移植器官保護劑的製作方法

2023-07-09 06:39:26 1

專利名稱：移植器官保護劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及新型的移植器官保護用組合物，特別是涉及具有移植 器官的生長促進效果的組合物。
背景技術：
紅細胞生成素(下面有時也用EP0表示)，是促進紅血球類母細 胞分化、增殖的酸性糖蛋白質荷爾蒙，主要由腎臟產生。在生物體的 紅血球日常性保持中，EPO擔負著中心作用，臨床上EPO用於貧血的 治療及手術前後的管理。
己知EP0除作為造血因子的作用外，在神經類細胞、心肌細胞、 腎尿細管上皮細胞等中具有抑制細胞凋亡及組織保護的作用(PNAS 100: 4802 - 4806， 2003等)。EP0具有的這2個作用，可以認為是 EPO通過2個不同的信號傳送路線來產生作用的。當EPO作用於EP0 受體的同型二聚體時，通過細胞內的JAK2信號傳送路線引起造血作 用。另一方面，當EP0作用於EP0受體與common p受體(P cR)的雜 聚體時，通過細胞內ERK1/2信號傳送路線，引起抗細胞凋亡作用(PNAS 1 01: 14907 - 14912, 2004 )。
近幾年來，進行器官移植手術，但在器官移植手術時，從器官提 供者(供體)摘取的移植用器官，在血流中斷、不能通過血流供氧的 狀態下(缺血狀態)，於移植前保存數分鐘~數十小時。因此，當沒 有適當選擇保存溫度及保存液等保存條件，或至移植需要長時間時， 在通過移植使移植器官內的血流恢復(再灌流時)，移植器官內往往 產生基質的或功能性的障礙。
此前作為移植器官保護劑，己知有氨基苯磺酸衍生物(W0 2004/022545 )、 4 -三氟甲基嘧啶衍生物(特開2005 - 350363 )、嘌呤衍生物(特開2005 - 350364 )。
但是，並不知道EPO對移植器官的保護效果。另外，也不知道具 有生長促進效果的移植器官保護劑。
非專利文獻l: PNAS 100: 4802 - 4806， 2003
非專利文獻2: PNAS 101: 14907 - 14912， 2004
專利文獻1: WO 2004/022545
專利文獻2:特開2005 - 350363
專利文獻3:特開2005 - 35036
發明內容
發明要解決的課題
本發明的目的在於提供一種新型的移植器官保護用組合物，特別 是提供一種具有移植器官的生長促進效果的組合物。 用於解決課題的手段
本發明人等為了達到上述目的進行悉心研究的結果可見，紅細胞 生成素具有移植器官保護作用，特別是具有移植器官的生長促進效果， 完成本發明。
即，本發明提供下列內容。
(1 )移植器官保護用組合物，所述組合物含有紅細胞生成素作為 有效成分。
(2 )移植器官生長促進用組合物，所述組合物含有紅細胞生成素 作為有效成分。
(3) 移植器官保存用組合物，所述組合物含有紅細胞生成素作為 有效成分。
(4) 上述(1) ~ ( 3)任何一項所述的組合物，其中，上述紅細 胞生成素是脫唾液酸(asialo)的紅細胞生成素。
(5) 從移植時再灌流障礙保護移植器官的方法，其中包括把含 有紅細胞生成素作為有效成分的組合物，直接供給移植器官的工序。
(6) 促進移植器官在被移植對象上生長的方法，其中包括把含有紅細胞生成素作為有效成分的組合物，直接供給移植器官的工序。
