一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法

2023-10-16 23:44:54 1

專利名稱：一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，具體包括鑑別方法和含量測定方法，屬於醫藥技術領域。
背景技術：
在製藥技術上，藥品生產要達到安全有效、質量可控的基本要求。完善的質量控制標準能夠保證藥品的可靠性和均一性。本發明是關於一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法。
從鮮地黃及幹地黃中，已分離鑑定出多種苷類成分，其中環烯醚萜苷主要有梓醇，二氫梓醇，乙醯梓醇，益母草苷，桃葉珊瑚苷，單蜜力特苷，蜜力特苷，Rehmaglutin A、 B、C、D, Acteoside,地黃苷 A、B、C、D, Cerebrosid 及含氯的 Glutinoside, RehmaionosideA、B、C, Rehmapicroside, Purpureaside C,海膽苷，Cistanoside A、F, Jionoside A、B, Jioglutoside A, B,去輕桅子苷,筋骨草苷,8-表番木鰵酸，乙醯梓醇苷等。
從地黃愈傷組織的甲醇提取物中分離鑑定了 4種苯乙醇苷類ACte0Side、 Forsythiaside、3,4- 二輕基-O—D-卩比喃葡糖-(1_3)-4_0-咖啡醯一D-卩比喃葡糖苷、3, 4- 二羥基-0—D-吡喃葡糖-(1-3)-0—L-鼠李吡喃糖-(1-6)-4-0-咖啡醯一D_吡喃葡糖苷及3，4- 二羥基一苯乙基-0—L-鼠李吡喃糖-(1-3) -0—D-半乳吡喃糖-(1-6) -4-0-咖啡醯-a -D-喃葡糖苷。採用HPLC法測定鮮地黃、幹地黃、熟地黃中毛蕊花糖苷含量，測得鮮地黃、幹地黃、熟地黃中毛蕊花糖苷的含量分別是0. 116%,O. 093%,O. 04%。
地黃中還含有水蘇糖、棉子糖、葡萄糖、甘露三糖、毛蕊花糖、半乳糖等寡糖及地黃多糖、地黃多糖β等糖類成分。
經過發明人長期對地黃的藥學研究，發現了一種從鮮地黃中提取的總苷類提取物，及其在製備治療糖尿病藥物中的用途。發明內容
本發明目的是提供一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，通過此方法可以很好地控制該鮮地黃總苷提取物的質量，為該鮮地黃總苷提取物建立了質量標準。
本發明所提到的鮮地黃總苷提取物是通過如下方法製備而成的
取鮮地黃，壓榨榨汁，榨汁液加入4倍量95 %乙醇，放置過夜，上清液減壓濃縮至相對密度1. 1，噴霧乾燥，得鮮地黃乾粉；鮮地黃乾粉加水溶解並稀釋至相對密度1. 05，濾過，濾液上大孔吸附樹脂，控制流速為O. 5 1. 5BV/h ;先用2. OBV的水進行除雜， 然後用2.0BV80%乙醇洗脫，收集80%醇洗脫液，減壓濃縮，60 70°C真空乾燥，粉碎，即得。
本發明的目的是通過如下技術方案實現的
一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，其特徵是包括如下方法中的一種或全部性狀鑑別、薄層色譜鑑別和有效成分含量測定。
一、性狀鑑別
本發明的鮮地黃總苷提取物，呈棕黃色粉末；氣特異，味微苦。
二、薄層鑑別(I)梓醇、益母草苷的鑑別
取鮮地黃總苷粉末10_50mg，置IOml量瓶中，加50% -80%甲醇溶解並於室溫下定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取梓醇、益母草苷對照品，分別用甲醇製成每Iml含O.5mg的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點於同一娃膠G薄層板上，以12 16 : 4 8 : O.1 I的三氯甲燒-甲醇-水為展開劑， 展開，取出，晾乾，噴以茴香醛試液，在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。
(2)毛蕊花糖苷的鑑別
取鮮地黃總苷粉末10_50mg，置IOml量瓶中，加50% -80%甲醇溶解並於室溫下定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取毛蕊花糖苷照品，用甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5 μ1、對照品溶液2 μ 1，分別點於同一娃膠G薄層板上，以14 18 : O. 2 2 : O. 5 5的乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以O.1 %的2，2- 二苯基-1-苦肼基無水乙醇溶液浸板，晾乾。供試品色譜中，在對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。
優選地，薄層鑑別鑑別方法為
(I)梓醇、益母草苷的鑑別
取鮮地黃總苷粉末25mg，置IOml量瓶中，加50%甲醇溶解並於室溫下定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取梓醇、益母草苷對照品，分別用甲醇製成每Iml含O. 5mg的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以14 6 I的三氯甲烷-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以茴香醛試液，在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。
(2)毛蕊花糖苷的鑑別
取鮮地黃總苷粉末50mg，置IOml量瓶中，加50%甲醇溶解並於室溫下定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取毛蕊花糖苷照品，用甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液 5 μ1、對照品溶液2 μ I,分別點於同一娃膠G薄層板上，以16 : O. 5 : 2的乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以O.1 %的2，2-二苯基-1-苦肼基無水乙醇溶液浸板，晾乾。供試品色譜中，在對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。
