一種測定atp的方法

2023-11-07 22:19:52

專利名稱：一種測定atp的方法
技術領域：
本發明涉及一種ATP含量的測定方法，特別涉及一種利用PiOfile-I生物發光儀測定含菌水體、土壤、汙泥中ATP含量的測定方法，以及通過測定ATP的含量間接表示出土壤中微生物量的方法。
背景技術：
ATP(Adenosine Triphosphate)是生物體內一種特定的高能磷酸化合物。正常生物體細胞內的ATP含量是相對穩定的。故ATP含量與活性微生物量之比可以認為是常數。因此，ATP可以作為一種指標表徵活性微生物量。ATP生物發光法是利用ATP與蟲螢光素-蟲螢光素酶反應，產生光子，再用螢光檢測器檢測發光值，從而得到ATP的量。其反應過程如下
權利要求
1.一種測定ATP的方法，其特徵在於，該方法包括以下步驟 (1)製取樣品的待測溶液； (2)在待測溶液中加入苯扎溴銨溶液得到混合溶液； (3)用定量濾紙對步驟(2)得到的混合溶液進行吸取過濾，將得到的濾液放入已加入螢光素酶的過濾比色杯中； (4)使用型號為Profile-I的生物發光儀進行ATP測定。
2.根據權利要求I所述的一種測定ATP的方法，其特徵在於，步驟(I)中所述的樣品的待測溶液為土樣分散液，製取過程包括以下步驟將土樣放入滅菌水中，控制土樣的濃度為0.5 2g/ml,然後向其中加入10 15粒玻璃珠,放入搖床振蕩60min,控制轉速為160rpm,攪拌得到待測溶液。
3.根據權利要求I所述的一種測定ATP的方法，其特徵在於，步驟(2)具體包括以下步驟吸取步驟(I)振蕩得到的待測溶液，加入到苯扎溴銨溶液中，控制待測溶液與苯扎溴銨溶液的體積比為I : 4，振蕩均勻即可。
4.根據權利要求I所述的一種測定ATP的方法，其特徵在於，所述的苯扎溴銨溶液的濃度為 0. 05wt%o
5.根據權利要求I所述的一種測定ATP的方法，其特徵在於，步驟(3)中所述的螢光素酶與濾液的體積比為I : I。
全文摘要
本發明涉及一種測定ATP的方法，用於測定含菌水體、土壤、汙泥等中的ATP量，包括如下步驟a)製取樣品的待測溶液；b)在待測溶液中加入BAB溶液；c)吸取過濾後的濾液放入已加入螢光素酶的過濾比色杯中；d)使用Profile-1生物發光儀進行ATP測定。與現有技術相比，本發明高於Profile-1生物發光儀自帶的標準分析方法，特別適用於土壤ATP的測定，彌補了Profile-1生物發光儀自帶的標準分析方法的不足。
文檔編號G01N21/76GK102818801SQ20111015181
公開日2012年12月12日 申請日期2011年6月8日 優先權日2011年6月8日
發明者席雪飛, 胡煜, 張豔楠, 彭曉佳, 王磊, 武滿滿, 唐玉姝 申請人:同濟大學