更昔洛韋在製備治療腫瘤藥物中的應用的製作方法
2023-04-26 05:43:06 1
專利名稱:更昔洛韋在製備治療腫瘤藥物中的應用的製作方法
技術領域:
本發明涉及更昔洛韋的新用途。具體涉及更昔洛韋對腫瘤的治療作用。
背景技術:
更昔洛韋(GCV)是鳥嘌呤核苷衍生物,通常作為廣譜抗皰疹病毒藥物。其原理為GCV進入細胞後迅速被病毒編碼的蛋白激酶(胸苷激酶,TK)磷酸化為單磷酸GCV,然後經細胞激酶的作用生成二磷酸和三磷酸GCV。三磷酸GCV再通過競爭性抑制病毒DNA多聚酶和摻入病毒DNA鏈中阻斷病毒DNA的延長這兩種方式抑制病毒複製而發揮其抗病毒作用。
目前,腫瘤已成為導致我國人口死亡的重要病種之一。據衛生部統計,近幾年中國每年新增腫瘤病人200萬人,死亡130多萬人,目前全國腫瘤病人總數約為450萬人左右。其中肺癌已成為我國第一大癌症。由於肺癌的診斷治療存在不規範等問題,導致其早期發現、早期診斷及早期治療十分困難,80%以上的患者到醫院就診時已屬晚期。專家指出,隨著吸菸人數的大量增加和生活環境汙染的加劇,肺癌發病人數在全國範圍內急劇增加。據預測,2000~2005年間,我國肺癌的發病人數將增加12萬,男性將從2000年的26萬增加到2005年的33萬,女性將從2000年的12萬增至17萬。最新的資料表明,我國肝癌年死亡率佔全部惡性腫瘤的18.8%,已由70年代的第三位上升到第二位,在城市僅次於肺癌,在農村僅次於胃癌,男性增加64.83%,女性增加54.41%,城市增加38.79%,農村增加71.96%。雖然腫瘤患者的人群極其龐大,但目前的抗腫瘤藥物仍相當貧乏。
腫瘤基因治療是目前腫瘤治療研究的最新領域,迄今至少已有100餘個基因方案試用於人體。中國專利號ZL98124960.4公開了一種重組腺病毒-胸苷激酶構建體及其獲得方法和用途,該發明選擇無毒的腺病毒為載體,並選定相應啟動子和功能基因片段長度等,使基因構建體具有特異性,所製備的構建體可轉染多種人體實體瘤,對卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌、皮膚黑色素癌及軟組織腫瘤具有較好殺傷作用。問題是單用上述基因構建體對腫瘤尤其是肝癌、肺癌、胰腺癌的治療仍不夠理想。
發明內容
本發明的第一目的在於提供更昔洛韋在製備治療腫瘤藥物中的用途。
本發明的第二目的在於提供更昔洛韋和重組腺病毒-胸苷激酶構建體(ADV-TK)在製備治療腫瘤藥物中的用途。
本發明提供的技術方案是更昔洛韋在製備治療腫瘤藥物中的應用。
更昔洛韋和重組腺病毒-胸苷激酶構建體在製備治療腫瘤藥物中應用。
本發明所述重組腺病毒-胸苷激酶構建體為98124960.4號專利公開的重組腺病毒-胸苷激酶構建體。
本發明更昔洛韋治療腫瘤時可按5mg/kg靜脈滴注,每12小時一次,連用14天。
委託中國醫學科學院藥物研究所進行的藥效學試驗,結果表明本發明更昔洛韋和98124960.4號專利公開的重組腺病毒-胸苷激酶構建體具有廣譜抗癌性,對所試驗的14種體外腫瘤細胞株的抑瘤率高達80~90%;在體內,明顯抑制所選用的動物移植性腫瘤和人癌裸小鼠移植瘤生長,抑瘤率達60~80%,具有顯著的試驗治療作用,並顯示出較好的劑量效應關係。
