苦玄參提取物在製藥中的應用的製作方法
2023-12-05 16:36:01
專利名稱：苦玄參提取物在製藥中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及植物提取物的醫藥應用領域，具體涉及苦玄參提取物在製藥中的應用。
背景技術：
苦玄參(Picria Felterrae Lour),又名苦草、熊膽草、四環素草，為苦玄參科多年生草本植物，主產於廣西、廣東。全草可入藥，民間用於肺炎、感冒、咽喉炎、跌打損傷、淋巴結炎等炎症的治療已有悠久歷史。許多學者對苦玄參中的化合物成分進行了較為系統的研究，從中分離到了三萜類、黃酮類及苯乙醇苷類等化合物。已有的藥理和臨床結果顯示，苦玄參具有廣譜性的抗菌消炎和抗病毒作用、神經系統興奮作用、降脂作用以及對性功能障礙和健忘症等病症的治療作用等。但目前還未見有苦玄參提取物用於製備鎮痛藥物的公開報導。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供苦玄參提取物在製藥中的應用。本發明所述的苦玄參提取物在製藥中的應用，具體地說，是苦玄參提取物在製備鎮痛藥物中的應用，其中，所述的苦玄參提取物的製備方法包括取苦玄參，加水煎煮提取，所得提取液過大孔樹脂柱，水洗樹脂柱，然後用體積濃度為40 50%的低碳醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮，乾燥，即得。具體的苦玄參提取物的製備方法為取苦玄參，加水煎煮提取，所得提取液用截留分子量為5000 10000道爾頓的超濾膜超濾，超濾透過液過大孔樹脂柱，水洗樹脂柱至無色，然後用體積濃度為40 50%的低碳醇洗脫至流出液呈淺黃色，收集醇洗脫液，濃縮，乾燥，即得。通過增加超濾步驟，以減少後序大孔樹脂柱的吸附量，延長大孔樹脂的使用壽命；可將超濾所得的超濾透過液先進行反滲透濃縮，然後再過大孔樹脂柱。同樣地，為了減少超濾膜的堵塞，可將提取液先用80 100目濾布粗濾，濾液再進行超濾步驟。更為具體的苦玄參提取物的製備方法為取苦玄參，加水煎煮提取I 3次，合併藥液得到提取液，所得提取液用截留分子量為5000 10000道爾頓的超濾膜超濾，超濾透過液過大孔樹脂柱，水洗樹脂柱至無色，然後用體積濃度為40 50%的低碳醇洗脫呈淺黃色，收集醇洗脫液，濃縮，乾燥，即得。上述製備方法中，每次提取時，水的加入量為藥材重量的3 10倍，提取時間為O. 5 3. Oh ;提取之前可先將藥材粉碎，以有利於活性成分的提出，粉碎的粒度以10 200目為好。 在用體積濃度為40 50%的低碳醇對樹脂柱進行洗脫時，洗至流出液呈淺黃色即可，通常上述濃度低碳醇的用量為柱體積的4 8倍。所述大孔樹脂的型號可以是D101、AB-8、HPD400或HP-20等。
所述用於洗脫的低碳醇的體積濃度為45%。所述的低碳醇為甲醇、こ醇或丙醇。申請人:經實驗發現，將苦玄參的水提物上大孔樹脂柱後，用體積濃度為40 50%的低碳醇對樹脂柱進行洗脫得到的提取物有很好的鎮痛作用，同等劑量下，其鎮痛抑制率幾乎相當於苦玄參水提物鎮痛抑制率的2倍，並且在保證上述鎮痛效果的同時具備較好的消炎作用，而且提取物毒副作用小，非常 適合用於製備鎮痛藥物。
具體實施例方式下面以實施例對本發明作進ー步說明，但本發明並不局限於這些實施例。實施例II)準備取苦玄參幹藥材，粉碎至100目，備用；2)提取稱取粉碎的藥材5kg，加水煎煮提取三次(水的加入量分別為藥材重量的8倍、6倍、4倍，提取分別時間為2小吋、I. 5小吋、I. 5小吋)，合併藥液，得到提取液80. OL ；取其中的10. OL提取液濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物A 66. 2g；3)超濾將剩餘的提取液用截留分子量為10000的超濾膜超濾，收集超濾透過液，備用；同時將超濾截留物濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物B676. Sg ；4)大孔樹脂柱吸附分離超濾透過液過HP-20大孔樹脂柱，先用水洗樹脂柱至流出液無色，然後用6倍柱體積的45% (v/v)こ醇洗柱，收集醇洗脫液，濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物C 786. Og ;最後再用6倍柱體積的80% (v/v)こ醇洗脫，洗脫液濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物D 361. 