ 1 )得到白色顆粒狀晶體203mg,收率54. 2%。元素分析C2。H19F06計算值(。/0: C, 64.17; H， 5.12; F， 5.07 實測值(％): C, 64.17; H， 5.10; F， 5.104 NMR (CDCh， 300MHz): 5 7. 19(d， J=9. 3Hz，lH)， 6. 16(s， 1H)， 6. 08 (d， J=9. 3Hz， 1H)， 5. 72(s, 1H)， 3. 65 (s+d， 4H) ， 2. 85 (d， J=10. 2Hz， 1H) ， 2. 62 (d， J=10.8Hz， 1H)， 2. 60-2.20 (m, 4H) ， 2.10-1.85 (m， 2H) ， 1.26(s, 3H).13CNMR(CDC13， 75MHz): 5 200. 47 (d， J=5. 8Hz ) ， 191.08， 172.76， 170.27， 148. 72 (d, J=19. 6Hz), 145.84， 129.80， 119.66, 96. 30 (d， J=200.1Hz), 89.08， 65.56, 61,71， 61. 23(d， J=4. 3Hz ) ， 52. 48, 48.81,48.17， 37. 44 (d， J=16. 7Hz): 34.30 (d， J=27.1Hz)， 17.49(d， J=8. OHz ) ， 11.99.化合物6 13-氟-3， 15-二氧代赤黴酸苄酯以化合物4-—13-氯-3, 15-二氧代赤黴酸苄酯(467mg， l麵ol)為起始原料， 製備方法(反應步聚、投料摩爾比、加料順序、反應溫度等)與化合物5 (13-氟-3， 15-二氧代赤黴酸曱酯)的製備類同，最終得到淺黃色固體產物粗品430mg， 矽膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯-8/ l)純化得白色結晶230mg，收率51.1%。元素分析C26H F06計算值(％): C， 69.32; H， 5.15; F, 4.22 實測值U): C， 69.33; H， 5.17; F， 4.25^ NMR (CDC13， 300MHz): 5 7. 45—7. 10(m， 5H) ， 7. 12(d， J=9. 6Hz， 1H), 6. Ol(d， J=9. 6Hz， 1H)， 6. OO(s， 1H) ， 5. 60 ( s， 1H)， 5. OO(s， 2H) ， 3. 61 (d, J-10. 4Hz, 1H)， 2. 82(d， J-10. 4Hz， 1H)， 2. 53(d， J=10. 8Hz， 1H), 2. 45-2. 10 (m 4H), 2. 00-1.70 (m， 2H) ， 1.27(s， 3H).13CNMR(CDCl3，75MHz): 5 200. 46 (d， J=5. 8Hz ), 191.06， 172.72, 169.64， 148.75 (d， J=19.7Hz)， 145.81， 134.92， 129.76， 128.75， 128.70， 128.69, 119.37， 96.28 (d， J-200.2Hz), 89.05， 67.59, 65.52， 61.64, 61. 23 (d, J=4. 3Hz)， 48.91,48.20, 37.41 (d, J=16. 7Hz)， 34. 13(d， J=27. 2Hz), 17. 45(d J=7. 8Hz )， 12. 02.化合物7 13-溴-3， 15-二氧代赤黴酸甲酯混合吡啶(168mg，2. lmmol)和二氯曱烷(10mL)， - 40。C外浴冷卻下攪拌、 滴加三溴化磷(72. 6 mg， 0. 27畫1)，加畢，換冰鹽水冷卻，滴加13-羥基-3, 15-二氧代赤黴酸曱酯(11， 106 mg， 0. 27隨o1)與二氯甲烷(2mL )配成的溶 液，攪拌反應0. 5小時後停止反應，加入乙酸乙酯(10mL)，混合液轉入分液漏 鬥中，依次用水、鹽酸(2N)和飽和食鹽水洗，分出有機層，水層再用乙酸 乙酉旨(5mLx 2 )萃取兩次，飽和食鹽水洗至中性後合併有才幾相，加無水闢u酸 鈉乾燥，過濾除去乾燥劑，減壓蒸出溶劑至幹，得無色油狀物85mg,矽膠柱層 析(正己烷/乙酸乙酯=3/ 1 )得到白色固體65mg,收率55.5%。元素分析C2QH19Br06計算值(％): C, 55.19; H， 4.40; Br， 18.36 實測值(％): C， 55.22; H, 4.42; Br, 18.40丄H NMR (CDC13, 300MHz): 5 7. 