不具備血管舒張活性的促排水和利尿鈉多肽的製作方法

2023-07-26 20:25:41 4

專利名稱：不具備血管舒張活性的促排水和利尿鈉多肽的製作方法
不具備血管舒張活性的促排水和利尿鈉多肽 相關申請的交叉引用
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號的權益o
背景
本文本涉及促排水和利尿鈉(natriuretic)多肽。例如，本文本涉及具有 促排水和利尿鈉活性而不具備擴張血管組織的能力的多肽。
利尿鈉多肽家族的成員是調節體液內穩態的激素。心房利尿鈉肽(ANP) 由心房肌細胞響應於血管內容積的增加而分泌。ANP在循環中後，其主要 作用於腎臟、血管組織和腎上腺，其中它的作用導致腎臟排出鈉和水並導 致血管內容積和血壓降低。BNP也來自心肌細胞，並如ANP —樣在人血 漿中循環。BNP是利尿鈉的、抑制腎素(rennin)、血管舒張(vasodilating)和 鬆弛性的。BNP的主要循環和貯存形式是具有環結構的32胺基酸多肽。 BNP的生理作用由與鳥苷酸環化酶相連的受體利尿鈉肽受體A (NPR-A)介 導。BNP的清除由NPR-C受體推動，將其移出循環。BNP也由中性內肽 酶通過酶促裂解而降解。C-型利尿鈉肽(CNP)來源於內皮細胞，起血管舒 張和生長抑制多肽作用。樹眼鏡蛇屬(Z)ew/raa^/力利尿鈉肽(DNP)結構與 ANP、 BNP和CNP相似，從非洲綠樹眼鏡蟲它(De"c/ow;^fl"gwWce;w)或綠 曼巴蟲它(green mamba snake)的毒'液分離。概述
本文本涉及促排水和利尿鈉多肽。例如，本文本提供了具有促排水和 利尿鈉活性的多肽。在一些例子，本文提供的多肽可具有促排水和利尿鈉 活性，而不具備擴張血管組織的能力。
大體上，本文本一方面特徵為長度少於45胺基酸殘基的多肽，其中 所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括或基本上由以下組成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1所列的 序列,(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備 血管舒張(vasodilatory)活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序歹'J。 所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種編碼長度少於45胺基酸殘基的 多肽的分離的核酸，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括或 基本上由以下組成(a)SEQIDNO: 1所列的序列或有不多於3個^"配的 SEQ ID NO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8 個錯配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或 有不多於3個錯配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉 活性。所述多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1 所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包 括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序 列、SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽 可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種包括編碼長度少於45胺基酸殘 基的多肽的核酸或基本上由編碼長度少於45胺基酸殘基的多肽的核酸組 成的載體，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括或基本上由 以下組成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ IDNO: l所列的序列，(b)SEQIDNO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的 SEQIDNO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多於3 個錯配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述 多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。 所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種包括編碼長度少於45胺基酸殘 基的多肽的核酸的宿主細胞，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順 序包括或基本上由以下組成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3 個錯配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有 不多於8個錯配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列 的序列或有不多於3個錯配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包 括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽可包括SEQID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多 肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所 列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所 述多肽可為大致純的多肽。所述宿主細胞可為真核宿主細胞。
在另一實施方式，本文本特徵為一種包括藥學上可接受的運載體 (carrier)和長度少於45胺基酸殘基的多肽的藥物組合物，其中所述多肽以 從氨基末端至羧基末端的順序包括或基本上由以下組成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQIDNO: 2所列的序列，和 (c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張活性。 所述多肽可包括SEQIDNO: 1所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可 包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。在另一實施方式，本文本特徵為一種增加哺乳動物的促排水和利尿鈉 活性而不降低血壓的方法，其中所述方法包括向哺乳動物施用 一種長度少 於45胺基酸殘基的多肽，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序
包括或基本上由以下組成(a)SEQIDNO: 1所列的序列或有不多於3個 錯配的SEQIDNO: l所列的序列，(b)SEQIDNO: 2所列的序列或有不 多於8個錯配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的 序列或有不多於3個錯配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括 利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多 肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所 列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所 述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種支架，其包括包含長度少於45 胺基酸殘基的多肽的塗層(coating)，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末 端的順序包括或基本上由以下組成(a)SEQIDNO: 1所列的序列或有不 多於3個錯配的SEQIDNO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序 列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個《昔配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多 肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽可包括 SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。 所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。 所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種透析袋(dialysis tubing),其包括 包含長度少於45胺基酸殘基的多肽的塗層，其中所述多肽以從氨基末端 至羧基末端的順序包括或基本上由以下組成(a) SEQ ID NO: l所列的序 列或有不多於3個錯配的SEQ IDNO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2 所列的序列或有不多於8個錯配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c) SEQ IDNO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽
