β－咔啉在製備預防和/或治療眼部神經變性疾病的藥物組合物中的應用的製作方法

2023-12-08 20:03:46 2

專利名稱：β－咔啉在製備預防和/或治療眼部神經變性疾病的藥物組合物中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及β-咔啉在製備預防和/或治療眼部神經變性疾病的藥物組合物中的應用，同時涉及用於此用途的適宜的藥物組合物。
背景技術：
眾所周知，眼睛中穀氨酸鹽水平的升高會導致眼部神經組織產生嚴重的損傷。眼睛中穀氨酸鹽水平的升高導致視覺能力下降，包括導致失明。例如缺氧和/或眼內壓增大都可以引發眼內穀氨酸鹽水平的升高。
由此，眼內穀氨酸鹽水平是導致眾多眼睛疾病，諸如與年齡相關的黃斑變性、糖尿病性視網膜炎、青光眼、和眼局部缺血症候群的主要原因。
病理學上最重要的穀氨酸鹽受體是NMDA受體。NMDA受體以電壓-依賴型和配體-依賴型的形式同時起作用。在神經元正常的休止電位-60mV時，受體的離子通道被Mg2+離子封堵，配體不能激活該受體。當膜去極化時，Mg2+離開離子通道，受體就可以被配體激活，從而導致Ca2+和Na+的流入及K+的流出。
Ca2+對觸發細胞內的瀑流起了主要的作用，高濃度的Ca2+對細胞具有毒性。本文中也按照慣例使用術語「興奮性毒性」。NMDA受體——此處指導致大量神經變性疾病的穀氨酸鹽受體——過渡的激活導致Ca2+流入增加，如上文所述，對細胞具有毒性。由於所述Ca2+的流入，觸發細胞凋亡及此後的壞死，從而最終導致細胞死亡。
在神經變性疾病的晚期，被NMDA受體佔據的細胞大部分都會死亡。使用NMDA受體拮抗劑進行治療使NMDA受體再也不能進入這些細胞，從而隨著漸進性的神經變性，導致NMDA受體拮抗劑失去越來越多的有效性。
儘管人們希望給予NMDA受體拮抗劑以達到神經-保護目的，但是臨床試驗顯示在這種情況下會產生嚴重的副作用，從而使該方法不能在臨床上採用。此外，幾乎所有的NMDA受體拮抗劑都可導致中度至重度的精神病副作用。
因此，非常需要一種藥物組合物，它可用於眼睛的神經-保護治療，並能防止上述現有技術中的缺點。特別是，需要一種適用於神經-保護治療的藥物組合物，它能明顯降低或預防神經細胞的損傷和失活。
人們發現，使用含有GABA-受體-調節劑的藥物組合物可以克服上述現有技術中的缺點。
在現有技術中已經知道，使用GABA激動劑可降低眼內壓力。GABA激動劑有很大的缺點，而且，即使在沒有神經遞質時也會產生作用。因此激動劑具有很高的潛在毒性，激動劑劑量的增加可線性地導致抑制的增強，直至感覺喪失和呼吸抑制。調節劑效果的增加受到存在的介質數量的限制，並且不能任意地增加。

發明內容
根據本發明，通過在眼科學中使用GABA-受體-調節劑以預防和/或治療眼部神經變性疾病可實現本發明目的，GABA-受體-調節劑選自包括以下物質的組β-咔啉、巴比妥酸鹽、巴比妥酸衍生物和/或神經甾體。因此，本發明的目的是通過調節反相遞質系統，也就是GABA-能體系來實現穀氨酸鹽保護。
為實現本發明目的，可採用被認為是神經-保護性療法的方法，這些處置方法可降低或預防神經細胞損害和失活。
「GABA」表示γ-氨基-丁酸。GABA產生於穀氨酸鹽的代謝中，並且是哺乳動物神經系統中最重要的抑制性遞質。缺乏GABA或者GABA-能體系被抑制在大多數情況下將導致痙攣和癲癇性驚厥，直至細胞死亡。
GABA是穀氨酸鹽的生理性拮抗劑。激活GABA-受體將導致Cl-離子流入，它能改變逆向膜電位，並降低動作電位的概率。因此，GABA被描述為一種抑制性遞質。
