用於校驗血細胞分析儀的質控品和校準品及其製備方法
2023-07-02 18:22:46
專利名稱：用於校驗血細胞分析儀的質控品和校準品及其製備方法
用於校驗血細胞分析儀的質控品和校準品及其製備方法技術領域：
本發明涉及一種校驗細胞分析儀的精確度和穩定性時所用到的質控品和校準品。背景技術：
血細胞分析儀是日常檢驗當中不可或缺的篩查設備，每天肩負著大量的對正常或異常標本的篩查工作，一旦發現異常，醫務人員即時進行下一步相關檢查，以根據病理數據進行判斷及相關治療或調理。及時將病人與健康人員分流，減輕醫務工作量及加快醫務工作效率。由於血細胞分析儀每天對大量的病人或正常體檢標本進行分析報告數據，所以醫院每天都必須確定儀器的性能是否符合出廠時性能指標，這就需要特定的標準物質。目前國內衛生部門使用的多種血細胞分析儀校驗用的質控品和校準品，其作用在於通過質控品的日常測試可分析出儀器的精確度和穩定性，通過校準品對儀器的校準可以保證儀器的檢測結果的準確性。通常該儀器使用的標準物質都由儀器廠家配套銷售，逐漸形成壟斷性質，若用戶不是使用該廠家提供的配套試劑而是使用國內生產的配套試劑，該用戶基本不可能買到其昂貴的標準物質，而廠家配套的試劑往往價格都比較高，造成目前國內醫療成本居高不下。再者，進口標準物質也受各種條件限制而經常斷貨，如供應量(廠家也受控制)、有效期 (一般只有三個月，到用戶手上不到兩個月)、運輸方式、周期(進口基本需要一周以上)、天氣 (必須保存在2 8°C)等，生產儀器的廠家試劑也並不參與標準物質的生產，他們基本都是依靠美國的幾個廠家貼牌生產，所以配套到國內用戶手上就特別稀缺且昂貴。國內曾經有多家廠家試圖開發生產，結果只有兩三家利用人血生產出替代的標準物質，但效果依然欠佳；特別是近年來，國家已經明令禁止人體血液或其製品作為商品銷售，導致該些廠家只能將其原料轉為豬血，由於豬血與人血細胞差異較大，雖然成本低，但效果與人血就相差甚遠。
發明內容
本發明的目的是克服現有技術的不足，提供了一種價格合理、質量可靠，符合國家衛生要求、又能更準確地測試血細胞分析儀的精確度和穩定性的質控品。本發明的另一目的是克服現有技術的不足，提供了一種價格合理、質量可靠，符合國家衛生要求、又能準確校準血細胞分析儀的校準品。本發明的又一目的是提供了上述用於校驗血細胞分析儀的質控品和校準品的製備方法。為了解決上述存在的技術問題，本發明採用下述技術方案
一種用於校驗血細胞分析儀的質控品，其包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細胞模擬物和穩定劑，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合後的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩定劑；所加入的細胞模擬物根據產品的多少和濃度來添加，在此所述的抗凝劑的原料組成有Na2HP04，KH2P04，3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；所述保存液的原料組成有 C21H27N7014P2Na, C10H14013N3P3N2 ·
3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；所述穩定劑的原料組成有羥乙基澱粉，氯化鈉注射液和青黴素鈉，其中氯化鈉注射液和青黴素鈉之間的重量比為1:100，它們兩者的混合液中按每升加入1600000U的青黴素鈉；所述的細胞模擬物的原料是血細胞或直徑1 IOum的乳膠顆粒。上述用於校驗血細胞分析儀的質控品的製備方法，其包括有如下步驟採血抗凝一保鮮一過濾一檢測一離心提純稀釋一添加細胞模擬物一細胞穩定一賦值。一種用於校驗血細胞分析儀的校準品，其包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細胞模擬物和穩定劑(抗菌劑)，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合後的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩定劑；所加入的細胞模擬物根據產品的多少和濃度來添加，在此所述的抗凝劑的原料組成有妝2朋04，1(!12 04，3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；所述保存液的原料組成有C21H27N7014P2Na，C10H14013N3P3N2 ·
