苦參黃酮在製備降血糖藥劑中的應用的製作方法

2023-07-21 14:32:26

專利名稱：苦參黃酮在製備降血糖藥劑中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及苦參的製取物苦參黃酮的應用，特別是苦參黃酮在製備降血糖、治療糖尿病的藥劑中的應用。
糖尿病是一種嚴重影響人民健康和生命的常見多發病，屬代謝性疾病，其發病機理、病因均未完全闡明。當今，在全球範圍內糖尿病已成為繼心腦血管疾病和腫瘤之後威脅人類的「第三號殺手」。據WHO公布的資料，1997年全世界糖尿病患者已達1.35億，預計2025年則會增加到3億人，而新增的患者主要在中國、印度之那等發展中國家。另據報導，我國目前有糖尿病患者4千萬左右，且每年將以1％上升，糖尿病患者中，90％以上是II型糖尿病。糖尿病的慢性持續高血糖狀態，可以導致組織器官的代謝異常，繼而產生功能障礙及形態改變，引起各種急慢性併發症。糖尿病患者的70％-80％死於心血管病，中老年糖尿病患者常見的死亡原因，是糖尿病腎功能衰竭及腦血管意外。
目前對糖尿病的治療，主要採用藥物降低和控制血糖。西藥主要有雙胍類藥、磺脲類、胰島素、α-葡萄糖苷酶抑制劑等。但是由於雙胍類藥的療效低、副作用大，長久使用會產生高乳酸血症；磺脲類藥對肝臟、腎臟及血細胞有損害作用，與磺胺藥共用會產生交叉過敏，而且後期產生繼發性失效；胰島素需注射給藥，長久使用將產生抗體，生物活性降低，當劑量增加後，會產生高胰島素血症，促使微血管病變的發生和發展；α-葡萄糖苷酶抑制劑(如阿卡波糖，商品名拜糖平)是一種新的治療糖尿病藥物，對餐後高血糖療效好，為進口藥品，價格昂貴，一般患者難以承受。中成藥如玉泉丸等均為複方製劑，療效不十分明顯，患者往往不得不依賴於西藥，特別是晚期糖尿病患者多採用「胰島素」進行治療。
針對上述情況，我們希望在中藥資源裡，能找到有α-葡萄糖苷酶抑制作用的藥物，經過長期地實驗篩選等研究，最終我們發現苦參的提取物苦參黃酮有非常好的降糖效果，並進行了深入系統地動物實驗研究及臨床研究工作，並取得了滿意的效果。苦參黃酮為苦參的有效部位，天然無毒副作用，純度高且降糖效果佳，不僅能降低空腹血糖，對降低餐後高血糖作用更佳，其作用機理類似阿卡波糖，即競爭抑制小腸上皮刷狀緣葡萄糖澱粉酶、蔗糖酶及胰腺α-澱粉酶，阻止1，4-糖苷鍵水解，因此口服後蔗糖和麥芽糖和消化延緩，水解產生葡萄糖的速度減慢，從而達到控制血糖過高的目的。
苦參是一種臨床上常用的中藥，性味苦寒，具有清熱燥溼、祛風殺蟲、利尿的功效。苦參在臨床上用於溼熱所致的黃疸、瀉痢；狐惑病、陰癢帶下、溼疹溼瘡、疥癬、麻風等諸證。到目前為止，還未見有關苦參提取物苦參黃酮的降血糖及治療糖尿病作用的藥理實驗和臨床觀察報導。本發明人等通過大量的化學與藥理篩選，獲得了苦參黃酮具有較強降糖作用的研究效果。為臨床治療糖尿病提供了一種新的途徑。
鑑於此，本發明的目的是提供一種苦參黃酮在製備降血糖、治療糖尿病的藥劑中的應用。
本發明的苦參黃酮的製藥用途，是用於製備降血糖、治療糖尿病的藥劑。
用苦參黃酮製備上述藥劑，按常規方法，用苦參進行提取，獲得苦參黃酮，單獨以苦參黃酮為藥物活性成分製成藥劑。藥劑可以按常規方法，製成膠囊劑、或片劑、或顆粒劑、或注射劑、或酒劑。
用苦參黃酮製備上述藥劑，也可以是將苦參黃酮與其它藥物活性成分如黃芪多糖、人參多糖、人參總甙、麥冬多糖、天花粉多糖、桑葉總多糖有效成分中的至少一種組成複方。複方製劑可以按常規方法製成膠囊劑、或片劑、或顆粒劑、或注射劑。
