納米脂質立方晶製劑及其製備方法和應用的製作方法
2023-05-27 11:34:51
專利名稱：納米脂質立方晶製劑及其製備方法和應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，尤其涉及一種納米脂質立方晶製劑及其製備方法和應用。
背景技術：
目前，眼科疾病的藥物在臨床使用中仍存在諸多問題，以環孢素A(環孢素，環孢黴素A，Cyclosporine A，CysA)為例，環孢素A在眼部的臨床主要應用於角膜移植排斥反應，角結膜乾燥症，Behcet氏症候群和激素依賴型皰性角膜結膜炎等。環孢素A全身給藥後，由於「血眼屏障」的存在藥物難於進入眼內口服5mg. Kg—1, day—1環孢素A後平均眼房水濃度僅^ng. mL—1，是血藥濃度的13%。此外，全身用藥不僅價格昂貴，而且可能引起腎臟、 肝臟毒性損害以及高血壓等併發症，因此全身給藥在眼科的應用受到限劑。眼局部給藥製劑是最易為患者接受、使用最便利的眼表給藥形式，即透過眼角膜給藥系統。目前有研究報導的環孢素A的眼表局部給藥製劑，主要可分為兩類(1)以油為介質的分散體-油溶液和軟膏由於環孢素A在水中幾乎不溶，所以臨床通常將環孢素A溶於無菌橄欖油、蓖麻油或花生油中，但給藥時產生的油膩感使患者難以接受，有報導油溶液可致瞼結膜輕度充血；兔眼滴用後發生了眼周皮炎和脫毛現象，停藥後可恢復；而且有報導，由於油氧化值的升高，此類製劑的有效期不足4周。軟膏由於其造成視力模糊和不舒適感，所以只有獸用的市售製劑Optimmune 含0. 2%環孢素A。(2)以水為介質的分散體-包合物、膠束、乳劑和微乳、脂質體和納米粒等以水為介質的分散體比油溶液更舒適，但是由於瞬目和淚水作用使藥物在角膜前停留時間很短，角膜的屏障作用和藥物理化性質使藥物的跨角膜轉運受到限制，只有小於 5%的藥物能夠進入到眼睛的前房組織(如房水等)，而分配到後房組織(晶體、玻璃體等) 的藥物則更少。同時，由於環孢素A在水中幾乎不溶，因此，新型劑型旨在提高環孢素A的角膜粘附性和角膜穿透能力，主要有環糊精包合物和膠體分散體系。Mosteller等製備了環孢素A的α環糊精包合物溶液，將其溶解度提高了近100倍，但沒有延長藥物角膜前停留。膠體分散體的研究主要報導有膠束、乳劑和微乳、脂質體和納米粒等，能夠提高環孢素 A的角膜粘附性、角膜穿透能力，但多數存在無法高溫高壓或輻射滅菌，以及藥物洩漏、穩定性差的問題。立方晶(Cubosomes，CS)是兩親性脂質和表面活性劑在水中自發形成的雙連續相的立方液晶的納米分散體系，屬於自穩定體系。立方液晶在控釋藥物和蛋白質方面具有很大的優勢，這是因為其獨特的脂水雙連續相和雙水通道結構，能夠同時增溶親水、親脂及兩親性分子。近幾年已有關於立方晶載體用於靜脈給藥、口服給藥、口腔黏膜給藥和透皮給藥等給藥途徑的研究報導，但至今未見有關環孢素A等脂溶性藥物的納米脂質立方晶眼部給藥製劑的公開報導。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種納米脂質立方晶製劑，該製劑進行眼部給藥時，能顯著提高藥物的角膜穿透能力，且穩定性好，可以實現熱壓滅菌。此外，還需要提供一種上述納米脂質立方晶製劑的製備方法和應用。為了解決上述技術問題，本發明通過如下技術方案實現在本發明的一個方面，提供了一種納米脂質立方晶製劑，包含脂溶性藥物、兩親性脂質、穩定劑、水，其重量比如下
