從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法
2023-06-14 05:59:41 3
從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法
【專利摘要】本發明提供了一種從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法，包括以下步驟：1)將巴戟天粉碎，加入乙醇回流提取，將提取液減壓濃縮至無乙醇，得到稠膏；2)將稠膏加水溶解，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，收集正丁醇相，減壓濃縮，回收正丁醇，得到浸膏；3)將浸膏加水溶解，上大孔吸附樹脂柱，用鹼液洗脫，收集洗脫液和流出液，得到混合液；4)調節混合液pH至中性，上大孔吸附樹脂柱，用乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，乾燥，即為高純度水晶蘭甙。本發明工藝簡單，穩定性好，成本低廉，產品純度高，收率大，適合工業化生產。
【專利說明】從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於植物活性成分提取【技術領域】，主要涉及一種從羅巴戟漢天果中提取羅分漢離果水甜晶蘭甙甙V的方法。
【背景技術】
[0002]巴戟天是著名的四大南藥之一，來源於菌草科巴戟天屬植物巴戟Morinda officinalis How的乾燥根。巴戟天具有補腎陽、強筋骨、祛風溼功效，臨床用於治療陽痿遺精、宮冷不孕、月經不調、少腹冷痛、風溼痺痛、筋骨萎軟等症。據分析，巴戟天含多種化學成分，如蒽醌、環烯醚職、寡糖、多糖等成分，其中環烯醚職類主要包括水晶蘭式(monotropein)和去乙醯基車葉草苷酸，具有抗菌、抗氧化、抗誘變、抗腫瘤、消炎鎮痛等廣泛作用。水晶蘭甙是環烯醚萜類物質的特徵性成分，在5年生藥材中的含量可達13mg/g以上。
【發明內容】
[0003]本發明要解決的技術問題是提供一種
[0004]本發明提供的技術方案是
[0005]I)將巴戟天粉碎，加入其8?15倍重量的乙醇回流提取3次，每次提取I?3h，合併提取液，減壓濃縮至無乙醇，得到稠膏；
[0006]2)將稠膏加水溶解，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，收集正丁醇相，減壓濃縮，回收正丁醇，得到浸膏；
[0007]3)將浸膏加水溶解，上大孔吸附樹脂柱，用鹼液洗脫，收集洗脫液和流出液，得到混合液；
[0008]4)調節混合液pH至中性，上大孔吸附樹脂柱，用乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，乾燥，即為高純度水晶蘭甙。
[0009]步驟I)中，所述乙醇的體積濃度為60?80%。採用乙醇溶液為溶媒可以將巴戟天中的水晶蘭甙、蒽醌類和糖類成分提取出來。
[0010]步驟2)中，由於蒽醌類成分更容易溶於乙酸乙酯中，而水晶蘭甙和糖類成分在乙酸乙酯中溶解度較小，因此蒽醌就進入上層乙酸乙酯相中，而水晶蘭甙和糖類成分則繼續留在下層水相中。採用正丁醇繼續萃取，由於水晶蘭甙在正丁醇中具有更大的溶解度，而糖類等成分更容易溶於水中，因此水晶蘭甙則進入正丁醇相中，而糖類等其他雜質則留在水中。
[0011]步驟3)中，由於浸膏中還含有一定量的大分子物質以及脂溶性雜質，這些雜質更容易被樹脂吸附至飽和，採用較快的上樣流速，以2?4BV/h為宜，可減少目標成分水晶蘭甙的吸附。採用鹼液洗脫，可以將水晶蘭甙最大程度洗脫出來，減少水晶蘭甙的吸附損失。洗脫時，採用較慢的洗脫速度，以I?1.5BV/h為宜。鹼液的pH值以9?11為宜。
[0012]步驟4)中，第二次上大孔吸附樹脂柱，採用體積濃度為30%的乙醇洗脫，可以進一步去除無機鹽、多酚類雜質。
[0013]步驟3)和4)中所述大孔吸附樹脂柱的型號為D101、AB-8、HPD600、D301。
[0014]本發明工藝簡單，穩定性好，成本低廉,產品純度高,收率大,適合工業化生產。
【具體實施方式】
[0015]以下具體實施例對本發明作進一步闡述，但不作為對本發明的限定。
[0016]實施例1
[0017]I)將10g 5年生巴戟天粉碎，加入其8倍重量的60v%乙醇回流提取3次，每次提取lh，合併提取液，減壓濃縮至無乙醇，得到稠膏；
[0018]2)將稠膏加水溶解，加入混合液體積0.7倍的乙酸乙酯，萃取2次，靜置分層，收集下層水相，然後向下層水相中加入其體積2倍的正丁醇萃取3次，棄去水相，合併正丁醇相，將正丁醇相減壓濃縮，回收正丁醇，得到相對密度為1.05的浸膏；
[0019]3)將浸膏加水溶解，上DlOl大孔吸附樹脂柱，上樣流速為2BV/h，用pH值為9的NaOH溶液洗脫，洗脫流速為lBV/h，收集洗脫液和流出液，得到混合液；
[0020]4)調節混合液pH至中性，上DlOl大孔吸附樹脂柱，用30v%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，乾燥，得到1.35g高純度水晶蘭甙，經反相分析型液相色譜(RP-HPLC)檢測，其純度為 90.018%。
[0021]實施例2