為了不被任一特定理論所束縛，人們設想加強GABA-能體系可導致細胞的超極化。這將使得去極化或傳遞動作電位變得更為困難。只要當細胞膜去極化時，NMDA受體才對Ca2+而言是可透過的。換句話說，依據該理論，使用GABA-增強劑可抑制NMDA受體。通過細胞膜的超極化，可以阻止穀氨酸鹽受體-非依賴型、電位-依賴型Ca2+通道被激活。上述通道不被NMDA-受體拮抗劑所覆蓋。除其它因素之外，上述兩種作用是GABA-受體-調節劑根據本發明可用於眼部神經變性疾病的用途的原因。
由此，GABA-受體-調節劑可改變GABA對受體的親和力和有效性。缺乏GABA時，GABA-受體-調節劑是無效的。因此與激動劑相比，給予GABA-受體-調節劑是無害的，這是因為激動劑隨著給藥濃度的增加將逐漸的增加其作用效果，而不依賴於存在的神經遞質的量，從而導致細胞損傷直至細胞死亡。因此，與GABA激動劑相比，給予GABA-受體-調節劑所具有的毒性要小得多。
用於本發明目的的GABA-受體-調節劑是一些可以調節位於突觸狀GABA-受體上的GABA的親和力/有效性的物質。本發明所使用的GABA-受體-調節劑由此稱為正調節劑，即，它們可增強GABA的突觸親和力/有效性。
本發明要求保護的GABA-受體-調節劑的藥學可接受鹽包括，特別是β-咔啉、巴比妥酸鹽、巴比妥酸衍生物、神經甾體。
本發明中使用的特別適宜的β-咔啉(beta-carbolines)包括阿比卡尼(abecarnil)、3，4-二氫-β-咔啉(3，4-dihydro-beta-carboline)、吉多卡奈(gedocarnil)、1-甲基-1-乙烯基-2，3，4-三氫-β-咔啉-3-羧酸(1-methyl-1-vinyl-2，3，4-trihydro-beta-carboline-3-carboxylicacid)、6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-β-咔啉(6-methoxy-1，2，3，4-tetrahydro-beta-carboline)、N-BOC-L-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸(N-BOC-L-1，2，3，4-tetrahydro-beta-carboline-3-carboxylic acid)、替普他啉(tryptoline)、派諾啉(pinoline)、甲氧哈梅藍(methoxyharmalan)、四氫-β-咔啉(tetrahydro-beta-carboline(THBC))、1-甲基-THBC(1-methyl-THBC)、6-甲氧基-THBC(6-methoxy-THBC)、6-羥基-THBC(6-hydroxy-THBC)、6-甲氧哈梅藍(6-methoxyharmalan)、去甲哈爾滿(norharman)和/或3，4-二氫-β-咔啉(3，4-dihydro-beta-carboline)以及它們的藥學可相容鹽。
根據本發明，特別適用的巴比妥酸鹽(barbiturates)或巴比妥酸衍生物(barbituric acid derivatives)選自包括下列物質的組巴比克索克隆(barbexaclon)、二丙基巴比妥酸(dipropyl barbituric acid)、優納康(eunarcon)、環己烯巴比妥(hexobarbital)、甲基苯巴比妥(mephobarbital)、甲乙炔巴比妥(methohexital)、甲乙炔巴比妥鈉(Na-methohexital)、戊巴比妥(pentobarbital)、苯巴比妥(phenobarbital)、去氧苯巴比妥(primidone)、2，4，6(1H，3H，5)-普米定純(2，4，6(1H，3H，5)-pyrimidintrion)、仲丁巴比妥(secbutabarbital)和/或硫噴妥(thiopental)以及它們的藥學可相容的鹽。