脂溶性藥物0. 01% 跳兩親性脂質0. 05% 35%穩定劑0.005% 4%水60% 99. 4%。所述脂溶性藥物選自環孢素A、氧氟沙星、紅黴素、氟比洛芬、阿託品、毛果芸香鹼、 阿替洛爾、託品醯胺、阿昔洛韋、腺嘌呤阿糖苷、無環鳥苷、匹馬菌素、制黴菌素中的一種或多種。所述兩親性脂質選自甘油單油酸酯(M0)、磷脂醯乙醇胺(PE)、磷脂、植烷三醇中的一種或多種。所述穩定劑選自泊洛沙姆407 (Poloxamer 407，F127)、聚乙烯醇(PVA)、短鏈多肽中的一種或多種。優選的，所述脂溶性藥物為環孢素A，所述兩親性脂質為甘油單油酸酯，所述穩定劑為泊洛沙姆407。優選的，還包含重量比為0% 的抑菌劑，該抑菌劑選自苯扎氯銨、羥苯酯類、 三氯叔丁醇、醋酸氯己定中的一種或多種。優選的，還包含重量比為0% 10%的酸鹼調節劑，該酸鹼調節劑選自鹽酸、氫氧化鈉、磷酸鹽、硼酸、硼酸鹽中的一種或多種。在納米脂質立方晶製劑中添加滴眼液輔料酸鹼調節劑，使該立方晶製劑的PH值達到眼部耐受的pH5 9。優選的，還包含重量比為0% 10%的粘度調節劑，該粘度調節劑選自透明質酸、 卡波姆、泊洛沙姆、聚丙烯酸中的一種或多種。在納米脂質立方晶製劑中添加滴眼液輔料粘度調節劑，使該立方晶製劑的粘度達到4 5mPa. s。優選的，還包含其他常用的滴眼液輔料，如滲透壓調節劑、表面活性劑、助懸劑、金屬離子絡合劑等。在本發明的另一方面，還提供了一種上述納米脂質立方晶製劑的製備方法，包括以下步驟將穩定劑加入兩親性脂質至熔化後形成油相，再加入適量脂溶性藥物並使其溶解於油相中；待脂溶性藥物溶解後，加入預熱的水相，混勻，再經均質機均質後，即得納米脂質立方晶製劑。在本發明的另一方面，還提供了一種上述納米脂質立方晶製劑在製備治療眼科疾病的眼部用藥製劑中的應用。本發明的納米脂質立方晶製劑，具有以下有益效果1.與納米粒和脂質體相比，該製劑為熱力學穩定體系，60°C加速實驗也證明了該納米脂質立方晶製劑具有很好的穩定性，可以實現熱壓滅菌。2.體內藥效學實驗證明環孢素A脂質立方晶製劑的藥效優於橄欖油溶液；體內藥動學實驗證明其能顯著提高藥物的角膜穿透量。3.對於脂溶性藥物有較高的包封率，通過凝膠微柱離心法測定環孢素A的包封率大於90%，既解決了脂溶性藥物在水中溶解度低的問題，又製備出以水為分散介質的滴眼液，相比於油溶液，增加了病患使用的眼部舒適度。4.原料無刺激、生物相容性好，家兔角膜的刺激實驗結果顯示環孢素A納米脂質立方晶製劑基本無刺激性。5.現有大型工業儀器，如高速剪切勻漿(乳化)儀器和高壓均質機，可以實現該製劑的工業化生產。
下面結合附圖和具體實施方式
對本發明作進一步詳細的說明。圖1是本發明實施例7空白對照組大鼠在角膜移植術後第二天(A)、第十天(B)的眼部裂隙燈照片圖；圖2是本發明實施例7環孢素A橄欖油組大鼠在角膜移植術後第二天(A)、第十天 (B)的眼部裂隙燈照片圖；圖3是本發明實施例7環孢素A立方晶組大鼠在角膜移植術後第二天(A)、第十天 (B)的眼部裂隙燈照片圖；圖4是本發明實施例8家兔眼部給予環孢素A橄欖油和環孢素A納米脂質立方晶後不同時間點房水中的藥物濃度曲線圖。
具體實施例方式為克服目前眼用製劑藥物角膜穿透能力低，且穩定性差，難以實現高溫高壓滅菌等缺點，經歷多次反覆實驗後，終於研製出本發明納米脂質立方晶製劑，包含脂溶性藥物、 兩親性脂質、穩定劑、水，其重量比為脂溶性藥物0. 01 % 2 %，兩親性脂質0. 05 % 35 %，穩定劑0. 005 % 4 %，水60 % 99. 4 %。實驗證明本發明納米脂質立方晶製劑能顯著增加藥物的角膜穿透能力，且穩定性好，藥效試驗和體內藥物動力學實驗都顯示，以環孢素A為模型藥物製備的環孢素A納米脂質立方晶的效果都明顯優於對照環孢素A橄欖油溶液，而且降低了眼部刺激性。實施例1環孢素A納米脂質立方晶製劑的製備製備環孢素A納米脂質立方晶製劑，成品含1%環孢素4(1/們。