抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法
2023-06-04 04:41:01 2
抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法
【專利摘要】本發明涉及一種在含有硝酸根或硝酸鹽以及硝酸鹽還原酶的保健品、食品或藥材中抑制亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法，包括使用保健品、食品或藥材可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑抑制所述保健品、食品或藥材中硝酸鹽還原酶的活性。尤其涉及一種抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法，包括使用燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑抑制燕窩中硝酸鹽還原酶的活性。具體而言，所述方法包括向新鮮採集的燕窩加入抑制有效量的燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑或在燕窩生產過程中加入抑制有效量的燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑。硝酸鹽還原酶抑制劑可選自鎢酸鹽。本發明的方法能夠有效抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽的產生，降低燕窩的食用風險。
【專利說明】抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法
【技術領域】
[0001]本發明一般地涉及一種使用硝酸鹽還原酶抑制劑在含有硝酸根或硝酸鹽以及硝酸鹽還原酶的保健品、食品或藥材中抑制亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法，特別地涉及抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法，以及硝酸鹽還原酶抑制劑在抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的用途。
【背景技術】
[0002]亞硝酸鹽屬於高度毒性類化學品，有許多相關的研究報告說明其病理症狀。其中，嬰兒由於消化系統及正鐵血紅蛋白還原酶系統尚未成熟，較易患上亞硝酸鹽引起的正鐵血紅蛋白血症，後果嚴重則可以致命。另外，亞硝酸鹽和硝酸鹽可與胃酸作用產生化合物亞硝胺。亞硝胺是高度致癌物，有報告指出亞硝胺與直腸癌、胃癌及胰臟癌均有直接關係。亞硝酸鹽引致中毒的症狀還包括慢性阻塞性肺病、DNA突變與在孕婦中的兒童產生腦瘤。因此，在保健品、食品和藥材中亞硝酸鹽含量必須嚴格控制。
[0003]燕窩是一種常見的保健品，其是由雨燕科(Apodidae)金絲燕屬(Collocalia)的多種鳥類分泌出的唾液或唾液與其絨羽混合凝結於懸崖峭壁上而築成的巢窩。主產地為印度尼西亞、馬來西亞、越南等。據《本草拾遺》記載:「燕窩甘淡平，大養肺陰，化痰止咳，補而能清，為調理虛勞之聖藥，一切病之由於肺虛，而不能肅清下行者，用此皆可治之。」中醫認為燕窩:「養陰潤燥、益氣補中、治虛損、咳痰喘、咯血、久痢，適宜於體質虛弱，營養不良，久痢久瘧，痰多咳嗽，老年慢性支氣管炎、支氣管擴張、肺氣腫、肺結核、咯血、吐血和胃痛病人食用。」現代醫學發現，燕窩可促進免疫功能，有延緩人體衰老，延年益壽的功效。
[0004]傳統上評價燕窩的貴賤與好壞之分在於六大指標:產地、發頭、完整程度、清潔品質以及口感。產地:以越南會安生產的燕窩較為質優，商品名叫「會安燕」。在山洞和峭壁上採摘到的燕窩稱為「洞燕」。採摘燕洞不僅人身極其危險，大自然也被洗劫一空。為了保護自然，燕屋應運而生。燕屋築巢於人工建築房屋內的木板及牆壁上，以實物或其他方法吸引燕子聚居，由燕屋採收到的燕窩叫「屋燕」。現在商品多為「屋燕」，其因清潔爽滑、潔白細膩，在商品上也稱為「白燕」。另有採收周期較長，燕窩帶金黃色的「黃燕」，主產地為印度尼西亞和馬來西亞。「紅燕」分為「洞紅燕」和「屋紅燕」兩種。洞紅燕可能因外界環境影響，外觀猶如巖石壁滲出紅色液體滲潤而導致巢色從粘貼於巖石壁的一邊開始改變成血紅色。屋紅燕為一位赴德留學的印度尼西亞醫生於九十年代所發明。生成原因不明，因與燕洞環境極為相似，故可能同受外界環境影響。色澤較洞紅燕均勻，顏色也比洞紅燕為深。由於紅燕產量少，商品價格也比較貴。洞紅燕主產於泰國，而屋紅燕則主產於印度尼西亞。