3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；所述穩定劑的原料組成有羥乙基澱粉，氯化鈉注射液和青黴素鈉，其中氯化鈉注射液和青黴素鈉之間的重量比為1:100，它們兩者的混合液中按每升加入1600000U的青黴素鈉；所述的細胞模擬物的原料是直徑1 IOum的乳膠顆粒。上述用於校驗血細胞分析儀的質控品的製備方法，包括有如下步驟採血抗凝一保鮮一過濾一檢測一離心提純稀釋一添加細胞模擬物一細胞穩定一賦值。與現有技術相比，本發明的有益效果是1)、本發明採用猴血代替人血，效果與人血製成的質控品和校準品相同，可以彌補目前國內用人血製造的技術空白，該項目經過多年研究和多次反覆試驗，已經解決了猴血細胞活性保護和保證細胞的生長壽命一系列問題；2)、由於進口產品成本價格昂貴，且受各種條件限制而經常斷貨，如供應量(廠家也受控制)、有效期(一般只有三個月，到用戶手上不到兩個月)、運輸方式、周期(進口基本需要一周以上)、溫度(必須保存在2 8°C)等，該項目一旦應用於生產，將會大大降低同類產品的生產成本，打破人血製成質控品及校準品市場壟斷的局面；3)、由於國家明令禁止人體血液或其製品作為商品銷售，本項目完全可以彌補到目前國內相關領域的空白。下面結合具體實施方式
對本發明作進一步的詳細描述具體實施方式
本發明是用於校驗血細胞分析儀的質控品，其用猴血漿製成的，由類白細胞、類血小板和類紅細胞組成，其中類白細胞為經過加工處理得到的類似人的白細胞模擬物；類血小板為猴血小板加工處理而成的類似人的血小板模擬物；類紅細胞為猴紅細胞加工處理後進行保存而成。在血漿中添加檸檬酸及磷酸鹽緩衝液作抗凝，ATP作營養劑穩定細胞，以青黴素殺菌防腐。本質控品，包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細胞模擬物和穩定劑(抗菌劑)，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合後的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩定劑；所加入的細胞模擬物根據產品的多少和濃度來添加。在此
所述的抗凝劑的原料組成有Na2HP04，KH2P04, 3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1,2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；抗凝劑的作用是防止猴全血血漿凝固，在此用3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉(檸檬酸和檸檬酸鈉)作抗凝劑；磷酸鹽Na2HP04、KH2P04緩衝液起到保持血漿的酸鹼度平衡作用，從而延長紅細胞的保存期。所述保存液的原料組成有C21H27N7014P2Na，C10H14013N3P3N2·
3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；保存液的作用是提供營養，保持細胞活性，延長細胞壽命，其中C21H27N7014P2Na是還原型輔酶，與C10H14013N3P3N2 ·3Η20—同補充細胞所需營養，NH4CL可降低血漿中二氧化碳含量，C6H1206 (葡萄糖)是紅細胞代謝所必需的營養成分，可延長紅細胞保存時間，且防止溶血；並可使細胞中的有機磷消失緩慢，防止紅細胞儲存的損傷；C6H1406對細胞膜有保護作用，且不影響細胞膜的功能，從而提高了紅細胞的再活率；C5H5N5可促進紅細胞ATP合成，延長紅細胞的保存期，並增強紅細胞放氧功能。所述穩定劑的原料組成有羥乙基澱粉，氯化鈉注射液和青黴素鈉，其中氯化鈉注射液和青黴素鈉之間的重量比為1 :100，它們兩者的混合液中按每升加入160000011的青黴素鈉。青黴素鈉是比較溫和的殺菌劑，可以殺死血漿中的細菌，保護細胞生長環境；羥乙基澱粉和氯化鈉注射液作為血漿填充劑，按照每批細胞含量適當添加。所述的細胞模擬物的原料是血細胞或直徑1 IOum的乳膠顆粒，它可以替代同等級大小細胞，例如當質控品用來替代白細胞時，則按2 20X 109/L來添加細胞模擬物，由於顆粒穩定，可以保證數量的準確性，並配合不同儀器所需製作成不同的固定的直方圖或散點圖供數據分析。本質控品的主要生產工藝流程如下
採血抗凝一保鮮一過濾一檢測一離心提純稀釋一添加細胞模擬物一細胞穩定一賦值， 其中
1、採血至已消毒的玻璃容器，先按101的比例加入抗凝劑，混合到一定數量後再按 10 1的比例加入保存液混勻後加蓋密封，使混合液保鮮，防止凝固；
2、血漿過濾採用輸血器過濾雜質及凝塊，經充分混勻後濾出的血液靠壁流入瓶底，以防止溶血現象破壞細胞，隨後檢測細胞含量及其它參數。3、分離提取
根據需要按照細胞數值的高低定離心的次數和提取細胞的多少取已過濾的血液平行離心吸提取所需細胞，測試餘下的血細胞參數值。4、添加細胞模擬物
根據產品要求按量添加不同大小及濃度比例的細胞模擬物 5、細胞穩定
根據血液體積按1 :100提取穩定劑加入到血液中混合，並輕度充分搖勻。
6、分裝時輕度充分搖勻血液，根據生產要求包裝量分裝到試管內，加蓋密封並置於2 8攝氏度冷庫保存。7、測試並賦值
在相應的血細胞分析儀上按要求測試或通過顆粒計數儀反覆檢測各種細胞的含量並計算賦值不確定度。
本校準品也是用猴血漿製成的，其由類白細胞、類血小板和類紅細胞組成，其中類白細胞為經過加工處理得到的類似人的白細胞模擬物；類血小板為猴血小板加工處理而成的類似人的血小板模擬物；紅細胞為猴紅細胞加工處理後進行保存而成。血漿中添加檸檬酸及磷酸鹽緩衝液作抗凝，ATP作營養劑穩定細胞，以氰黴素殺菌防腐。校準品與質控品的原料、 重量比和製作方法基本上一樣，只是模擬物質的添加和使用不一樣，質控品可直接使用血細胞或乳膠顆粒，而校準品必須使用乳膠顆粒。例如，當用來替代白細胞來校準時，按4 IlX 109/L來添加細胞模擬物；當用來替代紅細胞來校準時，按3 5X 1012/L來添加細胞模擬物；而當用來替代血小板時則按100 300X 109/L來添加細胞模擬物。對製備出來的本校準品和質控品進行生物安全的檢測，在此通過酶聯免疫吸附試驗對HBsAg、HIV-1/HIV-2抗體、HCV抗體檢測為陰性；
從上可以看出，1本發明採用猴血代替人血，效果與人血製成的質控品和校準品相同， 可以彌補目前國內用人血製造的技術空白，該項目經過多年研究和多次反覆試驗，已經解決了猴血細胞活性保護和保證細胞的生長壽命一系列問題；2、由於進口產品成本價格昂貴，且受各種條件限制而經常斷貨，如供應量(廠家也受控制)、有效期(一般只有三個月， 到用戶手上不到兩個月)、運輸方式、周期(進口基本需要一周以上)、溫度(必須保存在2 8°C)等，該項目一旦應用於生產，將會大大降低同類產品的生產成本，打破人血製成質控品及校準品市場壟斷的局面；3、由於國家明令禁止人體血液或其製品作為商品銷售，本項目完全可以彌補到目前國內相關領域的空白。
權利要求
1.一種用於校驗血細胞分析儀的質控品，其特徵在於包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細胞模擬物和穩定劑，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合後的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩定劑；所加入的細胞模擬物根據產品的多少和濃度來添加，在此所述的抗凝劑的原料組成有Na2HP04，KH2P04，3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；所述保存液的原料組成有C21H27N7014P2Na，C10H14013N3P3N2 ·3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；所述穩定劑的原料組成有羥乙基澱粉，氯化鈉注射液和青黴素鈉，其中氯化鈉注射液和青黴素鈉之間的重量比為1 :100，它們兩者的混合液中按每升加入160000011的青黴素鈉；所述的細胞模擬物的原料是血細胞或直徑1 IOum的乳膠顆粒。
2.一種製備如權利要求1所述的用於校驗血細胞分析儀的質控品的製備方法，其包括有如下步驟採血抗凝一保鮮一過濾一檢測一離心提純稀釋一添加細胞模擬物一細胞穩定一賦值。
3.一種用於校驗血細胞分析儀的校準品，其特徵在於其特徵在於包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細胞模擬物和穩定劑(抗菌劑)，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10 :1，猴全血血漿和抗凝劑混合後的混合液與保存液之間的重量比為10 1 ；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩定劑；所加入的細胞模擬物根據產品的多少和濃度來添加，在此所述的抗凝劑的原料組成有Na2HP04，KH2P04，3-羥基-3-羧基戊二酸，2-羥基丙烷-1，2，3-三羧酸鈉和純水，它們的重量比為5 10 :3 10 20 50 15 30 1000 ；所述保存液的原料組成有C21H27N7014P2Na，C10H14013N3P3N2 ·3H20, NH4CL, C6H1206, C6H1406, C5H5N5 和純水，它們的重量比為:0· 5 5 :0· 1 1 5 15 20 50 10 50 :0. 5 5 1000 ；所述穩定劑的原料組成有羥乙基澱粉，氯化鈉注射液和青黴素鈉，其中氯化鈉注射液和青黴素鈉之間的重量比為1 :100，它們兩者的混合液中按每升加入160000011的青黴素鈉；所述的細胞模擬物的原料是直徑1 IOum的乳膠顆粒。
4.一種製備如權利要求3所述的用於校驗血細胞分析儀的質控品的製備方法，其包括有如下步驟採血抗凝一保鮮一過濾一檢測一離心提純稀釋一添加細胞模擬物一細胞穩定一賦值。
全文摘要
一種用於校驗血細胞分析儀的質控品和校準品，包括有猴全血血漿、抗凝劑、保存液、細胞模擬物和穩定劑，其中猴全血血漿與抗凝劑之間的重量比為10∶1，猴全血血漿和抗凝劑混合後的混合液與保存液之間的重量比為10∶1；在上述三種成份的混合液中按重量加入1%的穩定劑；所加入的細胞模擬物根據產品的多少和濃度來添加。它們的價格合理、質量可靠，符合國家衛生要求、又能更準確地測試血細胞分析儀的精確度和穩定性。
文檔編號G01N33/48GK102435724SQ201110000498
公開日2012年5月2日 申請日期2011年1月4日 優先權日2011年1月4日
發明者歐明坤 申請人:中山市滔略生物科技有限公司