18(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 30(s， 1H)， 6. 08 (d， J=9. 4Hz， 1H)， 5.97 ( s， 1H)， 3.65 ( s， 3H) ， 3. 63(d， J-10. 4Hz， 1H)， 2. 91 (d， J=11.7Hz， 1H)， 2. 82(d， J=10.4Hz， 1H),2. 67(d, J-ll. 7Hz， 1H) ， 2. 50—2. 20 (m， 4H)， 1. 90-1. 75 (m, 1H)， 1. 35(s， 3H).13C雨R (CDC13,75MHz): 5 199.61， 191.07， 172.70， 170.22， 150.29， 145.76， 129.80， 122.93， 89.22， 65.46， 61.19, 60.86， 57.45， 52. 54, 48.95, 47. 00， 42. 74， 41. 34， 18. 43, 11. 95.化合物8 13-溴-3， 15-二氧代赤黴酸苄酯以化合物11—-13-羥基-3， 15-二氧代赤黴酸苄酯(448mg， lmmol)為起始原 料，製備方法(反應步聚、投料摩爾比、加料順序、反應溫度等)與化合物7 (13-溴-3, 15-二氧代赤黴酸甲酯)的製備類同，最終得到淺黃色固體產物粗 品430mg，矽膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯=8/ l)純化得白色結晶305mg,收率 59. 7%。元素分析C26H23Br06計算值(％): C, 61.07; H， 4.53; Br， 15.63 實測值(％): C, 61.08; H, 4.55; Br, 15.66^ NMR ( CDCh, 300MHz ): 5 7. 50—7. 20 (m， 5H)，7. 17(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 23(s, 1H)， 6. 08(d, J=9. 4Hz， 1H) ， 5. 94 ( s， 1H)， 5. 05(s, 2H)， 3. 66 (d， J-10.4Hz， 1H)， 2.92(d， J-ll. 7Hz, 1H), 2.86(d， J=10. 4Hz， 1H)，2. 65(d， J=L1. 7Hz， 1H)， 2. 50-2. 20 (m， 4H), 1.90-1. 75 (m， 1H), 1. 35 (s, 3H).13C NMR (CDCh，75MHz): 5 199.68, 191.05， 172.68， 169.60， 150.38, 145.74， 134.97, 129.82, 129.79, 128.72， 128.70, 122.78， 89.22， 67.56, 65.46, 61.15， 60.92， 57.47, 49.12， 47.07， 42.74， 41.21， 18.45， 12.03.化合物9 13-鹼-3, 15-二氧代赤黴酸曱酯混合13-氯-3, 15-二氧代赤黴酸甲酯(3 , 391mg， lmmol)、碘化鈉(3. OOg, 20mmo1)和30 mL無水乙腈，回流反應50小時，減壓蒸出溶劑至幹，加入20mL 二氯甲烷和10mL水，充分攪拌後分出有機層，水層再用二氯曱烷(10mLx2) 萃取，合併有機層，飽和鹽水(10mL)洗後，加無水^琉酸鈉乾燥，過濾除去千 燥劑，減壓蒸出溶劑至幹，得黃色油狀物415mg,矽膠柱層析(正己烷/乙酸乙 酉旨=3/ 1 )得到白固體241mg，收率43. 1%。元素分析C2。H191 06計算值(％): C, 49.81; H， 3.97; I, 26.31 實測值(％): C， 49.79; H, 3.99; I， 26.35^ NMR (CDC13, 300MHz): 5 7. 17(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 36(s, 1H), 6. 08 (d， J=9.4Hz， 1H), 6.03 ( s， 1H)， 3.66 ( s, 3H), 3. 62 (d， J=10. 4Hz, 1H)， 3. 02 (d， J-12，8Hz， 1H), 2. 82(d, J-ll. 6Hz， 1H)，2. 80(d， J=10. 4Hz， 1H)， 2. 40-2.10(m， 4H)， 1.90-1. 75 (m， 1H)， 1. 