[0022]I)將10g 5年生巴戟天粉碎，加入其15倍重量的80v%乙醇回流提取3次，每次提取3h，合併提取液，減壓濃縮至無乙醇，得到稠膏；
[0023]2)將稠膏加水溶解，加入混合液體積1.5倍的乙酸乙酯，萃取4次，靜置分層，收集下層水相，然後向下層水相中加入其體積4倍的正丁醇萃取6次，棄去水相，合併正丁醇相，將正丁醇相減壓濃縮，回收正丁醇，得到相對密度為1.15的浸膏；
[0024]3)將浸膏加水溶解，上AB-8大孔吸附樹脂柱，上樣流速為4BV/h，用pH值為11的NaOH溶液洗脫，洗脫流速為1.5BV/h，收集洗脫液和流出液，得到混合液；
[0025]4)調節混合液pH至中性，上AB-8大孔吸附樹脂柱，用30v%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，乾燥，得到1.40g高純度水晶蘭甙，經反相分析型液相色譜(RP-HPLC)檢測，其純度為 91.11%。
[0026]實施例3
[0027]I)將10g 5年生巴戟天粉碎，加入其12倍重量的70v%乙醇回流提取3次，每次提取2h，合併提取液，減壓濃縮至無乙醇，得到稠膏；
[0028]2)將稠膏加水溶解，加入混合液體積1.2倍的乙酸乙酯，萃取3次，靜置分層，收集下層水相，然後向下層水相中加入其體積3倍的正丁醇萃取5次，棄去水相，合併正丁醇相，將正丁醇相減壓濃縮，回收正丁醇，得到相對密度為1.10的浸膏；
[0029]3)將浸膏加水溶解，上HPD600大孔吸附樹脂柱，上樣流速為3BV/h，用pH值為10的NaOH溶液洗脫，洗脫流速為1.2BV/h,收集洗脫液和流出液，得到混合液；
[0030]4)調節混合液pH至中性，上HPD600大孔吸附樹脂柱，用30v%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，乾燥，得到1.38g高純度水晶蘭甙，經反相分析型液相色譜(RP-HPLC)檢測，其純度為92.54%。
[0031]實施例4
[0032]I)將10g 5年生巴戟天粉碎，加入其8倍重量的80v%乙醇回流提取3次，每次提取lh，合併提取液，減壓濃縮至無乙醇，得到稠膏；
[0033]2)將稠膏加水溶解，加入混合液體積1.5倍的乙酸乙酯，萃取2次，靜置分層，收集下層水相，然後向下層水相中加入其體積4倍的正丁醇萃取3次，棄去水相，合併正丁醇相，將正丁醇相減壓濃縮，回收正丁醇，得到相對密度為1.15的浸膏；
[0034]3)將浸膏加水溶解，上DlOl大孔吸附樹脂柱，上樣流速為4BV/h，用pH值為9的NaOH溶液洗脫，洗脫流速為1.5BV/h，收集洗脫液和流出液，得到混合液；
[0035]4)調節混合液pH至中性，上DlOl大孔吸附樹脂柱，用30v%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，乾燥，得到1.30g高純度水晶蘭甙，經反相分析型液相色譜(RP-HPLC)檢測，其純度為 91.86%。
【權利要求】
1.從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法，其特徵在於:包括以下步驟: 1)將巴戟天粉碎，加入其8?15倍重量的乙醇回流提取3次，每次提取1?3h，合併提取液，減壓濃縮至無乙醇，得到稠膏； 2)將稠膏加水溶解，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，收集正丁醇相，減壓濃縮，回收正丁醇，得到浸膏； 3)將浸膏加水溶解，上大孔吸附樹脂柱，用鹼液洗脫，收集洗脫液和流出液，得到混合液； 4)調節混合液pH至中性，上大孔吸附樹脂柱，用乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，乾燥，SP為高純度水晶蘭甙。
2.根據權利要求1所述的從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法，其特徵在於:步驟1)中，所述乙醇的體積濃度為60?80%。
3.根據權利要求1所述的從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法，其特徵在於:步驟3)中，所述鹼液的pH值為9?11。
4.根據權利要求1所述的從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法，其特徵在於:步驟3)中，上樣流速為2?4BV/h ;洗脫流速為1?1.5BV/h。
5.根據權利要求1所述的從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法，其特徵在於:步驟3)和4)中，所述大孔吸附樹脂柱的型號為D101、AB-8、HPD600或D301。
6.根據權利要求1所述的從巴戟天中提取分離水晶蘭甙的方法，其特徵在於:步驟4)中，所述乙醇體積濃度為30%。
【文檔編號】C07H1/08GK104311612SQ201410522495
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年9月30日 優先權日:2014年9月30日
【發明者】盧照凱, 謝冬養, 鍾德品, 陸美珍, 唐利萍 申請人:桂林三寶藥業有限公司