一種人參皂苷Rg3納米製劑的製備方法與流程
2024-04-15 14:51:05 1
一種人參皂苷rg3納米製劑的製備方法
技術領域
1.本發明屬於納米材料技術領域，具體是指一種人參皂苷rg3納米製劑的製備方法。
背景技術：
2.人參為上藥，性平，味甘微寒，歸心、脾、肺經，具有大補元氣，復脈固脫，補脾益肺，生津養血，安神益智的功效，大量的研究表明人參在抗衰老、抗疲勞、降低膽固醇、抗腫瘤等方面具有較高的藥用價值，使人參製劑廣泛應用於醫藥領域。人參為五加科植物人參的根，主要有效成分是人參皂苷，現已明確的人參皂苷單體約有40餘種。人參皂苷rg3是人參的主要活性成分之一，是存在於人參中的一種四環三萜皂苷，屬於原人參二醇型，大量研究表明人參皂苷rg3具有抑制腫瘤新生血管形成、抗疲勞、調節免疫、防止腫瘤復發、擴散和轉移的作用，對肺癌、腸癌、乳腺癌等腫瘤細胞均具有一定的抑制作用。目前人參皂苷rg3已上市的劑型為其口服製劑參一膠囊，但是其水溶性差，極大地降低了溶出速率和生物利用度。有研究表明志願者3.2mg/kg劑量口服人參皂苷rg3後最大血藥濃度值僅為(16
±
6)ng/ml。
3.隨著納米技術的持續進步以及生物醫學的蓬勃發展，基於人參皂苷rg3的相關納米製劑不斷湧現。雖然在人參皂苷rg3納米製劑方面進行了不斷地嘗試，但目前報導的人參皂苷rg3納米藥物的製備工藝較為繁瑣，成本高，人參皂苷rg3納米藥物的靶向性差，降低了人參皂苷rg3生物利用率，影響治療效果。因此，需要尋找新的方法來解決這一難題。
4.近些年以來，金屬有機骨架由於具有大的內表面積、尺寸均勻、可調的通道和可定製的化學性質，在氣體分離和儲存、催化等方面受到了廣泛的關注。特別是納米金屬有機框架(nmofs)在生物傳感、生物成像和藥物傳遞等生物醫學領域顯示出巨大的潛力。沸石咪唑基框架-8(zif-8)是近年來新興的一類nmofs，受到了廣泛關注。zif-8具有合成策略簡單、功能化容易、負載能力強、ph響應釋藥等特點。利用這些優點，基於zif-8的納米顆粒被廣泛應用於dna、蛋白質和藥物的傳輸。
5.本發明一種人參皂苷rg3納米製劑的製備方法，利用zif-8作為載體負載人參皂苷rg3，採用一步法製備，該製備方法操作簡單，反應條件溫和，具有納米級粒徑，尺寸較均勻，納米尺寸具有允許高效遞送的特性，可提高人參皂苷rg3的溶解度及生物利用率，為人參皂苷rg3的在藥品和食品領域中的攝入提供了一種新的形式。
技術實現要素：
6.本發明的目的在於提供一種人參皂苷rg3納米製劑的製備方法，以解決現有問題。
7.為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：
8.一種人參皂苷rg3納米製劑的製備方法，包括以下步驟：
9.合成人參皂苷rg3@zif-8納米粒子：
10.步驟一：溫下，0.15g六水合硝酸鋅加入到7.5ml甲醇中，磁力攪拌至完全溶解；
11.步驟二：1mg人參皂苷rg3加入到上述溶液中，磁力攪拌至完全溶解；
12.步驟三：0.33g的2-甲基咪唑加入到7.5ml甲醇中，磁力攪拌至完全溶解；
13.步驟四：將步驟三中的溶液加入到步驟二中，磁力攪拌反應5～30min；
14.步驟五：反應結束後，將反應後的液體和固體轉移至離心管中進行離心分離，離心分離條件為5000～12000rpm，5～30min，將上清液丟棄，留下管底固體，加入甲醇，超聲分散固體，再用2000～12000rpm進行洗滌，時間為5～30min，反覆3～8次後放置於真空乾燥箱進行乾燥，乾燥溫度為30～90℃。
15.進一步地，步驟一種負載所述人參皂苷rg3的為有機金屬框架納米顆粒。
16.進一步地，所述有機金屬框架納米顆粒為zif-8。
17.進一步地，在步驟五中，所述採用的洗滌方式為離心洗滌，洗滌次數為3～8次。
18.進一步地，所述人參皂苷rg3納米製劑呈乳白色，形態結構為球形，平均粒徑為50nm～300nm，提高了人參皂苷rg3的溶解度及生物利用率，具有良好的分散性。
19.採用上述結構本發明取得的有益效果如下：本方案提出的一種人參皂苷rg3納米製劑的製備方法，與現有技術相比，本發明合成人參皂苷rg3@zif-8納米粒子，具有納米級粒徑，尺寸較均勻，納米尺寸具有允許高效遞送的特性，可提高人參皂苷rg3的溶解度及生物利用率等優點；同時本發明為人參皂苷rg3的在藥品和食品領域中的攝入提供了一種新的形式；且本發明製備方法操作簡單，反應條件溫和。
附圖說明
20.圖1是本發明一種人參皂苷rg3@zif-8納米粒子的掃描電鏡圖；
21.圖2是本發明一種人參皂苷rg3@zif-8納米粒子的透射電鏡圖；
