一種胞磷膽鹼鈉的製備方法與流程
2023-09-16 17:54:40
本發明涉及一種胞磷膽鹼鈉的製備方法，屬於生物製藥技術領域。
背景技術：
胞磷膽鹼鈉，又稱胞二磷膽鹼鈉，是腦代謝激活劑，作為內源性合成磷脂醯膽鹼的中間體可促進神經細胞膜磷脂的合成，磷脂也是構建生物膜的重要成分。中樞神經損傷後，胞磷膽鹼鈉參與修復和再生，起神經保護作用，在神經介質的轉移和生物電的傳導中也起著重要作用。胞磷膽鹼鈉在臨床上主要用於頭部外傷及腦術後伴有意識障礙、腦梗塞急性意識障礙、促進腦卒中偏癱患者上肢功能恢復及急性胰腺炎等病症，對急性中風、外科手術後引起的神經損傷、意識障礙，對帕金森綜合症、痴呆症、青光眼等有明顯的臨床治療效果。胞磷膽鹼鈉為目前臨床用量最大的神經激活劑，具有以下臨床用途：（1）降低腦血管阻力，增加腦血流，促進腦物質代謝，改善腦循環；（2）增強腦幹網狀結構的機能，增強椎體系統機能，改善運動麻痺，促進卵磷脂合成，改善腦代謝，可與腦多肽合用，對改善腦功能有協同作用；（3）主要適用症為急性顱腦外科及腦手術後意識障礙；（4）臨床上還用於其他中樞神經系統急性損傷引起的功能和意識障礙、震顫麻痺、耳鳴和神經性耳聾、安眠藥中毒等；（5）近年來臨床上廣泛用於缺血性腦中風、腦動脈硬化、多梗塞性痴呆、老年痴呆症、小兒病毒性腦炎等。目前製備胞磷膽鹼鈉的方法有： ①化學合成，利用CMP(5′-胞苷酸)和磷酸膽鹼作為反應物，對-甲苯磺醯氯作為縮合劑，在N-二甲基甲醯胺存在下進行縮合製備，用717(Cl-)型陰離子交換柱和711(Cl-)型濃縮柱分離液酒精沉澱製備胞磷膽鹼鈉，其缺點是難與縮合劑分離，產品不適合藥用；②酶促合成，抽提細胞液用胞苷三磷酸(CTP)和磷酸膽鹼生物合成胞磷膽鹼鈉，酶和細胞抽提液合成需要底物CTP，合成價格高； ③游離細胞和酵母無細胞抽提液合成胞磷膽鹼鈉，游離酵母合成需要大量酵母，且只能一次性使用，具有很多缺點。
技術實現要素：
本發明所要解決的技術問題：針對目前化學合成胞磷膽鹼鈉中產品難與縮合劑分離，導致的產品不適合藥用的問題，提供了一種胞磷膽鹼鈉的製備方法，本發明以氯化磷酸膽鹼鈣鹽為原料，首先通過與苯進行二元共沸除去氯化磷酸膽鹼鈣鹽中的結晶水，然後再將氯化磷酸膽鹼鈣鹽與碳酸鈉反應，生成碳酸鈣沉澱，過濾，得到粘稠物，將粘稠物與乙醯氯進行反應，產物再與胞苷酸反應，減壓蒸餾得到殘餘物，最後用氫氧化鈉、乙醇進行結晶和重結晶得到產物，本發明操作簡單，乙醯氯加水後容易除去，並且溶劑全部可以回收利用，更環保，經濟效益更高，本發明產品純度高，達到了98%以上，適合藥用。
為解決上述技術問題，本發明採用如下所述的技術方案是：
（1）量取200～300mL苯加入到帶有分流器和溫度計的三口燒瓶中，置於油浴中，向三口燒瓶中加入10～20g氯化磷酸膽鹼鈣鹽，控制油浴溫度在120～130℃，磁力攪拌30～40min，得到氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液；
（2）向上述氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液中加入100～200mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應2～3h，產生白色沉澱，過濾，將濾液進行減壓蒸餾，得到粘稠物；
（3）將上述粘稠物加入到裝有溫度計和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，並置於油浴中，向三口燒瓶中依次加入300～400mL四氫呋喃、3～5g乙醯氯，控制油浴溫度在75～85℃，磁力攪拌反應2～3h，再向反應液中加入8～12g胞苷酸，攪拌反應5～6h，得到混合液；
（4）將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入100～200mL去離子水，攪拌10～20min，靜置，分層，用分液漏鬥進行分液，得有機相，將有機相進行減壓蒸餾，得到殘餘物；
（5）將上述殘餘物加入到燒杯中，再加入200～300mL質量濃度為20%NaOH溶液，置於水浴鍋中，控制溫度在80～90℃，向燒杯中加入10～20g活性炭，攪拌20～30min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有400～500mL質量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌1～2h，靜置14～16h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；
（6）將上述粗品加入到盛有200～300mL質量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置於水浴鍋中，水浴控制溫度在80～90℃，再向燒杯中加入500～600mL質量濃度為95%乙醇，攪拌1～2h，靜置14～16h，使固體全部析出，離心分離，得沉澱物，經乾燥，磨碎，得到胞磷膽鹼鈉產品。