(7 )紅細胞生成素的用途，其用於製造從移植時再灌流障礙保護 移植器官的醫療用組合物。
(8 )紅細胞生成素的用途，其用於製造促進移植器官在被移植對 象上生長的醫療用組合物。 發明效果
如下列實施例所示，本發明的組合物從通過移植時的血液再灌流 所產生的障礙保護移植器官，顯示在被移植對象上的生長促進效果。 本發明的組合物向移植的器官直接供給EPO,能夠得到上述效果。特 別是供給脫唾液酸EPO，能夠確認優良的效果。
另外，可以認為通過作為移植器官的保存用組合物使用，能夠在 移植後保護移植器官、促進生長。


圖1為表示移植後卵巢中每0. 64rai^的平均卵胞數以及對移植前 卵巢的卵胞數的殘留率曲線。結果用平均土標準偏差表示。星號表示 試驗組之間的有顯著差異(*: p<0. 05)。
具體實施方式
紅細力包生成素
本發明4吏用的紅細胞生成素，可以採用任何一種紅細胞生成素， 但優選的是高度純化過的紅細胞生成素，更具體的說，有哺乳動物 EP0，特別是與人EP0實質上具有同樣生物活性的EP0。
本發明使用的紅細胞生成素，也可採用任何一種方法製造，例如， 可以採用從來自人的提取物精製得到的天然的人EP0 (特公平l-38800號公報等)，或通過遺傳基因工學的方法，從大腸菌、酵母菌、 中國田鼠卵巢細胞(CH0細胞)、C127細胞、COS細胞、骨髓瘤細胞、 BHK細胞、昆蟲細胞等產生的，採用各種方法提取、分離精製的人EPO 等。本發明使用的紅細胞生成素，通過遺傳基因工學的方法製造的EP0是優選的，採用哺乳動物細胞(特別是CH0細胞)製造的EPO是優選 的(例如，特公平1 - 44317號公報，Ke腸th Jacobs et al. ， Nature, 313 806 - 810 ( 1985 )等)。
通過遺傳基因組轉換方法得到的紅細胞生成素，與來自天然的 EP0的胺基酸排列相同的紅細胞生成素，或通過該胺基酸排列中的1 個或多個胺基酸缺失、置換、加成等的紅細胞生成素，也可具有與來
自天然的EP0同樣的生物學活性等的紅細胞生成素。胺基酸的缺失、 置換、加成等，可採用本領域專業人員公知的方法來進行。例如，本 領域專業人員可以採用部位特異的變異誘發法(Gotoh， T.et al.
(1995 ) Gene 152， 271 — 275; Zoller， M. J. and Smith, M. ( 1983 ) Methods Enzymol, 100， 468 - 500; Kra隨，W. etal. ( 1984 ) Nucleic Acids Res. 12， 9441 - 9456; Kra隨，W .and Fritz, H丄(1987 ) Methods Enzymol ， 154 ， 350 _ 367; Kunkel , T丄 (1985 ) Proc, Natl. Acad. Sci. USA. 82， 488 - 492; Kunkel ( 1988 ) Methods Enzymol, 85， 2763 - 2766 )等，在EP0的胺基酸中導入適當變異，可 以製造與EP0功能同等的多肽。另外，胺基酸的變異，在自然界也可 產生。 一般在取代的胺基酸殘基中，在胺基酸側鏈性質被保存的另外 胺基酸上取代是優選的。