22.圖3為本發明一種人參皂苷rg3@zif-8納米粒子的x射線晶體衍射圖。
23.附圖用來提供對本發明的進一步理解，並且構成說明書的一部分，與本發明的實施例一起用於解釋本發明，並不構成對本發明的限制。
具體實施方式
24.下面將結合本發明實施例中的附圖，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例；基於本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬於本發明保護的範圍。
25.實施例1：
26.一種人參皂苷rg3納米製劑的製備方法中主要的實驗材料包括：六水合硝酸鋅、甲醇購自北京化學試劑廠、二甲基咪唑購自上海阿拉丁生化科技股份有限公司、人參皂苷rg3購自上海麥克林生化科技有限公司。
27.一種人參皂苷rg3納米製劑的製備方法，包括以下步驟：
28.合成人參皂苷rg3@zif-8納米粒子：
29.步驟一：室溫下，0.15g六水合硝酸鋅加入到7.5ml甲醇中，磁力攪拌至完全溶解；
30.步驟一：1mg人參皂苷rg3加入到上述溶液中，磁力攪拌至完全溶解。
31.步驟一：0.33g的2-甲基咪唑加入到7.5ml甲醇中，磁力攪拌至完全溶解。
32.步驟一：將步驟三中的溶液加入到步驟二中，磁力攪拌反應10min；
33.步驟一：反應結束後，將反應後的液體和固體轉移至離心管中進行離心分離，離心
分離條件為10000rpm，10min，將上清液丟棄，留下管底固體，加入甲醇，超聲分散固體，再用10000rpm進行洗滌，時間為10min，反覆3次後放置於真空乾燥箱進行乾燥，乾燥溫度為50℃
34.實施例2
35.使用掃描和透射電鏡表徵該實施例所獲的人參皂苷rg3@zif-8納米粒子的形貌和粒徑，該測試方法中主要的實驗儀器包括：hitachis-4800場發射掃描電子顯微鏡(日本hitachi公司)、feitecnaig2f20透射電子顯微鏡(荷蘭fei公司)。
36.人參皂苷rg3@zif-8納米粒子樣品製備及測試方法包括：
37.稱取1mg人參皂苷rg3@zif-8納米粒子，加入到10ml的甲醇中，超聲至納米粒子均勻分散在甲醇中，取10μl的樣品溶液滴加到矽片表面，放置於鼓風乾燥箱中，50℃的溫度乾燥1小時；另外稱取10μl的樣品溶液滴加到銅網表面，放置於鼓風乾燥箱中，50℃的溫度乾燥1小時；人參皂苷rg3@zif-8納米粒子的掃描電鏡圖通過hitachis-4800場發射掃描電子顯微鏡觀察拍攝，人參皂苷rg3@zif-8納米粒子的透射電鏡圖通過feitecnaig2f20透射電子顯微鏡觀察拍攝。
38.通過掃描和透射電鏡表徵該實施例所獲的人參皂苷rg3@zif-8納米粒子的形貌和粒徑(見圖1和圖2)，納米粒子的尺寸為130nm左右。
39.實施例3
40.使用x射線晶體衍射儀表徵該實施例所獲的人參皂苷rg3@zif-8納米粒子的晶型，該測試方法中主要的實驗儀器包括：brukerd8x射線粉末衍射儀(德國brukeraxs公司)。
41.人參皂苷rg3@zif-8納米粒子樣品製備及測試方法包括：
42.取0.1g的真空乾燥後的人參皂苷rg3@zif-8納米粒子，將其添加到x射線粉末衍射儀樣品槽中，用載玻片將樣品粉末填滿壓實，採用brukerd8x射線粉末衍射儀進行測試；測試條件為：電壓40mv、電流40ma、掃描範圍5-50
°
、掃速10
°
/min。
43.通過x射線粉末衍射儀表徵該實施例所獲的人參皂苷rg3@zif-8納米粒子的晶型(見圖3)。
44.需要說明的是，在本文中，諸如第一和第二等之類的關係術語僅僅用來將一個實體或者操作與另一個實體或操作區分開來，而不一定要求或者暗示這些實體或操作之間存在任何這種實際的關係或者順序。而且，術語「包括」、「包含」或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設備不僅包括那些要素，而且還包括沒有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設備所固有的要素。
45.儘管已經示出和描述了本發明的實施例，對於本領域的普通技術人員而言，可以理解在不脫離本發明的原理和精神的情況下可以對這些實施例進行多種變化、修改、替換和變型，本發明的範圍由所附權利要求及其等同物限定。
46.以上對本發明及其實施方式進行了描述，這種描述沒有限制性，附圖中所示的也只是本發明的實施方式之一，實際的結構並不局限於此。總而言之如果本領域的普通技術人員受其啟示，在不脫離本發明創造宗旨的情況下，不經創造性的設計出與該技術方案相似的結構方式及實施例，均應屬於本發明的保護範圍。