35 (s， 3H).13C腿(CDC13， 75MHz): 5 198.22， 191.07， 172.69, 170.22， 153.19， 145.70， 129.80， 124.77， 89.34, 65.41， 60.98， 60.95， 52. 55， 48.99， 46.56, 45. 11， 44. 82， 33. 67, 18. 67， 11. 94.化合物IO 13-碘-3, 15-二氧代赤黴酸節酯以化合物4-—13-氯-3, 15-二氧代赤黴酸節酯(467mg， lmmol)為起始原料， 製備方法(反應步聚、投料摩爾比、加料順序、反應溫度等)與化合物9 (13-碘-3, 15-二氧代赤黴酸曱酯)的製備類同，最終得到淺黃色固體產物粗品430mg, 矽膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯=8 / 1)純化得白色結晶303mg,收率54. 3%。元素分析C26H231 06計算值(％): C， 55.93; H， 4.15; I， 22.73 實測值(％): C, 55.93; H， 4.17; I， 22.77丄H NMR ( CDC13， 300MHz ): 5 7. 40—7. 20 (m， 5H),7. 16(d， J=9. 4Hz， 1H), 6.29(s， 1H)， 6. 08(d， J=9. 4Hz， 1H), 6. 00 ( s， 1H) ， 5. 04(s， 2H) ， 3. 65 (d， J-10.4Hz， 1H)， 3. 06(d, J=12.8Hz, 1H), 2. 80(d， J=ll. 6Hz， 1H)，2.79(d， J=10.4Hz， 1H)， 2.40-2. 10 (m， 4H), 1.90-1. 75 (m， 1H)， 1. 35 (s, 3H).13C NMR (CDC13,75MHz): 5 198.29， 191.05, 172.69， 170.20， 153. 28， 145.68,134.93， 129.82， 129.80， 128.71, 128.65, 124.62， 89.34， 67.55, 65.41， 61.01， 60.94, 49.06， 46.63， 45.11， 44.77， 33.67， 18.69, 12.02.化合物ll 13-羥基-3， 15-二氧代赤黴酸曱酯 13-氯-3, 15-二氧代赤黴酸酯(3 ， 391mg，lmmol)溶於丙酮/水(8/2， 10mL) 中，再加入碳酸銀(304mg， 1. lmmol)，混合物攪拌回流反應24小時，仃反應， 冷至室溫後過濾，丙酮洗濾餅。濾液減壓濃縮至幹，加乙酸乙酯(20 mL)和水 (7 mL),充分攪拌後，分出有機層，水層再用乙酸乙酯(10 mLx2)萃兩次， 合併有機層，飽和鹽水洗後，加無7jc琉酸鈉乾燥，過濾除去乾燥劑，減壓蒸出 溶劑至幹，得白色粉末狀固體355mg，矽月交柱層析(正己烷/乙酸乙酯=3/2) 得到白色固體345mg,收率95. 4%,。元素分析(:2。112。07計算值(％): C, 64. 51; H, 5. 41實測值(％): C， 64. 50; H, 5. 43!H NMR (CDC13， 300MHz): 5 7. 20(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 13(s, 1H)， 6. 08 (d，J=9. 4Hz， 1H)， 5.70 ( s, 1H), 3.64 ( s， 3H) ， 3. 65 (d， J=10. 2Hz， 1H), 2. 83(d， J=10. 2Hz， 1H)，2. 54(d， J=10. 8Hz， 1H), 2. 40-2. 20 (m， 3H) ， 2. 16(d， J=10. 8Hz, 1H)，1.90-1. 75 (m, 3H) ， 1.35(s, 3H)。13C纖(CDCl3，75MHz): 5 202.15， 191.28, 173.00， 170.60， 152.69， 146.07， 129.74， 118.53， 89.31, 76.00, 65.60， 61.63， 60.86， 52.44， 48.98， 48. 09， 40. 39， 36. 75， 17. 61， 12. 01。化合物12 13-羥基-3， 15-二氧代赤黴酸千酯以化合物4---13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸千酯(467mg， lmmol)為起始原料， 製備方法(反應步聚、投料摩爾比、加料順序、反應溫度等)與化合物11 (13-羥基-3,15-二氧代赤黴酸曱酯)的製備類同，最終得到白色固體產物粗品420mg， 矽膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯=3/ l)純化得白色結晶295mg，收率65.8%。