可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列
的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為包括長度少於45胺基酸殘基的多肽 的微粒或毫微粒，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括或基 本上由以下組成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯 配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不 多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。 所述多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的 序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純 的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種長度少於45胺基酸殘基的多肽， 其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a)SEQIDNO: l所 列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1所列的序列,(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多於8個錯配的SEQIDNO: 2所列的序列，和 (c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所 列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 7所列的序列。所述多肽可包括 SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、 SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可為 大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種編碼長度少於45胺基酸殘基的 多肽的分離的核酸，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括 (a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 7所列的序列。所述 多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1 所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。 所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種包括編碼長度少於45胺基酸殘 基的多肽的核酸或基本上由編碼長度少於45胺基酸殘基的多肽的核酸組 成的載體，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的 序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 7所列的序列。所述多肽可 包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的 序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多 肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種包括編碼長度少於45胺基酸殘 基的多肽的核酸的宿主細胞，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順 序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1所列的序列,(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多於3個錯酉己 的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可 包括SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 7所列的 序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種包括藥學上可接受的運載體和長
10度少於45胺基酸殘基的多肽的藥物組合物，其中所述多肽以從氨基末端
至羧基末端的順序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯 配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多 於8個錯配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序 列或有不多於3個錯配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括利 尿鈉活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括 SEQIDNO: 7所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。 所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、SEQIDNO: 7所列的序列 和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種支架，其包括包含長度少於45 胺基酸殘基的多肽的塗層，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序 包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多於3個錯配 的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可 包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 7所列的 序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種透析袋，其包括包含長度少於45 胺基酸殘基的多肽的塗層，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序 包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多於3個錯配 的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可 包括SEQIDNO: l所列的序列。所迷多肽可包括SEQ ID NO: 7所列的 序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可為大致純的多肽。在另一實施方式，本文本特徵為包括長度少於45胺基酸殘基的多肽
的微粒或毫微粒，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1所列的 序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 7所列的序列。所述 多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1 所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。 所述多肽可為大致純的多肽。
