一種苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其製備方法
2023-04-26 18:29:36
專利名稱：一種苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物製劑，尤其是一種經口服給藥用於治療消化道腫瘤的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其製備方法。
背景技術：
苦參鹼是從豆科植物苦參iSophora flavescens Ait.)、豆科 植物廣豆根{Sophora subprosstratae')歲告豆子 iSophora alopecuroides L.)中提取分離得到的一種生物鹼，屬於四環喹諾裡西啶類，具有顯著的抗腫瘤活性[1]。研究表明，其抗腫瘤活性的作用機制包括抑制腫瘤增殖、誘導腫瘤分化和凋亡、抑制腫瘤浸潤和遠端轉移、減輕腫瘤誘發的惡病質和抑制腫瘤耐藥性、抑制端粒酶活性等。此外，苦參鹼還具有鎮靜、鎮痛、解熱降溫，治療心血管疾病，抗動脈粥樣硬化，免疫抑制的作用，抑制自身免疫反應，治療肝臟疾病，抗病毒等多種藥理作用。新藥研究文獻報導，目前上市的苦參鹼藥品劑型有栓劑、片劑、膠囊和注射液。就目前苦參鹼普通口服製劑來說，由於自身劑型大都存在藥效維持時間較短，需頻繁給藥，且血藥濃度波動較大，毒副作用及併發症較多，患者易產生耐藥性和藥物不良反應，患者依從性低，藥物生物利用度低，臨床療效差等問題。
發明內容
本發明旨在提供一種可克服現有技術不足，經口服給藥用於治療消化道腫瘤的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其製備方法。由本發明的方法可製備得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。本發明的製備方法為首先分別配製質量/體積濃度為0. I 0. 3%的殼聚糖醋酸溶液，再在殼聚糖醋酸溶液中加入0. 3g 0. 7g的CaCl，攪拌使CaCl溶解，配製質量/體積濃度為I. 5% 2. 5%的海藻酸鈉溶液，分別稱取I. 25g I. 75g的苦參鹼和0. 05g 0. 08g的Fe3O4納米粒，加至前述的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液,量取含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，經洗滌處理後，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。採用本發明的方法可製備出苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。本發明的製劑具有pH敏感性和磁靶向性，可使苦參鹼在消化道內不同pH環境部位，按PH梯度釋放藥物，並可在外加磁場的引導下，實現靶向定位釋藥特徵，減少藥物不良反應和毒副作用，提高藥物生物利用度，增強臨床治療效果。為了達到上述目的，本發明所述的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球是由主藥和藥用輔料組成。主藥苦參鹼起到抗消化道腫瘤作用，藥用輔料是天然高分子材料殼聚糖和海藻酸鈉，交聯劑是CaCl2，磁性物質是Fe3O4納米粒，溶劑是純化水。
本發明中的殼聚糖是一種天然氨基多糖甲殼素的脫乙醯化產物，含有自由的氨基基團。其來源豐富，價格低廉，具有很好的生物相容性和生物降解性，生物黏附性和成膜性良好，無毒、無刺激、無過敏性，環境友好，不汙染環境，已被廣泛用於醫藥、化工、食品和水質處理等領域中。本發明中的海藻酸鈉是一種天然陰離子聚合物，具有生物相容和生物降解好的特點，其結構中的羧基可以與殼聚糖分子中的氨基陽離子發生離子反應形成聚合電解質複合物，該過程不涉及熱交聯過程中的高溫及化學交聯過程中的共價鍵形成，對包載物的性質無影響，因此作為藥物、生物製品、疫苗及細胞的載體有著極大的優越性。本發明中的Fe3O4納米粒作為磁性物質，具有毒性低、易得、飽和磁化強度高等特 點，有利於苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球在外加磁場誘導下，在消化道中的靶向定位，藥物釋放完畢後，自身可隨糞便排出體外，在體內不會造成蓄積中毒或影響機體功能。本發明製備的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球擁有pH敏感性和磁靶向性雙重敏感的釋藥機制。首先，利用其PH敏感性，使苦參鹼在胃、十二指腸，小腸，結腸等不同PH環境的消化道部位，按pH梯度釋放。此外，該凝膠小球內含有Fe3O4納米粒，具有良好的磁響應性，可利用外加磁場的誘導性能，將苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球定向轉運至靶區，使藥物定位釋放，從而實現對消化道腫瘤的靶向定位給藥，增加苦參鹼在消化道腫瘤部位的藥物濃度，減少全身藥物水平，降低藥物毒副作用和不良反應，提高藥物生物利用度，降低藥物服用次數和劑量，增強患者的依從性，提高藥物臨床治療效果。
圖I.實施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的外觀形態圖，圖中a圖為溼苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球數碼照片；b圖為乾燥苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球數碼照片；c圖為放大45倍數的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球掃描電鏡照片；d圖為放大800倍數的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球掃描電鏡照片。圖2.實施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球紅外光譜圖。圖3.實施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的X射線衍射譜圖。圖4.實施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的磁滯曲線圖，圖中為苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球；為純Fe3O4納米粒。圖5.實施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環境中的溶脹度圖。圖6.實施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環境中的苦參鹼累積釋放曲線圖。