本發明的應用方法：稱取0.3～0.5g本發明製得的胞磷膽鹼鈉加入到醫用吊瓶中，向吊瓶中加入100～200mL質量濃度為5%～10%葡萄糖，攪拌使胞磷膽鹼鈉溶解，然後滴注到人體，每5～7天為一個療程，2～4個療程即可痊癒，主要用來治療急性顱腦外傷及腦手術後的意識障礙。
本發明與其他方法相比，有益技術效果是：
（1）本發明操作簡單，乙醯氯加水後容易除去，並且溶劑全部可以回收利用，更環保，經濟效益更高，本發明產品純度高，並且可以適合藥用；
（2）有效地解決了化學合成胞磷膽鹼鈉中產品難與縮合劑分離，導致的產品不適合藥用的問題。
具體實施方式
首先量取200～300mL苯加入到帶有分流器和溫度計的三口燒瓶中，置於油浴中，向三口燒瓶中加入10～20g氯化磷酸膽鹼鈣鹽，控制油浴溫度在120～130℃，磁力攪拌30～40min，得到氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液；向上述氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液中加入100～200mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應2～3h，產生白色沉澱，過濾，將濾液進行減壓蒸餾，得到粘稠物；將上述粘稠物加入到裝有溫度計和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，並置於油浴中，向三口燒瓶中依次加入300～400mL四氫呋喃、3～5g乙醯氯，控制油浴溫度在75～85℃，磁力攪拌反應2～3h，再向反應液中加入8～12g胞苷酸，攪拌反應5～6h，得到混合液；將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入100～200mL去離子水，攪拌10～20min，靜置，分層，用分液漏鬥進行分液，得有機相，將有機相進行減壓蒸餾，得到殘餘物；將上述殘餘物加入到燒杯中，再加入200～300mL質量濃度為20%NaOH溶液，置於水浴鍋中，控制溫度在80～90℃，向燒杯中加入10～20g活性炭，攪拌20～30min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有400～500mL質量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌1～2h，靜置14～16h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；將上述粗品加入到盛有200～300mL質量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置於水浴鍋中，水浴控制溫度在80～90℃，再向燒杯中加入500～600mL質量濃度為95%乙醇，攪拌1～2h，靜置14～16h，使固體全部析出，離心分離，得沉澱物，經乾燥，磨碎，得到胞磷膽鹼鈉產品。
實例1
首先量取200mL苯加入到帶有分流器和溫度計的三口燒瓶中，置於油浴中，向三口燒瓶中加入10g氯化磷酸膽鹼鈣鹽，控制油浴溫度在120℃，磁力攪拌30min，得到氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液；向上述氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液中加入100mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應2h，產生白色沉澱，過濾，將濾液進行減壓蒸餾，得到粘稠物；將上述粘稠物加入到裝有溫度計和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，並置於油浴中，向三口燒瓶中依次加入300mL四氫呋喃、3g乙醯氯，控制油浴溫度在75℃，磁力攪拌反應2h，再向反應液中加入8g胞苷酸，攪拌反應5h，得到混合液；將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入100mL去離子水，攪拌10min，靜置，分層，用分液漏鬥進行分液，得有機相，將有機相進行減壓蒸餾，得到殘餘物；將上述殘餘物加入到燒杯中，再加入200mL質量濃度為20%NaOH溶液，置於水浴鍋中，控制溫度在80℃，向燒杯中加入10g活性炭，攪拌20min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有400mL質量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌1h，靜置14h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；將上述粗品加入到盛有200mL質量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置於水浴鍋中，水浴控制溫度在80℃，再向燒杯中加入500mL質量濃度為95%乙醇，攪拌1h，靜置14h，使固體全部析出，離心分離，得沉澱物，經乾燥，磨碎，得到胞磷膽鹼鈉產品。