製備方法將Ig泊洛沙姆407加入9g甘油單油酸酯中40°C熔化後形成油相，將 2g環孢素A加入油相中，繼續40°C加熱並振動促進藥物溶解；待藥物完全溶解後，加入預熱 40°C的188g水中，迅速攪拌混勻，先IOOOOrpm高速剪切均質(FJ 200-S數顯高速分散均質機,上海標本模型廠)lmin，再用200bar高壓均質(EM-C3高壓均質機，Avestin Canada) 3個循環。再加入適量的抑菌劑、酸鹼調節劑、粘度調節劑、滲透壓調節劑等滴眼液常用輔料， 即得到納米脂質立方晶製劑。平均粒徑193. 5nm，多分散係數PDI值0.199。(粒徑測定方法各樣品取100 μ L，加蒸餾水900 μ L稀釋，漩渦振蕩混勻後，採用馬爾文^^狀^吐Nano S型納米粒度分析儀測定粒徑分布和粒子多分散係數PDI。)實施例2環孢素A納米脂質立方晶製劑的製備製備環孢素A納米脂質立方晶製劑，成品含0. 01 %環孢素A (W/W)。製備方法將0. 05g聚乙烯醇加入0. 5g甘油單油酸酯中40°C熔化後形成油相，將 0. Ig環孢素A加入油相中，繼續40°C加熱並振動促進藥物溶解；待藥物完全溶解後，加入預熱40°C的200g水中，迅速攪拌混勻，先IOOOOrpm高速剪切均質(FJ 200-S數顯高速分散均質機，上海標本模型廠)lmin，再用200bar高壓均質(EM-C3高壓均質機，Avestin Canada) 3 個循環，再加水至lOOOg，混勻。再加入適量的抑菌劑、酸鹼調節劑、粘度調節劑、滲透壓調節劑等滴眼液常用輔料，即得到納米脂質立方晶製劑。平均粒徑209. 3nm,多分散係數PDI值 0.185。實施例3環孢素A納米脂質立方晶製劑的製備製備環孢素A納米脂質立方晶製劑，成品含2%環孢素A(W/W)。製備方法將7g泊洛沙姆407加入70g甘油單油酸酯中40°C熔化後形成油相，將 4g環孢素A加入油相中，繼續40°C加熱並振動促進藥物溶解；待藥物完全溶解後，加入預熱 40°C的119g水中，迅速攪拌混勻，IOOOOrpm高速剪切均質5min。再加入適量的抑菌劑、酸鹼調節劑、粘度調節劑、滲透壓調節劑等滴眼液常用輔料，即得到納米脂質立方晶製劑。實施例4氧氟沙星納米脂質立方晶製劑的製備製備氧氟沙星納米脂質立方晶製劑，成品含0. 3%氧氟沙星(W/W)。製備處方將Ig泊洛沙姆407加入IOg植烷三醇中40°C熔化後形成油相，將0. 6g 氧氟沙星加入油相中，繼續40°C加熱並振動促進藥物溶解；待藥物完全溶解後，加入預熱 40°C的188g水中，迅速攪拌混勻，先IOOOOrpm高速剪切均質lmin，再用高壓均質200bar 3 個循環。再加入適量的抑菌劑、酸鹼調節劑、粘度調節劑、滲透壓調節劑等滴眼液常用輔料。 平均粒徑177. 8nm,多分散係數PDI值0. 157。實施例5氟比洛芬納米脂質立方晶製劑的製備製備氟比洛芬納米脂質立方晶製劑，成品含0. 2%氟比洛芬m)。製備處方將Ig泊洛沙姆407加入9g磷脂醯乙醇胺中40°C熔化後形成油相， 將0. 4g氟比洛芬加入油相中，繼續40°C加熱並振動促進藥物溶解；待藥物完全溶解後，加入預熱40°C的190g水中，迅速攪拌混勻，先IOOOOrpm高速剪切均質lmin，再用高壓均質 200bar 3個循環。再加入適量的抑菌劑、酸鹼調節劑、粘度調節劑、滲透壓調節劑等滴眼液常用輔料。平均粒徑158. 4nm,多分散係數PDI值0. 203。實施例6環孢素A納米脂質立方晶製劑的眼部刺激性實驗(1)刺激性實驗設計選擇眼睛健康的家兔，每組4隻，一側眼給予對照製劑BSS平衡鹽眼灌注液 (ALCONCANADA INC.)，另一側給予受試製劑，分別為環孢素A橄欖油滴眼液和環孢素A納米脂質立方晶滴眼液。採用結膜囊給藥的方法，給藥體積50 μ L。(2)刺激性實驗結果統計
