液體微肥及其在提高菸葉角鯊烯含量中的應用的製作方法

2023-05-09 19:27:26 1

本發明涉及菸草種植領域，更具體地，涉及一種液體微肥及其在提高菸葉角鯊烯含量中的應用。

背景技術：

角鯊烯是一種脂質不皂化物，為一種多不飽和烯烴(三十碳六烯)，最初是從鯊魚的肝油中發現的，1914年被命名為Squalene，其化學名稱為2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯，屬開鏈三萜，又稱魚肝油萜，參與人體膽固醇合成並能促進新陳代謝，具有提高體內超氧化物歧化酶(SOD)活性、增強機體免疫能力、抗衰老、抗疲勞、抗腫瘤等多種生理功能，是一種無毒性的具有防病治病作用的海洋生物活性物質。

角鯊烯廣泛存在於動植物體內。在動物中以深海鯊魚肝臟中含量最高，主要是深海的鎧鯊、小刺鯊、緣吻田氏鯊、紐西蘭烏鯊肝臟中，而其它江海鯊魚的角鯊烯含量很低，普遍低於1.5％。在植物中則以橄欖油、莧菜子油和棕櫚油中含量最高，如橄欖油含有角鯊烯150～700mg/100g，米糠油中其含量為332mg/100g。深海鯊魚是珍貴的保護動物，再加上其低生長率和低繁殖力，易過度捕撈，導致含角鯊烯的動物資源缺乏。目前發現含有角鯊烯的植物資源蓄積量少，開發利用有一定的難度。因而限制了角鯊烯的生產和使用。

現有技術中已經有公開從羅漢果、尾巨桉、糯米香茶、菸草等植物中提取角鯊烯。也有人報導從菸草廢料中提取出角鯊烯見201110058487.5；因此植物中提取角鯊烯將是未來獲得角鯊烯的一個重要途徑。在植物中角鯊烯通過特定的生物合成途徑產生並在植物中積累的，然而在各種植物中角鯊烯的含量不高，現有技術中還沒有研究表明可以通過在植物生長階段加入外源性物質，提高植物中角鯊烯含量的報導。

技術實現要素：

本發明的目的是提供一種液體微肥。在菸草的生長過程中，添加所述液體微肥，能夠提高菸葉中角鯊烯的含量。

液體微肥是一種新型的肥料，其以有機營養物質作為螯合劑，與中心金屬原子結合，形成所述液體微肥。在本發明中，所述液體微肥中包含EDTA-Zn和磷鉬酸銨。所述液體微肥可以是完全由EDTA-Zn和磷鉬酸銨組成，或者添加其他不影響這兩種物質穩定性的成分。

本發明液體微肥的優選組成為：EDTA-Zn；磷鉬酸銨；乙醇和水。

本發明液體微肥的更優選組成為：以重量百分數計，其組分組成為：EDTA-Zn0.2～5％；磷鉬酸銨0.5～10％；乙醇5～10％；餘量為水。

最優選地，EDTA-Zn與磷鉬酸銨的質量比為1：1～5，更優選為1：2～3。

磷鉬酸銨可以購買獲得，或參考如下方法製備：將0.12mol(NH4)6Mo7O24·4H2O溶於2000ml蒸餾水中，再加入0.1mol H3PO4，並用濃HNO3將溶液pH值調為1；將上述混合液在室溫下攪拌1.5h，得到黃色沉澱，然後在室溫下陳化20h，過濾，用1mol/L的HNO3溶液洗滌3次，再用蒸餾水洗滌1次，最後乾燥，即得。

本發明同時提供了液體微肥在提高菸葉角鯊烯含量中的應用。

發明人發現在菸草的生長過程中，添加液體微肥，能夠提高菸葉中角鯊烯的含量。

優選地，所述液體微肥的用量為每株30～50克。

優選地，所述液體微肥為用水稀釋500～2000倍後葉面噴施。

優選地，所述液體微肥在菸草株的快速生長期施用一次。

優選地，所述液體微肥在菸草株的打頂後1周施用一次。

優選地，所述液體微肥在菸草株的快速生長期和打頂後1周各施用一次。

本發明所述的菸葉可以是晾曬煙或烤菸的菸葉，優選地，所述菸葉為烤菸菸葉。

菸葉除了主要用於香菸的製備外，其會產生大量的如煙末、廢棄菸葉，不適用菸葉等廢品，常常只能通過降解等方式進行處理，造成浪費。角鯊烯是一種具有經濟價值的物質，提升菸葉中角鯊烯的含量，一定程度上也提升了菸葉的經濟價值，使煙末、廢棄菸葉等廢品的利用價值得以提升。

與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：

在菸草的生長過程中，添加本發明所述液體微肥，能夠提高菸葉中角鯊烯的含量，與空白對照組相比，在添加了液體微肥後，菸葉中的角鯊烯含量得到明顯提升，提高菸葉的經濟價值。