[0005]二零一一年八月淅江省工商局公布燕窩中含有大量的亞硝酸根，平均達4，400ppm，最高更達ll，000ppm，其中以紅燕含量最高。隨後國家衛生部門立即禁止從馬來西亞進口紅燕，其他相關的燕窩產業亦受到了經濟上嚴重的打擊。這些事件引來境內境外市民對燕窩食用安全的高度關注。
[0006]實際上，亞硝酸鹽天然存在於周圍環境，並可於動物和人體內源產生，大部分蔬菜中亦含有亞硝酸鹽。另外，亞硝酸鈉可作為食品添加劑，主要用於醃臘肉類製品等。主要是由於它具有抗菌作用，特別是能夠預防可致命的肉毒梭狀芽孢桿菌汙染，但用量不可超過法定標準。聯合國糧食及農業組織/世界衛生組織聯合食品添加劑專家委員會(下稱「專家委員會」)仍未制定亞硝酸鹽的急性參考劑量。專家委員會將亞硝酸鹽的每日可攝入量定為每公斤體重O至0.07毫克(以亞硝酸鹽離子計算)。而國家食品法典委員會尚未就亞硝酸鹽作為食物汙染物制定任何食物安全標準。根據國家食品法典委員會和香港法例就亞硝酸鹽用作多種奶酪製品和醃製肉類製品的食物添加劑制定標準。根據GB2760-2011《食品添加劑使用標準》規定，只有臘腸、臘肉、西式火腿腸、罐頭等幾類食品可以添加亞硝酸鹽，其他所有食物都不允許添加。其中醃臘肉製品:亞硝酸鹽標準上限為150ppm。而香港《食物內防腐劑規例》(第132BD章)已規定了指定食物的亞硝酸鹽最高準許含量。香港法定標準:非經加熱處理的加工肉類製品，亞硝酸鹽標準上限為200ppm ;經加熱處理的醃製肉類，亞硝酸鹽標準上限為125ppm。然而，《食物內防腐劑規例》第3(10)條規定，該規例不適用於天然含有任何食物添加劑的食品。總之，燕窩中亞硝酸鹽含量在國際間並沒有一致的參考和管理標準。
[0007]對東南亞國家而言,燕窩出口成了國家主要收入來源之一。然而，以目前的燕窩處理技術，燕窩出口國也只能夠把燕窩中的亞硝酸根及亞硝酸鹽控制在30ppm或以下。中國為燕窩最大的入口國，同時香港亦為全球最大的燕窩出入口市場，為了保障國民的健康以及國家的聲譽，需要提高對燕窩食用安全性的要求，把燕窩中亞硝酸根及亞硝酸鹽含量的上限降到低於可檢測水平。這個角色上對立與矛盾的問題是目前燕窩處理技術所無法解決的。近年來，一些有關無亞硝酸根及亞硝酸鹽的燕窩生產方法主要通過重複不斷浸洗燕窩後再重新整型。然而，燕窩中的營養成分在重複浸洗及重新整型時所流失的百分比以及在處理後亞硝酸根及亞硝酸鹽在燕窩中殘留的含量均得不到數據的支持。
[0008]因此，在本領域需要一種既能夠有效地控制燕窩中的亞硝酸根及亞硝酸鹽，又可以保持燕窩營養成分的方法。
【發明內容】
[0009]在一個實施方案中，本發明涉及一種在含有硝酸根或硝酸鹽以及硝酸鹽還原酶的保健品、食品或藥材中抑制亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法，包括使用保健品、食品或藥材可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑抑制所述保健品、食品或藥材中硝酸鹽還原酶的活性。
[0010]在一方面，本發明涉及一種抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法，包括使用燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑抑制燕窩中硝酸鹽還原酶的活性。
[0011]在進一步的方面，本發明的方法包括向新鮮採集的燕窩加入抑制有效量的燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑或在燕窩生產過程中加入抑制有效量的燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑。
[0012]在進一步的方面，本發明的方法進一步包括去除所述硝酸鹽還原酶抑制劑。
[0013]在進一步的方面，硝酸鹽還原酶抑制劑的抑制有效量可以為大約IOOnM-1 μ M/g燕窩。