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記錄給藥後l、3、6、24、48、72h的眼局部反應和裂隙燈觀察結果。按照Draize眼刺激反應評分標準，將每隻受試動物的眼角膜、虹膜和結膜的刺激反應的分值相加，得到一隻受試動物眼刺激反應的總積分。把每隻受試動物的刺激反應積分的總和除以動物數就是製劑對眼刺激性的最後平均值，並以此判斷其刺激程度。結果顯示(見表1)環孢素A橄欖油滴眼液有一定刺激性，家兔閉眼不願睜開，在他以內結膜有輕度充血，有一隻虹膜輕微充血，24h後基本無刺激反應。環孢素A納米脂質立方晶組基本沒有刺激反應，只有個別短暫的結膜充血，Ih左右即恢復。表1 Draize眼刺激反應評分結果
權利要求
1.一種納米脂質立方晶製劑，其特徵在於，包含脂溶性藥物、兩親性脂質、穩定劑、水， 其重量比如下脂溶性藥物 0.01% 觀兩親性脂質 0. 05% 35% 穩定劑0. 005% 4%/K60% 99. 4%。
2.根據權利要求1所述的納米脂質立方晶製劑，其特徵在於，所述脂溶性藥物選自環孢素A、氧氟沙星、紅黴素、氟比洛芬、阿託品、毛果芸香鹼、阿替洛爾、託品醯胺、阿昔洛韋、 腺嘌呤阿糖苷、無環鳥苷、匹馬菌素、制黴菌素中的一種或多種。
3.根據權利要求1所述的納米脂質立方晶製劑，其特徵在於，所述兩親性脂質選自甘油單油酸酯、磷脂醯乙醇胺、磷脂、植烷三醇中的一種或多種。
4.根據權利要求1所述的納米脂質立方晶製劑，其特徵在於，所述穩定劑選自泊洛沙姆407、聚乙烯醇、短鏈多肽中的一種或多種。
5.根據權利要求1所述的納米脂質立方晶製劑，其特徵在於，還包含重量比為0% 的抑菌劑，該抑菌劑選自苯扎氯銨、羥苯酯類、三氯叔丁醇、醋酸氯己定中的一種或多種。
6.根據權利要求1或5所述的納米脂質立方晶製劑，其特徵在於，還包含重量比為 0% 10%的酸鹼調節劑，該酸鹼調節劑選自鹽酸、氫氧化鈉、磷酸鹽、硼酸、硼酸鹽中的一種或多種。
7.根據權利要求1或5所述的納米脂質立方晶製劑，其特徵在於，還包含重量比為 0% 10%的粘度調節劑，該粘度調節劑選自透明質酸、卡波姆、泊洛沙姆、聚丙烯酸中的一種或多種。
8.根據權利要求2至4中任一項所述的納米脂質立方晶製劑，其特徵在於，所述脂溶性藥物為環孢素A，所述兩親性脂質為甘油單油酸酯，所述穩定劑為泊洛沙姆407。
9.權利要求1所述納米脂質立方晶製劑的製備方法，其特徵在於，包括以下步驟將穩定劑加入兩親性脂質至熔化後形成油相，再加入適量脂溶性藥物並使其溶解於油相中；待脂溶性藥物溶解後，加入預熱的水相，混勻，再經均質機均質後，即得納米脂質立方晶製劑。
10.權利要求1所述的納米脂質立方晶製劑在製備治療眼科疾病的眼部用藥製劑中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種納米脂質立方晶製劑，包含脂溶性藥物、兩親性脂質、穩定劑、水。本發明還公開了納米脂質立方晶製劑的製備方法以及該納米脂質立方晶在製備治療眼科疾病的眼部用藥製劑中的應用。本發明的納米脂質立方晶製劑，能顯著提高藥物的角膜穿透能力，穩定性優於脂質體和納米粒，可實現高壓高溫滅菌，具有良好的藥物釋放特性，擁有廣闊的臨床應用和市場前景。
文檔編號A61K45/08GK102274175SQ20111018333
公開日2011年12月14日 申請日期2011年7月1日 優先權日2011年7月1日
發明者王慶平, 鄒豪, 鍾延強, 陳建明, 陳琰, 高申, 魯瑩 申請人:中國人民解放軍第二軍醫大學