在另 一實施方式，本文本特徵為一種長度少於45胺基酸殘基的多肽， 其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a) SEQ ID NO: 2所 列的序列或有不多於8個錯配的SEQIDNO: 2所列的序列,和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQIDNO: 3所列的序列。所 述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽可 不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列 的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純 的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種編碼長度少於45胺基酸殘基的 多肽的分離的核酸，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括 (a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列 的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管 舒張活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包 括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序 列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的 序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種包括編碼長度少於45胺基酸殘基的多肽的核酸或基本上由編碼長度少於45胺基酸殘基的多肽的核酸組
成的載體，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和 (b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張活性。 所述多肽可不具有SEQ ID NO: 1所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多 肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述 多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種包括編碼長度少於45胺基酸殘 基的多肽的核酸的宿主細胞，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順 序包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備 血管舒張活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種包括藥學上可接受的運載體和長 度少於45胺基酸殘基的多肽的藥物組合物，其中所述多肽以從氨基末端 至羧基末端的順序包括(a)SEQIDNO: 2所列的序列或有不多於8個錯 配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不 多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。 所述多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: 1所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另 一實施方式，本文本特徵為一種增加哺乳動物的促排水和利尿鈉 活性而不降低血壓的方法，其中所述方法包括向哺乳動物施用一種長度少
13於45胺基酸殘基的多肽，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序
包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備 血管舒張活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種增加哺乳動物的促排水和利尿鈉 活性而不降低血壓的方法，其中所述方法包括向哺乳動物施用 一種長度少 於45胺基酸殘基的多肽，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序 包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備 血管舒張活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所歹'J 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種支架，其包括包含長度少於45 胺基酸殘基的多肽的塗層，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序 包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備 血管舒張活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為一種透析袋，其包括包含長度少於45 胺基酸殘基的多肽的塗層，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備 血管舒張活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在另一實施方式，本文本特徵為包括長度少於45胺基酸殘基的多肽 的微粒或毫微粒，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a) SEQIDNO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的 序列,和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張 活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: 1所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述 多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所 述多肽可為大致純的多肽。
在另 一 實施方式，本文本特徵為治療患有心血管或腎疾患(condition) 的哺乳動物的方法。所述方法可包括向哺乳動物施用一種多肽。所述哺乳 動物可患有心血管疾病。所述哺乳動物可患有充血性心力衰竭。所述哺乳 動物可患有心肌梗塞、冠心病、動脈疾病、腎才幾能不全、癌症或鈉和水滯 留狀態(sodium and water retaining state)。
在一些例子，所述多肽的長度可少於45胺基酸殘基，其中所述多肽 以從氨基末端至羧基末端的順序包括或基本上由以下組成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQIDNO: l所列的序列，(b) SEQIDNO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的 序列,和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張 活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在一些例子，所述多肽的長度可少於45胺基酸殘基，其中所述多肽 以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a)SEQIDNO: l所列的序列或有 不多於3個錯配的SEQIDNO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的 序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多 肽可包括利尿鈉活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述 多肽可包括SEQIDNO: 7所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3 所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列、SEQIDNO: 7 所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
