一種膠原蛋白創傷修復膜及其製備方法

2023-07-20 23:55:16

專利名稱：一種膠原蛋白創傷修復膜及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種膠原蛋白創傷修復膜及其製備方法，屬於生物醫學材料領域。
背景技術：
創傷修復的過程，不僅是各種細胞增殖、分化、遷移、凋亡和消失的過程，同時也是一系列不同類型細胞、結構蛋白、生長因子和蛋白激酶等形成網絡式交互作用的結果。由創傷導致的皮膚缺損是臨床常見病症之一，儘早封閉創面是治療皮膚缺損的關鍵.既往臨床一般採用自體皮片移植修復創面，但由於自體皮源的嚴重缺乏，導致創面得不到及時、有效的修復.目前國外研究者已開發出多種真皮替代物，並已初步應用於創傷的修復和疤痕整形等領域，取得了一定臨床效果，但製品的價格非常昂貴，因此，研製和開發適合我國國情和經濟實用的高質量真皮替代物具有重要意義.膠原對創面癒合具有促進作用，其良好的組織相容性已得到實驗及臨床證實(Shanmugasundaram N， Ravichandran P， Reddy P N， et al Collagen chitosan polymeric scaffoldsfor the in vitro c ulture of human epidermo id carcinoma ells[J].Biomaterial,2001，22: 1943- 1951.)。膠原是哺乳動物體內含量最豐富的蛋白質，真皮組織中約70%的成分是膠原，它具有良好的生物相容性和細胞親和性，有利於細胞的附著與生長，可促進創傷癒合.可與血小板結合，可激活血液凝固因子，形成血栓阻止流血，是很好的止血劑。目前市場上出現各類創傷敷料。這些材料具有不同的適應症。薄膜類合成敷料可吸收創面滲液，維持創面溼潤，促使壞死組織脫落，對氣體和水蒸汽有一定通透性。但敷料吸收飽和後易致膜下滲液積聚能誘發或加重感染，故只適用於相對清潔的創面，不適於滲出性和感染性創面。研究表明重均分子量17500、分子量分布6.5的膠原蛋白中，既有膠原蛋白，又有具有特殊作用的膠原蛋白生物活性肽類物質(生物活性肽具有提高免疫力等生理功能)。由其製備的創傷修復膜可促進上皮細胞的增生修復，從而加速創面的癒合。此外還可以覆蓋創面，可主動參與創面癒合。有促進創面血液循環、減輕組織水腫的作用。使創面與外界隔絕，有效防止汙染和感染。其功能近似皮膚，使局部環境接近生理環境，為創面修復創造了有利條件，從而促進了創面的癒合。中醫學認為創傷修復需內外兼治，鼓舞氣血以生肌斂瘡是其指導思想。研究表明，某些中藥能多靶點、多環節地發揮作用:調節創傷局部組織血容量，降低組織炎症反應和滲出，調節毛細血管通透性，促進微循環運行，影響纖維結合蛋白的產生和膠原的合成，雙向調節創傷中各種生長因子的含量，使其向著有利於創傷癒合的方向發展。紫珠草具有止血、散瘀、消炎的功效。兩面針能消腫止痛、減少滲出物及促進傷口癒合。在膠原蛋白創傷修復膜中添加紫珠草、兩面針，對創面能起到良好的止血、消炎、抗菌、防感染的功效。本發明把創面修復材料製成水凝膠膜狀，並添加膠原蛋白和中藥活性成分將其有機結合製成新型的膠原蛋白創傷修復膜。本發明增加了創傷修復產品的多樣性。

發明內容
