一種複合培養基及其用於快速檢測菌落總數的方法
2023-05-31 20:14:36 2
一種複合培養基及其用於快速檢測菌落總數的方法
【專利摘要】本發明涉及一種複合培養基及其用於快速檢測菌落總數的方法，屬於食品中菌落總數的檢測方法領域。一種複合培養基，其特殊之處在於由以下按重量百分配比的原料混合而成：胰蛋白腖10～20％、瓊脂粉10～30％、牛肉膏1～10％、酵母浸膏1～10％、葡萄糖1～10％、卵磷脂0.1～0.9％、複合維生素B0.1～0.9％、吐溫6010～40％。本發明的複合培養基及其用於快速檢測菌落總數的方法，與已有技術相比具有以下優點：採用快速檢測菌落總數的複合培養基可快速檢測各類食品中的菌落總數，檢出率比市售培養基(平板計數瓊脂)高20％，菌落形態較大，並且比市售菌落總數檢測試紙價格低，適合大範圍推廣使用。
【專利說明】一種複合培養基及其用於快速檢測菌落總數的方法
【技術領域】 [0001]本發明涉及一種複合培養基及其用於快速檢測菌落總數的方法，屬於食品中菌落總數的檢測方法領域。
【背景技術】
[0002]菌落總數是食品樣品在一定條件下(如培養基、培養溫度和培養時間等)培養後，所得每g(ml)樣品中形成的微生物菌落總數。目前，對菌落總數的檢測試劑，通常為平板計數瓊脂，多數細菌在該瓊脂上培養48h才能形成肉眼可分辨的菌落，耗費時間較長；採用菌落總數快速檢測試紙可解決該問題，但快速檢測試紙價格昂貴，不適合普遍應用，且國家標準中並未用快速檢測試紙檢測菌落總數的標準。
【發明內容】
[0003]針對現有技術中存在的不足，本發明的目的在於提供一種既經濟又能快速檢測菌落總數的複合培養基及其用於快速檢測菌落總數的方法。
[0004]本發明是通過以下技術方案實現的:
[0005]一種複合培養基，其特殊之處在於由以下按重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白腖10~20%、瓊脂粉10~30%、牛肉膏I~10%、酵母浸膏I~10%、葡萄糖I~10%、卵磷脂0.1~0.9%、複合維生素B0.1~0.9%、吐溫6010~40% ；
[0006]所述複合培養基，由以下按重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白腖15~20%、瓊脂粉20~30%、牛肉膏6~8%、酵母浸膏8~10%、葡萄糖8~10%、卵磷脂0.3~
0.9%、複合維生素B0.3~0.9%、吐溫6020~40% ;
[0007]所述複合培養基，由以下按最佳重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白腖17.8 %、瓊脂粉26 %、牛肉膏7 %、酵母浸膏9 %、葡萄糖9 %、卵磷脂0.6 %、複合維生素B0.6%、吐溫 6030% ；
[0008]上述複合培養基用於快速檢測菌落總數的方法，其特殊之處在於包括以下工藝步驟:
[0009]a.將上述複合培養基中各組分(無先後順序)加入適量水中，煮沸溶解至澄清溶液，調節pH值為7.0~7.5，高壓滅菌後備用；
[0010]b.稱取樣品25±0.1g,加入無菌均質瓶中，加入無菌稀釋液至250g,均質lmin_2min,稀釋度為 I:10 ；
[0011]C.取上述b步驟的稀釋液1ml，放入滅菌平皿中，傾倒a步驟的複合培養基溶液，於36°C ±1°C的培養箱內培養12-15h ；
[0012]d.計數，得菌落總數的檢測結果。
[0013]所述a步驟中的高壓滅菌條件為:溫度115°C，時間15min。
[0014]本發明的複合培養基各成分作用原理如下:
[0015]胰蛋白腖:低分子肽，游離胺基酸，提供營養基礎；[0016]酵母浸膏:提供維生素和胺基酸；
[0017]葡萄糖:提供碳源；
[0018]吐溫60:表面活性劑和細菌活化劑，可作用於細菌細胞膜某些受體，使休眠狀態的細菌迅速感知外界適宜的生長環境，快速生長，同時降低細菌表面和培養基的表面張力，使營養物質更易吸收；
[0019]瓊脂粉:凝固劑；
[0020]卵磷脂:營養強化劑，使休眠狀態的細菌快速生長。