3g。實施例2I)準備取苦玄參幹藥材，粉碎至80目，備用；2)提取稱取粉碎的藥材5kg，加水煎煮提取二次(水的加入量分別為藥材重量的8倍、6倍，提取分別時間為2小吋、I. 5小吋)，合併藥液，得到提取液60. OL ;取其中的10. OL提取液濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物A 65. 7g；3)超濾將剩餘的提取液用截留分子量為8000的超濾膜超濾，收集超濾透過液，備用；同時將超濾截留物濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物B674. Ig ；4)大孔樹脂柱吸附分離超濾透過液過DlOl大孔樹脂柱，先用水洗樹脂柱至流出液無色，然後用8倍柱體積的40% (v/v)こ醇洗柱，收集醇洗脫液，濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物C 782. Og ;最後再用5倍柱體積的80%(v/v)こ醇洗脫，洗脫液濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物D 364. 0g。實施例3I)準備取苦玄參幹藥材，粉碎至160目，備用；2)提取稱取粉碎的藥材5kg，加水煎煮提取二次(水的加入量分別為藥材重量的8倍、5倍，提取分別時間為2小吋、2. 0小吋)，合併藥液得到提取液58. OL ;取其中的10. OL提取液濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物A 64. Ig ；3)超濾將剩餘的提取液用截留分子量為5000的超濾膜超濾，收集超濾透過液，備用；同時將超濾截留物濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物B661. Sg;4)大孔樹脂柱吸附分離超濾透過液過AB-8大孔樹脂柱，先用水洗樹脂柱至流出液無色，然後用4倍柱體積的45% (v/v)乙醇洗柱，收集醇洗脫液，濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物C 782. Og ;最後再用7倍柱體積的80%(v/v)乙醇洗脫，洗脫液濃縮，真空乾燥，得到苦玄參提取物D 364. 0g。實驗例苦玄參鎮痛藥理活性部位篩選I、材料醋酸，由南通醋酸化工股份有限公司生產；二甲苯，由君安化工股份有限公司生產；伊文思藍，上海藍季生物技術有限公司生產； 阿司匹林，廣東康博通藥業實業有限公司生產；其餘試劑均為國產分析純；昆明種小鼠，雌雄各半，體質量18 22g，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，生產許可證號=SCXKUfi ) 2009-0004，常規飼養，自由進食飲水。提取物為本發明實施例I製備得到的苦玄參提取物A、B、C、D02、方法與結果2. I分組及給藥取昆明種小鼠140隻，雌雄各半，根據體重隨機分為14組，即空白對照組(給予等量生理鹽水)、陽性對照組(阿司匹林O. 2g/kg)、苦玄參提取物A給藥劑量(3. 0,2. O, I. Og/kg)，苦玄參提取物B、苦玄參提取物C、苦玄參提取物D的給藥劑量(均為O. 5，I. O, 2. Og/kg) ο 按 O. 2mL · (log)-1, ig,連續給藥 7d。2. 2小鼠醋酸所致扭體反應試驗於末次給藥後30min後，小鼠腹腔注射(ip) O. 6%醋酸溶液O. ImL · (IOgK1，記錄注射醋酸後15min內小鼠扭體次數。鎮痛抑制率=(空白組扭體次數_藥物組扭體次數)/空白組扭體次數X 100%。具體數據如表I所示。表I醋酸對小鼠所致扭體反應的影響n=10)
_^_(g/kg) 扭體次數_抑制|Γ:%)
空白對照組一21. 9 土 6. 8
阿司匹林組0.217.6土2. f'19.6