委託中國軍事醫學科學院藥物毒物所、中國醫學科學院藥物所新藥安全評價研究中心進行的安全性試驗,結果表明更昔洛韋與ADV-TK聯用基本無毒性反應。
在進行臨床前試驗的同時,還開展了對國內部分腫瘤志願受試患者的臨床預試工作,治療病種涉及肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、胃腸道癌、胰腺癌、血管外皮瘤等。
臨床預試結果表明更昔洛韋與ADV-TK聯用抗腫瘤活性高、療效顯著,有效率高達70%以上,且見效快,基本無毒副作用,臨床應用安全、方便;特別是,在治療肝癌等難治性癌症疾病方面已顯示出著良好的臨床預期效應和應用前景。
具體實施例方式
更昔洛韋與ADV-TK聯用對小鼠黑色素瘤B16生長抑制作用。
選擇腫瘤生長良好,全身狀況較好的荷瘤動物,頸椎脫臼處死。無菌條件下取出瘤塊,稱重、紗網過濾,生理鹽水10∶1稀釋瘤液,每隻鼠腋窩下接種0.2ml。
次日,將動物隨機分組,每組10隻。設陰性、陽性及不同給藥組。陰性對照組腫瘤自然生長,陽性對照組腹腔注射環磷醯胺100mg/kg 1次。給藥組分別以6.7×108病毒顆粒/kg、2×109病毒顆粒/kg、6×109病毒顆粒/kg 3個劑量在腫瘤接種部位局部注射ADV-TK 1次。試驗第3天開始,以125mg/kg劑量級動物腹腔注射GCV,每日1次,連續6天後再按上述方法重複給藥,共2療程。第15天,頸椎脫臼處死動物,稱體重,剝瘤,稱瘤重,將各給藥組腫瘤重量與對照組比較,計算抑瘤率,並用t檢驗統計顯著性差異。
結果表明更昔洛韋125mg/kg與ADV-TK聯用,對動物移植性腫瘤小鼠黑色素瘤B16生長具有明顯抑制作用,當ADV-TK的劑量為6×109病毒顆粒/kg時對腫瘤抑制率在55.9%~67.8%間。
更昔洛韋與ADV-TK聯用對小鼠神經膠質瘤的生長抑制作用。
無菌條件下取出小鼠腫瘤,稱重後研磨,用生理鹽水5∶1稀釋瘤液,於試驗動物一側後肢膝關節附近肌肉肥厚處接種0.1ml。
次日,將動物隨機分組,每組10隻。設不給藥組為陰性對照,卡莫司汀400mg/kg劑量尾靜脈注射1次為陽性對照。給藥組分別以6.7×108病毒顆粒/kg、2×109病毒顆粒/kg、6×109病毒顆粒/kg 3個劑量,在腫瘤接種部位局部注射ADV-TK 1次。試驗第3天開始,以100mg/kg劑量給動物腹腔注射GCV,每日1次,連續6天後再按上述方法重複給藥,共2療程。第14天,頸椎脫臼處死動物,稱體重,於小鼠兩側髖關節相同部位高位截肢,分別稱量雙下肢重量,以重量差作用瘤重。將各給藥組腫瘤重量與對照組比較,計算抑瘤率,並用t檢驗統計顯著性差異。
結果表明,GCV與ADV-TK聯用,對動物移植性腫瘤小鼠神經膠質瘤生長具有明顯抑制作用,ADV-TK的劑量為6×109病毒顆粒/kg時對腫瘤抑制率均在70%以上。ADV-TK與GCV單獨給藥對腫瘤生長無明顯抑制作用。
更昔洛韋與ADV-TK聯用對小鼠肝癌H22的生長抑制作用。
選擇腫瘤生長良好,全身狀況較好荷瘤動物,頸椎脫臼處死。無菌條件下取出瘤塊,稱重、研磨,紗網過濾,生理鹽水6∶1稀釋瘤液,每kg鼠腋下接種0.2ml。