例如，作為胺基酸側鏈的性質，可以舉出疏 水性胺基酸(A、 I、 L、 M、 F、 P、 W、 Y、 V)、親水性胺基酸(R、 D、 N、 C、 E、 Q、 G、 H、 K、 S、 T)、具有脂肪族側鏈的胺基酸(G、 A、 V、 L、 I、 P)、具有含羥基側鏈的胺基酸(S、 T、 Y)、具有含硫原子側 鏈的胺基酸(C、 M)、具有含羧酸及醯胺側鏈的胺基酸(D、 N、 E、 Q)、 具有含鹼基側鏈的胺基酸(R、 K、 H)、具有含芳香族側鏈的胺基酸(H、 F、 Y、 W)(括號內表示任何一種胺基酸的一文字標記)。已知對某種 胺基酸排列，通過1個或多個胺基酸殘基的缺失、加成及/或其他氨基 酸的取代，具有被修飾的胺基酸排列的多肽，其生物學活性被保持， 對此已為人們熟知(Mark, D . F . et al. ， Proc. Natl. Acad. Sci. USA
(1984 ) 81， 5662 - 5666; Zoller， M.J.&Sraith， M . Nucleic Acids Research ( 1982 ) 10， 6487 — 6500; Wang, A.etal.， Science 224，
61431 - 1433 ;Dalbadie - McFarland ，G .et al.， Proc. Natl.Acad. Sci. USA ( 1982 ) 79， 6409 - 6413 )。
還有，作為本發明的紅細胞生成素，也可以採用EPO與其他蛋白 質的融合蛋白質。在製造融合多肽時，例如，編碼EPO的DNA與編碼 其他蛋白質的DNA，構架一致地進行連結，將其導入呈現載體中，也 可由宿主呈現。與本發明的紅細胞生成素融合加成的其他蛋白質，未 作特別限定。
還有，作為本發明的紅細胞生成素，也可採用經過化學修飾的 EP0。作為經過化學修飾的EPO的例子，例如，可以舉出通過聚乙二醇 等進行化學修飾EPO (W090/12874等)、不帶糖鏈的EPO通過聚乙二 醇等的化學修飾的，另外，結合了維生素B12等無機或有機化合物等 的EPO等。
另外，作為本發明的紅細胞生成素，也可釆用EPO衍生物。所謂 EPO衍生物，意指EPO分子中的胺基酸被修飾的EPO或EPO分子中的
糖鏈#:修飾的epo。
作為EPO分子中的糖鏈的修飾，包括糖鏈的加成、取代、缺失等。 作為本發明中優選的糖鏈的修飾，可以舉出EPO分子中的唾液酸 (sialic acid )的缺失。
通常，通過重組動物細月包生產的EPO,來自尿的EPO的任何一種， 可作為含與糖鏈結構不同的多樣EPO的EPO組合物得到。在EPO組合 物中的EPO分子上加成的唾液酸數目，因各個EPO分子而異，通常，1 個EPO分子加成11個~ 15個唾液酸。通過除去這些唾液酸，可以制 成脫唾液酸EPO (Asialo EPO)。脫唾液酸時^皮除去的唾液酸數，未 作特別限定，既可除去全部唾液酸，也可除去l、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9、 10、 11、 12、 13、或14個唾液酸。本發明中優選的脫唾液酸 EPO，在EPO分子上加成的唾液酸數在IO個以下，更優選5個以下， 特優選2個以下。還有，本發明中使用的唾液酸數目，採用EPO組合 物中含有的EPO分子平均數。每個EPO分子的唾液酸平均數，本領域 技術人員可採用公知的方法測定(EP 0428267公報等)。除去了唾液酸的EP0(脫唾液酸EP0)，本領域技術人員可採用公 知的方法製造，例如，可採用唾液酸酶(Sialidase)等酶，處理EP0 等進行製造。唾液酸酶可從市場購買使用(特表2005 - 507426號、 Nobuo Imai et al. ， Eur.J.Biochem， 194， 457 - 462 ( 1990 )等)。