三、含量測定
(I)梓醇和益母草苷用高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈為流動相Α，O.1 %磷酸溶液為流動相B，按下表進行梯度洗脫；檢測波長為210nm，柱溫30°C。理論塔板數按梓醇峰計算應不低於10000。
權利要求
1.一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，其特徵是包括如下方法中的一種或全部性狀鑑別、薄層色譜鑑別和有效成分含量測定。
2.根據權利要求1所述的一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，其特徵是性狀鑑別如下呈棕黃色粉末；氣特異，味微苦。
3.根據權利要求1所述的一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，其特徵是薄層色譜鑑別如下 (1)梓醇、益母草苷的鑑別 取鮮地黃總苷粉末10-50mg，置IOml量瓶中，加50% -80%甲醇溶解並於室溫下定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取梓醇、益母草苷對照品，分別用甲醇製成每Iml含O. 5mg的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以12 16 : 4 8 : O.1 I的三氯甲烷-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以茴香醛試液，在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。
(2)毛蕊花糖苷的鑑別 取鮮地黃總苷粉末10-50mg，置IOml量瓶中，加50% -80%甲醇溶解並於室溫下定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取毛蕊花糖苷照品，用甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5 μ1、對照品溶液2 μ 1，分別點於同一娃膠G薄層板上，以14 18 : O. 2 2 : O. 5 5的乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開齊U，展開，取出，晾乾，噴以O.1 %的2，2- 二苯基-1-苦肼基無水乙醇溶液浸板，晾乾。供試品色譜中，在對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。
4.根據權利要求3所述的一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，其特徵是薄層色譜鑑別如下 (1)梓醇、益母草苷的鑑別 取鮮地黃總苷粉末25mg，置IOml量瓶中，加50%甲醇溶解並於室溫下定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取梓醇、益母草苷對照品，分別用甲醇製成每Iml含O. 5mg的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以14 6 I的三氯甲烷-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以茴香醛試液，在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。
(2)毛蕊花糖苷的鑑別 取鮮地黃總苷粉末50mg，置IOml量瓶中，加50 %甲醇溶解並於室溫下定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取毛蕊花糖苷照品，用甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5 μ1、對照品溶液2 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以16 0.5 2的乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以O.1 %的2，2-二苯基-1-苦肼基無水乙醇溶液浸板，晾乾。供試品色譜中，在對照品色譜相應的位置上，應顯相同顏色的斑點。
5.根據權利要求1所述的一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，其特徵是有效成分含量測定如下 (I)梓醇和益母草苷含量測定。色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈為流動相A，O.1 %磷酸溶液為流動相B，按下表進行梯度洗脫；檢測波長為210nm，柱溫30°C。理論塔板數按梓醇峰計算應不低於10000。
6.根據權利要求5所述的一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，其特徵是 (1)梓醇和益母草苷含量測定中，供試品溶液的製備取本品50mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加入50%甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得； (2)毛蕊花糖苷含量測定中，色譜條件和系統適應性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以16 : 84的乙腈-水-O.1 %冰醋酸為流動相；供試品溶液的製備取鮮地黃總苷約50mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加50%甲醇溶解並稀釋至刻度，即得。
全文摘要
本發明涉及一種鮮地黃總苷提取物的質量控制方法，具體包括鑑別方法和含量測定方法，屬於醫藥技術領域。其中鑑別方法包括性狀鑑別和薄層色譜鑑別；含量測定方法是對本發明鮮地黃總苷提取物中的梓醇、益母草苷和毛蕊花糖苷採用高效液相色譜法測定。
文檔編號G01N30/88GK103018390SQ20111027867
公開日2013年4月3日 申請日期2011年9月20日 優先權日2011年9月20日
發明者玄振玉 申請人:玄振玉