本發明的目的是提供一種膠原蛋白創傷修復膜組合物，以解決現有技術中存在的上述問題，本發明的創面修復膜具有良好的透氣性、與皮膚有良好的相容性、能有效吸收傷口的滲出液、能保持傷口乾燥的特點，能夠使傷口快速癒合以及減小傷口疤痕。本發明的另一目的是提供一種上述組合物的製備方法。本發明的膠原蛋白創傷修復膜，按重量份數該組合物由以下組分組成:
膠原蛋白0.廣0.7份
丙三醇2 5份
戊二醛廣5份
澱粉0.Γ1份
羧甲基纖維素鈉0.5飛份
去離子水8 50份
紫珠草提取物0.Γ0.6份
甘草提取物0.Γ0.6份
兩面針提取物0.Γ0.6份 聚乙烯吡咯烷酮(PVP) 0.廣2份
在上述的膠原蛋白創傷修復膜組合物中，膠原蛋白粉末和中藥活性成分粉末是活性物質，是自主提取。膠原蛋白粉末具有促進細胞再生、美白、淡化疤痕的作用；中藥活性成分具有止血、殺菌的作用；丙三醇起保溼的作用，使膠原蛋白創傷修復膜具有一定的溼度、韌性，不易撕裂、破碎；戊二醛為交聯劑；澱粉為定型劑；羧甲基纖維素鈉是膠原蛋白創傷修復膜組合物的基本骨架物質，使組合物具有膜樣的形態，也給活性物質提供附著的地點；分散劑為聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，其作用是增大藥品在膜中的溶出度，增加膠原蛋白創傷修復膜的藥效。這些組分的組合以及各組分的上述份數範圍，是通過大量試驗確定的，上述組合以及份數範圍使本發明膠原蛋白創傷修復膜具有上述的殺菌、止血、透氣性、與皮膚的相容性、有效吸收傷口滲出液、保持傷口乾燥、促進傷口快速癒合以及淡化疤痕的特點。本發明的組合物所用的中藥活性成分粉末提取工藝是:首先將紫珠草、甘草、兩面針碾碎約為3mm3大小的粗顆粒，分成等量的三組，每組都用等量的75% (重量)的乙醇分三種方法浸制，即分別浸泡7天、15天、30天。到時將浸泡中藥溶液分別減壓抽濾；留濾液並將同種藥材的三種不同天數的濾液均勻混合。將濾液在恆溫70°C時減壓蒸餾，得膏狀提取物。把提取物放在恆溫60°C的鼓風乾燥箱中烘乾，分別得到紫珠草、甘草、兩面針提取物粉末。膠原蛋白創傷修復膜依次由下列步驟製成:
將選好的新鮮的豬皮用刀把豬皮上殘留的脂肪刮下，再把豬皮洗淨、切碎後置於反應瓶中。以新配置的濃度為10%的Na2CO3溶液作為脫脂劑，向反應瓶中加入脫脂劑直至把豬皮顆粒完全淹沒，用45°C的水浴中脫脂70分鐘後抽濾。然後將脫脂後的豬皮顆粒置於另外一反應瓶中，加入適量蒸餾水，把溶液的PH調節為8，然後加入約為豬皮顆粒質量25%的蛋白酶，在加入適量蒸餾水使豬皮顆粒完全淹沒。把反應瓶放入40°C的水浴中酶解3小時。在酶解過程中通過用醋酸溶液和Na2CO3溶液調節PH使溶液的PH保持在8左右。最後分離上述混合液，用離心機離心2min取出，去除上層脫脂未盡的脂肪和下層的不溶的根毛、彈性纖維等物質，得到含膠原蛋白的中間層溶液，再在60°C的烘箱中恆溫乾燥，直至烘乾，然後用乾燥器乾燥，將乾燥物碾磨得膠原蛋白粉末備用。將羧甲基纖維素鈉與水混合，於3(T4(TC的恆溫水浴中攪拌均勻成透明膠狀物。將膠原蛋白、澱粉、戊二醛與丙三醇於室溫下混合攪拌均勻。將紫珠草提取物、甘草提取物、兩面針提取物與聚乙烯比咯烷酮(PVP)均勻混合，採用熔融法製成固體分散體；
在恆溫3(T4(TC的水浴中，將攪拌均勻的羧甲基纖維素鈉溶液和膠原蛋白溶液混合併攪拌均勻，然後加入溶解的中藥提取物溶液，將其混合併攪拌均勻。將攪拌均勻製得的混合物均勻的平鋪在乾燥、潔淨的模板上，形成厚薄均勻、表面光潔平整的液層，在60°C的恆溫鼓風乾燥箱中烘乾，揭膜即得膠原蛋白創傷修復膜。
