一種促進成骨細胞骨形成的紅景天提取物的製作方法
2023-06-10 12:21:46 1
一種促進成骨細胞骨形成的紅景天提取物的製作方法
【專利摘要】本發明提供了一種促進成骨細胞骨形成的紅景天提取物及其提取方法。該提取方法為：將乾燥的紅景天用純淨水煎煮提取，提取液濃縮後用有機溶劑萃取，濃縮成膏狀，膏狀提取物再用打孔吸附樹脂分離，即可得到本發明的紅景天提取物。本發明的紅景天提取物具有很好的促進成骨細胞骨形成的作用，並來源於天然藥物，副作用少，使用安全，提取方法簡單，易於工業化生產。
【專利說明】—種促進成骨細胞骨形成的紅景天提取物
【技術領域】
[0001]本發明涉及紅景天提取物，尤其是涉及促進成骨細胞骨形成的紅景天提取物。
【背景技術】
[0002]隨著世界人口老齡化日趨明顯，骨質疏鬆症的發病率逐年升高，由骨質疏鬆症所致的骨痛和骨折直接影響了中老年人的生存質量，已經成為嚴峻的社會問題。人體的骨骼通過不斷的骨生成和骨吸收，一直在進行著改造，這種改造叫骨改造。在骨改造的過程中，有骨生成作用的成骨細胞和骨破壞作用的破骨細胞起重要的作用。兩種細胞相互協調，骨形成和骨吸收處於一種動態平衡，維持骨質的不斷更新。在年輕時骨生成和骨吸收保持著良好的平衡，但隨著年齡的增長，由於各種原因該平衡傾向於骨吸收，長時間持續該狀態的話會使得骨組織變脆，導致發生骨質疏鬆症、骨折等各種骨疾病。
[0003]針對骨質疏鬆症的發病機理，目前主要有兩種治療骨質疏鬆症的方案:抑制破骨細胞的形成和骨吸收活性，還有一個是促進成骨細胞的形成和骨形成活性。目前，對於骨質疏鬆症的治療，目前已開發出多種藥物，但大部分藥物為針對於破骨細胞，而針對於成骨細胞的藥物很少見，而且開發出的藥物大部分為合成藥物，價格昂貴，長期服用引起多種副作用，因而使用上都有一定的局限性。比起合成新藥，天然藥物成分具有安全，價廉的優點。
【發明內容】
[0004]本發明的目的在於提供一種來源於天然藥物的，具有促進成骨細胞骨形成的植物性藥物。
[0005]為了實現本發明的目的，本發明採用以紅景天為天然藥物資源，通過多種溶劑提取法和分離方法以及在提取`、分離過程中緊密配合得到的提取物或組分對成骨細胞形成的作用的實驗，最終得到具有顯著促進成骨細胞骨形成的紅景天提取物。
[0006]具有促進成骨細胞骨形成的紅景天提取物的提取方法為如下:
[0007]①將紅景天挑選去雜後，清洗，切成5_20mm的小塊，浸泡，加入3-10倍純淨水煎煮1-3次,過濾,合併濾液；
[0008]②步驟①的濾液濃縮成一半，然後用有機溶劑萃取，萃取液濃縮，得浸膏I ;
[0009]③將浸膏I用大孔樹脂柱精製，用水-乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得浸膏II ;
[0010]④將浸膏II冷凍乾燥，得粉末狀紅景天提取物。
[0011]本發明的優選技術方案中，在步驟②所述的有機溶劑為含有1-6個碳原子的醇，烷或酯類。
[0012]本發明的另一優選技術方案中，步驟③所述的水-乙醇溶液洗脫順序依次為:水，20-40%乙醇，40-60%乙醇洗脫，100%乙醇洗脫。
[0013]紅景天(Rhodiola rosea L.)為我國傳統中藥,分布於我國廣泛地區和地域,其資源很豐富。紅景天具有滋補強壯藥，消除疲勞，抵禦寒冷的作用。現代藥理研究表明，紅景天主要含有紅景天甙、35種微量元素，18種胺基酸，維生素A、D、E和抗衰老活性超氧化物，其營養成分齊全且配伍合理，具有抗疲勞，加強記憶力和注意力等多種功效。
[0014]本發明的紅景天提取物具有很好的促進成骨細胞骨形成的作用，並來源於天然藥物，副作用少，使用安全。
[0015]本發明的紅景天提取物，提取方法簡單，易於工業化生產。