在一些例子，所述多肽的長度可少於45胺基酸殘基，其中所述多肽 以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a)SEQIDNO: 2所列的序列或有 不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列 的序列或有不多於3個錯配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包 括利尿鈉活性。所述多肽可不具備血管舒張活性。所述多肽可不具有SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述 多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2 所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可為大致純的多肽。
除非另外限定，否則本文所用的所有技術和科學術語都具有如本發明 所屬領域普通技術人員所通常理解的相同含義。儘管與本文描述的方法和 材料相似或等價的方法和材料可用於實踐本發明，下文描述了適合的方法 和材料。本文提及的所有出版物、專利申請、專利和其它參考文獻以引用 的方式全文併入本文。如有衝突，以包括定義的本說明書為準。此外，這 些材料、方法和實施例僅為示例而不意為限制。
本發明的一個或多個實施方式的詳述在下文的附圖和描述中列出。根 據所述描述和附圖以及權利要求書，本發明的其它特徵、目標和優點將變 得明顯。


圖1是長度為33胺基酸殘基的ABC-NP多肽(SEQ ID NO: 4)的示意 圖。SEQ ID NO: 4的前5個胺基酸殘基對應於人類成熟ANP的第11至 15胺基酸殘基，命名為SEQIDNO: 1。 SEQIDNO: 4的第6至27氨基 酸殘基對應於人類成熟CNP的第1至22胺基酸殘基，除了在第15、 16 和17位胺基酸殘基改變為精氨酸、穀氨酸和丙氨酸。SEQIDNO: 4的第 6至27胺基酸殘基命名為SEQ ID NO: 2。 SEQ ID NO: 4的第28至33 胺基酸殘基對應於人類成熟BNP的第27至32胺基酸殘基，命名為SEQ ID NO: 3。
圖2是長度為33胺基酸殘基的ABC-NP1多肽(SEQ ID NO: 6)的示意 圖。SEQ ID NO: 6的前5個胺基酸殘基對應於人類成熟ANP的第11至 15胺基酸殘基，命名為SEQIDNO: 1。 SEQIDNO: 6的第6至27氨基 酸殘基對應於人類成熟CNP的第1至22胺基酸殘基，命名為SEQ ID NO: 7。 SEQIDNO: 6的第28至33胺基酸殘基對應於人類成熟BNP的第27 至32胺基酸殘基，命名為SEQIDNO: 3。
圖3是長度為28胺基酸殘基的BC-NP2多肽(SEQ ID NO: 8)的示意 圖。SEQ ID NO: 8的第1至22胺基酸殘基對應於人類成熟CNP的第1 至22胺基酸殘基，除了在第15、 16和17位的胺基酸殘基改變為精氨酸、 穀氨酸和丙氨酸。SEQ ID NO: 8的第1至22胺基酸殘基命名為SEQ ID NO: 2。 SEQIDNO: 8的第23至28胺基酸殘基對應於人類成熟BNP的 第27至32胺基酸殘基，命名為SEQIDNO: 3。
圖4包含四幅描繪以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25嗎每 kg，以IV彈丸(bolus)施用)處理的犬的尿鈉排洩率的條形圖。基線是施用 前，而所指出的時間是在施用後。
圖5包含四幅描繪以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25呢每
kg，以IV彈丸施用)處理的犬的尿流速的條形圖。基線是施用前，而所指 出的時間是在施用後。
圖6包含四幅描繪以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25嗎每
17kg,以IV彈丸施用)處理的犬的平均動脈血壓水平的條形圖。基線是施用 前，而所指出的時間是在施用後。
圖7包含四幅描繪以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25 每
kg，以IV彈丸施用)處理的犬的血漿加壓素水平的條形圖。基線是施用前， 而所指出的時間是在施用後。
圖8包含四幅描繪以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25嗎每
kg，以IV彈丸施用)處理的犬的腎血流量的條形圖。基線是施用前，而所 指出的時間是在施用後。
圖9是描繪未處理的人類心臟成纖維細胞(cardiac fibroblast)和以 ANP(10—6M)、 BNP(10-6M)、 CNP(10.6M)、 ABC隱NP(10-11 M、 10 或l(T6 M)、或ABC-NP+BNP(各l(T6 M)處理10分鐘的人類心臟成纖維細胞中的 cGMP水平(pmol/mL)的條形圖。
圖10是描繪未處理的人類心臟成纖維細胞和以ANP(1(T6 M)、 BNP(IO.6 M)、 CNP(1(T6 M)、 ABC-NP1(1(T11 M、 l(T8 M或10.6 M)、 ABC-NP1+BNP(各l(T6 M)處理10分鐘的人類心臟成纖維細胞中的cGMP 水平(pmol/mL)的條形圖。
圖11是描繪未處理的人類心臟成纖維細胞和以ANP(l(T6 M)、 BNP(10-6 M)、 CNP(10-6 M)或BC-NP2(10-11 M、 l(T8 M或l(T6 M)處理10分 鐘的人類心臟成纖維細胞中的cGMP水平(pmol/mL)的條形圖。
圖12包含可編碼具有SEQ ID NO: 4所列的胺基酸序列的ABC-NP 多肽的核酸序列(SEQIDNO: 5)。
詳述
本文本涉及促排水和利尿鈉多肽。例如，本文本提供具有促排水和/ 或利尿鈉活性的多肽。在一些例子，本文提供的多肽可具有促排水和利尿 鈉活性，而不具備降低血壓的能力。本文本還提供誘導哺乳動物的促排水 和/或利尿鈉活性的方法和材料。本文提供的多肽可具有任何序列並可具有任何長度。例如，本文^是供
的多肽可包括SEQIDNO: 1、 SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 3所列的序 列。在一些例子，本文提供的多肽可包含一種胺基酸序列，其與(a)SEQID NO: 1所列的序列比對具有4個或更少(例如，3個或更少、2個或更少、 1個或0個)的胺基酸添加、缺失、取代，或其組合，與(b)SEQIDNO: 2 所列的序列比對具有10個或更少(例如，9個或更少、8個或更少、7個或 更少、6個或更少、5個或更少、4個或更少、3個或更少、2個或更少、1 個或0個)的胺基酸添加、缺失、取代，或其組合，和與(c)SEQIDNO: 3 所列的序列比對具有5個或更少(例如，4個或更少、3個或更少、2個或 更少、1個或0個)的胺基酸添加、缺失、取代，或其組合。例如，本文提 供的多肽可包含SEQ ID NO: 1所列的序列，除了 SEQ ID NO: 1的第一 精氨酸殘基或最後一個異亮氨酸殘基被缺失或被不同胺基酸殘基取代。
在一些例子，本文提供的多肽可包含(a)第一胺基酸序列，其為SEQ ID NO: 1所列的或與SEQ ID NO: 1所列的序列比對具有4個或更少(例如， 3個或更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸缺失、取代，或其組合，(b) 第二胺基酸序列，其為SEQ ID NO: 2所列的或與SEQ ID NO: 2所列的 序列比對具有10個或更少(例如，9個或更少、8個或更少、7個或更少、 6個或更少、5個或更少、4個或更少、3個或更少、2個或更少、l個或0 個)的胺基酸添加、取代，或其組合，和(a)第三胺基酸序列，其為SEQ ID NO: 3所列的或與SEQ ID NO: 3所列的序列比對具有5個或更少(例如，4個 或更少、3個或更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸缺失、取代，或 其組合。例如，本文提供的多肽可包括SEQIDNO: 4所列的序列或由SEQ ID NO: 4所列的序列組成。
在一些例子，本文提供的多肽可包括SEQIDNO: 1、 SEQIDNO: 7 和SEQ ID NO: 3所列的序列。在一些例子，本文提供的多肽可包含一種 胺基酸序列，其與(a)SEQIDNO: 1所列的序列比對具有4個或更少(例如， 3個或更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸添加、缺失、取代，或其 組合，與(b) SEQ ID NO: 7所列的序列比對具有10個或更少(例如，9個 或更少、8個或更少、7個或更少、6個或更少、5個或更少、4個或更少、3個或更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸添加、缺失、取代，或其
組合，和與(c) SEQ ID NO: 3所列的序列比對具有5個或更少(例如，4個 或更少、3個或更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸添加、缺失、取 代，或其組合。例如，本文提供的多肽可包含SEQIDNO: l所列的序列， 除了 SEQIDNO: 1的第一精氨酸殘基或最後一個異亮氨酸殘基被缺失或 被不同胺基酸殘基取代。
