一種從相思子屬植物中製備葫蘆巴鹼的方法與流程

2023-05-21 22:13:46

本發明屬於天然藥物提取領域，具體涉及一種從相思子屬植物中製備葫蘆巴鹼的方法。

背景技術：

廣州相思子(Aburs cantoniensis Hance)、毛相思子(Abrus mollis Hance)和相思子(Abrus precatorius L.)均為豆科植物相思子屬植物，具有清熱解毒、疏肝止痛等作用，多用於治療急慢性肝炎等病症。

葫蘆巴鹼，化學名為N-甲基煙酸內酯或N-甲基煙酸內鹽，溶於水、甲醇、乙醇等水溶極性溶劑，分子式為C7H7NO2，分子量為137.14，結構式為：

葫蘆巴鹼存在於豆科植物相思子屬廣州相思子(Aburs cantoniensis Hance)、毛相思子(Abrus mollis Hance)和相思子(Abrus precatorius L.)等植物的全草中。藥理研究表明，葫蘆巴鹼具有保肝，抗炎，鎮痛，降血脂，降血糖，促進神經組織再生，抗偏頭痛，抗癌宮頸癌和肝癌，抗菌等作用，無明顯的不良反應，可用於肝病、糖尿病和高脂血症等疾病的防治，也可用作營養型添加劑和醫藥中間體，為開發前景廣闊的天然藥物，一直為國內外學者所關注。

目前，未見有針對廣州相思子、毛相思子和相思子中葫蘆巴鹼開展提取純化製備工藝的方法，而其他植物中葫蘆巴鹼單體成分的提取分離方法複雜，提取率低，所涉及溶劑毒性大，不適用於工業化生產。

中國專利申請201310706466.9公開了野生葫蘆巴鹼的新型提取方法，該方法利用超高壓技術和大孔樹脂吸附及柱層析耦聯技術富集純化葫蘆巴中葫蘆巴鹼，採用梯度的乙醇對大孔吸附樹脂進行洗脫，再採用不同配比的丙酮、石油醚對含葫蘆巴鹼半成品的矽膠柱層析進行梯度洗脫，該方法工藝複雜，所用的溶劑毒性較大。

技術實現要素：

為解決現有技術中存在的技術問題，本發明目的在於提供一種從相思子屬植物中製備葫蘆巴鹼的方法，該方法對葫蘆巴鹼的提取純化得率高，樣品純度高，安全穩定，步驟簡便，成本低，可用於工業化生產。

本發明提供一種從相思子屬植物中製備葫蘆巴鹼的方法，其包括以下步驟：

(1)取廣州相思子、毛相思子或相思子，加入水溶性溶劑進行提取，濾過，將濾液濃縮並回收溶劑，然後將濃縮液上氧化鋁柱，用水溶性溶劑洗脫至無色，收集全部洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至幹，得葫蘆巴鹼粗純化物；

(2)往步驟(1)製得的葫蘆巴鹼粗純化物中加入適量水溶性溶劑反覆提取，超濾，濃縮，重結晶，得高純度的葫蘆巴鹼。

進一步地，所述步驟(1)和(2)中的水溶性溶劑為水、乙醇、甲醇或丙酮中的至少一種。

進一步地，所述步驟(1)中的提取方式為加熱回流、超聲、浸提中的一種。

進一步地，所述步驟(1)中的氧化鋁為中性、酸性或鹼性氧化鋁，所述氧化鋁的目數為60目以上。

優選地，所述氧化鋁的目數為100-200目。

進一步地，所述步驟(2)中的超濾的膜規格為3000分子量以下。

進一步地，所述步驟(1)具體為：取廣州相思子、毛相思子或相思子，加入藥材重量5～200倍水溶性溶劑，加熱回流提取或超聲提取或浸泡提取1～5次，每次0.1～5小時，過濾，合併濾液，將濾液濃縮，製得每ml含藥材量0.01～3g的水濃縮液，然後將水濃縮液上100～200目的氧化鋁柱，用2～10倍柱體積的水溶性溶劑洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至幹，得葫蘆巴鹼粗純化物。

優選地，所述步驟(1)具體為：取廣州相思子、毛相思子或相思子，加入藥材重量5～200倍純化水，加熱回流提取1～5次，每次0.1～5小時，過濾，合併濾液，將濾液濃縮，製得每ml含藥材量0.01～3g的水濃縮液，然後將水濃縮液上100～200目的中性氧化鋁柱，用2～10倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至幹，得葫蘆巴鹼粗純化物。

