食品中壬基酚的測定方法

2023-10-30 03:21:02

專利名稱：食品中壬基酚的測定方法
技術領域：
本發明涉及一種食品中壬基酚的測定方法，特別是食品中壬基酚濃度的測定方法。
背景技術：
壬基酚是一種對人體有嚴重危害的一類環境汙染物，目前被廣泛應用於食品相關產品生產中，如用作清潔劑、油漆和殺蟲劑等的原料，還可作為食品工業生產中的抗氧化齊U。我國目前壬基酚的年生產能力3萬噸，產量為2.6萬噸，近幾年我國壬基酚進口量維持在年2萬噸左右。據統計，全世界每年約有50萬噸的壬基酚進入水體或土壤。由於壬基酚的高度疏水性及化學性質穩定，使得其易在水體下的淤泥中蓄積造成在環境中的廣泛分布，並能通過食物鏈進行富集，從而通過食物對人類造成危害。研究發現壬基酚可以從牛奶加工過程中的PVC管以及包裝食品的塑料中滲出，這些壬基酚大部分直接進入牛奶中，還有一部分釋放到環境中後，很難被降解掉，累積在汙水汙泥、流水沉積物、甚至一些飲用水中，水體中的壬基酚汙染還可富集在水生動物中，通過食物鏈對人體產生作用。大量體內、外試驗表明壬基酚作為一種環境雌激素，具有幹擾內分泌活性的作用，對哺乳動物與水生生物的生殖與發育造成了不同程度的影響，已經引起了毒理學、生態學、環境流行病學等方面科學家的廣泛關注。目前相關研究主要集中在其環境行為及其可能的相關生態環境風險方面，有關食品中壬基酚的檢測技術目前還比較缺乏。大量研究表明，這些化合物廣泛地存在於各種食品中，對人類有著長期的危險，與其他雌激素類物質的協同效應也是其嚴重危害後果之一。針對壬基酚的檢測，國內外尚有對環境中壬基酚含量的檢測方法，但較少有具體在食品中的檢測。

發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種檢出限低、回收率高、重現性好、利用高效液相色譜法測定食品中壬基酚的方法。為了解決上述技術問題，本發明提供一種食品中壬基酚的測定方法，包括以下步驟:I)、試樣製備:將待測品製成待測樣品；2)、提取:稱取待測樣品2.0g加入離心管內，加入18 22mL正己烷和丙酮混合溶劑，振蕩提取、超聲波提取、離心後，得首次上清液和沉澱；在沉澱中加入8 12mL正己烷和丙酮混合溶劑，重複上述振蕩提取、超聲波提取和離心；得再次上清液；
合併首次上清液和再次上清液，得合併上清液，取1/3體積的合併上清液45飛5°C(最佳為50°C)氮吹乾(吹至近幹)，二氯甲烷溶解，得待淨化提取液；正己烷和丙酮混合溶劑由正己烷和丙酮按照1:1的體積比混合而得；備註說明:上述二氯甲烷的用量為只需能溶解「被45飛5°C氮吹至近幹的1/3體積的合併上清液」即可；一般為2 4ml，例如為3ml ；3)、淨化:取活化後的氨基固相萃取柱，轉移上述待淨化提取液上柱，先加入正己烷淋洗，吹乾(近幹)氨基固相萃取柱後，加入甲醇丙酮混合液洗脫，收集洗脫液，將所收集的洗脫液於48^520C (最佳為50°C )氮氣吹乾，用流動相溶解並定容至lmL，過0.45 μ m有機相濾膜，得樣品提取液；所述樣品提取液用於下述步驟的高效液相色譜儀測定；所述流動相同步驟4)中的高效液相色譜檢測用流動相；備註說明:過0.45 μ m有機相濾膜，幾乎不會導致體積的改變，S卩，所得的樣品提取液仍為I mL ；4)、將步驟3)所得的樣品提取液與壬基酚標準工作溶液分別進行高效液相色譜測定;高效液相色譜測定條 