根據本發明，特別適用的神經甾體(neurosteriods)選自包括下列物質的組別孕烯醇酮(allopregnenolone)、3-β-羥雄甾-5-烯-17-酮-3-硫酸酯(3beta-hydroxyandrost-5-en-17-on-3-sulfate)、脫氫表雄甾酮(dehydroepiandrosterone)、乙他諾龍(eltanolone)、炔雌醇(ethinylestradiol)、5-孕烯-3-β-醇-20-酮-硫酸酯(5-pregnen-3beta-ol-20-on-sulfate)、孕烯醇酮(pregnenolone)和/或黃體酮(progesterone)以及它們的藥學可相容的鹽類。
本發明最適用的GABA-受體-調節劑是氟硝西泮、咪達唑侖、苯巴比妥、阿比卡尼和/或脫氫表雄甾酮以及它們的藥學可相容的鹽類。
本文中藥學可相容的鹽類應當理解為在現有技術中所知的其藥學作用不會不利地影響活性成分的有效性，即不會以危及健康的方式減弱其活性的所有鹽類。
根據本發明，特別適用的藥學可相容鹽選自包括有機酸和/或無機酸以及它們衍生而來的鹼類的組。根據本發明，可以使用的是單價、二價和/或多價離子。特別優選的是鹼金屬和鹼土金屬，諸如Na+、Ca2+、K+和/或Mg2+。也可以使用有機胺類諸如單、二和三胺和乙醇胺的鹽。也可與咖啡因、氨丁三醇和/或相似的物質成鹽。當需要將硝基成鹽時，可以與任意的有機和/或無機物質諸如甲基亞碘鹽酸成鹽。更優選的鹽是與無機酸諸如氯酸、硫酸和/或磷酸形成的鹽。由此可形成1-、2-和3-元酸。
此外，本發明可用的所有可能的GABA-受體-調節劑的物理/化學異構體也是要求保護的。
根據本發明，GABA-受體-調節劑可用於眼科以預防和/或治療神經變性疾病。
GABA-受體-調節劑在視網膜疾病上的用途是特別優選的。
根據本發明，使用GABA-受體-調節劑治療早產兒視網膜病變，諸如早產兒視網膜視乳頭炎(retinopathia praematurorum)和/或治療晶狀體後纖維素增生是適用的。
根據本發明，GABA-受體-調節劑可用於治療視網膜的血管性疾病，諸如血管痙攣性視網膜病、動脈硬化性視網膜病、驚厥性視網膜病、由主動脈頸動脈閉合引起的疾病、靜脈周炎性視網膜、糖尿病性視網膜病、非增生性糖尿病性視網膜病、增生性糖尿病性視網膜病、糖尿病性黃斑、由放療創傷引起的與癌症-關聯的視網膜病和/或視網膜病。
根據本發明，GABA-受體-調節劑也可用於由靜脈和/或動脈血管閉塞引起的疾病，諸如由腦靜脈閉塞、中央靜脈閉塞、動脈閉塞、一時性黑蒙、視網膜小靜脈閉塞、慢性眼局部缺血、鐮刀狀細胞性視網膜病、眼部局部缺血症候群和/或滲出性視網膜炎(retinitis exsudativa)引起的疾病。