[0014]在進一步的方面，所述硝酸鹽還原酶抑制劑可以為可產生游離鎢酸根的鎢酸鹽，例如鶴酸鈉或鶴酸鉀。[0015]在另一個實施方案中，本發明涉及一種燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑在抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生中的用途。
[0016]在另一個實施方案中，本發明涉及一種燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑在製備用於抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的組合物中的用途。
[0017]在一個方面中，本發明所使用的硝酸鹽還原酶抑制劑可以為可產生游離鎢酸根的鎢酸鹽，例如鎢酸鈉或鎢酸鉀。
[0018]在另一個實施方案中，本發明涉及一種經燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑處理的燕窩，其中亞硝酸根及亞硝酸鹽的含量被抑制。在一個方面中，硝酸鹽還原酶抑制劑為可產生游離鎢酸根的鎢酸鹽，例如鎢酸鈉或鎢酸鉀。
[0019]在另一個實施方案中，本發明涉及一種用於抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的組合物，其包含燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑。在一個方面中，硝酸鹽還原酶抑制劑為可產生游離鎢酸根的鎢酸鹽，例如鎢酸鈉或鎢酸鉀。
[0020]在另一個實施方案中，本發明提供根據本發明的方法獲得的燕窩。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0021]以下將結合附圖，對本發明進行進一步的詳細說明。本領域技術人員將理解，附圖以及以下詳細描述旨在僅為示例性的，不應以任何方式解釋為對本發明範圍的限制。
[0022]圖1表示市售燕窩及天然產地中採收燕窩中的硝酸根含量(採用t檢驗，*號表示具有統計學顯著性，***表示99.99%的確定性)。
[0023]圖2顯示不同燕窩生產環境(「燕洞」及「燕屋」)中硝酸根含量與水樣本距鳥糞距尚的關係(米用t檢驗，*號表不具有統計學顯者性，***表不99.99%的確定性)。
[0024]圖3是分別從洞紅燕和屋紅燕中分離的蛋白質的電泳圖譜，其中43kDa處條帶表示分離的硝酸鹽還原酶。
[0025]圖4是圖3中43kDa處的蛋白質經胰蛋白酶解後，蛋白肽提取物的飛行時間質譜。
[0026]圖5顯示不同種類燕窩中的硝酸根或硝酸鹽還原作用以及鎢酸鈉對亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的抑制作用。
【具體實施方式】
[0027]除非本文中另外定義，本文所使用的所有技術和科學術語具有本領域普通技術人員通常所理解的含義。儘管與本文所描述的方法和材料相似或等價的那些方法和材料也可用於本發明的實踐中，但是優選的方法和材料還是在本文中加以描述。此外，如本文所使用，數值範圍包括定義該範圍的數字。本發明的小標題僅僅為了闡述的目的，而不旨在限制本發明的範圍。
[0028]如本文所使用，除非上下文明確指出，所有百分比都按重量計算。
[0029]本發明基於在對燕窩中亞硝酸根及亞硝酸鹽產生的來源及其產生過程的研究中的如下發現:各種燕窩中天然存在大量的硝酸根或硝酸鹽並且存在硝酸鹽還原酶。在燕窩採收、加工或存放過程中，硝酸鹽還原酶持續將燕窩內存在的硝酸根或硝酸鹽還原為亞硝酸根或亞硝酸鹽，使得在燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽的含量不斷累積，從而可對人體產生不利影響。[0030]本發明通過使用硝酸鹽還原酶特異性抑制劑(例如鎢酸鹽)，堵截了亞硝酸根及亞硝酸鹽產生的源頭，從而免去了後期重複浸洗時所帶來的問題(例如營養成分的流失)，並降低食用各類燕窩(包括但不限於白燕、黃燕及紅燕在內)的風險。同時，本發明亦無需對天然燕洞或人工燕屋內部進行改動，保持天然燕洞或人工燕屋內的天然生態環境，將對金絲燕族群的滋擾減到最低。
[0031]因此，本發明目的之一在於提供一種抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法，所述方法包括抑制燕窩中硝酸鹽還原酶的活性。本發明的方法可包括向新鮮採集的燕窩加入抑制有效量的燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑或在燕窩生產過程中加入抑制有效量的燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑。