進一步地，所述步驟(2)具體為：往步驟(1)製得的葫蘆巴鹼粗純化物中加入其重量5～50倍乙醇或甲醇提取1～5次，合併提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結晶，得高純度的葫蘆巴鹼。

與現有技術相比，本發明的優勢在於：

(1)本發明提供的製備方法能夠較好地去除黃酮類等其他類成分，獲得高純度葫蘆巴鹼。

(2)本發明方法穩定性好，步驟簡便，且所用溶劑毒性低。

(3)本發明提供的方法成本低，周期短，製備量大，效率高，可應用於工業化生產。

具體實施方式

以下通過具體實施方式進一步描述本發明，但本發明不僅僅限於以下實施例。

實施例1

(1)取廣州相思子1000g，加入藥材重量15倍純化水，超聲提取3次，每次0.5小時，過濾，合併濾液，將濾液濃縮，製得每ml含藥材量1g的水濃縮液，然後將水濃縮液上200目的中性氧化鋁柱，用3倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至幹，得葫蘆巴鹼粗純化物；

(2)往步驟(1)製得的葫蘆巴鹼粗純化物中加入其重量10倍甲醇提取2次，合併提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結晶，得高純度的葫蘆巴鹼3.5g。

實施例2

(1)取毛相思子1000g，加入藥材重量10倍純化水，浸泡提取2次，每次3小時，過濾，合併濾液，將濾液濃縮，製得每ml含藥材量0.2g的水濃縮液，然後將水濃縮液上100目的中性氧化鋁柱，用4倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至幹，得葫蘆巴鹼粗純化物；

(2)往步驟(1)製得的葫蘆巴鹼粗純化物中加入其重量15倍甲醇提取2次，合併提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結晶，得高純度的葫蘆巴鹼3.2g。

實施例3

(1)取相思子1000g，加入藥材重量20倍純化水，加熱回流提取3次，每次2小時，過濾，合併濾液，將濾液濃縮，製得每ml含藥材量0.1g的水濃縮液，然後將水濃縮液上200目的中性氧化鋁柱，用2倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至幹，得葫蘆巴鹼粗純化物；

(2)往步驟(1)製得的葫蘆巴鹼粗純化物中加入其重量15倍乙醇提取3次，合併提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結晶，得高純度的葫蘆巴鹼3.8g。

實施例4

(1)取廣州相思子1000g，加入藥材重量30倍純化水，加熱回流提取2次，每次3小時，過濾，合併濾液，將濾液濃縮，製得每ml含藥材量0.5g的水濃縮液，然後將水濃縮液上100目的中性氧化鋁柱，用8倍柱體積的純化水洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至幹，得葫蘆巴鹼粗純化物；

(2)往步驟(1)製得的葫蘆巴鹼粗純化物中加入其重量30倍乙醇提取2次，合併提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結晶，得高純度的葫蘆巴鹼3.9g。

實施例5

(1)取廣州相思子1000g，加入藥材重量10倍濃度為25％乙醇溶液，加熱回流提取2次，每次3小時，過濾，合併濾液，將濾液濃縮，製得每ml含藥材量1g的濃縮液，然後將濃縮液上100目的鹼性氧化鋁柱，用5倍柱體積的濃度為25％乙醇溶液洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至幹，得葫蘆巴鹼粗純化物；

(2)往步驟(1)製得的葫蘆巴鹼粗純化物中加入其重量20倍乙醇提取3次，合併提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結晶，得高純度的葫蘆巴鹼3.8g。

實施例6

(1)取毛相思子1000g，加入藥材重量15倍濃度為20％甲醇溶液，加熱回流提取2次，每次3小時，過濾，合併濾液，將濾液濃縮，製得每ml含藥材量0.5g的濃縮液，然後將濃縮液上100目的酸性氧化鋁柱，用10倍柱體積的濃度為20％甲醇溶液洗脫至無色，收集全部通過柱子的洗脫液，將洗脫液減壓濃縮至幹，得葫蘆巴鹼粗純化物；

(2)往步驟(1)製得的葫蘆巴鹼粗純化物中加入其重量15倍甲醇提取3次，合併提取液，1000分子量超濾膜濾過，濾液濃縮，重結晶，得高純度的葫蘆巴鹼3.7g。

以上僅是本發明的優選實施方式，應當指出的是，上述優選實施方式不應視為對本發明的限制，本發明的保護範圍應當以權利要求所限定的範圍為準。對於本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明的精神和範圍內，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。