另外，本發明的紅細胞生成素，可以是糖鏈改變體EP0，可以舉 出EP0的N末端上加成唾液酸的糖鏈改變體EPO,即NESP (新型紅細 胞生成素刺激蛋白質WO85/02610、 WO91/05867、 WO95/05465等中有 記栽)等的糖鏈改變EPO類似體。
EPO分子中的胺基酸修飾，可以舉出氨基曱醯基化、生物素化、 脒化、乙醯基化、胍化等。
被修飾過的氨基殘基，未作特別限定，例如，可以舉出賴氨酸、 精氨酸、穀氨酸、色氨酸等。
組合物
本發明的組合物中可根據需要適當添加懸浮劑、溶解輔助劑、穩 定劑、等滲劑、保存劑、防吸附劑、表面活性劑、稀釋劑、賦形劑、 pH調節劑、無痛化劑、緩衝劑、含疏還原劑、抗氧劑等。
作為懸浮劑的例子，可以舉出甲基纖維素、聚山梨酸酯80、羥乙 基纖維素、阿拉伯膠、西黃蓍膠粉末、羧甲基纖維素鈉、聚氧化乙烯 山梨糖醇單月桂酸酯等。
作為溶解輔助劑，可以舉出聚氧化乙烯固化蓖麻籽油、聚山梨酸 酯80、煙酸醯胺、聚氧化乙烯山梨糖醇單月桂酸酯、檜醇、蓖麻籽油 脂肪酸乙酯等。
作為穩定劑，可以舉出葡聚糖40、甲基纖維素、明膠、亞疏酸鈉、 偏亞硫酸鈉等。
另外，作為穩定劑，也可添加某種胺基酸(例如，特開平IO-182481號公報等)。作為穩定劑添加的胺基酸，包括游離的胺基酸、 其鈉鹽、鉀鹽、鹽酸鹽等的鹽等。胺基酸可1種或2種以上組合添加。 作為穩定劑添加的胺基酸，未作特別限定，但作為優選的胺基酸，可以舉出亮氨酸、色氨酸、絲氨酸、穀氨酸、精氨酸、組氨酸、賴氨酸。
作為等滲劑，例如，可以舉出D-甘露糖醇、山梨糖醇等。
作為保存劑，例如，可以舉出對羥基安息香酸甲酯、對羥基安息 香酸乙酯、山梨糖酸、苯酚、甲酚、氯甲酚等。
作為防吸附劑，例如，可以舉出人血清白蛋白、卵磷脂、葡聚糖、 環氧乙烷 環氧丙烷共聚物、羥丙基纖維素、甲基纖維素、聚氧化乙 烯固化蓖麻籽油、聚乙二醇等。
作為表面活性劑，非離子表面活性劑，例如，可以舉出山梨糖醇 酐一辛酸酯、山梨糖醇酐一月桂酸酯、山梨糖醇酐一棕櫚酸酯等山梨 糖醇酐脂肪酸酯；丙三醇一辛酸酯、丙三醇一肉豆蔻酸酯、丙三醇一 硬脂酸酯等丙三醇脂肪酸酯；十甘油基一硬脂酸酯、十甘油基二硬脂 酸酯、十甘油基一亞油酸酯等聚丙三酵脂肪酸酯；聚氧化乙烯山梨糖 醇肝一月桂酸酯、聚氧化乙烯山梨糖醇酐一油酸酯、聚氧化乙烯山梨 糖醇酐一硬脂酸酯、聚氧化乙烯山梨糖醇酐一棕櫚酸酯、聚氧化乙烯 山梨糖醇酐三油酸酯、聚氧化乙烯山梨糖醇酐三硬脂酸酯等氧化乙烯 山梨糖醇酐脂肪酸酯；聚氧化乙烯山梨糖醇四硬脂酸酯、聚氧化乙烯 山梨糖醇四油酸酯等聚氧化乙烯山梨糖醇脂肪酸酯；聚氧化乙烯甘油 基一硬脂酸酯等聚氧化乙烯甘油硬脂酸酯；聚乙二醇二硬脂酸酯等聚 乙二醇硬脂酸酯；聚氧化乙烯月桂醚等聚氧化乙烯烷基醚；聚氧化乙 烯聚氧化丙二醇、聚氧化乙烯聚氧化丙烯丙醚、聚氧化乙烯聚氧化丙 烯十六基醚等聚氧化乙烯聚氧化丙烯烷基醚；聚氧化乙烯壬基苯基醚 等聚氧化乙烯烷基苯基醚；聚氧化乙烯蓖麻子油、聚氧化乙烯固化蓖 