[0032]如本文所使用，術語「硝酸鹽還原酶」是指能將硝酸鹽或硝酸根還原為亞硝酸鹽或亞硝酸根的酶。在一個實施方式中，硝酸鹽還原酶可以是來自慢生根瘤菌的周質硝酸鹽還原酶。在燕窩的主要產地例如印度尼西亞和馬來西亞，在燕屋或燕洞環境中普遍存在根瘤菌，其可分泌硝酸鹽還原酶，使得採集或加工的燕窩中存在硝酸鹽還原酶。
[0033]如本文所使用，術語「燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑」包括能夠有效抑制硝酸鹽還原酶的活性並且不會給燕窩的品質和/或食用安全帶來明顯不利影響的抑制劑。在一個方面，燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑可包括能夠有效抑制硝酸鹽還原酶的活性並且無需進一步去除或在使用後方便和容易除去的抑制劑。
[0034]本領域技術人員還將公知的是，任何能夠抑制硝酸鹽還原酶的活性，並且不會對人體帶來較亞硝酸根或亞硝酸鹽更大的不利影響以及不會給燕窩的營養價值等帶來顯著影響的抑制劑都可以應用於本發明，用於抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽的產生。例如，抑制硝酸鹽還原酶抑制劑可以選自鎢酸鹽。在一個實施方案中，本發明的硝酸鹽還原酶抑制劑可以是特異性硝酸鹽還原酶抑制劑，其專屬抑制硝酸鹽還原酶的活性。
[0035]優選地，硝酸鹽還原酶抑制劑為能夠產生游離鎢酸根的鎢酸鹽。進一步，鎢酸鹽可以選自鎢酸鈉或鎢酸鉀。
[0036]在一個實施方式中，鎢酸鹽可以是鎢酸鈉，其為植物實驗中使用的一種硝酸鹽還原酶抑制劑，通過與硝酸鹽還原酶中的鑰離子產生化學反應而抑制其活性。鎢酸鈉無色無味，亦未證實對人體有害。相反，鎢酸鈉能通過增強胰臟功能來對抗糖尿病。再者，鎢酸鈉具有一定的水溶性，因此，如果期望，所加入的微量鎢酸鈉可以通過傳統燕窩浸洗技術而方便去除。相對於亞硝酸根和亞硝酸鹽的高度毒性，鎢酸鈉抑制了燕窩中亞硝酸根及亞硝酸鹽的產生，大大減低了食用燕窩的風險。
[0037]不受理論束縛，鎢酸鈉中的鎢酸根通過與硝酸鹽還原酶中的鑰離子相互作用從而抑制了硝酸鹽還原酶的活性，進而抑制了亞硝酸根或亞硝酸鹽的產生。根據本發明的教導，本領域技術人員可以容易地理解，其他不會對人體產生不可接受的不利影響、能夠產生游離鎢酸根的鎢酸鹽同樣適用於本發明，例如鎢酸鉀。
[0038]進一步，根據本領域技術人員可以容易地想到其他適用的非鎢酸鹽的硝酸鹽還原酶抑制劑，以用於抑制燕窩中亞硝酸根及亞硝酸鹽的產生，只要其能夠抑制硝酸鹽還原酶的活性並且是燕窩可接受的。
[0039]如本文所使用，術語「抑制有效量」是指任何有效抑制燕窩中硝酸鹽還原酶的量。本領域技術人員將公知的是，硝酸鹽還原酶抑制劑的抑制有效量是可根據燕窩中硝酸鹽還原酶的含量決定的，並且使用上限以不對人體產生傷害為宜。本領域技術人員能夠根據燕窩的類型和來源等，確定硝酸鹽還原酶抑制劑的有效量。
[0040]優選地，本發明硝酸鹽還原酶抑制劑的抑制有效量使用量可以為約IOOnM-1 μ M/g燕窩，例如約200-800nM/g燕窩，諸如約400_600nM/g燕窩、約450_550nM/g燕窩、約500nM/
g燕窩等。
[0041]硝酸鹽還原酶抑制劑可以以本領域已知的任何適合形式例如固體、液體、粉末、混懸液等以適合的方式例如塗敷、浸泡或噴霧等添加至燕窩中。硝酸鹽還原酶抑制劑可添加至新鮮採集的燕窩，或者可在燕窩加工過程中的各個階段添加至燕窩，以抑制硝酸鹽還原酶的活性，從而減少甚至消除亞硝酸根或亞硝酸鹽的產生。
[0042]本發明還提供一種用於抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的組合物，其包含本發明的硝酸鹽還原酶抑制劑。
[0043]本發明進一步提供一種經本發明的硝酸鹽還原酶抑制劑處理的燕窩，經此處理的燕窩與不經此處理的燕窩相比，其亞硝酸根或亞硝酸鹽的含量大幅降低甚至不含有亞硝酸根或亞硝酸鹽。
[0044]本發明還提供一種本發明的硝酸鹽還原酶抑制劑在抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生中的用途。