苦參提取苦參黃酮的方法有兩種方法一、取苦參一重量份，粉碎成粗粉，加乙醇2-30重量份，採用冷浸，滲濾或熱回流提取，收集提取液，回收乙醇，水液加乙醚或氯仿或醋酸乙酯提取，合併提取液，回收溶劑，水浴蒸乾，即得苦參黃酮。
方法二、取苦參一重量份，加乙醚或醋酸乙酯或氯仿或丙酮2-30重量份，採用泠浸法或滲濾法或熱回流提取，提取液以酸水洗滌，棄去酸水液，回收溶劑，乾燥，得黃參黃酮。
上述苦參黃酮包含黃酮類、二氫黃酮類、異黃酮類、查耳酮類、查耳酮類甙及其甙元，其中主要成分有苦參醇C、苦參醇G、苦參醇、異苦參醇酮、新苦參醇、降苦參醇、Kushenol A、Kushenol B、Kushenol D、Kushenol E、Kushenol F、Kushenol H、Kushenol I、Kushenol J、Kushenol K、Kushenol L、Kushenol M、Kushenol N、Kushenol O。上述苦參黃酮易溶於乙醚、氯仿、醋酸乙酯、丙酮、乙醇，難溶於水，具有黃酮類化合物的通性。
本發明的用苦參黃酮製備的藥劑，按照相關要求對苦參黃酮進行規範的動物實驗研究及臨床試驗，證明藥劑具有如下的明顯優點和顯著效果。
一、毒理實驗表明苦參黃酮具有無毒性本發明的苦參黃酮由中藥苦參提取，苦參來源於天然資源，經長期入藥使用證明，苦參長期服用無毒副作用。用苦參提取的苦參黃酮，富集藥物的有效成份，經毒理學研究證明，無明顯毒性。
(1)經小鼠急性毒性試驗表明，用提取的苦參黃酮，一次給藥時，未測出LD50，測得其最大耐受量為24g苦參黃酮，相當於臨床成人用量的4800倍。
(2)經大鼠長期毒性試驗表明，用提取的苦參黃酮按600、300和150mg/kg三個劑量，連續對大鼠灌胃給藥180天及停藥30天，結果經動物一般生長發育情況檢查，肝腎功能檢查，血常規檢查，臟器指數和腦、心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胃、胰腺、十二指腸、迴腸、結腸、子宮和卵巢等病理組織檢查未見明顯異常。
(3)經Beagle犬長期毒性試驗表明，用提取的苦參黃酮粉末按300、150和75mg/kg三劑量連續對Beagle犬灌胃給藥180天及停藥30天，結果經動物的一般生長發育情況，肝腎功能檢查，血常規檢查，心電圖檢查、尿常規檢查、臟器指數和腦、心、肝、腎、肺、腎上腺、胃、胸腺、十二指腸、迴腸、結腸、子宮和卵巢等病理組織檢查均未見明顯異常。
二、藥效學實驗表明苦參黃酮具有降血糖作用。
按照《中藥新藥藥理學研究指導原則》對苦參黃酮進行規範的實驗研究，並以德國拜爾公司生產的Acarbose(阿卡波糖，商品名為拜糖平)作為對照組，對四氧嘧啶和鏈脲佐菌素所致糖尿病動物模型及對正常家兔糖耐量試驗進行觀察，藥理實驗表明，用苦參黃酮對四氧嘧啶和鏈脲佐菌素所致糖尿病動物有較強的降血糖活性，能提高四氧嘧啶性糖尿病動物的糖耐量作用。具體實驗結果如下(1)用苦參黃酮對四氧嘧啶所致家兔糖尿病進行動物實驗，其實驗結果見表1。
表1苦參黃酮對四氧嘧啶所致家兔糖尿病模型的影響
表1表明苦參黃酮對四氧嘧啶所致家兔糖尿病模型有明顯的降血糖活性，與Acarbos的降血糖作用相當(P＞0.05)。
(2)用苦參黃酮對鏈脲佐菌素所致小鼠糖尿病進行模型實驗，其實驗結果見表2。表2苦參黃酮對鏈脲佐菌素所致小鼠糖尿病模型的影響