具體實施例方式下面是本發明的實施例，但本發明不僅限於實施例。實施例I :
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小 球。實施例2
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 15g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為I. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述I. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例3:
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 20g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 0%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g，加至上述2. 0%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例4 I)稱取殼聚糖o. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。
4)分別稱取苦參鹼I. 25g、Fe3O4納米粒0. 06g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例5:
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 25g、Fe3O4納米粒0. 08g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例6
I)稱取殼聚糖0. 02g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 1%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 1%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到上述20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例7:
I)稱取殼聚糖0. 06g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 3%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 3%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
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實施例8
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 3g，加至上述0. 2%殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為I. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例9:
I)取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 7g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為3. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 25g、Fe3O4納米粒0. 05g，加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例10
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌使完全溶解，得 到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 50g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。實施例11
I)稱取殼聚糖0. 04g，均勻撒入1%的醋酸溶液20ml中，放置過夜，攪拌至溶解完全，得到濃度為0. 2%的殼聚糖溶液，備用。2)稱取CaCl2O. 5g，加至上述0. 2%的殼聚糖溶液20ml中，攪拌使溶解，得到殼聚糖和CaCl2的混合溶液，備用。CaCl2在殼聚糖溶液中的濃度為2. 5%。3)稱取海藻酸鈉0. 25g，均勻撒入IOml純化水中，放置過夜，攪拌至完全溶解，得到濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液，備用。4)分別稱取苦參鹼I. 75g、Fe3O4納米粒0. 05g,加至上述2. 5%的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，備用。5)量取上述含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液IOml,在緩緩攪拌下,通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，用適量純化水洗滌3次，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的外觀形態觀察
分別稱取溼和乾燥後的實施例I所得的苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球適量，於室溫條件下用肉眼和掃描電子顯微鏡(SEM)觀察苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的表面形態及微觀結構。觀察前，所有的樣品需噴金處理，控制加速電壓為30 kV，放大倍數為40及800倍。從圖I可以看出，溼苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球呈球形，棕褐色，形態較規則，表面光滑，平均直徑為2. 5^4. Omm(a);室溫放置自然乾燥後，仍保持其球形形態，但體積縮小，直徑約為2mm(b)。由圖I SEM圖片(c，d)可以看出，仍呈球形，形態較規貝U，該凝膠小球由於乾燥後凝膠網絡結構脫水而表面變得較為粗糙，且具有孔溝和褶皺。苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜分析