[0045]本發明還提供一種本發明的硝酸鹽還原酶抑制劑在製備用於抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的組合物中的用途。
[0046]實施例
[0047]下面通過實施例進一步說明本發明。然而，本發明的範圍不局限於這些實施例。除非特別說明，所有試劑和設備均可商購獲得。
[0048]實施例1.燕窩及其產地的天然環境中含有大量的硝酸根或硝酸鹽
[0049]按照中國「食品安全國家標準-食品中亞硝酸鹽的測定」 GB5009.33-2010中描述的方法，對市售及天然採收的各類燕窩進行了檢測。發明人檢測了市售和天然產地採收的燕窩中硝酸根的含量，其中市售的洞燕、屋紅燕和屋黃燕分別來自印度尼西亞、越南、馬來西亞及泰國等地(見表I)，而天然產地採收的洞燕、屋紅燕和屋黃燕分別採收自馬來西亞哥曼東洞及印度尼西亞爪哇島上燕屋。結果發現，無論市售或天然採收的燕窩中均含有大量硝酸根或硝酸鹽(見表I和圖1)。
[0050]表I不同燕窩品種中的硝酸鹽和亞硝酸鹽含量
[0051]
【權利要求】
1.一種在含有硝酸根或硝酸鹽以及硝酸鹽還原酶的保健品、食品或藥材中抑制亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法，包括使用保健品、食品或藥材可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑抑制所述保健品、食品或藥材中硝酸鹽還原酶的活性。
2.一種抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的方法，包括使用燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑抑制燕窩中硝酸鹽還原酶的活性。
3.如權利要求2所述的方法，其包括向新鮮採集的燕窩加入抑制有效量的燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑或在燕窩生產過程中加入抑制有效量的燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑。
4.如權利要求3所述的方法，其進一步包括去除所述硝酸鹽還原酶抑制劑。
5.如權利要求3所述的方法，其中所述抑制有效量為IOOnM-1μ M/g燕窩。
6.如權利要求1-5任一項所述的方法，其中所述硝酸鹽還原酶抑制劑為可產生游離鎢酸根的鎢酸鹽。
7.如權利要求6所述的方法，其中所述鎢酸鹽為鎢酸鈉或鎢酸鉀。
8.燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑在抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生中的用途。
9.燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑在製備用於抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的組合物中的用途。
10.如權利要求8或9所述的用途，其中所述硝酸鹽還原酶抑制劑為可產生游離鎢酸根的鎢酸鹽。
11.如權利要求10所述的用途，其中所述鎢酸鹽為鎢酸鈉或鎢酸鉀。
12.—種經燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑處理的燕窩，其中亞硝酸根及亞硝酸鹽的含量被抑制。
13.如權利要求12所述的燕窩，其中所述硝酸鹽還原酶抑制劑為可產生游離鎢酸根的鎢酸鹽。
14.如權利要求13所述的燕窩，其中所述鎢酸鹽為鎢酸鈉或鎢酸鉀。
15.一種用於抑制燕窩中亞硝酸根或亞硝酸鹽產生的組合物，其包含燕窩可接受的硝酸鹽還原酶抑制劑。
16.如權利要求15所述的組合物，其中所述硝酸鹽還原酶抑制劑為能夠產生游離鎢酸根的鎢酸鹽。
17.如權利要求16所述的組合物，其中所述鎢酸鹽為鎢酸鈉或鎢酸鉀。
18.根據權利要求2-7任一項所述的方法獲得的燕窩。
【文檔編號】A23L1/015GK103815210SQ201210464527
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2012年11月16日 優先權日:2012年11月16日
【發明者】詹華強, 董婷霞, 陳嘉倫 申請人:香港科技大學