件如下:所用色譜柱為EclipseXDB C18, 5 μ m, 150mmX 4.6mm 內徑；高效液相色譜檢測用流動相由體積百分比70%的組分A和體積百分比30%的組分B,組分A為乙腈,組分B為水；分別測得樣品提取液和壬基酚標準工作溶液的峰面積；利用壬基酚標準工作溶液的峰面積和壬基酚標準工作溶液中壬基酚濃度獲知壬基酚濃度/峰面積的線性相關性關係，以及利用樣品提取液的峰面積，得知樣品提取液中壬基酚的濃度；再根據待測樣品與樣品提取液的比例關係，換算獲得待測樣品中壬基酚的濃度(即，待測品中壬基酚的濃度)。作為本發明的食品中壬基酚的測定方法的改進:壬基酚標準工作溶液中壬基酚的濃度為在Ing/mL 0.5mg/mL。作為本發明的食品中壬基酚的測定方法的進一步改進:壬基酚濃度/峰面積的線性相關性關係:y=0.13x+0.41 ；y為峰面積；x為壬基酚濃度，單位ng/ml。作為本發明的食品中壬基酚的測定方法的進一步改進:當待測品為穀類時，將穀類製成過40目篩的粉末，作為待測樣品；當待測品為魚類時，將待測品製成糜狀物(即魚肉糜)，作為待測樣品；當待測品為蔬菜、蔬菜製品，將待測品勻漿，得漿液；加入無水硫酸鈉將漿液進行濃縮處理，使濃縮後的漿液=待測品的重量；濃縮後的漿液作為待測樣品。作為本發明的食品中壬基酚的測定方法的進一步改進:步驟4)中的高效液相色譜中螢光檢測波長為激發波長222nm，發射波長305nm。作為本發明的食品中壬基酚的測定方法的進一步改進:步驟2)中:在15 25mm震蕩幅度下的震蕩提取時間為15 25min ；
在3(Γ50ΚΗζ的超聲頻率和80 120W的功率下超聲波提取15 25min。離心的轉速為4000 6000r/min,離心時間8 12min。上述工藝參數較佳為:在20mm震蕩幅度下的震蕩提取時間為20min ；在40KHz的超聲頻率和99W的功率下超聲波提取20min。離心的轉速為5000r/min,離心時間lOmin。作為本發明的食品中壬基酚的測定方法的進一步改進:步驟3)中甲醇丙酮混合液、正己烷體積均為rSmL，較佳均為6mL。作為本發明的食品中壬基酚的測定方法的進一步改進:步驟2)中所用的離心管為具塞離心管。備註說明:將氨基固相萃取柱進行活化 ，從而獲得活化後的氨基固相萃取柱，是一個公知技術；例如為:將氨基固相萃取柱安裝在SPE固相萃取裝置上，依次用甲醇丙酮混合液(甲醇和丙酮的體積比為1:1)和正己烷進行淋洗，實現活化。在本發明的步驟4)中，高效液相色譜測定條件具體如下:a)色譜柱:EclipseXDB C18 柱，5 μ m(粒度)，150mmX4.6mm (內徑)。b)流動相70% (體積比)A:乙腈30% (體積比)B:水c)流速:1.3mL/min。d)柱溫:30°C。e)激發波長:222nm。發射波長:305nm。f)進樣量:10 μ L。在本發明中，壬基酚標準工作溶液中壬基酚的溶液在Ing/mL 0.5mg/mL內，其濃度與峰面積有良好的相關性，回歸方程為y=0.13x+0.41 (x為壬基酚的濃度，單位ng/ml ；y為峰面積)，相關係數0.9995，能夠滿足定量分析的需要。按照常規理論:倘若樣品提取液的響應值超出儀器檢測的線性範圍的上限，則對樣品提取液採取適當的稀釋處理後再進行檢測即可，稀釋倍數視響應值而定。本發明具有如下優點:(I)回收率高、重現性好:回收率可以達到78.2% 101.2%，相對標準偏差2.3%