GABA-受體-調節劑還可用於預防和/或治療視網膜黃斑變性，諸如溼性和乾性視網膜黃斑變性、獲得性視網膜黃斑變性、年齡相關性視網膜黃斑變性、中央漿膜視網膜病(retinopathia centralis serosa)、近視性黃斑變性、囊狀黃斑水腫、脈管狀條紋、中毒性黃斑病、黃斑小孔、其它原因導致的滲出性黃斑病、中央漿膜氯視網膜病(chlorioretinopathy centralisserosa)、囊狀黃斑水腫、亞黃斑滲血(submacular bleeding)、遺傳性黃斑及視網膜變性、青少年視網膜黃斑變性、卵黃性視網膜黃斑變性、白化病、貯積病、黑蒙性痴呆、神經醯胺類失常、泰薩氏幼年型黑朦白痴病、尼曼-皮克(Niemann-Pick)病、神經節苷脂沉澱症、高雪氏病、斯皮梅爾-沃格特-斯託克(Spielmeyer-Vogt-Stock)病和/或山霍夫氏病。
根據本發明，GABA-受體-調節劑也可用於預防和/或治療創傷性視網膜變化，諸如眼睛挫傷、穿孔性眼睛損傷、鐵質沉著/偏身穿出性供給失調、銅屑沉著、燒傷、創傷性視網膜疾病和/或光線引起的視網膜損傷。
此外，根據本發明，GABA-受體-調節劑也可用於視網膜劈裂。
根據本發明，GABA-受體-調節劑也適用於預防和/或治療脈絡膜疾病，諸如玻璃樣沉積(hyalin deposits)和/或無脈絡膜。
根據本發明，GABA-受體-調節劑也可用於視神經疾病，包括中毒導致的視神經損傷，諸如菸酒損傷、甲醇導致的損傷、乙胺丁醇導致的損傷、奎寧、砷、鉛和/或溴導致的損傷。
根據本發明，GABA-受體-調節劑也可用於前局部缺血性視神經病，諸如乳頭卒中和/或霍爾頓氏症候群。
GABA-受體-調節劑也可用於預防和/或治療視神經萎縮，諸如創傷性視神經萎縮、腫瘤壓迫導致的視神經萎縮、遺傳性視神經萎縮、肝臟性視神經萎縮、繼發性視神經萎縮、視神經乳頭/球後視神經炎導致的視神經萎縮、原因不明的視神經萎縮、青光眼性視神經萎縮和/或視神經乳頭變性。
在一個較優選的具體實施方式
中，根據本發明，GABA-受體-調節劑用於治療青光眼，諸如原發性青光眼、東德斯(Donders′)青光眼、原發性東德斯(Donders′)青光眼、血壓正常型青光眼、角閉型青光眼、急性角閉型青光眼、間歇性角閉型青光眼、亞急性角閉型青光眼、慢性角閉型青光眼、高原虹膜症和/或小眼球。
根據本發明，GABA-受體-調節劑也可用於先天性青光眼和早產兒青光眼，諸如房室虹膜發育不全的角度改變、洛氏(Lowe′s)症候群、斯特奇-韋博(Sturge-Weber)症候群、多發性神經纖維瘤、魯賓施泰因-塔伊貝(Rubinstein-Taybi)症候群、皮埃爾·魯賓(Pierre Rubin)症候群、奧塔氏(Ota′s)痣、三體症(trisomy)、馬爾凡(Marfan)症候群、特納(Turner′s)症候群、無虹膜、高胱氨酸、眼內腫瘤、眼眶內淋巴管瘤、普拉馬圖若姆(praematurorum)視網膜病、頑固性原發性玻璃體增生、晶狀體異位、眼內炎症、可的松療法、近視伴隨色素層青光眼、風疹性胚胎病(rubellaembryopathy)、內障摘出術和/或用於麻醉治或急性創傷。
根據本發明，GABA-受體-調節劑的應用也適用於治療青光眼症候群，諸如青光眼伴隨無晶狀體和假性無晶狀體、糖尿病伴隨青光眼、青光眼和內皮性營養不良(dystrophia endotheliasis)、分泌過多型青光眼、妊娠期青光眼、高度近視和/或青少年青光眼。
根據本發明，GABA-受體-調節劑還可用於治療繼發性青光眼，諸如創傷性及術後青光眼、繼發性東德斯(Donders′)青光眼、繼發性角閉型青光眼、類固醇-誘發青光眼、炎症後青光眼、晶狀體溶液性青光眼、波斯納-施洛斯曼(Posner-Schlossman)症候群、異色性睫狀體炎、影細胞青光眼、溶血性青光眼、多發性神經纖維瘤、鐵質沉著病、脈管再生導致的青光眼、給予可的松導致的青光眼、色素層青光眼、假性剝脫性青光眼，前眼色素層炎伴隨青光眼、富克斯(Fuchs)異色伴隨青光眼、格蘭特(Grant′s)症候群、挫傷後青光眼、非-創傷性房室角度異常、虹膜細胞破碎性青光眼、矽青光眼、晶狀體-相關的青光眼、晶狀體局部性青光眼、晶狀體形態性青光眼、由游離透鏡材料導致的青光眼、假性剝脫性青光眼、晶狀體源性葡萄膜鹽、前葡萄膜炎伴隨青光眼、惡性青光眼和/或用於治療鞏膜血管壓增加導致的青光眼。
