從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法
2023-10-09 07:40:34 1
從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法
【專利摘要】本發明公開了一種從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，包括如下步驟：(1)去脂：以新鮮雞皮為原料，剪碎洗淨，加入質量濃度為0.8～1.2％的H2O2的NaOH溶液，浸泡，用清水洗至中性，瀝乾，得去脂雞皮；(2)製備膠原蛋白：向去脂雞皮加入去離子水，升溫，加入複合蛋白酶Ⅰ，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；(3)製備低分子量活性膠原蛋白肽：向散狀膠原蛋白加複合蛋白酶Ⅱ，進一步酶解，酶解完全後，升溫，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色後過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經乾燥後製得低分子量活性膠原蛋白肽。本發明優化了工藝步驟，提高了生產率，提升了膠原蛋白肽的得率，提高了膠原蛋白肽的活性。
【專利說明】從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及雞皮的深加工【技術領域】，具體涉及一種從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法。
【背景技術】
[0002]雞皮屬於富含動物結締組織的原料，有很好的美容功效，其含有豐富的膠原蛋白，能使皮膚光滑祛皺，效果是其它東西沒法比較的。膠原蛋白具有獨特的三股超螺旋結構，三條鏈相互平行而且由鏈間氫鍵相連，具有十分穩定的性質，一般的加工溫度及短時間加熱都難使其分解，因此難被人體吸收，直接食用利用率較低；如將膠原蛋白水解為多肽後，消化吸收率低幾乎達到100%，而其營養劑生理功能也會顯著提高，如:保護胃黏膜以及抗潰瘍，促進皮膚膠原代謝，抑制血壓上升，能促進鈣吸收和降低血清中膽固醇含量，對關節炎等膠原病也都有很好的預防和治療作用。
[0003]近幾年來，膠原蛋白的開發和利用已引起人們廣泛的關注。不過，並非所有的膠原蛋白肽都能輕易地應用於不同的領域。膠原蛋白肽的用途主要取決於膠原水解產物量，膠原蛋白肽在醫藥、食品、化妝品、精細化工產品中的應用都與其分子量有關。分子量的大小已經成為衡量產品質量的標準。
[0004]目前，國內生產的膠原蛋白肽，其分子量多在2000道爾頓以上，生物學活性很低。
[0005]經過專利檢索，還未發現從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法的相關文獻。
【發明內容】
[0006]本發明所要解決的技術問題是提供一種從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，該方法生產出的膠原蛋白肽的分子量分布在500~1500道爾頓之間。
[0007]本發明提供的技術方案如下:
[0008]從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，包括以下步驟:
[0009](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗淨，用18~20倍原料重的質量濃度為0.8~
1.2%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在18~22°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙幹，得去脂雞皮；
[0010](2)製備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量5~10倍量的去離子水，升溫至38~45°C，加入原料質量1%。~3%。的複合蛋白酶I ,進行酶解,雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0011]( 3)製備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量1%。~3%。複合蛋白酶II，進一步酶解，酶解完全後，升溫至90~100°C，保持15~30min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色後過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經乾燥後製得低分子量活性膠原蛋白肽。
[0012]步驟⑵中所述複合蛋白酶I為氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶。[0013]步驟(3)中所述複合蛋白酶II為內切蛋白酶。
[0014]優選地，步驟(3)中所述乾燥為噴霧乾燥。
[0015]本發明的有益效果在於:
[0016]本發明採用兩步酶切法從雞皮中提取膠原蛋白，具有產品活性高、得率高的優點。在酶解前，對雞皮進行去脂處理，有效避免了酶解液中顆粒狀的脂肪與酶解液形成混懸液，也防止脂肪粒殘存在膠原蛋白中，影響膠原蛋白得率，降低膠原蛋白肽的生物學活性。氨肽酶和羧肽酶是外切酶，本發明首先採用氨肽酶和羧肽酶對雞皮中的膠原蛋白進行外切，將膠原蛋白與雞皮的其他組織成分離開，使雞皮成為散狀後，再用內切蛋白酶對蛋白質進行酶解，使蛋白成為小分子的蛋白肽。
[0017]綜上所述，本發明在不同階段科學選取了不同的蛋白酶，優化了工藝步驟，提高了生產率，提升了膠原蛋白肽的得率，提高了膠原蛋白肽的活性。採用本發明製得的產品，分子量在500~1500道爾頓之間約佔90%，活性多肽含量高達90%以上。
【具體實施方式】
[0018]以下結合實施例對本發明作進一步說明，但本發明並不局限於這些實施例。
[0019]實施例1
[0020](I)去脂:以新鮮 雞皮為原料，剪碎洗淨，用18倍原料重的質量濃度為1.2%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在18°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙幹，得去脂雞皮；
[0021](2)製備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量10倍量的去離子水，升溫至45°C，加入原料質量1%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0022](3)製備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量3%。內切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全後，升溫至90°C，保持30min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色後過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經噴霧乾燥後製得低分子量活性膠原蛋白肽。
[0023]實施例2
[0024](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗淨，用19倍原料重的質量濃度為1.1%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在19°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙幹，得去脂雞皮；