7.7%，現有技術的回收率為77.3% 90.1%，相對標準偏差為4.2% 6.5%，本發明平均回收率提高了 5%，相對標準偏差大體相當。(2)檢出限低:本方法檢出限為I μ g/kg,現有技術檢出限2.4 μ g/kg。


下面結合附圖對本發明的具體實施方式
作進一步詳細說明。圖1是濃度為0.25 μ g/mL壬基酚(Nonylphenol)標準物質的液相色譜圖。
具體實施例方式標準品:壬基酚(Nonylphenol)分子式為C15H24O,純度大於99%。標準貯備溶液:準確稱取0.0500g壬基酚標準品，用甲醇定容至IOOmL,配製成濃度為500 μ g/mL的壬基酚標準貯備液，於一 18°C避光保存。標準工作溶液(0.25 μ g/mL):分別準確吸取50 μ L壬基酚標準貯備液至IOOmL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，配製成0.25 μ g/mL的標準工作溶液。氨基固相萃取柱:500mg (填料量)，3mL (空柱管體積)，例如可選用天津博納艾傑爾科技有限公司生產的PA5003型號的氨基固相萃取柱；使用前依次使用6mL甲醇丙酮混合液(甲醇:丙酮=1:1的體積比)，6mL正己烷活化，活化即除去氨基固相萃取柱中的雜質，甲醇丙酮混合液和正己烷依靠重力自然過柱。高效液相色譜(HPLC)儀:配有螢光檢測器。實施例1、速食麵樣品中壬基酚含量檢測(一)樣品處理I)試樣製備將速食麵製成過40目篩的粉末，作為待測樣品。2)提取稱取待測樣品2.0Og加入50mL離心管(具塞離心管)內，加入20mL正己烷和丙酮混合溶劑(正己燒:丙酮=1:1的體積比)，在20mm震蕩幅度下振蕩提取20min,在40KHz的超聲頻率和99W的功率下超聲波提取20min，5000r/min離心lOmin，得首次上清液和沉澱；將所得的首次上清液轉移至另一個50mL離心管中。在沉澱中加入IOmL正己烷和丙酮混合溶劑(正己烷:丙酮=1:1的體積比)重複提取一遍，即，在20mm震蕩幅度下振蕩提取20min，在40KHz的超聲頻率和99W的功率下超聲波提取20min, 5000r/min離心lOmin,得再次上清液。將首次上清液和再次上清液進行合併，共得到約30mL的上清液。取1/3體積(SP約IOmL)上清液50°C氮氣吹至近幹，然後用3mL 二氯甲烷溶解，得待淨化提取液。3)淨化將氨基固相萃取柱安裝在SPE固相萃取裝置上，依次用6mL甲醇丙酮混合液(甲醇:丙酮=1:1的體積比)和6mL正己烷活化，活化即除去氨基固相萃取柱中的雜質，甲醇丙酮混合液和正己烷依靠重力自然過柱。轉移步驟2)所得的待淨化提取液上柱，再加入6mL正己烷淋洗(流速為一秒一滴)，50°C氮氣吹氨基固相萃取柱近幹，加入6mL甲醇丙酮混合液洗脫(流速為一秒一滴，甲醇:丙酮=1:1的體積比)，收集洗脫液，50°C氮氣吹乾，流動相(即高效液相色譜檢測用流動相:體積百分比70%乙腈和30%水組成的混合溶液)溶解並定容至lmL，過0.45 μ m有機相濾膜，得ImL樣品提取液，供高效液相色譜儀測定。(二)測定條件a)色譜柱:EclipseXDB C18 柱，5 μ m(粒度)，150mmX4.6mm (內徑)。b)流動相70% (體積比)A:乙腈30% (體積比)B:水
