偶氮介體的製作方法

2023-05-26 03:51:06 1

偶氮介體的製作方法
【專利摘要】本申請涉及偶氮化合物和它們作為診斷方法中的介體的用途。本申請還涉及包含這類偶氮化合物的檢測試劑、試劑盒和測試元件。
【專利說明】偶氮介體
[0001]說明書
本申請涉及偶氮化合物和它們作為診斷方法中的介體的用途。本申請還涉及包含這類偶氮化合物的檢測試劑、試劑盒和測試元件。
[0002]診斷元件是用於測定被分析物的臨床相關方法的重要部件。在這方面的主要焦點特別是使用酶基系統測定的被分析物的快速和精確測量。在這種方法中，使要測定的被分析物與通常以催化量使用的合適的酶、輔酶和任選介體接觸，其中輔酶被物理化學改變，例如氧化或還原並可隨後藉助合適的技術檢測。
[0003]如果另外使用介體，其將通常在被分析物的酶法轉化過程中由物理化學改變的輔酶釋放的氧化還原等效物轉移到光學指示劑或電極的導電部件上以例如光度學或電化學檢測該過程。測量值的校準隨後得出與測定的被分析物的濃度的直接關係。
[0004]在測試元件中用於測定被分析物的介體是現有技術中已知的並且其中包括亞鐵氰化鉀、二茂鐵衍生物、醌類、噁嗪類、吩嗪類和噻嗪類。例如在Takaminami (MaterialsIntegration (2008), 21, 317-323)和 Heller 等人(Chemical Reviews (2008), 108,2482-2505)中可以找到確保氧化還原等效物直接轉移到合適的檢測系統上並尤其可用於血糖的電化學檢測的介體的綜述。
[0005]介體的另一已知種類包含如US 5，206, 147和US 5，286，362中公開的亞硝基苯胺類。與能夠直接轉移氧化 還原等效物的上述介體相比，亞硝基苯胺類的特徵在於首先製備實際介體的前體化合物，其在後繼步驟中還原成具有避免空白反應的優點的有效介體。
[0006]但是，使用亞硝基苯胺類時的問題在於，它們通常具有形成氧化偶氮二聚體的傾向並對含氨基和巰基的物質具有高反應性(J.A.Hinson !Advances in ExperimentalMedicine and Biology (1986)，197，691-696)，這會最終導致不想要的副反應並且不利地影響被分析物測定的特異性和靈敏性。
[0007]因此，本發明的目的是提供用於定性或/和定量測定被分析物的介體，其中至少部分消除現有技術的缺點。特別地，應該設計所述介體以避免發生空白反應(例如介體被抗壞血酸還原)並同時在最低程度上形成副產物(例如介體的二聚體)或介體與含氨基或/和巰基的物質的不受控反應的產物。此外，該介體應該比亞硝基苯胺類更耐水解，同時具有可接受的反應速率。
[0008]根據本發明藉助通式(I)的偶氮化合物實現這一目的
【權利要求】
1.通式(I)的偶氮化合物
2.根據權利要求1的偶氮化合物， 其特徵在於 R1表示殘基NR7R8。
3.根據權利要求1或2的偶氮化合物， 其特徵在於 選自R2、R3、R4和R5的至少三個殘基表示殘基H。
4.根據權利要求1至3中一項的偶氮化合物， 其特徵在於 R2表示選自H和0(烷基)的殘基，且R3、R4和R5各自表示殘基H。
5.根據權利要求1 至4中一項的偶氮化合物， 其特徵在於 R6表示殘基C (=X) NR9R10,特別是殘基C (=0) NR9N10。
6.根據權利要求1至5中一項的偶氮化合物， 其特徵在於 R8 表示一個或多個選自 C00_、N (烷基)3+、NH-C (=NH2) _NH2+、0H、O- (CH2CH2) n_0H、O- (CH2CH2) n-0 (烷基)、OPO32' PO32-和 SO3-的取代基。
7.根據權利要求1至6中一項的偶氮化合物， 其特徵在於 R7或/和R8表不殘基輕乙基。
8.根據權利要求1至7中一項的偶氮化合物， 其特徵在於 R9或/和Rw表示選自烷基和芳基的殘基，其中所述烷基或芳基可含有一個或多個選自0H、O (烷基)和O (芳基)的取代基，或 R9和Rw與它們所鍵合的N原子一起形成5元或6元雜環，其中所述雜環可含有選自N、O和S的另一雜原子。
9.根據權利要求1至8中一項的偶氮化合物， 其特徵在於 R9或/和Rici表不選自甲基、乙基、苯基、輕甲基、輕乙基、輕苯基和甲氧基苯基的殘基。
10.通式(I)的偶氮化合物作為診斷方法中的介體的用途
11.用於測定被分析物的檢測試劑，其包含: (a)黃素_、煙醯胺-或吡咯喹啉醌-依賴性氧化還原酶， (b)可還原的黃素、煙醯胺或吡咯喹啉醌輔酶， (c)通式(I)的偶氮化合物


12.根據權利要求11的檢測試劑， 其特徵在於， 所述黃素_、煙醯胺-或吡咯喹啉醌-依賴性氧化還原酶是黃素_、煙醯胺-或吡咯喹啉醌-依賴性脫氫酶，特別是黃素_、煙醯胺-或吡咯喹啉醌-依賴性葡萄糖脫氫酶或葡萄糖-6-磷酸脫氫酶。
13.根據權利要求11或12的檢測試劑， 其特徵在於， 所述可還原的黃素、煙醯胺或吡咯喹啉醌輔酶是FAD、FMN、NAD+、NADP+、PQQ或其衍生物，特別是 NAD+、NADP+> CarbaNAD+ 或 carbaNADP+。
14.用於測定被分析物的試劑盒，其包含(a)根據權利要求11至13中一項的檢測試劑，和 (b)測試元件，特別是設計為光學或電化學傳感器的測試元件。
15.用於測定被分析物的測試元件，其包含根據權利要求11至13中一項的檢測試劑。
16.根據權利要求15的測試元件， 其特徵在於， 其被設計為光學或電化學傳感器。
17.測定被分析物的方法，其包括以下步驟: (a)使含有被分析物的樣品與根據權利要求11至13中一項的檢測試劑、根據權利要求14的試劑盒或根據權利要求15或16的測試元件接觸，和 (b)測定被分析物的存在或/和量。
【文檔編號】C12Q1/26GK103958463SQ201280057963
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2012年9月26日 優先權日:2011年9月28日
【發明者】S.H.杜瓦爾, P.格鮑爾, D.海因德爾, C.霍恩, P.克拉奇, M.馬寬特, T.邁爾 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司