[0025](2)製備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量9倍量的去離子水，升溫至43°C，加入原料質量2%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0026](3)製備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量1%。內切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全後，升溫至95°C，保持25min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色後過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經噴霧乾燥後製得低分子量活性膠原蛋白肽。
[0027]實施例3
[0028](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗淨，用20倍原料重的質量濃度為1.0%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在20°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙幹，得去脂雞皮；
[0029](2)製備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量7倍量的去離子水，升溫至38°C，加入原料質量3%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0030](3)製備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量2%。內切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全後，升溫至10(TC，保持15min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色後過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經噴霧乾燥後製得低分子量活性膠原蛋白肽。
[0031]實施例4
[0032](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗淨，用20倍原料重的質量濃度為0.8%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在20°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙幹，得去脂雞皮；
[0033](2)製備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量5倍量的去離子水，升溫至45°C，加入原料質量3%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0034](3)製備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量3%。內切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全後，升溫至100°C，保持20min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色後過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經噴霧乾燥後製得低分子量活性膠原蛋白肽。[0035]實施例5
[0036](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗淨，用20倍原料重的質量濃度為0.9%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在22°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙幹，得去脂雞皮；
[0037](2)製備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量10倍量的去離子水，升溫至40°C，加入原料質量2%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0038](3)製備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量2%。內切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全後，升溫至95°C，保持20min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色後過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經噴霧乾燥後製得低分子量活性膠原蛋白肽。
【權利要求】
1.從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，其特徵在於，包括以下步驟: (1)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗淨，用18~20倍原料重的質量濃度為0.8~1.2%的H2O2的0.01mol/L NaOH溶液在18~22°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙幹，得去脂雞皮； (2)製備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量5~10倍量的去離子水，升溫至38~45°C，加入原料質量1%。~3%。的複合蛋白酶I，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白； (3)製備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量1%。~3%。複合蛋白酶II，進一步酶解，酶解完全後，升溫至90~100°C，保持15~30min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色後過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經乾燥後製得低分子量活性膠原蛋白肽。
2.根據權利要求1所述從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，其特徵在於:步驟(2)中所述複合蛋白酶I為氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶。
3.根據權利要求1所述從雞皮中 提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，其特徵在於:步驟⑶中所述複合蛋白酶II為內切蛋白酶。
4.根據權利要求1所述從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，其特徵在於:步驟(3)中所述幹 燥為噴霧乾燥。
【文檔編號】C12P21/06GK103952457SQ201410179061
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2014年4月30日 優先權日:2014年4月30日
【發明者】周冠旻 申請人:桂林軍供生化技術開發有限公司