表2表明苦參黃酮對鏈脲佐菌素所致小鼠糖尿病模型有明顯的降血糖活性。
(3)用苦參黃酮對四氧嘧啶性糖尿病家兔進行糖耐量試驗，其實驗結果見表3。
表3苦參黃酮對四氧嘧啶性糖尿病家兔糖耐量的影響
注與對照組比較，P＜0.05。
表3表明苦參黃酮有明顯提高四氧嘧啶性糖尿病家兔的糖耐量作用。
三、臨床試驗表明苦參黃酮具有好的治療糖尿病的作用。
使用本發明的用苦參黃酮製備的藥劑，共觀察治療II型糖尿病80例，其中治療組48例，對照組32例。研究結果證明，苦參黃酮對糖尿病，特別是II型糖尿病有較好的療效，其空腹血糖(FBG)和餐後2小時血糖(PBG)水平均得到降低，與治療前比較，差異顯著，其P＜0.05。其治療及觀察情況如下1、病例的選擇標準根據WHO1985年確定的II型糖尿病診斷標準，即空腹血糖(FBG)＞7.8mmol/L，餐後2小時血糖(PBG)＞11.1mmol/L，並持續1個月以上。均經4周以上的飲食控制或加用磺脲類藥物後控制不滿意，且3個月內無糖尿病急性合併症、嚴重外傷、心肌梗塞及心絞痛發作、腦血管意外且肝腎功能正常者。
按照上述標準，將80例患者隨機分為治療組48例，對照組32例。治療組中，男性21例，女性27例；年齡35-74歲，平均56.5±12.0歲；病程半年-24年，平均3.6±3.7年。對照組中，男性15例，女性17例；年齡35-77歲，平均56±11.4歲；病程半年-21年，平均3.2±3.5年。
兩組病例在年齡、性別、病程、臨床症狀計分、檢測指標等方面經過統計學處理無顯著性差異(P＜0.05)。兩組病例具有可比性。
2、治療及觀察方法2.1根據《新藥臨床研究指導原則》，經4周飲食及運動治療，或其它口服降糖藥(相對固定劑量)的平衡期試驗組(苦參黃酮膠囊)和對照組(拜唐蘋)均採用口服給藥，要求患者在一日三餐吞咽第一口澱粉類食物時服用，苦參黃酮膠囊吞服，拜唐蘋嚼服。
試驗組口服苦參黃酮膠囊，每日3次，每次2粒(約100mg苦參黃酮/粒)，療程1個月；對照組口服拜糖平，每日3次，每次50mg，療程1個月。
若受試者已服用其它口服降糖藥物，則在原治療方案不變基礎上，試驗組加用苦參黃酮，對照組加用拜唐蘋。劑量、用法及療程同上。若發生低血糖反應，減少或停用其他口服降糖藥物，不改變試驗藥物基對照藥物劑量和給藥方法。
2.2觀察項目空腹血糖(FBG)，餐後2小時血糖(PBG)，血、尿、常規及肝、腎功能檢查。血糖測定採用靜脈血糖法(真糖法)，用血漿測定。
2.3不良反應的觀察在服藥期間出現的任何異常症狀、體徵、實驗室檢查都應認真析，仔細鑑別，詳細記錄。因不良反應未堅持服藥者，不納入療效分析，但計入不良反應分析。
3、治療標準顯效臨床症狀、體徵消失或明顯減輕，FBG＜7.2mmol/L；PBG降至8.3mmol/L以下，或血糖較治療前降低30％以下；有效臨床症狀、體徵明顯改善，FBG降至8.25mmol/L以下，PBG降至8.3-10.0mmol/L，或血糖較前下降10％-29％；無效臨床症狀、體徵改善不明顯或無改善，FBG無變化或血糖下降未達有效標準者。
4、數據統計和結論(一)臨床療效情況 見表4表4苦參黃酮膠囊治療NIDDM的臨床療效
表4表明治療組有效率為83.3％，對照組有效率為84.3％，兩組治療NIDDM的療效比較，無顯著性差異(P＞0.05)。