元素分析C2JU)7計算值(％): C， 69. 63; H， 5. 39 實測值(%): C， 69. 64; H， 5. 41丄H NMR (CDCl3，300MHz): 5 7. 40-7. 10(m, 6H) ， 6. 08 (d， J=9. 9Hz, 1H)， 6. 06(s, 1H)，5. 65(s， 1H)，5. 06(s， 2H) ， 3. 68 ( d， J=10. 2Hz， 1H)， 2. 86(d, J-10. 8Hz， 1H)，2. 51(d， J=ll. lHz, 1H)， 2.40—2.15 (m, 3H) ， 2. 07 (d, J=ll. lHz， 1H)，1.90-1. 70 (m， 3H)， 1.34(s， 3H).13C NMR (CDC13， 75MHz): 5 202.50, 191.27， 172.98, 170.00， 152.86， 146.05， 135.10， 129.74， 128.84， 128.71， 128.67, 118.18， 89.32， 75.99， 67.55， 65.59， 61.61， 60.87， 49.15, 48.18， 40.46, 36.53， 17.59, 12.06.化合物3 ~ 10的抗癌活性實驗化合物3 10按照MTT方法對K562 (人白血病細胞林)等六種腫瘤細胞抹 的半數抑制濃度(IC5。)測定結果表明:化合物3 ~ 10的IC5。 = 3. 5 ~ 45. 3 ju g/mL， 均具有較強的對腫瘤細胞的抑制作用。
權利要求
1、一種具有下述結構通式(I)的化合物，名稱為13-滷代-3，15-二氧代赤黴酸酯，id="icf0001" top= "54" left = "35"/>
2、如權利要求1所述的具有結構通式(I )的化合物的製備方法，其特 徵是a.以3， 13， 15-三羥基赤黴酸酯(l)或3， 13， 15-三羥基赤黴酸節酯(2)為起 始原料，首先在低極性溶劑中，低溫下加入二甲亞碸與適當比例的草醯氯或適 當比例的二甲亞碸與氯化亞碸形成的氧化劑，氧化3位和15位羥基為3， 15-二羰基的同時，13位發生氯代反應生成具有結構通式(I )的化合物(3): 13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸酯或(4): 13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸苄酯，(1) 或(2)的結構式如下，Ri-CI^;2個碳到5個碳 的垸基及PhCH2式中(l)的R產CH3、 2個碳到5個碳的烷基，(2)的R產P跳 (3)或(4)結構式如下，formula see original document page 2其中(3)的R產CH3、 2個碳到5個碳的垸基，(4)的R產PhCH:b. 以13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸酯(3)或13-氯-3, 15-二氧代赤黴酸苄酯 (4)為原料，製備具有結構通式(I)的化合物13-氟-3， 15-二氧代赤黴酸 酯(5、 6)， 13-溴-3， 15-二氧代赤黴酸酯(7、 8)， 13_碘-3, 15-二氧代赤黴酸 酯(9、 10)，c. 以13-羥基-3， 15-二氧代赤黴酸酯(ll)或13_羥基-3, 15-二氧代赤黴 酸苄酯(12)為原料，製備具有結構通式(I )的化合物13-溴-3, 15-二氧代 赤黴酸酯(7、 8)或製備13-碘-3， 15-二氧代赤黴酸酯(9、 10)。
3、 一種以13-氯-3, 15-二氧代赤黴酸酯(3)或(4)為原料製備13-羥 基-3， 15-二氧代赤黴酸酯(ll)、 (12)的方法。
4、 根據權利要求2所述的製備方法，其特徵是所採用的低極性溶劑為苯、 甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、正已烷、環己烷或石油醚，用量為10 100mL 溶劑/g底物；以二甲亞碸與草醯氯或二甲亞碸與氯化亞碸在-7(TC至一40'C 下形成的化合物為氧化劑，加入侍氧化和氯代的底物後反應5-30分鐘，再加 入三乙胺進行反應5-30分鐘。
5、 根據權利要求2或4所述的製備方法，其特徵是各化合物用量按摩爾 比為底物/二甲亞碸/草醯氯或氯化亞碸/三乙胺=1/2 50/2 6/4 100。
6、 根據權利要求2或4所述的製備方法，其特徵是各化合物用量按摩爾 比為底物/二甲亞碸/草醯氯/三乙胺=1/10/5/14。