具體實施方式

下面結合具體實施例，對本發明做進一步詳細說明。實施例僅用於解釋本發明，並不對本發明的內容做任何形式的限定。

實施例中，液體微肥所用的原料EDTA-Zn(石家莊傑克化工有限公司)和七鉬酸銨(安慶市月銅鉬業有限公司)、磷酸、硝酸(廣州化學試劑廠)合成原料均為市面購買。

實施例所用磷鉬酸銨按如下方法製備：將0.12mol(NH4)6Mo7O24·4H2O溶於2000ml蒸餾水中，再加入0.1mol H3PO4，並用濃HNO3將溶液pH值調為1；將上述混合液在室溫下攪拌1.5h，得到黃色沉澱，然後在室溫下陳化20h，過濾，用1mol/L的HNO3溶液洗滌3次，再用蒸餾水洗滌1次，最後乾燥，即得。

實施例1：

選一小區田，烤菸品種為雲煙87,栽煙60株，按照15株/行排列，行株距為1m×0.5m。整個生育期間未施用任何殺蟲藥劑，其它栽培管理措施同常規大田生產。液體微肥組成為：EDTA-Zn 0.2％；磷鉬酸銨0.5％；乙醇5％；餘量為水

隨機選擇菸草株按以下情況處理：1、每株50g液體微肥，按稀釋500倍噴施；2、每株50g液體微肥，按稀釋1000倍噴施；3、每株50g液體微肥，按稀釋2000倍噴施；4、僅噴施清水，不添加液體微肥。每種情況處理的數量為15株，在菸草快速生長期或打頂後1周或快速生長期和打頂後1周各施1次。

菸葉成熟後，每種情況選3株，每株的全部葉片洗淨，用紗布吸乾表面水分，去掉中脈，105℃殺青15min，60℃烘乾至恆重，粉碎，過40目篩，所得樣品用於測定菸葉中角鯊烯含量。

菸葉中角鯊烯的絕對含量的測定

稱取上述所得菸葉粉末20g用濾紙包裹裝入索氏提取器內，同時水浴溫度恆定為75℃，加入200mL石油醚(60～90℃)回流加熱4h，用無水硫酸鈉乾燥石油醚層，取石油醚提取液用旋轉蒸發儀旋轉至幹，得黃色菸葉提取物，用石油醚定溶至50mL，利用氣相色譜，採用內標法測定出菸葉中角鯊烯的絕對含量(mg/Kg)。

氣相色譜條件如下：HP-5MS毛細管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，柱溫150℃，程序升溫15℃/min至290℃，恆溫15min；載氣為高純He；進口溫度300℃；分流比20∶1；溶劑切除1.5min；進樣量0.5μL。

煙氣中角鯊烯的相對含量的測定

參照文獻(GC/MS法檢測24種烤菸煙氣中角鯊烯含量[J].廣東農業科學,2012,39(3):105-107.)，利用菸草熱解吸裝置獲得菸葉粉末的煙氣石油醚提取物：菸葉粉末在菸草熱解吸裝置中燃燒，燃燒時產生的煙氣在真空泵的作用下被抽吸進密封的裝有石油醚的錐形瓶中，煙氣中的成分被石油醚吸收。

然後利用GC/MS對提取的煙氣中的成分進行分析測定：根據Nist標準譜庫檢索到定性結果，根據質譜的總離子流圖確定其百分含量，按照質譜儀自帶的工作站軟體進行歸一化測定，得到煙氣中角鯊烯的相對百分含量(％)。

其質譜條件如下：GC/MS接口溫度290℃；離子源溫度235℃；電離方式EI源；電離電壓70eV；質量掃描範圍30～500amu；SCAN(全掃描)檢測。

測試結果如下表1所示：

表1

可以看出，在菸草生長期，噴施液體微肥後，菸葉中的角鯊烯含量得到提升。

實施例2

煙苗種植及角鯊烯提取和檢測見實施例1。

液體微肥組成為：EDTA-Zn 2％；磷鉬酸銨6％；乙醇8％；餘量為水。

隨機選擇菸草株按以下情況進行處理：1、每株30g液體微肥，按稀釋500倍噴施；2、每株30g液體微肥，按稀釋1000倍噴施；3、每株30g液體微肥，按稀釋2000倍噴施；4、僅噴施清水，不添加液體微肥。每種情況處理的數量為15株，在菸草快速生長期或打頂後1周或快速生長期和打頂後1周各施1次。

測試結果如下表2所示：

表2

可以看出，在菸草生長期，噴施液體微肥，菸葉中的角鯊烯含量得到提升。

實施例3

煙苗種植及角鯊烯提取和檢測見實施例1。

液體微肥組成為：EDTA-Zn 5％；磷鉬酸銨10％；乙醇10％；餘量為水。

隨機選擇菸草株按以下情況進行處理：1、每株40g液體微肥，按稀釋500倍噴施；2、每株40g液體微肥，按稀釋1000倍噴施；3、每株40g液體微肥，按稀釋2000倍噴施；4、僅噴施清水，不添加液體微肥。每種情況處理的數量為15株，在菸草快速生長期或打頂後1周或快速生長期和打頂後1周各施1次。

測試結果如下表3所示：

表3

可以看出，在菸草生長期，噴施液體微肥，菸葉中的角鯊烯含量得到顯著提升。