分別稱取殼聚糖、海藻酸鈉、苦參鹼、施例I所得的空白PH/磁雙重敏感性水凝膠小球及苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球適量，研碎後與KBr細粉以I :100的比例混合，在瑪瑙乳缽中研磨至均勻，裝入壓片模具，均勻鋪布後，邊抽氣邊加壓，至壓強約20MPa時維持壓力5min，得到厚約Imm的透明KBr樣品片。將其置於紅外光譜儀的樣品光路中，錄製紅外光譜圖，比較殼聚糖、海藻酸鈉、苦參鹼、空白PH/磁雙重敏感性水凝膠小球及苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜圖，結果見圖2。由圖2可見，殼聚糖的特徵吸收峰位於3444、2877、1655、1598，1095和1033CHT1處。海藻酸鈉的特徵吸收峰位於1626，1427和1029CHT1處。空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜中，殼聚糖和海藻酸鈉的特徵吸收峰1419，1087和1032CHT1仍存在，說明製備的水凝膠小球中含有二者的成分。苦參鹼 紅外光譜圖中，特徵吸收峰位於2929、1651、1440、1338，1252cm—1處。苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的紅外光譜圖中，出現了苦參鹼的特徵吸收峰，說明苦參鹼被成功載入苦 參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球網絡結構中。苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的X-衍射分析
分別稱取殼聚糖、海藻酸鈉、苦參鹼、Fe3O4納米粒、施例I所得的空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球適量，置瑪瑙乳缽中研磨粉碎，均勻鋪布後上機檢測，比較殼聚糖、海藻酸鈉、苦參鹼、Fe3O4納米粒、空白pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球的晶形，選擇掃描角度2 0的範圍為10°、0°，結果見圖3。由圖3可見，苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球，其主要衍射峰的位置與空白PH/磁雙重敏感性水凝膠小球的衍射峰位置完全一致，苦參鹼的部分衍射峰消失，並且殘留的部分苦參鹼衍射峰強度發生了改變，表明大部分苦參鹼被成功載入苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球網絡結構中，只有少量苦參鹼可能黏附在苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球表面。苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的磁性能測定
分別稱取Fe3O4納米粒及施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球粉末適量，於室溫條件下用振動樣品磁強計(VSM)測定Fe3O4納米粒和苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的磁滯曲線，考察該凝膠小球的磁響應特徵。結果顯示Fe3O4納米粒具有較高的飽和磁化強度，可達到58. 57emu/g ;剩餘磁化強度和矯頑力都為零，表現出典型的超順磁性，在體內應用時不會產生聚集。苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球的飽和磁化強度約為4emu/g，且矯頑力為零，該性質可使磁性凝膠小球在體內不會產生聚集，在磁場消失後又可以快速的重新分散。結果見圖4。由此可知，當施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球通過口服給藥，途徑胃腸道環境時，其釋藥行為可在胃腸道外加磁場的引導下，定位於腫瘤靶區，發揮定位釋放作用，使藥物濃集於病灶部位，降低了其他正常組織的中藥物濃度，減少了對正常組織的損害。從而可有效發揮該凝膠小球的磁敏感性藥物控釋作用，提高藥物生物利用度，增強臨床治療效果，同時也可減少藥物不良反和併發症，降低藥物毒副作用，改善患者服藥的依從性。苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的溶脹性試驗精密稱取施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球10mg，分別浸入IOmlpHl. 5的模擬胃液鹽酸溶液和pH 2. 5、pH 5. 0、pH 6. 8、pH 7. 4及pH 8. 0的系列磷酸鹽緩衝溶液中，溶脹介質溫度為37±0. 5° C，在預定的時間取出，用濾紙吸乾小球表面水分後稱重，計算小球的溶脹度(SR)，考察苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在模擬胃液pHl. 5及不同PH值的磷酸鹽緩衝溶液環 境中的溶脹性能。按以下公式計算溶脹度=SR=(W-Wtl)ZX ；其中W為苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球溶脹後的總質量(g) ,W0為乾燥苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球溶脹前的質量(g)。結果表明苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同PH值環境中溶脹度有明顯的差異。該凝膠小球在pHl. 5及pH2. 5磷酸鹽緩衝液中幾乎不溶脹；在PH6. 8、pH8. 0的的弱鹼性緩衝溶液中，表現出較好的敏感性，90分鐘時達到最大溶脹度，分別為24. 0及22. 6。超過90分鐘後，小球逐漸開始破裂，在圖中溶脹曲線有下降的趨勢。以上結果表明苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球在人工胃液pH值條件下不易溶脹破裂，不利於藥物釋放，而在小腸、結腸位置具有很好的溶脹性，有利於藥物釋放，具有明顯的pH敏感性，即環境pH越低溶脹度越小，環境pH越高溶脹度越大。結果見圖5。苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環境中的釋放行為試驗