苦玄參提取物A 3·°8-9±2·6"59·4
口糊 A2·ο14·9±9.4*31.9
I.O16.4±10. 3*25. I苦玄參提取物 B f °19n 2 ^ia7412· 3
L UZU. 9 ±9· 74. b
0.519·4±10·611.4
. ,>.t tn-rr,, ,Uil ^2. 08. 2 + 6.62. 6
S S 取物 I I. ο 15.2 + 8. I*30.6
0.516. 5 ±13.4*24. 7
苦玄參提取物D 2·°賄8·17·8
L ο19·3±5.511.9
__O1S__21. 4 土 15. 7___
注與空白對照組比較*P < 0. 05，**P < 0. Ol0結果表明，苦玄參提取物A和苦玄參提取物C均可明顯降低抑制冰醋酸所致小鼠的扭體反應次數，與對照組比較差異有顯著性(P〈0.01或P〈0. 05)，其中以高劑量組效果最為突出；由表中數據可知，在同等劑量條件下，提取物C的鎮痛抑制率幾乎相當於苦玄參提取物A鎮痛抑制率的2倍；同等劑量條件下，提取物C的鎮痛抑制率至少相當於提取物D的2. 5 倍。2. 3小鼠腹腔毛細血管通透性試驗於末次給藥30min後，小鼠尾靜脈注射0. 5%伊文思藍(生理鹽水配製) 0.lmL.aOg)—1，並立即腹腔內注射0.6%冰醋酸(生理鹽水配製)0.2mL /只。20min後頸椎脫臼處死，用6mL生理鹽水衝洗腹腔,收集腹腔液,合併,定容至10mL,4000rpm離心IOmin,取上清液於590nm處測定吸光值(A)，計算通透性抑制率，通透性抑制率(％) =(空白對照組平均吸光值(A)-給藥組平均吸光值(A)) /空白對照組平均吸光值(A) X 100%。具體數據如表2所示。表2醋酸對小鼠腹腔毛細血管通透性的(？±らn=10)
權利要求
1.苦玄參提取物在製備鎮痛藥物中的應用，其中， 所述的苦玄參提取物的製備方法包括取苦玄參，加水煎煮提取，所得提取液過大孔樹脂柱，水洗樹脂柱，然後用體積濃度為40 50%的低碳醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮，乾燥，即得。
2.根據權利要求I所述的應用，其特徵在於所述苦玄參提取物的製備方法為取苦玄參，加水煎煮提取，所得提取液用截留分子量為5000 10000道爾頓的超濾膜超濾，超濾透過液過大孔樹脂柱，水洗樹脂柱至無色，然後用體積濃度為40 50%的低碳醇洗脫呈淺黃色，收集醇洗脫液，濃縮，乾燥，即得。
3.根據權利要求2所述的應用，其特徵在於所述苦玄參提取物的製備方法為取苦玄參，加水煎煮提取I 3次，合併藥液得到提取液，所得提取液用截留分子量為5000 10000道爾頓的超濾膜超濾，超濾透過液過大孔樹脂柱，水洗樹脂柱至無色，然後用體積濃度為40 50%的低碳醇洗脫呈淺黃色，收集醇洗脫液，濃縮，乾燥，即得。
4.根據權利要求I 3中任ー項所述的應用，其特徵在於在苦玄參提取物的製備方法中，所述大孔樹脂的型號為D101、AB-8、HPD400或HP-20。
5.根據權利要求I 3中任ー項所述的應用，其特徵在於在苦玄參提取物的製備方法中，所述用於洗脫的低碳醇的體積濃度為45%。
6.根據權利要求I 3中任ー項所述的應用，其特徵在於在苦玄參提取物的製備方法中，所述的低碳醇為甲醇、こ醇或丙醇。
全文摘要
本發明公開了苦玄參提取物在製藥中的應用，具體是在製備鎮痛藥物中的應用，其中，所述的苦玄參提取物的製備方法包括取苦玄參，加水煎煮提取，所得提取液過大孔樹脂柱，水洗樹脂柱，然後用體積濃度為40～50%的低碳醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮，乾燥，即得。申請人發現，上述提取物在同等劑量下的鎮痛抑制率幾乎相當於苦玄參水提物鎮痛抑制率的2倍，並且在保證上述鎮痛效果的同時具備較好的消炎作用，而且該提取物毒副作用小，非常適合用於製備鎮痛藥物。
文檔編號A61K36/80GK102641376SQ201210140048
公開日2012年8月22日 申請日期2012年5月8日 優先權日2012年5月8日
發明者盧鳳來, 吳建璋, 文永新, 李典鵬, 陳月圓, 黃永林 申請人:廣西壯族自治區中國科學院廣西植物研究所