在一些例子，本文提供的多肽可包含(a)第一胺基酸序列，其為SEQID NO: 1所列的或與SEQ ID NO: 1所列的序列比對具有4個或更少(例如， 3個或更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸缺失、取代，或其組合，(b) 第二胺基酸序列，其為SEQ ID NO: 7所列的或與SEQ ID NO: 7所列的 序列比對具有10個或更少(例如，9個或更少、8個或更少、7個或更少、 6個或更少、5個或更少、4個或更少、3個或更少、2個或更少、1個或0 個)的胺基酸添加、取代，或其組合，和(a)第三胺基酸序列，其為SEQ ID NO: 3所列的或與SEQ ID NO: 3所列的序列比對具有5個或更少(例如，4個 或更少、3個或更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸缺失、取代，或 其組合。例如，本文提供的多肽可包括SEQIDNO: 6所列的序列或由SEQ ID NO: 6所列的序列組成。
在一些例子，本文提供的多肽可包括SEQIDNO: 2和SEQ ID NO: 3所列的序列。在一些例子，本文提供的多肽可包含一種胺基酸序列，其 與(a)SEQIDNO: 2所列的序列比對具有10個或更少(例如，9個或更少、 8個或更少、7個或更少、6個或更少、5個或更少、4個或更少、3個或 更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸添加、缺失、取代，或其組合， 並與(b) SEQIDNO: 3所列的序列比對具有5個或更少(例如，4個或更少、 3個或更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸添加、缺失、取代，或其 組合。例如，本文提供的多肽可包含SEQIDNO: 2所列的序列，除了 SEQ ID NO: 2的第 一甘氨酸殘基被缺失或被不同胺基酸殘基取代。
在一些例子，本文提供的多肽可包含(a)第一胺基酸序列，其為SEQID NO: 2所列的或與SEQIDNO: 2所列的序列比對具有10個或更少(例如， 9個或更少、8個或更少、7個或更少、6個或更少、5個或更少、4個或更少、3個或更少、2個或更少、1個或0個)的胺基酸添加、取代，或其
組合，和(b)第二胺基酸序列，其為SEQIDNO: 3所列的或與SEQIDNO: 3所列的序列比對具有5個或更少(例如，4個或更少、3個或更少、2個或 更少、1個或0個)的胺基酸缺失、取代，或其組合。例如，本文提供的多 肽可包括SEQ ID NO: 8所列的序列或由SEQ ID NO: 8所列的序列組成。
本文提供的多肽可具有任何長度。例如，本文提供的多肽的長度可為 25至45之間(例如，26至44之間、27至43之間、28至42之間、29至 41之間、30至40之間、31至39之間、或32至38之間)的胺基酸殘基。 應理解，長度為25或45胺基酸殘基的多肽是長度為25至45之間的氨基 酸殘基的多肽。
在一些例子中，本文提供的多肽可為大致純的多肽。此處所用於多肽 的術語"大致純的"指該多肽大致沒有天然伴隨的其它多肽、脂質、糖類和 核酸。因此大致純的多肽是從其天然環境移出的任何多肽並是至少60%純 的或為任何化學合成的多肽。大致純的多肽可為至少約60%、 65%、 70%、 75%、 80%、 85%、 90%、 95%或99%純的。通常，大致純的多肽可在非還 原性聚丙烯醯胺凝膠上產生單獨的主條帶。
在一些實施方式，本文提供的多肽可不具備血管活性。可通過確定血 管(如器官槽(organ chamber)中的頸動脈)對多肽的響應度而評估血管活性。
本文提供的多肽可通過表達編碼該多肽的重組核酸或化學合成而獲 得。例如可使用應用編碼本文提供的多肽的表達載體的標準重組技術。然 後所得的多肽可使用例如親合色譜技術和HPLC來純化。純化的程度可由 任何合適方法測量，包括但不限於柱色鐠法、聚丙烯醯胺凝膠電泳或高 效液相色譜法。本文提供的多肽可被設計或工程化以包含允許純化多肽(如 被捕獲到親合基質上)的標籤序列。例如，諸如c-myc、血凝素、多組氨酸 或FlagTM標籤(Kodak)等標籤可用於幫助多肽純化。這種標籤可插入在多肽 內任何位置，包括羧基端或氨基端。可使用的其它融合物(fbsions)包括幫 助檢測多肽的酶，諸如44性磷酸酶。
本文提供的多肽可製備為包含三個區，即包括N-末端(例如，來自ANP多肽的N-末端序歹'J)的第一區、包括成熟利尿鈉多肽如CNP多肽的環結構
的第二區和包括C-末端(例如，來自BNP多肽的C-末端序列)的第三區。 BNP、 DNP、 ANP和CNP的N-末端、環結構和C-末端在別處闡述。見於 例如，美國專利申請第10/561,014號。
可使用本文提供的多肽來治療心血管疾病、充血性心力衰竭、心肌梗 塞、冠狀動脈疾病、腎病、抗缺血性腎病(anti-ischemic renal disease)、抗炎 性腎病(anti-inflammatory renal disease)、抗纖維變性性腎病(anti-fibrotic renal disease),肝病、癌症(例如，腺癌、鱗狀細胞癌、小細胞肺癌、或乳 腺癌)、肺動脈高壓、血管疾病、舒張期功能障礙、心功能不全、腎機能不 全(例如，造影劑引起的腎機能不全或缺血引起的腎機能不全)或其組合。 例如，在降低人類冠狀動脈疾病症狀的嚴重度的情況下，可向患有冠狀動 脈疾病的人類施用ABC-NP多肽。
通過與藥學上可接受的非毒性賦形劑或運載體混合，本文提供的多肽 可配製為藥物組合物。這種組合物可以有效治療例如心臟、肝臟、血管、 腎臟或其它的鈉滯留(sodium retaining)疾患的量施用於需要其的受治療者。 藥物組合物可製備用於腸胃外施用，尤其是以水性生理緩沖溶液中液態溶 液或懸浮液的形式；用於口服施用，尤其是以片劑或膠嚢的形式；用於鼻 內施用，尤其是以粉末、鼻滴劑或氣溶膠的形式。用於其它施用途徑的組 合物可使用標準方法如所期望的製備。
用於腸胃外施用的製劑可包含作為普通賦形劑的無菌水或鹽水、聚烷 撐二醇如聚乙二醇、植物來源的油、氫化萘及類似物。尤其是，生物相容 的、生物可降解的丙交酯聚合物、丙交酯/乙交酯共聚物、或聚氧乙烯 (polyoxethylene)-聚氧丙烯共聚物是用於控制多肽體內釋放的賦形劑的例 子。其它適合的腸胃外遞送系統包括乙烯-乙酸乙烯酯共聚物粒子、滲透泵、 可植入的輸注系統和脂質體。如果期望，用於吸入施用的製劑可包含賦形 劑如乳糖。吸入製劑可為水性溶液，包含例如聚氧乙烯-9-月桂醚、甘膽酸 鹽和脫氧膽酸鹽，或該製劑可為用於以鼻滴劑形式施用的油性溶液。如果 期望，化合物可配製為鼻內施用的凝膠劑。用於腸胃外施用的製劑也可包 括用於含服施用的甘膽酸鹽。
22對於口服施用，片劑或膠嚢可以常規方法與藥學上可接受賦形劑 一起 配製，諸如粘合劑(如預膠凝化的玉米澱粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥丙甲基纖
維素)；填充劑(如乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣)；潤滑劑(如硬脂酸鎂、滑 石或二氧化矽)；崩解劑(如土豆澱粉或澱粉乙醇酸鈉)；或溼潤劑(如十二烷 基^L酸鈉)。可以本領域已知方法包衣片劑。用於口服施用的製品也可配製 為提供化合物的受控釋放。
鼻製品可呈現液態形式或為乾燥產品。霧化的水性懸浮液或溶液可包 括運載體或賦形劑以調節pH和/或張度。
在一些例子，本文提供的多肽可配製為持續釋放劑型。例如，ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2多肽可配製為控釋製劑。在一些例子，塗層、包封物 (envelope)或保護性基質(matrices)可配製為包含一種或多種本文提供的多 肽。可使用這類塗層、包封物和保護性基質以包被留置裝置(indwelling devices),如支架、導管和腹膜透析袋。在一些例子，可將本文提供的多 肽併入聚合物物質、脂質體、微乳劑、微粒、毫微粒或蠟。
本文本還提供了編碼本文提供的一種或多種多肽的分離的核酸。此處 所用的術語"分離的"對於核酸是指不與衍生它的生物體的天然存在的基因 組中緊鄰的兩序列(一個在5'端一個在3'端)緊鄰的天然存在的核酸。例如， 分離的核酸可為但不限於任何長度的重組DNA分子，只要在天然存在的 基因組中正常直接連於該重組DNA分子側翼的核酸序列之一被移除或不 存在。因此，分離的核酸包括但不限於作為獨立於其它序列的單獨分子(如 由PCR或限制性核酸內切酶處理產生的cDNA或基因組DNA片段)存在 的重組DNA,以及併入載體、自主複製質粒、病毒(如逆轉錄病毒、腺病 毒或皰滲病毒)或併入原核生物或真核生物基因組DNA的重組DNA。此 外，分離的核酸可包括作為雜合核酸序列或融合核酸序列 一部分的重組 DNA分子。
此處所用的術語"分離的"對於核酸還包括任何非天然存在核酸，因為 非天然存在核酸序列在自然界不存在，不具有在天然存在基因組中緊鄰的 序列。例如，非天然存在核酸如工程化核酸被認為是分離的核酸。可使用常用分子克隆或化學核酸合成技術製備工程化核酸(如編碼包括SEQ ID NO: 4、 6或8所列的胺基酸序列或由SEQIDNO: 4、 6或8所列的氨基 酸序列組成的多肽的核酸)。分離的非天然存在核酸可獨立於其它序列，或 併入載體、自主複製質粒、病毒(如逆轉錄病毒、腺病毒或皰滲病毒)或並 入原核生物或真核生物的基因組DNA。此外，非天然存在核酸可包括作為 雜合核酸序列或融合核酸序列一部分的核酸分子。在例如cDNA文庫或基 因組文庫或包含基因組DNA限制酶切消化產物(restriction digest)的凝膠片 中存在於數百至數百萬其它核酸中的核酸不被認為是分離的核酸。