7、 根據權利要求2所述的製備方法，其特徵是製備13-氟-3， 15-二氧代 赤黴酸酯(5)、 (6)時，將13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸酯(3)或(4)在四氫呋喃、 丙酮、乙醚、乙腈、二甲亞碸、N， N-二甲基甲醯胺、六甲基磷醯三胺等非質 子性溶劑中與氟化鈉、氟化鉀、氟化鋰、氟化銨或四丁基氟化銨等氟化試劑反 應製備目標物；反應溫度採用丙酮回流溫度；氟化試劑採用氟化鉀，反應中化 合物的用量按摩爾比為底物/氟化鉀二1/2 50，丙酮用量為10 100mL/mmol 底物，化合物(5)或(6)結構式如下，formula see original document page 4其中(5)的Rp CH3、 2個碳到5個碳的烷基,(6)的R產PhCH2 。
8、根據權利要求2所述的製備方法，其特徵是製備13-溴-3， 15-二氧代 赤黴酸酯(7)、 (8)時，將13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸酯(3)或(4)在四氫呋喃、 丙酮、乙醚、乙腈、二甲亞碸、N， N-二甲基甲醯胺或六甲基磷醯三胺溶劑中 與溴化鈉、溴化鉀、溴化鋰、四丁基溴化銨等溴化試劑反應製備目標物，溴化 劑採用溴化鋰，反應溫度採用乙腈回流溫度，反應中化合物的用量按摩爾比為 底物/溴化鋰=1/2 50，乙腈用量為10 100 mL /mmo1底物，(7)或(8)結 構式如下，formula see original document page 4式中(7)的R1= CH3、 2個碳到5個碳的垸基，(8)的R產PhCH2 。
9、根據權利要求2所述的製備方法，其特徵是製備13-碘-3， 15-二氧代 赤黴酸酯(9)、 (IO)時，將13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸酯(3)、 (4)在四氫呋喃、 丙酮、乙醚、乙聘、二甲亞碸、N， N-二甲基甲醯胺或六甲基磷醯三胺溶劑中 與碘化鈉、碘化鉀、碘化鋰、四丁基碘化銨等碘化劑反應製備目標物，碘化劑 採用碘化鈉，溶劑採用乙腈，反應溫度採用乙腈回流溫度，反應中化合物的用 量按摩爾比為底物/碘化鈉=1/2 50，乙腈用量為10 100 mL /mmol底物， (9)和(10)結構式如下，其中(9)的Rf CH3、 2個碳到5個碳的烷基，(10)的R^ PhCH2。
10、根據權利要求3所述的製備方法，其特徵是製備13-羥基-3， 15-二 氧代赤黴酸酯(ll)、 (12)時，將13-氯-3， 15-二氧代赤黴酸酯(3)或(4) 在丙酮、乙腈、乙醇、甲醇、四氫呋喃或二氯甲垸溶劑中與水和碳酸氫鈉、碳 酸鈉、碳酸銀、三乙胺或二異丙基乙基胺反應製備13-羥基-3, 15-二氧代赤 黴酸酯(11、 12)， (11、 12)結構式如下，formula see original document page 5其中(ll)的R^CH3， 2個碳到5個碳的烷基，(12)的R1= PhCH2。
11、 根據權利要求10所述的製備方法，其特徵是採用丙酮/水作為溶劑， 碳酸銀作為鹼；反應溫度採用丙酮回流溫度，採用化合物用量按摩爾比為底物 /碳酸銀=1/1. 1;丙酮/水比例採用按體積比為8/2，用量為10 100 mL/mmo1 底物。
12、 根據權利要求2所述的製備方法，其特徵是由13-羥基-3， 15-二氧 代赤黴酸酯(11)、 (12)為原料製備13-溴-3， 15-二氧代赤黴酸酯(7)、 (8)， 13-羥基-3, 15-二氧代赤黴酸酯(11)或(12)與三溴化磷和吡啶在二氯甲烷 中反應製備13-溴-3， 15-二氧代赤黴酸酯(7)或(8)，反應中化合物的用量按 摩爾比為底物/吡啶/三溴化磷二1/1 20/0.35 2， 二氯甲烷用量為10 100 mL /mmol底物，反應溫度採用—10°C 0°C。
13、 權利要求1所述的具有結構通式(I )的化合物在製備治癌症藥物的 應用。
全文摘要
本發明涉及醫藥衛生和化學領域的藥用化合物，是一種具有結構通式(I)的化合物13-滷代-3，15-二氧代赤黴酸酯及其製備方法，經抗癌活性實驗證明，該類化合物具有較強的抗腫瘤活性和對正常細胞的低毒性。
文檔編號A61K31/365GK101260095SQ20081005829
公開日2008年9月10日 申請日期2008年4月18日 優先權日2008年4月18日
發明者劉建平, 晨 卿, 孫竹先, 張洪彬, 張雁麗, 曾祥慧, 陳靜波 申請人:雲南大學;昆明醫學院