【具體實施方式】
[0016]下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。
[0017]實施例1
[0018]1.紅景天提取物的提取
[0019]①將紅景天挑選去雜後，清洗，切成5-20_的小塊，浸泡，加入5倍純淨水煎煮2次，每次1.5小時，過濾，合併濾液；
[0020]②步驟①的濾液濃縮成一半，然後依次用石油醚、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇萃取，其中將收集正丁醇萃取液，濃縮，得浸膏I;
[0021]③將浸膏I用大孔樹脂柱精製，先用水洗，然後依次用25%乙醇，50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，減壓濃縮，得浸膏II ；
[0022]④將浸膏II冷凍乾燥，得粉末狀紅景天提取物。
`[0023]2.紅景天提取物對成骨細胞形成的作用
[0024]成骨細胞的形成體系:採用小鼠顱骨細胞MC3T3-E1細胞在維生素D3和BMP-2的存在下，在a -MEM培養液中培養3周左右，用von-kossa鈣化染色法測定成骨細胞的鈣化程度，即成骨細胞的骨形成能力。
[0025]將紅景天提取物溶於a -MEM培養液中，配製成一定濃度，然後加入到MC3T3-E1細胞的成骨細胞形成體系中，在5% 二氧化碳、37°C的細胞培養箱中培養21天，用von-kossa鈣化染色法進行染色，在顯微鏡下數染成黑色團塊的鈣化結節的個數，結果見表1.[0026]表1.紅景天提取物對成骨細胞骨形成的影響
____?丐化結節數促進率(％)
紅景天 I ug/ml25115.5
[0027]提取物3 ug/ml__Z7__28^_
__10 ug/ml 301__42_
—對照組I 212I
[0028]表1的試驗中:MC3T3_E1細胞以IX IO5/孔的濃度接種於24孔板，維生素D3和BMP-2的存在下的a -MEM培養液中培養21日。
[0029]表中紅景天提取物的濃度為在細胞培養液中的最終濃度，每個濃度設3個孔，鈣化結節數為3個孔的平均數。
[0030]表中對照組為在紅景天提取物濃度為10ug/ml時使用的溶劑，作為溶劑對照。
[0031]表中促進率為相對於對照組計算的紅景天提取物對成骨細胞鈣化結節形成的促進率。
[0032]表1的結果可知，紅景天提取物顯著促進成骨細胞的骨形成能力，隨著濃度的增加其促進率也增加。`
【權利要求】
1.一種促進成骨細胞骨形成的紅景天提取物，其特徵在於用如下方法製備得到: ①將紅景天挑選去雜後，清洗，切成5-20mm的小塊，浸泡，加入3-10倍純淨水煎煮1_3次,過濾,合併濾液； ②步驟①的濾液濃縮成一半，然後用有機溶劑萃取，萃取液濃縮，得浸膏I; ③將浸膏I用大孔樹脂柱精製，用水-乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得浸膏II； ④將浸膏II冷凍乾燥，得粉末狀紅景天提取物。
2.根據權利要求1所述的紅景天提取物，其特徵在於在步驟②所述的有機溶劑為含有1-6個碳原子的醇，烷或酯類。
3.根據權利要求1所述的紅景天提取物，其特徵在於步驟③所述的水-乙醇溶液洗脫順序依次為:水,20-40%乙醇，40-`60%乙醇洗脫，100%乙醇洗脫。
【文檔編號】A61P19/10GK103816206SQ201210466159
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2012年11月16日 優先權日:2012年11月16日
【發明者】邢秋苓 申請人:邢秋苓