此處所用的術語"核酸"是指RNA和DNA兩者，包括mRNA、 cDNA、 基因組DNA、合成的(如化學合成的)DNA和核酸類似物。核酸可為雙鏈 或單鏈的，為單鏈時可為有義鏈或反義鏈。此外核酸可為環狀或線性的。 可在鹼基部分、糖部分或磷酸酯主鏈修飾核酸類似物以改進例如核酸的穩 定性、雜交或溶解度。在鹼基部分的修飾包括脫氧尿苷修飾脫氧胸苷，5-曱基-2'-脫氧胞苷和5-溴-2'-脫氧胞苷修飾脫氧胞苷。糖部分的修飾可包括 修飾核糖糖的2'羥基以形成2'-0-曱基糖或2'-0-烯丙基糖。脫氧核糖磷酸 酯主鏈可被修飾以產生嗎啉代核酸，其中每個鹼基部分連接至6-元嗎啉代 環，或產生肽核酸，其中脫氧磷酸酯主鏈被假肽主鏈代替並保留四種鹼基。 見於例^口 Summerton禾口 WellerJw/^em^iVwc/e/c Jc/(iZ>MgZ)ev., 7: 187-195 (1997);和Hyrup等.祝oorg朋.C/ e肌，4: 5- 23 (1996)。此外，脫氧磷 酸酯主鏈可被例如硫代磷酸酯或二硫代磷酸酯主鏈、亞磷醯胺 (phosphoroamidite)或烷基石粦酸三酯主鏈K替。
本文提供的核酸可包括SEQIDNO: 5所列的序列或由SEQ ID NO: 5 所列的序列組成。
通常，本文提供的分離的核酸長度為至少10核苷酸(如長度為10、 15、 20、 25、 30、 35、 40、 50、 75、 100、 200、 300、 350、 400、或更多核苷 酸)。小於全長的核酸分子可為有用的，例如為診斷目的作為引物或探針。 可通過標準技術製備分離的核酸分子，包括但不限於常用分子克隆和化學 核酸合成技術。例如可使用聚合酶鏈式反應(PCR)技術。PCR是指其中酶 促擴增靶核酸的方案或技術。從目標區域各端的序列信息或超出的序列信息通常用於設計寡核苷酸引物，該引物序列與待擴增的模板相反鏈相同。
PCR可用於從DNA和RNA擴增特定序列，包括總基因組DNA或總細胞 RNA的序列。引物長度通常為15至50核苷酸，但長度可從10核苷酸至 數百核苦酸變化。例如，引物長度可為12、 15、 16、 17、 18、 19、 20、 21、 22、 23、 24、 25、 26、 27、 28、 29、 30、 35、 40或45核苷酸。可以常規 方法從限制酶切消化產物純化引物或可化學合成引物。為了擴增的最大效 率，引物通常為單鏈，但引物可為雙鏈的。雙鏈引物在用於擴增前首先變 性(如用熱處理)以分離各鏈。普通PCR技術描述於例如PCR Primer: A Laboratory Ma歸l(PCR引物實驗室手冊)，Dieffenbach和Dveksler編輯， Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1995 。當使用RNA為模板來源時，可 使用逆轉錄酶來合成互補DNA(cDNA)鏈。如別處描述的，連接酶鏈式反 應、鏈置換擴增、自動維持序列擴增(self-sustained sequence replication)或 基於核酸序列的擴增也可用於獲得分離的核酸(Lewis， Gewe"c ￡>igf>zeen'ng We體，12(9): 1 (1992); Guatelli等，屍rac. AW/.爿caof. OS^， 87: 1874-1878 (1990);和Weiss, S"'e"ce， 254: 1292(1991))。
也可化學合成分離的核酸，作為單獨核酸分子(如應用亞磷醯胺技術以 3'至5'方向使用自動DNA合成)或作為一系列寡核苷酸。例如， 一對或多 對長寡核苷酸(如>100核苷酸)可合成為包含期望序列，每一對包含短的互 補性區段(如約15核苷酸)，如此當寡核苷酸對退火時形成雙鏈體。DNA 聚合酶用於延伸寡核苷酸，形成每寡核苷酸對的單、雙鏈核酸分子，隨後 其可被連接入載體。
也可由誘變獲得分離的核酸。例如，編碼具有SEQIDNO: 1、 2、 3、 4、 6、 7或8所列序列的多肽的核酸序列可使用標準技術突變，例如，由 PCR的寡核苦酸定向誘變和/或位點定向誘變。見於Short Protocols in Molecular Biology (分子生物學簡要方案)，第8章，Green Publishing Associates和John Wiley & Sons, Ausubel等編輯，1992。這種突變包括添 加、缺失、取代和其組合。
本文本還提供了包含本文提供的核酸的載體。此處所用的"載體"是複製子，如質粒、噬菌體或粘粒，另一DNA區段可插入其中以促使所插入 區段的複製。載體可為表達載體。"表達載體"為包括一個或多個表達控制
序列的載體，"表達控制序列"是控制和調節另一 DNA序列轉錄和/或翻譯 的DNA序列。
在本文提供的表達載體中，核酸可可操作地連接於一個或多個表達控 制序列。此處所用的"可操作地連接"表示併入遺傳構建體從而表達控制序 列有效地控制目標編碼序列的表達。表達控制序列的例子包括啟動子、增 強子和轉錄終止區。啟動子是由DNA分子區域組成的表達控制序列，通 常在轉錄起始點上遊的100核苷酸內(通常靠近RNA聚合酶II的起始位 點)。為了使編碼序列處於啟動子控制下，將多肽的翻譯閱讀框的翻譯起始 位點置於啟動子下遊1至約50核苷酸之間可是必需的。增強子提供時間、 位置和水平方面的表達特異性。不同於啟動子，增強子當位於與轉錄位點 不同距離時也起作用。增強子也可位於轉錄起始位點下遊。當RNA聚合 酶能轉錄編碼序列為mRNA時，編碼序列"可操作地連接"細胞中的表達控 制序列並"處於其控制下"，隨後可翻譯mRNA為編碼序列編碼的多肽。
合適的表達載體包括但不限於質粒和病毒載體，其衍生自例如細菌噬 菌體(bacteriophage)、杆狀病毒、菸草花葉病毒、皰滲病毒、細胞巨化病毒、 逆轉錄病毒、痘病毒、腺病毒和腺相關病毒。多種載體和表達系統可從如 下公司商業獲得Novagen (Madison， WI)、 Clonetech (Palo Alto, CA)、 Stratagene (La Jolla, CA)和Invitrogen/Life Technologies (Carlsbad, CA)。
表達載體可包括設計為促進隨後操作(如純化或定位)所表達的核酸序 列的標籤序列。如綠色螢光蛋白(GFP)、穀胱甘肽S-轉移酶(GST)、多組氨 酸、c-myc、血凝素或FlagTM標籤(Kodak, NewHaven，CT)序列等標籤序列 通常表達為與編碼多肽的融合體。這種標籤可插入在多肽的任何地方，包 括羧基端或氨基端。
本文本還提供了包含本文提供的核酸分子和/或核酸載體的宿主細胞。 術語"宿主細胞"意為包括可引入核酸分子或載體的原核細胞和真核細胞。 任何方法可用於引入核酸到細胞。例如，磷酸鈣沉澱、電穿孔、熱激、脂 質轉染法、微注射和病毒介導的核酸轉移可用於引入核酸到細胞。此外，棵DNA可如別處描述的直接體內遞送到細胞(美國專利第5,580,859和 5,589,466號)。
參彭i
本文本提供了檢測本文提供的多肽的方法和材料。這種方法和材料可 用於監控接受多肽作為治療劑的哺乳動物的多肽水平。例如，可使用一個 或多個抗體免疫地檢測本文提供的多肽(如ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2 多肽)。此處所用的術語"抗體"包括能結合於本文提供的多肽的表位決定子 的完整分子和其片段。術語"表位"是指抗原上結合抗體互補位的抗原決定 子。表位決定子通常由化學活性的表面分子組合(grouping)組成，如胺基酸 或糖側鏈，且通常具有特定三維結構特徵以及特定電荷特徵。表位通常具 有至少5個連續胺基酸(連續表位)，或可選地為限定特定結構的一組非連 續胺基酸(如構象表位)。術語"抗體"包括多克隆抗體、單克隆抗體、人源化 抗體或嵌合抗體、單鏈Fv抗體片段、Fab片段和F(ab》片段。多克隆抗體 是包含在免疫動物血清中抗體分子的異源群體。單克隆抗體是針對抗原的 特定表位的抗體的同類群體。
對本文提供的多肽(如ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2)具有特異結合 親合性的抗體片段可由已知技術產生。例如，F(ab')2片段可由胃蛋白酶消 化抗體分子而產生；Fab片段可由還原F(ab')2片段的二硫鍵而產生。或者 可構建Fab表達文庫。見於例如，Huse等，>SWe"ce, 246: 1275 (1989)。產 生抗體或其片段後，由標準免疫檢測方法測試其對本文提供的多肽的識 別，包括ELISA技術、放射免疫測定和蛋白質印跡法。見於Short Protocols in Molecular Biology(分子生物學簡要方案)，第11章，Green Publishing Associates和John Wiley & Sons, Ausubel, F.M.等編輯，1992。
在免疫測定中，對本文提供的多肽具有特異結合親合性的抗體或結合 這種抗體的第二抗體可直接或間接地被標記。合適的標記包括但不限於放 射性核素(如125I、 131I、 35S、 3H、 32P、 "P或I4C)、螢光部分(如螢光素、FITC、 PerCP、若丹明或PE)、發光部分(如Quantum Dot Corporation, Palo Alto, CA 供應的QdotTM毫微粒)、吸收限定波長的光的化合物、或酶(如鹼性磷酸酶