麻子油(聚氧化乙烯氫化蓖麻子油)等聚氧化乙烯固化蓖麻子油；聚 氧化乙烯山梨糖醇蜂蠟等聚氧化乙烯山梨糖醇蜂蠟衍生物；聚氧化乙 烯亞油酸等聚氧化乙烯亞油酸衍生物；聚氧化乙烯硬脂醯胺等聚氧化 乙烯脂肪酸醯胺等具有HLB6 ~ 18的化合物；陰離子表面活性劑，例如， 典型的可以舉出十六基硫酸鈉、月桂基硫酸鈉、油基硫酸鈉等具有碳 原子數10 ~ 18烷基的烷基硫酸鹽；聚氧化乙烯月桂基硫酸鈉等的環氧 乙烷平均加成摩爾數2~4的烷基碳原子數10~ 18的聚氧化乙烯烷基醚硫酸鹽；月桂基硫代琥珀酸酯鈉等烷基碳原子數8 ~ 18的烷基硫代 琥珀酸酯鹽；天然類表面活性劑，例如，卵磷脂、甘油磷脂質；鞘髓 磷脂等鞘髓磷脂質；碳原子數12 ~ 18脂肪酸的蔗糖脂肪酸酯等。在本 發明的製劑中，這些表面活性劑可1種或2種以上組合添加。優選的 表面活性劑為聚山梨糖酸酯20、 40、 60或80等聚氧化乙烯山梨糖醇 酐脂肪酸酯，特優選聚山梨糖酸酯20及80。另外，Poloxaraer( Pluronic F- 68(註冊商標)等)為代表的聚氧化乙烯聚氧化丙二醇也是優選的。
作為含硫還原劑，例如，可以舉出N-乙醯基半胱氨酸、N-乙醯 基均半胱氨酸、疏辛酸、疏代二乙二醇、硫代乙醇胺、硫代丙三醇、 硫代山梨糖醇、硫代乙二醇酸及其鹽、硫代硫酸鈉、穀胱甘肽、碳原 子數1 ~ 7個的硫代鏈烷酸等具有氫硫基的含硫還原劑等。
作為抗氧劑，例如，可以舉出刺桐酸、二丁基羥基甲苯、丁基羥 基茴香醚、a-生育酚、醋酸生育酚、L-抗壞血酸及其鹽、L-抗壞 血酸椋櫚酸酯、L-抗壞血酸硬脂酸酯、亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、沒食 子酸三戊酯、沒食子酸丙酯或乙二胺四醋酸二鈉(EDTA)、焦磷酸鈉、 偏磷酸鈉等螯合劑。
另外，也可以含有氯化鈉、氯化鉀、氯化釣、磷酸鈉、磷酸鉀、 碳酸氫鈉等無機鹽；檸檬酸鈉、檸檬酸鉀、醋酸鈉等有機酸鹽等通常 添加的成分。
在本發明的含紅細胞生成素的組合物中，有效成分的含量，考慮 移植器官的狀態及大小、患者(移植者、被移植者)的症狀、體重、 年齡及性別等來決定各有效成分。通常，10~ 10G0U/kg體重，優選 100~ 600U/kg體重左右。
本發明的含紅細胞生成素的組合物，對被移植者(受主)，在移 植手術中及/或手術前後供給被移植者，優選的是通過直接供給器官， 可以得到本發明的效果。關於供給，從移植者(宿主)摘出的器官， 也可在移植前直接與該組合物接觸進行供給，如下列實施例所述，也 可吸入海綿等後供給。另外，移植前也可作為保存液使用。作為保存 液添加物，例如，可以採用生理鹽水、磷酸緩衝生理鹽水、檸檬酸緩
10沖液等生理允許的緩衝液及等滲化液。此前，作為移植用器官保存液，
可以並用臨床使用的Euro-Collins液及UW液等。 實施例
實施例l:冷凍融解的狗卵巢在異種移植時的EP0及脫唾液酸EP0 的給予效果
(1) 目的
當冷凍融解的狗卵巢，異種移植至N0D-SCID鼠卵巢嚢內時，狗 卵巢的生長確認為高頻率，但有報告說，移植後在血管再生前，原始 卵胞的70%已死亡，而在狗同種移植試驗中，觀察到狗卵巢的原始卵 胞及其他卵胞，比移植前的卵巢有減少的傾向。
在這裡，對EP0及脫唾液酸EP0的局部供給、移植後的狗卯巢的 原始卵胞減少的抑制效果進行探討。