(二)空腹血糖變化情況 見表5表5苦參黃酮膠囊對FBG水平的影響(X±SDmmol/L)
注※治療後與治療前相比較，P＜0.05。
從表5可知治療組與對照組治療前FBG水平分別為9.99±2.48、10.48±2.31，治療後FBG分別為7.42±2.23、8.14±2.58。兩組治療後與治療前比較，FBG水平有顯著性差異(P＜0.05)，表明兩藥均能降低空腹血糖；且治療組與對照組比較，治療後FBG水平無顯著性差異(P＞0.05)，表明兩藥降低空腹血糖療效相當。
(三)餐後2小時血糖變化情況 見表6表6苦參黃酮膠囊對PBG水平的影響(X±SDmmol/L)
注※※治療後與治療前相比較，P＜0.01。
從表6可知治療組與對照組治療前PBG分別為17.74±5.66、17.84±4.82，治療後PBG分別為14.03±5.21、13.43±3.79，兩組治療後與治療前比較，PBG水平有顯著性差異(P＜0.05)，表明兩藥均能降低餐後血糖；且治療組與對照組比較，治療後PBG水平無顯著性差異(P＞0.05)，表明兩藥降低餐後血糖療效相當。
(四)血尿常規及肝腎功情況兩組的尿蛋白，血RBC、WBC、PCT和ALT、AST、TBIL以及BUN、Cr在後無顯著性變化(P＞0.05)。
(五)不良反應情況治療組中5例有輕度腹脹，有2例出現腹瀉，1例皮疹，對照組中7例有噁心、納差，4例有輕度腹脹。上述副作用程度均不重，未停藥，繼續治療。
(六)結論用苦參黃酮製備的藥劑具有好的治療糖尿病的作用。
實施例1本發明的苦參黃酮在製備降血糖藥劑中的應用，用苦參黃酮製備藥劑。取苦參黃酮粉末500g，加輔料適量(10-20g)，按常規方法，製成膠囊，每粒裝120mg(約含苦參黃酮100mg)。
本藥劑用於糖尿病患者，口服，每日三次，每次2粒，一月為一療程，有效率為83.3％。
典型案例1 患者王某某，男，68歲。有糖尿病史2年多，曾服用D860，降糖靈，消渴丸，達美康等藥物，症狀基本上得到控制。1999年4月，由於勞累，生氣，舊病復發。到醫院治療，患者自覺口乾、口渴、多食、多尿、下肢發軟。經飲食治療和運動治療4周後查空腹血糖12.3mmol/L，餐後2小時血糖17.7mmol/L。給予苦參黃酮膠囊口服，每次1粒，每日三次。1月後，患者自覺症狀大減，查空腹血糖9.1mmol/L，餐後2小時血糖為12.3mmol/L，療效判斷為有效。服藥期間未出現任何不良反應，治療前後肝、腎功、血、尿常規無明顯變化。
實施例2本發明的苦參黃酮在製備降血糖藥劑中的應用，用苦參黃酮製備藥劑。取苦參黃酮粉末500g，加輔料適量(10-20mg)，按常規方法，製成片劑，每片120mg(含苦參黃酮約100mg)。
本藥劑用於2型糖尿病患者，口服，每日三次，每次2片，臨床試驗方法同苦參黃酮膠囊，試驗結果表明，總有效率為82.7％。
典型病案2 患者張某某，女，47歲，發現血糖升高6月，經實驗室檢查，確診為2型糖尿病，經飲食治療和運動治療4周後空腹血糖為10.3mmol/L，餐後2小時血糖為17.4mmol/L。給予苦參黃酮片劑口服，每次2片，每日三次，治療1月後，查空腹血糖下降為6.7mmol/L，其餐後2小時血糖下降為7.4mmol/L。根據療效判斷標準，降低空腹血糖和餐後血糖的療效均為顯效，患者在用藥期間無其它不良反應。治療前後血尿常規、肝腎功無明顯變化。