根據本發明，還發現GABA-受體-調節劑適用於治療眼壓過高，例如原發性和繼發性的眼壓過高。
根據本發明，含GABA-受體-調節劑的藥物組合物可以液體、凝膠和/或固體形式給藥。優選地，如果含GABA-受體-調節劑的藥物組合物是以自由流動的形式存在的，則可以滴劑的形式給藥；如果是以固體的形式存在的，則可以局部地或全身性地給藥。優選地，按照整個組合物的量計，提供給適於使用的藥物組合物濃度為0.0001-5(重量)％的GABA-受體-調節劑。
根據本發明，局部給藥優於全身給藥，因為局部給藥的話，實際上更高濃度的活性成分可以直接作用於眼睛發揮作用。
本發明中可用的含GABA-受體-調節劑的眼科組合物可含有防腐劑、肌肉彈性調節劑、調節pH值的緩衝劑、抗氧劑、粘度-調節物質和/或其它常規使用的輔料。
優選的防腐劑選自包括苯扎氯銨、氯丁醇、硫柳汞、乙酸苯汞、溴化十六烷基三甲銨、EDTA和/或硝酸苯汞的組。
根據本發明，適宜的輔助物料選自包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素、泊洛沙姆、羧甲基纖維素、羥乙基纖維素、環糊精和/或水的組。
肌肉彈性調節劑選自包括鹽類，優選氯化鈉和/或氯化鉀、甘露糖醇、甘油以及相似物質的組。
可使用乙酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽以及硼酸鹽緩衝劑調節pH值。如果需要，也可以自然地使用酸和/或鹼。
眼科可接受的抗氧化劑選自包括偏亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、乙醯半胱氨酸、丁醇改性的羥基苯甲醚和/或丁醇改性的羥基甲苯的組。
卡波沫特別適用於可用作粘度調節物質。
根據本發明，在使用含GABA-受體-調節劑的藥物組合物時，GABA-受體-調節劑可以局部和/或全身性給藥用以進行神經保護性的預防和/或用以治療哺乳動物，特別是人類的眼睛。在局部使用時，所述含GABA-受體-調節劑的藥物組合物以眼科可相容的製劑形式，如滴眼劑、眼用凝膠或眼用軟膏的形式使用。如果藥物組合物在急性或慢性的使用中都不會對眼睛產生有害或危險的影響，那麼該藥物組合物是非常適用的。特別優選的藥物組合物是那些不會引起眼睛刺激，諸如炎症、騷癢等類似反應的藥物組合物。
特別優選在眼睛上使用一種溶液或凝膠形式的含GABA-受體-調節劑的藥物組合物。
在細胞培養物中以及剛剛製備的大鼠和兔子視網膜細胞中，實驗顯示，使用GABA-受體-調節劑可使由於興奮性毒性發作而失活的細胞數量顯著下降。


圖1顯示，在給予阿比卡尼10、30和60分鐘後，與對照組相比，經培養的大鼠皮質細胞培養物中臨死細胞數量的減少情況。
圖2-3顯示，在向麻醉大鼠眼球注射100nM的NMDA溶液後，再給予苯巴比妥(圖2)和脫氫表雄甾酮(DHEA；圖3)之後，大鼠視網膜標本中死亡細胞的數量。
具體實施例方式
本發明適用的藥物組合物含有0.0001-5(重量)％，優選0.001-3(重量)％，更優選0.01-2(重量)％，進一步優選0.05-1.5(重量)％，最優選0.1-1(重量)％的活性成分，以整個藥物組合物計。