具體實施例方式下列通過實施例的方式進一步說明本發明，本發明的範圍並不因此局限於下列實施例，而是由本發明的說明書和權利要求書限定。以下實施例中的膠原蛋白的重均分子量為17500，分子量分布6.5。
實施例1
在一個潔淨乾燥的燒杯中加入0.7份膠原蛋白粉末，I份澱粉，5份戊二醛，5份丙三醇，於室溫下攪拌均勻，在另外一個潔淨乾燥的燒杯中加入5份羧甲基纖維素鈉，再往其中加入50份去離子水，在40°C的水浴中繼續攪拌直至混合均勻。當其攪拌均勻後，把第一個燒杯中的混合液體倒入第二個燒杯中，並繼續在40°C的水浴中攪拌均勻。在第三個燒杯中加入將0.2份的紫珠草提取物、0.2份的甘草提取物、0.2份的兩面針提取物與I份的聚乙烯比咯烷酮(PVP)均勻混合，採用熔融法製成固體分散體。然後把其加入膠原蛋白混合液中繼續在40°c的水浴中攪拌均勻，得到黏稠狀的膠狀物。將膠原蛋白黏稠狀膠狀物均勻的平鋪在乾燥、潔淨的模板上，形成厚薄均勻、表面光潔平整的液層，用恆溫烘箱60°C烘乾，揭膜，即得到膠原蛋白創傷修復膜。實施例2
往一個潔淨乾燥的燒杯中加入0.5份膠原蛋白粉末，0.6份澱粉，4份戊二醛，4份丙三醇，於室溫下攪拌均勻，在另外一個潔淨乾燥的燒杯中加入3份羧甲基纖維素鈉，再往其中加入30份去離子水，在40°C的水浴中繼續攪拌直至混合均勻。當其攪拌均勻後，把第一個燒杯中的混合液體倒入第二個燒杯中，並繼續在40°C的水浴中攪拌均勻。在第三個燒杯中加入將0.2份的紫珠草提取物、0.2份的甘草提取物、0.2份的兩面針提取物與0.6份的聚乙烯比咯烷酮(PVP)均勻混合，採用熔融法製成固體分散體。然後把其加入膠原蛋白混合液中繼續在40°C的水浴中攪拌均勻，得到黏稠狀的膠狀物。將膠原蛋白黏稠狀膠狀物均勻的平鋪在乾燥、潔淨的模板上，形成厚薄均勻、表面光潔平整的液層，用恆溫烘箱60°C烘乾，揭膜，即得到膠原蛋白創傷修復膜。實施例3
往一個潔淨乾燥的燒杯中加入0.1份膠原蛋白粉末，0.1份澱粉，3份戊二醛，2.5份丙三醇，於室溫下攪拌均勻，在另外一個潔淨乾燥的燒杯中加入0.6份羧甲基纖維素鈉，再往其中加入9份去離子水，在40°C的水浴中繼續攪拌直至混合均勻。當其攪拌均勻後，把第一個燒杯中的混合液體倒入第二個燒杯中，並繼續在40°C的水浴中攪拌均勻。在第三個燒杯中加入將0.1份的紫珠草提取物、0.1份的甘草提取物、0.1份的兩面針提取物與0.1份的聚乙烯比咯烷酮(PVP)均勻混合，採用熔融法製成固體分散體。然後把其加入膠原蛋白混合液中繼續在40°C的水浴中攪拌均勻，得到黏稠狀的膠狀物。將膠原蛋白黏稠狀膠狀物均勻的平鋪在乾燥、潔淨的模板上，形成厚薄均勻、表面光潔平整的液層，用恆溫烘箱60°C烘乾，揭膜，即得到膠原蛋白創傷修復膜。實施例4
往一個潔淨乾燥的燒杯中加入0.5份膠原蛋白粉末，0.5份澱粉，3份戊二醛，2.5份丙三醇，於室溫下攪拌均勻，在另外一個潔淨乾燥的燒杯中加入4份羧甲基纖維素鈉，再往其中加入42份去離子水，在40°C的水浴中繼續攪拌直至混合均勻。當其攪拌均勻後，把第一個燒杯中的混合液體倒入第二個燒杯中，並繼續在40°C的水浴中攪拌均勻。在第三個燒杯中加入將0.3份的紫珠草提取物、0.3份的甘草提取物、0.3份的兩面針提取物與0.5份的聚乙烯比咯烷酮(PVP)均勻混合，採用熔融法製成固體分散體。然後把其加入膠原蛋白混合液中繼續在40°C的水浴中攪拌均勻，得到黏稠狀的膠狀物。將膠原蛋白黏稠狀膠狀物均勻的平鋪在乾燥、潔淨的模板上，形成厚薄均勻、表面光潔平整的液層，用恆溫烘 箱60°C烘乾，揭膜，即得到膠原蛋白創傷修復膜。