[0021]牛肉膏:提供營養物質和微量的金屬兀素；
[0022]複合維生素B:提供B族元素，促進芽孢生長。
[0023]本發明的複合培養基及其用於快速檢測菌落總數的方法，與已有技術相比具有以下優點:採用快速檢測菌落總數的複合培養基可快速檢測各類食品中的菌落總數，檢出率比市售培養基(平板計數瓊脂)高20%，菌落形態較大，易於計數，並且比市售菌落總數檢測試紙價格低，適合大範圍推廣使用。
【具體實施方式】
[0024]為了更好地理解與實施，下面結合實施例詳細說明本發明。
[0025]實施例1 [0026]準確地稱取胰蛋白腖4.0g、瓊脂粉6.0g、牛肉膏2.0g、酵母膏2.0g、葡萄糖2.0g、卵磷脂0.2g，複合維生素B0.2g、吐溫608.0g,均勻混合後即為複合培養基。
[0027]實施例2
[0028]準確地稱取胰蛋白腖10.0g、瓊脂粉15.0g、牛肉膏5.0g、酵母膏5.0g、葡萄糖
5.0g、卵磷脂0.5g,複合維生素B0.5g、吐溫6020.0g,均勻混合後即為複合培養基。
[0029]上述複合培養基用於快速檢測菌落總數的方法，包括以下步驟:將上述實施例1的複合培養基24.4g，加入到400ml蒸餾水中加熱煮沸至完全溶解，然後調節pH值為7.0~
7.5，高壓滅菌(115°C，15min)備用；再稱取25±0.1g樣品，加入無菌均質瓶中，加入無菌稀釋液至250g，均質lmin-2min，使樣品分散良好，此時稀釋度為1:10 ;取1.0mL上述稀釋液，分別放入2個滅菌平皿中,傾倒菌落總數複合培養基，於36°C ± 1°C的培養箱內培養12h,計數，得菌落總數的檢測結果。
[0030]本發明未詳細說明的內容均為現有技術，本領域技術人員可以從本實施例及現有技術獲得啟發，進行變形得到其它實施例。因此，本發明的保護範圍應該根據權利要求的保護範圍來確定。
【權利要求】
1.一種複合培養基，其特徵在於由以下按重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白腖10~20%、瓊脂粉10~30%、牛肉膏I~10%、酵母浸膏I~10%、葡萄糖I~10%、卵磷脂0.1~0.9%、複合維生素B0.1~0.9%、吐溫6010~40%。
2.根據權利要求1所述一種複合培養基，其特徵在於由以下按重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白腖15~20%、瓊脂粉20~30%、牛肉膏6~8%、酵母浸膏8~10%、葡萄糖8~10 %、卵磷脂0.3~0.9 %、複合維生素B0.3~0.9 %、吐溫6020~40 %。
3.根據權利要求1所述一種複合培養基，其特徵在於由以下按最佳重量百分配比的原料混合而成:胰蛋白腖17.8 %、瓊脂粉26 %、牛肉膏7 %、酵母浸膏9 %、葡萄糖9 %、卵磷脂0.6%、複合維生素B0.6 %、吐溫6030 %。
4.權利要求1或2或3所述的複合培養基用於快速檢測菌落總數的方法，其特徵在於包括以下工藝步驟: a.將上述複合培養基中各組分(無先後順序)加入適量水中，煮沸溶解至澄清溶液，調節PH值為7.0~7.5，高壓滅菌後備用； b.稱取樣品25±0.1g,加入無菌均質瓶中，加入無菌稀釋液至250g,均質lmin-2min,稀釋度為1:10 ; c.取上述b步驟的稀釋液lml，放入滅菌平皿中， 傾倒a步驟的複合培養基溶液，於360C ±1°C的培養箱內培養12-15h ； d.計數，得菌落總數的檢測結果。
5.根據權利要求4所述的複合培養基用於快速檢測菌落總數的方法，其特徵在於所述a步驟中的高壓滅菌條件為:溫度115°C，時間15min。
【文檔編號】C12Q1/06GK103614452SQ201310572487
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年11月13日 優先權日:2013年11月13日
【發明者】趙瑞連, 徐世明, 郭光平, 張建梅, 厲建軍, 王光傑, 宋玉潔, 孫曉紅 申請人:煙臺市喜旺食品有限公司