c)流速:1.3mL/min。d)柱溫:30°C。e)激發波長:222nm。發射波長:305nm。f)進樣量:10 μ L。(三)色譜分析注入10 μ L壬基酚標準工作溶液及樣品提取液於高效液相色譜儀進樣器中，按上述色譜條件進行色譜分析，記錄峰面積。根據標準品的保留時間定性，外標法定量。標準品色譜圖參見圖1。由於壬基酹標準溶液在Ing/mL 0.5mg/mL內，其濃度與峰面積有良好的線性相關性，回歸方程:y=0.13x+0.41，根據峰面積y=l.7295，可得樣品提取液中壬基酚濃度為10.15 ng/ml。再根據最初選用的取待測樣品2.0Og與樣品提取液用量比的換算關係:
X=C*V*N/mX-樣品中壬基酚殘留量，mg/kg ；C——樣品提取液中壬基酚濃度，μ g/mL;V 樣品提取液最終定容體積，mL ;N-稀釋倍數；m-樣品質量，g。其中樣品提取液的體積V為ImL ;樣品質量m為2g ;稀釋倍數N為3 (根據2)步驟中取1/3體積的上清液，可知此處N為3)。根據取樣的檢測結果，速食麵中壬基酚的濃度為15.2 ng/g。由於壬基酚廣泛存在於環境中，生產速食麵的原材料可能被壬基酚汙染。實施例2:中國大白菜樣品中壬基酚含量檢測(一)樣品處理1)試樣製備將中國大白菜切碎，勻漿，得漿液，加入適量無水硫酸鈉將漿液進行濃縮處理，使濃縮後的漿液的重量=原始的中國大白菜的重量；該濃縮後的漿液作為待測樣品。2)提取稱取待測樣品2.0(^加入5011^離心管(具塞離心管)內，加入20mL正己烷和丙酮混合溶劑(正己燒:丙酮=1:1的體積比)，在20mm震蕩幅度下振蕩提取20min,在40KHz的超聲頻率和99W的功率下聲波提取20min，5000r/min離心lOmin，得首次上清液和沉澱。將所得的首次上清液轉移至另一個50mL離心管中。在沉澱中加入IOmL正己烷和丙酮混合溶劑(正己燒:丙麗=1: I的體積比)重複提取一遍，即，在20mm震蕩幅度下振蕩提取20min,在40KHz的超聲頻率和99W的功率下聲波提取20min，5000r/min離心lOmin，得再次上清液。將首次上清液和再次上清液進行合併，共得到約30mL的上清液。取1/3體積(SP約IOmL)上清液50°C氮吹至近幹，然後用3mL 二氯甲烷溶解，得待淨化提取液。3)淨化
將氨基固相萃取柱安裝在SPE固相萃取裝置上，依次用6mL甲醇丙酮混合液(甲醇:丙酮=1:1的體積比)和6mL正己烷活化，活化即除去氨基固相萃取柱中的雜質，甲醇丙酮混合液和正己烷依靠重力自然過柱。轉移步驟2)所得的待淨化提取液上柱，再加入6mL正己烷淋洗(流速為一秒一滴)，吹氨基固相萃取柱近幹，加入6mL甲醇丙酮混合液洗脫(流速為一秒一滴)，收集洗脫液，50°C氮氣吹乾，流動相(即高效液相色譜檢測用流動相:體積百分比70%乙腈和30%水的混合溶液)溶解並定容至lmL，過0.45 μ m有機相濾膜，得樣品提取液lmL，供高效液相色譜儀測定。(二)測定條件a) 色譜柱:EclipseXDB Cl8 柱，5 μ m(粒度)，I5OmmX 4.6mm (內徑)。b)流動相70% (體積比)A:乙腈30% (體積比)B:水c)流速:1.3mL/min。d)柱溫:30°C。e)激發波長:222nm。發射波長:305nm。f)進樣量:10 μ L。(三)色譜分析注入10 μ L壬基酚標準工作溶液及樣品提取液於高效液相色譜儀進樣器中，按上述色譜條件進行色譜分析，記錄峰面積。根據標準品的保留時間定性，外標法定量。標準品色譜圖參見圖1。由於壬基酹標準溶液在Ing/mL 0.5mg/mL內，其濃度與峰面積有良好的線性相關性，回歸方程:y=0.13x+0.41，根據峰面積y=l.6398，可得樣品提取液壬基酚濃度為9.46ng/ml。再根據最初選用的取待測樣品2.0Og與樣品提取液用量比的換算關係:
CXVXN
X =-
mX-樣品中壬基酚殘留量，mg/kg ；C——樣品提取液中壬基酚濃度，μ g/mL ;V 樣品提取液最終定容體積，mL ;N-稀釋倍數；m——樣品質量，g。其中樣品提取液體積V為ImL ;樣品質量m為2g ;稀釋倍數N為3。根據取樣的檢測結果，中國大白菜中壬基酚的濃度為14.2 ng/g。由於壬基酚廣泛存在於各種環境介質中，可能通過各種途徑在植物體內富集。實施例3:鯽魚樣品中壬基酚含量檢測(一)樣品處理I)試樣製備將鯽魚肉製成糜狀物(魚肉糜),作為待測樣品。
2)提取稱取待測樣品2.0Og加入50mL離心管(具塞離心管)內，加入20mL正己烷和丙酮混合溶劑(正己燒:丙酮=1:1的體積比)，在20mm震蕩幅度下振蕩提取20min,在40KHz的超聲頻率和99W的功率下聲波提取20min，5000r/min離心lOmin，得首次上清液和沉澱；將所得的首次上清液轉移至另一個50mL離心管中。在沉澱中加入IOmL正己烷和丙酮混合溶劑(正己燒:丙麗=1: I的體積比)重複提取一遍，即，在20mm震蕩幅度下振蕩提取20min,在40KHz的超聲頻率和99W的功率下聲波提取20min，5000r/min離心lOmin，得再次上清液。將首次上清液和再次上清液進行合併，共得到約30mL的上清液。取1/3體積(SP，約IOmL)的上清液50°C氮吹至近幹，然後用3mL 二氯甲烷溶解，得待淨化提取液。3)淨化將氨基固相萃取柱安裝在SPE固相萃取裝置上，依次用6mL甲醇丙酮混合液(甲醇:丙酮=1:1的體積比)和6mL正己烷活化，活化即除去氨基固相萃取柱中的雜質，甲醇丙酮混合液和正己烷依靠重力自然過柱。轉移步驟2)所得的待淨化提取液上柱，再加入6mL正己烷淋洗(流速為一秒一滴)，吹氨基固相萃取柱近幹，加入6mL甲醇丙酮混合液洗脫(流速為一秒一滴)，收集洗脫液，50°C氮氣吹乾，流動相(即高效液相色譜檢測用流動相:體積百分比70%乙腈和30%水的混合溶液)溶解並定容至lmL，過0.45 μ m有機相濾膜，得樣品提取液，供高效液相色譜儀測定。(二)測定條件a)色譜柱:EclipseXDB Cl8 柱，5 μ m(粒度)，I5OmmX 4.6mm (內徑)。

b)流動相70% (體積比)A:乙腈30% (體積比)B:水c)流速:1.3mL/min。d)柱溫:30°C。e)激發波長:222nm。發射波長:305nm。f)進樣量:10 μ L。(三)色譜分析注入10 μ L壬基酚標準工作溶液及樣品提取液於高效液相色譜儀進樣器中，按上述色譜條件進行色譜分析，記錄峰面積。根據標準品的保留時間定性，外標法定量。標準品色譜圖參見附圖1。由於壬基酹標準溶液在Ing/mL 0.5mg/mL內，其濃度與峰面積有良好的線性相關性，回歸方程:y=0.13x+0.41，根據峰面積y=2.5198，可得樣品提取液壬基酚濃度為16.23 ng/ml。再根據最初選用的取待測樣品2.0Og與樣品提取液用量比的換算關係:
Γ ^ CxFxNX =-
mX-樣品中壬基酚殘留量，mg/kg ；
C——樣品提取液中壬基酚濃度，μ g/mL;V 樣品提取液最終定容體積，mL ;N—稀釋倍數；m——樣品質量，g。其中樣品提取液最終定容體積V為ImL ;樣品質量m為2g ;稀釋倍數N為3。根據取樣的檢測結果，鯽魚中壬基酚的濃度為24.3 ng/g。造成鯽魚體內的壬基酚含量濃度較高是由於樣品取自可能受環境汙染的東海沿海養殖場。驗證例1、將事先已知不含壬基酚的速食麵製成過40目篩的粉末，然後添加適量的壬基酚，從而製成壬基酚濃度為30ng/g的速食麵粉末作為待測樣品。將上述待測樣品按照實施例1所述的方法進行檢測，得峰面積y=2.7785，根據y=0.13x+0.41，得樣品提取液壬基酚濃度為18.22 ng/ml ;最終的待測樣品中壬基酚的濃度為 27.33 ng/g ο對比例1、將實施例1中的步驟3) 「淨化」中的「收集洗脫液，50°C氮氣吹乾」改成「收集洗脫液，70°C氮氣吹乾」，其餘同實施例1。將完全同驗證例I中的待測樣品按照對比例I的方法進行檢測，得峰面積I二2.619，根據y=0.13x+0.41，得樣品提取液壬基酚濃度為16.99 ng/ml ;最終的待測樣品中壬基酚的濃度為25.49 ng/g。驗證例2、將事先已知不含壬基酚的速食麵製成過40目篩的粉末，然後添加適量的壬基酚，從而製成壬基酚濃度為1.5ng/g的速食麵粉末作為待測樣品。將上述待測樣品按照實施例1所述的方法進行檢測，得峰面積y=0.5284，根據y=0.13x+0.41，得樣品提取液壬基酚濃度為0.91 ng/ml ;最終的待測樣品中壬基酚的濃度為 1.36 ng/g ο驗證例3、將事先已知不含壬基酚的鯽魚肉製成糜狀物(魚肉糜)，然後添加適量的壬基酚，從而製成壬基酹濃度為15ng/g的糜狀物(魚肉糜)作為待測樣品。將上述待測樣品按照實施例3所述的方法進行檢測，得峰面積y=l.588，根據y=0.13x+0.41，得樣品提取液壬基酚濃度為9.07 ng/ml ;最終的待測樣品中壬基酚的濃度為 13.6ng/g。最後，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發明的若干個具體實施例。顯然，本發明不限於以上實施例，還可以有許多變形。本領域的普通技術人員能從本發明公開的內容直接導出或聯想到的所有變形，均應認為是本發明的保護範圍。
權利要求
1.食品中壬基酚的測定方法，其特徵是包括以下步驟: 1)、試樣製備: 將待測品製成待測樣品； 2)、提取: 稱取待測樣品2.0g加入離心管內，加入18 22mL正己烷和丙酮混合溶劑，振蕩提取、超聲波提取、離心後，得首次上清液和沉澱； 在沉澱中加入8 12mL正己烷和丙酮混合溶劑，重複上述振蕩提取、超聲波提取和離心；得再次上清液； 合併首次上清液和再次上清液，得合併上清液，取1/3體積的合併上清液45 55°C氮吹乾，二氯甲烷溶解，得待淨化提取液； 所述正己烷和丙酮混合溶劑由正己烷和丙酮按照1:1的體積比混合而得； 3)、淨化: 取活化後的氨基固相萃取柱，轉移上述待淨化提取液上柱，先加入正己烷淋洗，吹乾氨基固相萃取柱後，加入甲醇丙酮混合液洗脫，收集洗脫液，將所收集的洗脫液於48飛2°C氮氣吹乾，用流動相溶解並定容至lmL，過0.45 μ m有機相濾膜，得樣品提取液；所述樣品提取液用於下述步驟的高效液相色譜儀測定； 所述流動相同步驟4)中的高效液相色譜檢測用流動相； 4)、將步驟3)所得的樣品提取液與壬基酚標準工作溶液分別進行高效液相色譜測定； 高效液相色譜測定條件如下:所用色譜柱為 EclipseXDB C18, 5 μ m, 1 50mmX 4.6mm 內徑； 高效液相色譜檢測用流動相由體積百分比70%的組分A和體積百分比30%的組分B，所述組分A為乙腈，所述組分B為水； 分別測得樣品提取液和壬基酚標準工作溶液的峰面積； 利用壬基酚標準工作溶液的峰面積和壬基酚標準工作溶液中壬基酚濃度獲知壬基酚濃度/峰面積的線性相關性關係，以及利用樣品提取液的峰面積，得知樣品提取液中壬基酚的濃度；再根據待測樣品與樣品提取液的比例關係，換算獲得待測樣品中壬基酚的濃度。
2.根據權利要求1所述的食品中壬基酚的測定方法，其特徵是: 壬基酚標準工作溶液中壬基酚的濃度為在Ing/mL 0.5mg/mL。
3.根據權利要求2所述的食品中壬基酚的測定方法，其特徵是: 壬基酚濃度/峰面積的線性相關性關係:y=0.13x+0.41 ； 所述I為峰面積，X為壬基酹濃度，單位ng/ml。
4.根據權利要求1、2或3所述的食品中壬基酚的測定方法，其特徵是: 當待測品為穀類時，將穀類製成過40目篩的粉末，作為待測樣品； 當待測品為魚類時，將待測品製成糜狀物，作為待測樣品； 當待測品為蔬菜、蔬菜製品，將待測品勻漿，得漿液；加入無水硫酸鈉將漿液進行濃縮處理，使濃縮後的漿液=待測品的重量；所述濃縮後的漿液作為待測樣品。
5.根據權利要求4所述的食品中壬基酚的測定方法，其特徵是: 所述步驟4)中的高效液相色譜中螢光檢測波長為激發波長222nm，發射波長305nm。
6.根據權利要求5所述的食品中壬基酚的測定方法，其特徵是:所述步驟2)中: 在15 25_震蕩幅度下的震蕩提取時間為15 25min ； 在3(Γ50ΚΗζ的超聲頻率和8(Tl20W的功率下超聲波提取15 25min。
離心的轉速為4000 6000r/min,離心時間8 12min。
7.根據權利要求6所述的食品中壬基酚的測定方法，其特徵是:步驟3)中甲醇丙酮混合液、正己烷體積均為4~8mL。
8.根據權利要求7所述的食品中壬基酚的測定方法，其特徵是:所述步驟2)中所用的離心管為具塞離心管。
全文摘要
本發明公開了一種食品中壬基酚的測定方法，包括以下步驟 1)將待測品製成待測樣品；2)提取將取待測樣品製成待淨化提取液；3)淨化取活化後的氨基固相萃取柱，轉移待淨化提取液上柱，先加入正己烷淋洗，吹乾氨基固相萃取柱後，加入甲醇丙酮混合液洗脫，收集洗脫液，吹乾，用流動相溶解並定容至1mL，得樣品提取液；4)樣品提取液與壬基酚標準工作溶液分別進行高效液相色譜測定；利用壬基酚標準工作溶液的峰面積和壬基酚標準工作溶液中壬基酚濃度獲知壬基酚濃度/峰面積的線性相關性關係，以及利用樣品提取液的峰面積，得知樣品提取液中壬基酚的濃度；最終根據比例關係換算獲得待測樣品中壬基酚的濃度。
文檔編號G01N30/14GK103115983SQ201310039869
公開日2013年5月22日 申請日期2013年1月29日 優先權日2013年1月29日
發明者關榮發, 郝雲彬, 駱曉波, 劉 英, 許亞新, 蔣晗, 劉明啟 申請人:中國計量學院, 杭州市餘杭區質量計量監測中心