或辣根過氧化物酶)。通過與生物素軛合可間接標記抗體，隨後用標記有上
27述分子的抗生物素蛋白或鏈黴親和素檢測。檢測或定量標記的方法取決於 標記的性質並是本領域已知的。檢測器的例子包括但不限於X射線膠片、 放射性計數器、閃爍計數器、分光光度計、比色計、螢光計、發光計和光 密度計。本領域技術人員熟悉的這些方法的組合(包括"多層"測定)可用於增 強測定的靈敏度。
用於檢測本文提供的多肽的免疫測定可以多種已知形式(format)進行， 包括三明治測定、竟爭測定(竟爭性RIA)或橋免疫測定(bridge immunoassay^見於例如，美國專利第5,296,347; 4,233,402; 4,098,876和 4,034,074號。檢測本文提供的多肽的方法通常包括將生物樣品與結合本文 提供的多肽的抗體接觸，並檢測多肽與抗體的結合。例如，對本文提供的 多肽具有特異結合親合性的抗體可由本領域已知多種方法的任一種固定 於固相基質上，隨後接觸生物樣品。多肽對固相基質上抗體的結合可通過 利用表面等離子體共振現象而檢測，該現象導致結合後表面等離子體共振 強度變化，這可被合適儀器如Biacore裝置(Biacore International AB， Rapsgatan， Sweden)定性或定量地^險測。或者，抗體一皮如上所述i也標i己和鬥企 測。使用已知量的本文提供的多肽可產生標準曲線以幫助定量多肽水平。
在其它實施方式，其中捕獲抗體固定在固相基質上的"三明治"測定用 於檢測本文提供的多肽的存在、不存在或水平。固相基質可與生物樣品接 觸以使樣品中任何目標多肽可結合固定抗體。結合於抗體的多肽的存在、 不存在或水平可使用對該多肽具有特異結合親合性的"檢測"抗體確定。在 一些實施方式，可使用對BNP和本文提供的多肽具有結合親合性的捕獲抗
檢測抗體。應理解，在三明治測定中，捕獲抗體不應與檢測抗體結合相同 表位(或在多克隆抗體的情形是一定範圍的表位)。因此，如果單克隆抗體 用作捕獲抗體，則檢測抗體可為另一單克隆抗體，其結合的表位與捕獲單 克隆抗體結合的表位在物理上完全分離或僅與它部分重疊，或4企測抗體可 為多克隆抗體，其結合的表位不同於捕獲單克隆抗體結合的表位或是捕獲 單克隆抗體結合的表位之外的表位。如果多克隆抗體用作捕獲抗體，則檢 測抗體可為單克隆抗體，其結合的表位與捕獲多克隆抗體結合的任一表位在物理上完全分離或與它部分重疊，或檢測抗體可為多克隆抗體，其結合 的表位不同於捕獲多克隆抗體結合的表位或是捕獲多克隆抗體結合的表
位之外的表位。可以三明治ELISA測定、三明治蛋白質印跡測定或三明治 免疫^t性;險測測定進行三明治測定。
抗體(如捕獲抗體)可結合的合適的固相基質包括但不限於，微量滴定 板、管、膜如尼龍或硝酸纖維素膜、和珠或粒子(如瓊脂糖、纖維素、玻璃、 聚苯乙烯、聚丙烯醯胺、磁性或能磁化的珠或粒子)。當使用自動免疫測定 系統時，^磁性或能^t化的粒子尤其有用。
對本文提供的多肽具有特異結合親合性的抗體可由標準方法產生。通 常，多肽可如上所述地重組產生，或可由生物樣品(如異源表達系統)純化， 並用於免疫宿主動物，包括兔、雞、小鼠、豚鼠或大鼠。例如，具有SEQ ID NO: 4、 6或8所列的胺基酸序列的多肽(或其長度為至少6胺基酸的片 段)可用於免疫動物。可用於增加免疫響應的各種佐劑取決於宿主物種，並 包括弗氏佐劑(完全和不完全)、礦物膠體(mineral gel)如氫氧化鋁、表面活 性物質如溶血卵磷脂、複合多元醇(pluronic polyol)、聚陰離子、肽類、油 乳膠、鑰孔戚血藍素和二硝基苯酚。可使用本文提供的多肽和標準雜交瘤 技術製備單克隆抗體。尤其是，可由任何提供製備抗體分子的技術獲得單 克隆抗體，諸如描述於Kohler等，A^/w ，256: 495 (1975)的持續培養的細 胞系、人類B-細胞雜交瘤技術(Kosbor等，/;wmmo/ogyr(^^y,4: 72(1983); Cole等，屍n c. iVa". Jcflc/. OS^， 80: 2026 (1983))和EBV-雜交瘤技術 (Cole等，"Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy(單克隆抗體和癌症治 療)，"Alan R. Liss, Inc., pp. 77-96 (1983))。這種抗體可為任何免疫球蛋白類， 包括IgG、 IgM、 IgE、 IgA、 IgD及其任何亞類。可在體外和體內培養產生 單克隆抗體的雜交瘤。
用於檢測本文提供的多肽的可選技術包括質i普-分光光度技術 (mass-spectrophotometric technique)，如電噴射電離(ESI)和基質輔助雷射解 吸電離(MALDI)。見於例如，Gevaert等，￡7e"rap/^m^， 22(9): 1645-51 (2001); Chaurand等，JJw. &c.Mfl^5^"ram.， 10(2): 91-103 (1999)。用 於這種應用的質"i普4義可乂人Applied Biosystems (Foster City, CA); BrukerDaltronics (Billerica, MA)和Amersham Pharmacia (Sunnyvale, CA)獲得。
本發明將由以下實施例進一步闡述，這不限制由權利要求書所描述的 本發明範圍。
實施例
實施例1 -ABC-NP、 ABC-NP1和BC-NP2多肽的生物學效應
設計併合成具有圖1-3所列的序列的多肽。圖1所列的多肽稱為 ABC-NP多肽；圖2所列的多肽稱為ABC-NP1多肽；圖3所列的多肽稱 為BC-NP2多肽。對正常犬檢測靜脈內輸注ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2 的生物學效應。簡要地說，對5隻正常犬輸入以IV彈丸施用的25嗎每 kg的ABC-NP、 ABC-NP 1或BC-NP2。尿鈉排洩、尿流量、平均動脈血壓、 血漿加壓素水平和腎血流量如別處所述的測量(Chen等，/ i^，Zo/. Aeg"/. /"tegr. Com屍.屍/^wW., 288: R1093-R1097 (2005)和Haber等，,C//w. ^W,."o/.臉威,29: 1349-1355 (2005))。將結果與IV彈丸施用25嗎每 kg BNP治療的犬獲得的結果進行比較。
系統施用ABC-NP多肽導致了促排水和利尿鈉效應(圖4和5)。系統 施用ABC-NP多肽對平均動脈血壓無影響(圖6)。系統施用ABC-NP多肽 不提高血漿加壓素水平(圖7)。施用BNP後血漿加壓素水平提高(圖7)。 ABC-NP和BNP兩者導致心充盈壓相似的降低。
這些結果證實與BNP相比，ABC-NP多肽具有不同的腎效應，不具備 影響系統血壓的能力。
ABC-NPl處理導致平均動脈血壓降低和腎血流量增加(圖6和8)。以 ABC-NPl處理的犬未觀察到延長的促排水(aquretic)和利尿腎作用，以 ABC-NP處理的犬則觀察到延長的促排水和利尿腎作用(圖4和5)。以 ABC-NPl處理還指出了血漿加壓素水平增加的強趨勢(圖7)。這些結果證 實CNP環中的REA胺基酸序列(圖l)導致以ABC-NP觀察到血管舒張作 用的缺乏。
以BC-NP2處理不導致平均動脈血壓降低或腎血流量增加(圖6和8)。因此，如同ABC-NP, BC-NP2不具備血管舒張效應。與ABC-NP相比， BC-NP2僅具有約50%的腎效應(圖4和5)。這些結果證實ABC-NP的N-末端存在的ANP的5個胺基酸殘基牽涉在ABC-NP的延長的促排水和利 尿作用中。
在體外檢測ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2對心臟成纖維細胞的生物 學效應。簡要地說，將80-90%匯合的心臟成纖維細胞孵育於含有20 mmol/L N-[2-羥乙基]哌喚-N'[2-乙磺酸]、0.1%牛血清白蛋白和0.5 mmol/L 3-異丁基 -l-曱基黃嘌呤(Sigma)的hanks平衡鹽溶液(InVitrogen)中。處理的細胞接受 ANP (10-6 M)、 BNP(1(T6M)、 CNP(10-6M)、 ABC-NP (1011 M、 10、或 l(T6 M)、 ABC-NP1 (l(T11 M、 l(T8 M或l(T6 M)或BC-NP2 (10-11 M、 l(r8M 或10-6 M)達10分鐘。在6% TCA中裂解細胞並超聲處理10分鐘。在4倍 體積的醚中醚萃取樣品四次，乾燥，並在300 )iLcGMP測定緩沖液中重構。 使用竟爭性RIA cGMP試劑盒(Perkin-Elmer, Boston, MA)測定樣品。簡要地 說，將樣品與標準品用100 (iL抗-人類cGMP多克隆抗體和I'"-抗原孵育 18小時。將cGMP測定緩衝液加入樣品，並以2500 rpm離心20分鐘。吸 出遊離的部分；對結合的部分計數；並確定濃度。根據稀釋因子校正樣品， 將值表示為pmole/mL。與ANP、 BNP或CNP沒有交叉反應性，與cAMP、 GMP、 GDP、 ATP和GTP有0.001o/o的反應性。