按《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄釋放度測定法中第一法規定進行累積釋放度測定。稱取施例I所得的苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球50mg，精密稱定，分別以pH2. 5、pH5. 0、pH6. 8、pH7. 4、pH8. 0的不同pH值磷酸鹽緩衝溶液500ml為溶出介質，控制轉速為每分鐘100轉，溫度為37. 0±0. 5°C,依法測定，於0. 5、1、2、4、8、12、18、24小時，分別定點精密量取釋放介質1ml，並同時補充相同溫度、相同體積的空白釋放介質1ml，用0. 22iim微孔濾膜過濾，棄去初濾液，精密量取續濾液5 u 1，注入高效液相色譜儀(Agilent 1200型，美國)，測定苦參鹼在220nm波長處的峰面積，並代入標準曲線方程計算累積釋放度，根據測定結果繪製累計釋放曲線。色譜條件為以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，甲醇
0.1%磷酸水溶液(70 :30，三乙胺調pH為6. 0)為流動相，檢測波長為220nm，流速為I. Oml/min，柱溫為30°C，進樣量為5 yl，理論塔板數按苦參鹼峰計不低於2000。藥物累積釋放度(%) = [Rt/L]X100，其中，Rt表示t時間內的藥物累計釋放量，L表示最初載入的藥物總量。圖6為苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環境中的累積釋放曲線。如圖所示，苦參鹼在不同pH值的磷酸鹽緩衝液中的釋放行為有明顯差異。在pH2. 5的酸性溶液中釋藥量較低，2小時釋放約26%，且該時間點後藥物釋放較慢，8小時僅釋放34. 90% ;而在pH6. 8的弱鹼性溶液中釋藥量較大，2小時釋放77%左右，且釋藥較快，8小時釋放達97. 11%。以上結果表明該凝膠小球具有明顯的PH敏感性，這也與溶脹實驗結果一致，即環境pH越低，藥物釋放越少，環境pH越高，藥物釋放越多。結果見圖6。由此可知，當施例I所得的苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球通過口服給藥，途徑胃腸道環境時，其釋藥行為可隨胃腸道PH梯度變化，而產生不同的藥物釋放量。即環境PH越低，凝膠小球溶脹越小，藥物釋放就越少；環境PH越高，凝膠小球溶脹越大，藥物釋放就越多。從而可
有效發揮該凝膠小球的PH敏感性藥物控釋作用，提高藥物生物利用度，增強臨床治療效果，同時也可減少藥物不良反和併發症，降低藥物毒副作用，改善患者服藥的依從性。苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球釋放動力學
採用peppas方程對施例I所得的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球的釋放機制進行探討。peppas方程為Mt/M°° = ktn ;Mt/M 表示藥物在某一時刻的累積釋放分數(以％表示);t為釋放時間；k為速率常數；n為釋放參數，是表徵peppas方程中釋放機制的特徵參數，當0. 43〈n〈0. 85時，藥物的釋放機制為非Fick擴散，由藥物擴散和骨架溶蝕共同作用；當n〈0. 43時，為Fick擴散；當n>0. 85時，為骨架溶蝕機制。該水凝膠小球在pH2. 5環境中釋放度較小，而在PH5. (T8. 0的環境中釋放度較大，苦參鹼從水凝膠小球中的釋放機制均為Fick擴散。結果見表I。表I苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球在不同pH環境中的釋放機制
pHnkX 10r釋藥機制
2.50. 24752.29510.9303Fick 擴散
5.00. 27274.58140.9977Fick 擴散 6.8 0. 1129 7.2728 0.9906 Fick 擴散 7.4 0.0907 7.8127 0.9894 Fick 擴散
8.00.11267. 22100.9836Fick 擴散。
權利要求
1.一種苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球的製備方法，其特徵在於首先分別配製質量/體積濃度為O. I O. 3%的殼聚糖醋酸溶液，再在殼聚糖醋酸溶液中加入O. 3g O. 7g的CaCl，攪拌使CaCl溶解，配製質量/體積濃度為I. 5% 2. 5%的海藻酸鈉溶液，分別稱取I. 25g I. 75g的苦參鹼和O. 05g O. 08g的Fe3O4納米粒，加至前述的海藻酸鈉溶液IOml中，超聲處理30分鐘，攪拌均勻，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，量取含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液10ml，在緩緩攪拌下，通過5ml注射器滴加到20ml的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯反應20分鐘，反應結束後過濾，經洗滌處理後，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼PH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
2.權利要求I所述的方法製備的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
全文摘要
本發明涉及一種經口服給藥用於治療消化道腫瘤的苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球及其製備方法。本發明的製備方法為在殼聚糖醋酸溶液中加入0.3g～0.7g的CaCl，攪拌使CaCl溶解，配製質量/體積濃度為1.5%～2.5%的海藻酸鈉溶液，分別稱取適量的苦參鹼和適量的Fe3O4納米粒，加至前述的海藻酸鈉溶液中，得到含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液，量取含苦參鹼、Fe3O4納米粒和海藻酸鈉的混懸液滴加到的殼聚糖和CaCl2的混合溶液中，交聯後過濾，經洗滌處理後，室溫放置自然乾燥，得到苦參鹼pH/磁雙重敏感性水凝膠小球。
文檔編號A61K47/36GK102727445SQ20121024285
公開日2012年10月17日 申請日期2012年7月14日 優先權日2012年7月14日
發明者劉濤, 張玲玲, 李平, 李曉強, 李玉民, 焦海勝 申請人:蘭州大學第二醫院