(2) 材料及方法
把4月齡的狗卵巢進行冷凍融解，移植至N0D-SCID鼠卵巢嚢內。 冷凍融解操作，按照Migishima等的方法(Migishima F et al. ，Biol Reprod 2003 Mar; 68 ( 3 ): 881 - 7 )進行，卵巢移才直按照Ishi j ima 等的方法(Ishijima T et al. ， J Reprod Dev. 2006 Apr; 52 ( 2 ): 293 - 9 )進行。
(2. 1)冷凍操作
把狗卵巢組織切成1.0mm-1.5mra的方形，浸漬在室溫下的1M DMS0中約60秒後，與5 ji 1的1M DMS0 —起放入深冷試管內，在冰上 冷卻5分鐘。添加預先於水上冷卻過的95 y 1的DAP 213後，於冰上 冷卻5分鐘，浸漬在液氮中。 (2.2)融解操作
從液氮中取管試管，棄去試管內液氮，於室溫放置60秒。添加加 溫至37匸的900 n 1的0. 25M的蔗糖，快速地輕輕地進行移液，用PBI 洗滌5次。
另外，把摘取的狗卵巢的一部分作為移植前卵巢，用10°/。福馬林固定。
(2. 3)移植方法
鼠(n-9),向腹腔內注射戊巴比妥鈉進行麻醉後，切開背面，取 出卵巢。從卵巢側部的脂肪進刀，把卵巢嚢內的鼠卵巢，為了確保移 植後的向狗卵巢的血流，切除以使殘留的一部分，向其中(卵巢嚢內) 放入冷凍融解的狗卵巢。此時，把止血用的海綿(下面為體組織吸收 性明膠)吸入了 EPO (n-3)及脫唾液酸EPO (n-3 ) 400U/kg的材料放 入卵巢嚢內。另外，用生理鹽水作為對照，浸漬同等量的體組織吸收 性明膠，放入卵巢嚢內。
4周後，取出卵巢，用10°/。福馬林固定，與移植前卵巢一起進行 HE染色。
(2. 4)製作切片及卵胞檢索
卵胞的分類，按照Oktay等(Oktay K et al.，Biol Reprod. 1995 Aug; 53 ( 2 ) : 295 - 301 )的分類，對卵子(卵母細月包)的實質進行 確{人，要點如下。
原始卵胞(Primordial )，是卵母細胞部分地或完全地;波覆扁平 的前顆粒膜細胞；初始1次細胞(Early primary)是前顆粒膜細胞的 至少一部分形成圓柱狀(巨大)；1次細胞(Primary),全部顆粒膜 細胞變大，由l層顆粒膜細胞構成；初始2次細胞(Transitional ) 由1層~ 2層圓柱狀顆粒膜細胞被覆；2次卵胞(Preantral )，由2 層以上顆粒膜細胞被覆，無卵胞腔的狀態；胞狀卵胞(Antral follicle)，由2層以上顆粒膜細胞被覆，伴隨著卵胞腔的狀態。
(2.4.1) 移植前的卵巢組織
隨機選擇10個組織，對該10個組織進行卵胞計數。選擇的各組 織的最初卵胞多的直徑900nm的圓中每0. 64mm2視野的卵胞(共計10 個視野)。以此作為移植前卵胞數。
(2.4.2) 移植卵巢組織
對1組織(1塊)分步驟製成5張切片。此時，切片與切片的間 隔為40pm~ 50|ira。該1切片中，計數最初卵胞多的直徑900 p m的圓中每0. 64mm'視野的卵胞(共計5個視野)。 (3)結果
所得到的結果示於表l及圖1。 [表l]
使用的狗卵巢miniaturedachshund 4月齡未發情 使用的鼠N0D-SCID鼠11周齡n=9