以ABC-NP 1處理活化人類心臟成纖維細胞中的cGMP,而以ABC-NP 和BC-NP2處理未活化(圖9-11)。這些結果證實ABC-NP1對人類心臟成纖 維細胞有生物學效應，而ABC-NP和BC-NP2兩者對人類心臟成纖維細胞 均不表現為具有任何生物學效應。因此，ABC-NP1可具有誘導抗纖維變性 作用的能力，ABC-NP或ABC-NP2則可能不存在這樣的能力。
實施例2-使用動物模型，ABC-NP、 ABC-NPl和
BC-NP2多肽的生物學效應
進一步在兩個大型動物鈉滯留模型中評價ABC-NP、 ABC-NP1或 BC-NP2輸注的效應CHF的起搏的(paced)犬模型和模擬肝硬化和腎變病的鈉滯留的犬模型。第一個模型是CHF的快速起搏模型，如別處所述的
(Chen等，Gycw/Wo", 100: 2443-2448(1999))。簡要地說，將犬以240bpm 起搏10天以產生嚴重CHF的模型。將24隻犬起搏，6隻接受ABC-NP多 肽，6隻接受ABC-NP1多肽，6隻接受BC-NP2多肽，6隻接受呋塞米(lasix) (作為利尿劑對照)。在輸注時進行急性血液動力學研究，比較各組之間和 各犬之間在基線和輸注時的值。第二個模型是具有鈉滯留和腹水而不同時 發生心充盈壓增加的TIVCC模型，如別處所述(Wei等，/屍/^w'o/., 273: R838-844 (1997))。在每隻鈉滯留犬模型，使用靜脈內施用增加劑量直到 100 pmol.kg/分鐘測試ABC-NP、 ABC-NP1和BC-NP2多肽。
實施例3 -治療處於左心室重塑(remodeling)風險的患者
IV輸注ABC-NP1多肽來治療處於左心室重塑風險的患者(例如，心肌 梗塞患者)。在輸注之前獲取生命體徵並進行實驗室一企測以測量神經激素和 腎功能。進行MRI以測量左心室大小和功能。以0.001 pg/kg/分鐘和1 (ig/kg/ 分鐘之間的劑量開始靜脈內輸注ABC-NP1多肽。輸注期間每兩小時評價 生命體徵。輸注可持續72小時。在72小時內，在輸注結束前取血以測量 神經激素和腎功能。1個月和6個月後患者返回，重複MRI以評價左心室 大小和功能。
實施例4-治療心腎疾患
預期地以IV輸注ABC-NP或BC-NP多肽治療腎功能惡化發展、在急 性失代償的心力衰竭背景中具有利尿劑抗性的患者。在輸注之前獲取生命 體徵並進行實驗室檢測以測量電解質、血清肌肝、胱抑素(cystatin)和BNP 多肽水平。測量基線排尿量並評價尿電解質。開始靜脈內輸注ABC-NP或 BC-NP多肽。輸注持續12至72小時，輸注期間每2小時評價生命體徵和 排尿量。輸注期間每天評價藥物水平(例如，ABC-NP或BC-NP多肽水平)、 BNP多肽水平、血清肌酐、胱抑素、血漿電解質和尿電解質。其它實施方式
應理解，儘管本發明已結合其詳述進行了闡述，但前述的描述意為闡 釋而非限制本發明範圍，本發明範圍由所附權利要求書的範圍限定。其它 方面、優點和修飾都在以下權利要求書的範圍內。
權利要求
1.一種長度少於45胺基酸殘基的多肽，其中所述多肽以從氨基末端至羧基末端的順序包括(a)SEQ ID NO1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO1所列的序列，(b)SEQ ID NO2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO2所列的序列，和(c)SEQ ID NO3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO3所列的序列。
2. 根據權利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括利尿鈉活性。
3. 根據權利要求1所述的多肽，其中所述多肽不具備血管舒張活性。
4. 根據權利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: l所列的序列。
5. 根據權利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 2所列的序列。
6. 根據權利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 3所列的序列。
7. 根據權利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: l所 列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。
8. 根據權利要求1所述的多肽，其中所述多肽是大致純的多肽。
9. 一種長度少於45胺基酸殘基的多肽，其中所述多肽以從氨基末端 至羧基末端的順序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 1 所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2 所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3 所列的序列。
10. 根據權利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括利尿鈉活性。
11. 根據權利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括SEQ ID NO: 1 所列的序列。
12. 根據權利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括SEQ ID NO: 7所列的序列。
13. 根據權利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括SEQ ID NO: 3所列的序列。
14. 根據權利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括SEQ ID NO: 1 所列的序列、SEQIDNO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。
15. 根據權利要求9所述的多肽，其中所述多肽是大致純的多肽。
16. —種長度少於45胺基酸殘基的多肽，其中所述多肽以從氨基末端 至羧基末端的順序包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多於8個錯配的SEQ ID NO: 2 所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多於3個錯配的SEQ ID NO: 3 所列的序列。
17. 根據權利要求16所述的多肽，其中所述多肽包括利尿鈉活性。
18.根據權利要求16所述的多肽，其中所述多肽不具備血管舒張活性。
19. 根據權利要求16所述的多肽，其中所述多肽不具有SEQIDNO: 1所列的序列。
20. 根據權利要求16所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 2所列的序列。
21. 根據權利要求16所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 3所列的序列。
22. 根據權利要求16所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 2 所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。
23. 根據權利要求16所述的多肽，其中所述多肽是大致純的多肽。
24. —種分離的核酸，其編碼根據權利要求l、 9或16所述的多肽。
25. —種載體，其包括編碼根據權利要求1、 9或16所述的多肽的核酸。
26. —種宿主細胞，其包括編碼根據權利要求1、 9或16所述的多肽的核酸。
27. 根據權利要求26所述的宿主細胞，其中所述宿主細胞是真核宿主細胞。
28. —種藥物組合物，其包括藥學上可接受的運載體和根據權利要求 1、 9或16所述的多肽。
29. —種增加哺乳動物的促排水和利尿鈉活性而不降低血壓的方法，
30. —種治療患有心血管疾患或腎疾患的哺乳動物的方法，其中所述 方法包括向所述哺乳動物施用根據權利要求1、 9或16所述的多肽。
31. 根據權利要求30所述的方法，其中所述哺乳動物患有心血管疾病。
32. 根據權利要求30所述的方法，其中所述哺乳動物患有充血性心力衰竭。
33. 根據權利要求30所述的方法，其中所述哺乳動物患有心肌梗塞、 冠心病、動脈疾病、腎機能不全、癌症或鈉和水滯留狀態。
34. —種支架，其包括包含根據權利要求1、 9或16所述的多肽的塗層。
35. —種透析袋，其包括包含根據權利要求1、 9或16所述的多肽的塗層。
36. —種微粒或毫微粒，其包括根據權利要求l、 9或16所述的多肽。
全文摘要
本發明提供了促排水和利尿鈉多肽。例如，本發明提供了具有促排水和/或利尿鈉活性的多肽。在一些例子，本發明提供的多肽可具有促排水和利尿鈉活性而不具備降低血壓的能力。本發明還提供了在哺乳動物中誘導促排水和/或利尿鈉活性的方法和材料。
文檔編號C07K14/00GK101600731SQ200780040226
公開日2009年12月9日 申請日期2007年9月7日 優先權日2006年9月8日
發明者J·C·小伯內特, 陳鴻豪 申請人:梅約醫學教育與研究基金會