權利要求
1.一種膠原蛋白創傷修復膜，其特徵在於它是由下述重量配比的原料製成的膜: 膠原蛋白0.1~0.7份丙三醇2 5份戊二醛1~5份澱粉0.Γ1份 羧甲基纖維素鈉0.5~5份 去離子水8 50份 紫珠草提取物0.1~0.6份 甘草提取物0.1~0.6份 兩面針提取物0.1~0.6份 聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.1 2份。
2.根據權利要求1所述的膠原蛋白創傷修復膜，其特徵在於膠原蛋白的重均分子量為17000^18000,分子量分布6 7。
3.製備權利要求1中所述製備膠原蛋白創傷修復膜的方法，其特徵在於該方法包括由以下步驟組成: (1)首先將紫珠草、甘草、兩面針碾碎約為3mm3大小的粗顆粒，分成等量的三組，每組都用等量的75% (重量)的乙醇分三種方法浸制，即分別浸泡7天、15天、30天.到時將浸泡中藥溶液分別減壓抽濾；留濾液並將同種藥材的三種不同天數的濾液均勻混合.將濾液在恆溫70°C時減壓蒸餾，得膏狀提取物.把提取物放在恆溫60°C的鼓風乾燥箱中烘乾，分別得到紫珠草、甘草、兩面針提取物粉末.(2)將0.5飛重量份羧甲基纖維素鈉與8 50重量份去離子水混合，於3(T40°C的恆溫水浴中攪拌均勻成透明膠狀物.(3)將0.Γ0.7重量份膠原蛋白、0.Γ1重量份澱粉、I飛重量份戊二醛與2飛重量份丙三醇於室溫下混合攪拌均勻.(4)將0.1 0.6重量份的紫珠草提取物、0.1 0.6重量份的甘草提取物、0.1 0.6重量份的兩面針提取物與0.1 2重量份的聚乙烯比咯烷酮(PVP)均勻混合，採用熔融法製成固體分散體.(5)在恆溫3(T40°C的水浴中，將(2)步配好的羧甲基纖維素鈉溶液和(3)步配好的膠原蛋白溶液混合併攪拌均勻，然後加入(4)步配好的固體分散體，將其混合併攪拌均勻.(6)將攪拌均勻製得的混合物均勻的平鋪在乾燥、潔淨的模板上，形成厚薄均勻、表面光潔平整的液層，在60 70°C的烘箱中乾燥，乾燥時間0.6 3小時，揭膜即得膠原蛋白創傷修復膜。
4.根據權利要求3所述的膠原蛋白創傷修復膜的製備方法，其特徵在於所述膠原蛋白的重均分子量為17500,分子量分布6.5。
全文摘要
本發明涉及一種膠原蛋白創傷修復膜及其製備方法，屬於生物醫學材料領域。本發明的膠原蛋白創傷修復膜是以膠原蛋白、澱粉、戊二醛和羧甲基纖維素鈉水溶液為基本原料，添加丙三醇調控產物的溼度，添加中藥提取物的固體粉末為活性成分，同時以聚乙烯吡咯烷酮(PVP)為分散劑，阻止中藥提取物沉澱團聚。最後將膠原蛋白創傷修復膜糊狀混合液倒入模具中成型，在烘箱中乾燥，揭膜即得具有良好透氣性和修復效果的膠原蛋白創傷修復膜產品。本發明工藝簡單，生產周期短，且無毒無汙染，便於工業化生產。
文檔編號A61L15/24GK103212108SQ201310160340
公開日2013年7月24日 申請日期2013年5月4日 優先權日2013年5月4日
發明者楊華, 陳雪旭, 舒子斌, 郭曉鳳, 高榮華, 周思瑤, 嚴亦晨 申請人:四川師範大學