實驗區鼠編號尿始豕一次豕 厲二次胞狀i合計
移植前 平均印胞數3.01X80.01 1 ，26.6
Ml0.6 4.，g o0.4 9.80.0 00.0 0l0ao j1.8
未處理M20.0 0.0O <D。
C}0.0 0.00.0 0.00.0 tN CO
M3o 0ao o力0.0 0.00.01 一J0.4 ,.5
M40.0 0.0g g0.0 0.00.00.0 0.00.0 j0.0 0.0
EPOM50.8 5.4O.d W. o力 0.00 00.0 i2>4 9.0
M6--h 1
M7，.2 8.11,4 42,40.2 4.9 N ID0.0 i3.0 11.3
脫唾液酸epoM84.6 31.15,6 1的70.0 0.00.0 0.00.0 !10.2 38.3
M96.0 40.5邁" b OK1.0 2"0.0 0.00.0 i15.6 幼.6
實驗區Kn合計
未處理0.30,3 ，0.1」0.0 0.00.0 0.00.0 !0.8 3.0
EPO0 00.0 0.00.0115 4.5
脫唾液酸ep(3.9 26. to0頃0.10.0 0.00.0 i9.6 38.1
☆上段0. 64mm^見野中的平均卵胞數
下段相對移植前卵巢的卵胞數的殘留率(％)
移植前卵巢中每0. 64mi^的原始卵胞數平均14. 8個，而移植後4 周的未處理組為0. 3個，EPO組為0. 4個，以及脫唾液酸EP0組為3. 9 個，特別是脫唾液酸EPO組的殘留率(27% )與未處理組(2. 3% )相比， 是有顯著差異地高值。
另外，對初期一次卵胞來說，未處理組的殘留率為10.1%，而EPO 組的殘留率為15. 2%,脫唾液酸EPO組為157. 6%。特別是脫唾液酸EPO 組，明確表明在原始卵胞的一部分向初期一次卵胞成長。另外， 一次 卵胞、初期二次卵胞的殘留率，特別是脫唾液酸EPO組與未處理組相
13比確認有高的傾向。
從以上的結果可以判斷，供給EPO,特別是供給脫唾液酸EPO，對 移植器官組織的生長是有效的。
權利要求
1.移植器官保護用組合物，所述組合物含有紅細胞生成素作為有效成分。
2. 移植器官的生長促進用組合物，所述組合物含有紅細胞生成 素作為有效成分。
3. 移植器官保存用組合物，所述組合物含有紅細胞生成素作為 有效成分。
4. 按照權利要求1 ~ 3的任何一項所述的組合物，其中，上述紅 細胞生成素為脫唾液酸的紅細胞生成素。
5. 從移植時再灌流障礙保護移植器官的方法，其中包括把含 有紅細胞生成素作為有效成分的組合物直接供給移植器官的工序。
6. 促進移植器官在被移植對象上生長的方法，其中包括把含 有紅細胞生成素作為有效成分的組合物直接供給移植器官的工序。
7. 紅細胞生成素的用途，其用於從移植時再灌流障礙保護移植 器官的醫療用組合物。
8. 紅細胞生成素的用途，其用於製造促進移植器官在被移植對 象上生長的醫療用組合物。
全文摘要
本發明涉及以紅細胞生成素(EPO)作為有效成分的移植器官保護用組合物、移植器官的生長促進用組合物或移植器官保存用組合物。
文檔編號A61K38/22GK101631561SQ20088000775
公開日2010年1月20日 申請日期2008年3月7日 優先權日2007年3月9日
發明者鈴木宏志, 齊藤英樹 申請人:國立大學法人帶廣畜產大學;中外製藥株式會社