防腐劑的比例為0-0.5(重量)％，優選＞0-0.1(重量)％，優選0.001-0.3(重量)％，更優選0.01-0.05(重量)％，以整個藥物組合物計。
輔助物料的比例為0-99(重量)％，優選＞0-80(重量)％，優選1-50(重量)％，更優選為5-40(重量)％，最優選10-30(重量)％，以整個藥物組合物計。
調整等滲性的物質的比例為1-10(重量)％，優選2-8(重量)％，更優選3-5(重量)％，以整個藥物組合物計。
緩衝物質的比例為0.01-10(重量)％，優選0.05-5(重量)％，優選0.01-3(重量)％，更優選0.1-2(重量)％，以整個藥物組合物計。
含GABA-受體-調節劑的藥物組合物的pH值優選在4.5-7.5之間，優選在5-7.3之間，優選在6-7.1之間，更優選在6.5-7.0之間。
抗氧劑的比例優選為0-10(重量)％，優選＞0-8(重量)％，優選為0.005-5(重量)％，更優選0.05-2(重量)％，進一步優選0.1-1(重量)％，以整個藥物組合物計。
適宜的含GABA-受體-調節劑的藥物組合物列於以下實施例中本發明中使用的活性成分的性質β-咔啉是親脂性的苯巴比妥鈉和戊巴比妥鈉是親水性的甾體是親脂性的實施例1滴眼劑(常規配方)藥物0.0001-5％防腐劑 0-0.1％輔料0-40％等滲性調節物質 1-10％緩衝劑 0.01-10％將pH值調節至4.5-7.5的物質 適量抗氧劑 適量實施例2水性滴眼劑1ml溶液中含有藥物3.42BAC 0.1二水合磷酸二氫鈉8.15十二水合磷酸氫二鈉 29.21注射用水加至1000實施例3眼用凝膠苯巴比妥鈉 0.001羥乙基纖維素20BAC 0.1Na-EDTA 1NaCI9NaOH(1摩爾溶液) 適量注射液加至1000實施例4片劑阿比卡尼 200mg咖啡因50.00mg玉米澱粉 340mg微晶纖維素60mg棕櫚酸硬脂精 5mg總計655.00mg測試1從16-18天大的大鼠胎兒上分離出來的皮質細胞在35mm的培養皿上培養。在開始的7天內所含的營養介質是L-穀氨酸鹽(4mM)、葡萄糖(6g/l)、青黴素(100U/ml)、鏈黴素(100μg/ml)以及10％的富含激素的基質，該基質中含轉鐵蛋白(1mg/ml)、胰島素(250μg/ml)、腐胺(600μM)、亞硒酸鈉(0.3μM)、黃體酮(0.2μM)和雌二醇(0.1μM)。培養皿儲存在加熱到37℃的空氣(5％CO2和95％O2)中。7天以後，將富含激素的營養基質虹吸除去，換以另一種除了不含激素之外其它含量都相同的基質。為了製備對照組(組1)，在一半的培養皿中再添加營養基質10nm L-穀氨酸鹽，並在正常有毒條件下培養4小時。
為了確定神經保護性作用，向另一半的培養皿再添加營養基質阿比卡尼500nm和10nm L-穀氨酸鹽(組2)，同樣也在相同正常有毒條件下培養。通過確定注入到細胞間質中的乳酸-脫氫酶(LDH)的量來確定存活或失活細胞的數量。通過光譜測定法測定NADH在340nm處的代謝，來確定LDH的活性。
在圖1的圖表中，所測定的數值情況如下所測定的值描述了測試後死亡細胞的數量與測試前細胞數量的百分比關係。數值比例越大表明失活細胞的比例越高，100％的數值則表示所有細胞都失活。
測試2為了避免系統誤差，在每個動物的右眼上進行對照測定(組1)，在左眼上進行物質測定(組2)。
組1在對照組(右眼)中，使用與組2中相同的劑量，除了將其中的含500nM活性成分苯巴比妥的藥物溶液替換為不含活性成分的相同的藥物溶液進行注射，在向眼球注射時，向對照眼睛注射不含藥物成分含100nM NMDA的5μl磷酸鈉緩衝液。