稱取0.3g本發明製得的胞磷膽鹼鈉加入到醫用吊瓶中，向吊瓶中加入100mL質量濃度為5%葡萄糖，攪拌使胞磷膽鹼鈉溶解，然後滴注到人體，每5天為一個療程，4個療程即可痊癒，主要用來治療急性顱腦外傷及腦手術後的意識障礙。
實例2
首先量取250mL苯加入到帶有分流器和溫度計的三口燒瓶中，置於油浴中，向三口燒瓶中加入15g氯化磷酸膽鹼鈣鹽，控制油浴溫度在125℃，磁力攪拌35min，得到氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液；向上述氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液中加入150mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應2.5h，產生白色沉澱，過濾，將濾液進行減壓蒸餾，得到粘稠物；將上述粘稠物加入到裝有溫度計和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，並置於油浴中，向三口燒瓶中依次加入350mL四氫呋喃、4g乙醯氯，控制油浴溫度在80℃，磁力攪拌反應2.5h，再向反應液中加入10g胞苷酸，攪拌反應5.5h，得到混合液；將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入150mL去離子水，攪拌15min，靜置，分層，用分液漏鬥進行分液，得有機相，將有機相進行減壓蒸餾，得到殘餘物；將上述殘餘物加入到燒杯中，再加入250mL質量濃度為20%NaOH溶液，置於水浴鍋中，控制溫度在85℃，向燒杯中加入15g活性炭，攪拌25min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有450mL質量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌1.5h，靜置15h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；將上述粗品加入到盛有250mL質量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置於水浴鍋中，水浴控制溫度在85℃，再向燒杯中加入550mL質量濃度為95%乙醇，攪拌1.5h，靜置15h，使固體全部析出，離心分離，得沉澱物，經乾燥，磨碎，得到胞磷膽鹼鈉產品。
稱取0.4g本發明製得的胞磷膽鹼鈉加入到醫用吊瓶中，向吊瓶中加入150mL質量濃度為8%葡萄糖，攪拌使胞磷膽鹼鈉溶解，然後滴注到人體，6天為一個療程，3個療程即可痊癒，主要用來治療急性顱腦外傷及腦手術後的意識障礙。
實例3
首先量取300mL苯加入到帶有分流器和溫度計的三口燒瓶中，置於油浴中，向三口燒瓶中加入20g氯化磷酸膽鹼鈣鹽，控制油浴溫度在130℃，磁力攪拌40min，得到氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液；向上述氯化磷酸膽鹼鈣鹽苯混合液中加入200mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應3h，產生白色沉澱，過濾，將濾液進行減壓蒸餾，得到粘稠物；將上述粘稠物加入到裝有溫度計和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，並置於油浴中，向三口燒瓶中依次加入400mL四氫呋喃、5g乙醯氯，控制油浴溫度在85℃，磁力攪拌反應3h，再向反應液中加入12g胞苷酸，攪拌反應6h，得到混合液；將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入200mL去離子水，攪拌20min，靜置，分層，用分液漏鬥進行分液，得有機相，將有機相進行減壓蒸餾，得到殘餘物；將上述殘餘物加入到燒杯中，再加入300mL質量濃度為20%NaOH溶液，置於水浴鍋中，控制溫度在90℃，向燒杯中加入20g活性炭，攪拌30min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有500mL質量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌2h，靜置16h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；將上述粗品加入到盛有300mL質量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置於水浴鍋中，水浴控制溫度在90℃，再向燒杯中加入600mL質量濃度為95%乙醇，攪拌2h，靜置16h，使固體全部析出，離心分離，得沉澱物，經乾燥，磨碎，得到胞磷膽鹼鈉產品。
稱取0.5g本發明製得的胞磷膽鹼鈉加入到醫用吊瓶中，向吊瓶中加入200mL質量濃度為10%葡萄糖，攪拌使胞磷膽鹼鈉溶解，然後滴注到人體，每7天為一個療程，2個療程即可痊癒，主要用來治療急性顱腦外傷及腦手術後的意識障礙。