實施例3本發明的苦參黃酮在製備降血糖藥劑中的應用，用苦參黃酮製備藥劑。取苦參1500g，經多次水煎煮、濾過及噴霧乾燥等方法，製成顆粒劑，每袋1g(含苦參黃酮200mg)。
本藥劑用於2型糖尿病患者，衝服，每日三次，每次1袋，臨床試驗方法同苦參黃酮膠囊，試驗結果表明，總有效率為80.9％。
典型病案3 患者王某某，女，60歲，發現糖尿病1年，其後一直用格列齊特(達美康)治療(160mg/日)療效不佳，繼續維持用藥劑量並經平衡飲食和運動治療後，空腹血糖仍然為12.1mmol/L，餐後2小時血糖仍為14.8mmol/L。給予苦參黃酮顆粒劑衝服，第次一袋，第日三次，治療1月後，查空腹血糖為7.3mmol/L，其餐後2小時血糖下降為9.1mmol/L。根據療效判斷標準，降低空腹血糖和餐後血糖的療效為顯效。服藥後10天出現肛門排氣增加，持續至第14天，未經任何處理，症狀消失，餘未出現其他不良反應。肝、腎功、血、尿常規無明顯改變。
此外，經試驗研究得出苦參黃酮與其他具有降糖作用的植物藥有效成分組成的複方也具有良好的降血糖作用。如用苦參黃酮，與黃芪多糖、人參多糖、人參總甙、麥冬多糖、天花粉多糖、桑葉總多糖等有效成分組成複方，劑量在50mg/kg-900mg/kg體重的範圍內。製成的複方可以是苦參黃酮與上述成分之一，也可以是2個或多個成分一起共同組成。
實施例4本發明的苦參黃酮在製備降糖藥劑中的應用，用苦參黃酮製備複方製劑。取苦參黃酮細粉600g，黃芪提取物多糖組分(APS-G)200g，按常規方法，混勻，制粒，裝入膠囊，每粒裝300mg，用於糖尿病患者，口服，每日三次，每次1粒，一月為一療程，有效率為85.41％。
權利要求
1.苦參黃酮的製藥用途，其特徵在於用於製備降血糖、治療糖原病的藥劑。
2.根據權利要求1所述的苦參黃酮的製藥用途，其特徵在於所說的藥劑為苦參黃酮，按常規方法製備。
3.根據權利要求2所述的苦參黃酮的製藥用途，其特徵在於所說的苦參黃酮含有苦參醇C、苦參醇G、苦參醇、異苦參醇酮、新苦參醇、降苦參醇、Kushenol A、Kushenol B、Kushenol D、Kushenol E、Kushenol F、Kushenol H、Kushenol I、Kushenol J、Kushenol K、Kushenol L、Kushenol M、Kushenol N、Kushenol O。
4.根據權利要求1、2或3所述的苦參黃酮的製藥用途，其特徵在於所說的藥劑是膠囊劑、或片劑、或顆粒劑，按常規方法製備。
5.根據權利要求1所述的苦參黃酮的製藥用途，其特徵在於所說的藥劑由苦參黃酮和黃芪多糖、人參多糖、人參總甙、麥冬多糖、天花粉多糖、桑葉總多糖有效成分中的至少一種製成，按常規方法製備。
6.根據權利要求5所述的苦參黃酮的製藥用途，其特徵在於所說的藥劑是膠囊劑、或顆粒劑、或片劑、或丸劑、或散劑，按常規方法製備。
全文摘要
本發明涉及苦參的製取物苦參黃酮的應用,特別是苦參黃酮在製備降血糖、治療糖尿病的藥劑中的應用。本發明用苦參黃酮製備治療糖尿病的藥劑,和用苦參黃酮與黃芪多糖、人參多糖、人參總甙、麥冬多糖、天花粉多糖、桑葉總多糖有效成分中的至少一種製備治療糖尿病的複方藥劑。可製成多種劑型。用於治療糖尿病具有好的療效作用。
文檔編號A61P3/00GK1348762SQ0011616
公開日2002年5月15日 申請日期2000年10月13日 優先權日2000年10月13日
發明者郭勃, 徐華模, 張德翠 申請人:瀘州寶光藥業集團有限公司