組2在給予NMDA注射的前一天，向50％重量為200-250g的大鼠(雌性同胞)給予5μl藥物溶液的藥滴兩次，一次在清晨，一次在傍晚，均向左眼給藥。每次給藥時在給予一滴藥物溶液後過30分鐘後再給第二滴。在注射穀氨酸鹽的早晨，先給大鼠注射5μl藥物溶液，然後用0.3ml kg-1海波諾姆(Hyponorm)(Janssen，Grove，U.K.)麻醉。30分鐘後，再次向每隻眼球中注射5μl藥物溶液。15分鐘後，將含100nM NMDA的5μl磷酸鈉溶液緩衝液注射到玻璃體中。在同一天的中午，給每隻眼睛注射2滴藥物溶液。在以後的4天裡，分別在早上和晚上向眼睛注射2滴藥物溶液。
在第四天中午，再次將動物麻醉(0.3ml kg-1Hyponorm，Janssen，Grove，U.K.)並摘除視網膜以作進一步的免疫組織學檢查。操作最後將視網膜置於2％多聚甲醛溶液中45分鐘，然後在30％的蔗糖溶液中冷凍。切取距離視神經約5mm的冰凍切片(10μm)，再放在明膠包裹的載玻片上觀察。然後將切片進一步地進行提(Thy)-1定位。
測試3測試3按照測試2的方式進行，除了將500nM的苯巴比妥替換為500nM的活性成分脫氫表雄甾酮(DHEA)。
測試4測試4按照測試3的方法進行，除了將500nM的脫氫表雄甾酮(DHEA)替換為500nM的活性成分咪達唑侖。
在圖2和3的圖表中，測定值情況如下測定值描述了試驗後死亡細胞的數量與測試前細胞總數量的百分比關係。數值越大表明失活細胞的比例越高，100％的數值則表示細胞完全失活。
權利要求
1.β-咔啉在製備眼科領域中用於預防和/或治療眼部神經變性疾病的藥物組合物中的應用。
2.如權利要求1所述的應用，這些疾病包括視網膜病、視網膜血管病、靜脈和動脈血管閉塞導致的疾病、黃斑變性、創傷性視網膜改變、視網膜劈裂、脈絡膜疾病、視神經疾病、前局部缺血性視神經病、青光眼、原發性青光眼、先天性青光眼、早產兒青光眼、單純性青光眼、繼發性青光眼和/或眼壓過高。
3.如權利要求1所述的應用，其中β-咔啉為阿比卡尼及其藥學可接受的鹽類。
4.如權利要求1所述的應用，其中β-咔啉的含量為0.0001-10％，以整個藥物組合物重量計。
5.如權利要求1所述的應用，其中β-咔啉的含量為0.01-5％，以整個藥物組合物重量計。
6.如權利要求1所述的應用，其中β-咔啉的含量為0.1-3％，以整個藥物組合物重量計。
7.如權利要求1所述的應用，其中以藥物上的活性量存在的β-咔啉的含量為0.001-1g。
8.如權利要求1所述的應用，其中以藥物上的活性量存在的β-咔啉的含量為0.01-0.8g。
9.如權利要求1所述的應用，其中以藥物上的活性量存在的β-咔啉的含量為0.05-0.6g。
10.如權利要求1-9中任一項所述的應用，用於全身性和/或局部給藥，其中藥物組合物以液體、凝膠和/或固體的形式存在。
11.如權利要求10所述的應用，其中藥物組合物含有用於調節肌肉彈性的添加劑、調節pH值的緩衝劑、眼科可接受的抗氧化劑、凝膠、防腐劑和/或調節粘度的物質。
全文摘要
本發明涉及β－咔啉在製備眼科領域用於預防和/或治療眼部神經變性疾病的藥物組合物中的應用。
文檔編號A61P27/00GK1813723SQ200510130289
公開日2006年8月9日 申請日期2002年2月13日 優先權日2001年2月13日
發明者克裡斯託費爾·布魯克納, 克裡斯託夫·凱斯勒, 科妮莉亞·賴默爾·埃維亞, 赫爾穆特·阿爾米爾 申請人:曼·格哈德博士化學藥物製造股份有限公司