接種後次日,將動物隨機分組,每組10隻。設不給藥組為陰性對照,環磷醯胺100mg/kg劑量腹腔注射1次為陽性對照。ADV-TK/GCV不同劑量給藥3組,ADV-TK與GCV單獨給藥各1組。試驗第4天,接種部位已可見腫瘤如黃豆大小,將ADV-TK 6.7×108病毒顆粒/kg、2×109病毒顆粒/kg和6×109病毒顆粒/kg劑量2個組共4組動物在腫瘤局部注射1次。試驗第5天後,除ADV-TK單獨用藥組外,以100mg/kg劑量給藥各組動物腹腔注射GCV,每日1次,連續6天。第12天,頸椎脫臼處死動物,稱體重,剝瘤,稱瘤重,將各給藥組腫瘤重量與對照組比較,計算抑瘤率,並用t檢驗統計顯著性差異。
結果表明,GCV與ADV-TK聯用,對動物移植性腫瘤小鼠肝癌H22生長具有一定的抑制作用,ADV-TK的劑量為6×109病毒顆粒/kg時對腫瘤抑制率均在50%以上。ADV-TK與GCV單獨給藥對腫瘤生長無明顯抑制作用。
更昔洛韋與ADV-TK聯用對裸小鼠人癌移植瘤小細胞肺癌的生長抑制作用。
選擇腫瘤生長良好,全身狀況較好荷瘤動物,頸椎脫臼處死。無菌條件下取出瘤塊,用手術刀切割成1~2mm徑的瘤塊,套管針接種於裸小鼠腋下。約一周後實驗動物腋下可見腫瘤。用遊標卡尺測量腫瘤長、寬徑,按瘤體積大小分層分組。每組5~8隻動物。
設為陰性對照組(不給藥),陽性對照組(環磷醯胺100mg/kg劑量腹腔注射)。ADV-TK6.7×108病毒顆粒/kg、2×109病毒顆粒/kg、6×109病毒顆粒/kg3個劑量加GCV 100mg/kg給藥組和ADV-TK 6×109病毒顆粒/kg、GCV100mg/kg單獨給藥組共7組。
每療程第1天將3個ADV-TK/GCV給藥組和ADV-TK單獨給藥組在腫瘤局部注射不同劑量ADV-TK 1次。次日開始給動物腹腔注射GCV,每日1次,6次為1療程。連續給藥3療程。此期間環磷醯胺補充給藥1次。
結果表明,GCV與ADV-TK聯用,對試驗選用的人癌裸小鼠移植性腫瘤小細胞肺癌具有明顯的抑制作用,第1批試驗高劑量組抑瘤率為64.6%,第2批試驗高劑量組抑瘤率達81.7%。相對腫瘤體積(RTV)、相對腫瘤增殖率(%)數據均顯示,對小細胞肺癌具有較好的抗腫瘤活性,ADV-TK的劑量為6×109病毒顆粒/kg時效果最為明顯。
權利要求
1.更昔洛韋在製備治療腫瘤藥物中的應用。
2.更昔洛韋和重組腺病毒-胸苷激酶構建體在製備治療腫瘤藥物中應用。
3.根據權利要求2所述的應用,其特徵在於所述腫瘤為黑色素瘤、神經膠質瘤、肝癌或肺癌。
全文摘要
本發明涉及更昔洛韋的新用途,尤其是更昔洛韋和重組腺病毒-胸苷激酶構建體在製備治療腫瘤藥物中的用途。更昔洛韋與重組腺病毒-胸苷激酶構建體聯用抗腫瘤活性高、療效顯著,有效率高達70%以上,且見效快,基本無毒副作用,臨床應用安全、方便;特別是,在治療黑色素瘤、神經膠質瘤、肝癌或肺癌等難治性癌症疾病方面已顯示出著良好的臨床預期效應和應用前景。
文檔編號A61P35/00GK1732942SQ200510019258
公開日2006年2月15日 申請日期2005年8月8日 優先權日2005年8月8日
發明者馬暢, 吳佳 申請人:湖北科益藥業股份有限公司