一種繸狀芸香素的提取分離方法

2023-12-08 12:40:26

專利名稱：一種繸狀芸香素的提取分離方法
技術領域：
本發明屬於醫藥技術領域，公開了一種縫狀芸香素的提取分離方法。
背景技術：
縫狀芸香素，為呋喃香豆素類化合物，白色片狀結晶，mp.87_87.5°C，分子式為C16H14O3，分子量為254. 29，易溶於丙酮、乙酸乙酯等低極性溶劑。縫狀芸香素具有抗生育作用，大鼠給以O. 36g/kg時，抗生育率為80%，要達到100%抗生育作用的有效劑量範圍很窄。縫狀芸香素來源於芸香科黃皮CZaw1Sefla(Lour. ) Skeels的根皮,原產中國南部，已有1500年以上栽培歷史。中國的廣東、廣西、臺灣、福建種植較多，四川、雲南 也有分布。黃皮有消除胸腹脹滿、生津、止渴、順氣、鎮咳的功效；苦味較重的黃皮，效果尤佳。有黃皮的苦味，可以刺激膽汁分泌，促進消化，使吸收機能暢旺；此種苦味質，還有強心作用，又能鬆弛胸腹肌肉緊張，脹滿狀況得到減少或消除，黃皮之所以能順氣、鎮咳，就是由於它具有鬆弛胸腹肌肉緊張作用，使呼吸順暢，沒有障礙問題，咳嗽自然停，黃皮還有較高的藥用價值，根、葉、果和種子等都可入藥，具有消食健胃、理氣健脾、行氣止痛等功效，俗有「飢食荔枝，飽食黃皮」之說。果皮可消風腫，去疳積；種子可治疝氣、蜈蚣咬傷和小兒頭瘡。黃皮種子富含油分，出油率高達42%，為優良的潤滑劑。黃皮作為一種優質的水果，其果實除鮮食外，尚可加工成果凍、果醬、蜜餞、果餅及清涼飲料等或鹽潰、糖潰。所以，在民間黃皮素有「果中之寶」之稱。

發明內容
本發明的目的是提供一種縫狀芸香素的提取分離方法，具體來說，是採用柱層析和高速逆流色譜結合的方法製備縫狀芸香素。本發明所述的一種縫狀芸香素的提取分離方法，其特徵在於包含以下步驟
(1)提取以黃皮根皮為原料，置於萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，萃取壓力為20-45MPa，萃取溫度為30_60°C，解析壓力為6-7. 5MPa，解析溫度為25_45°C，萃取O. 5_3h，得到縫狀芸香素粗提物；
(2)柱層析粗提物用氯仿溶解，用矽膠拌樣，揮幹氯仿，上中壓矽膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯混合溶液梯度洗脫，收集目標流分；
(3)高速逆流色譜將目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，收集高濃度流分；
(4)結晶將高濃度流分減壓濃縮，放置結晶，40-60°C溫度下真空乾燥，得到白色結晶。所述步驟(I)中C02流量為20_30kg/h。所述步驟(2)中矽膠為200-300目，柱徑高比為1:15，壓力控制在O. 6-0. 9MPa，石油醚-乙酸乙酯體積比為3:1-20。所述步驟(3)正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水體積比為6-9:5-7:6-9:4-5,紫外檢測波長為247nm。
本發明的積極效果為本發明製備的縫狀芸香素純度高、樣品損失少、製備量大，易於實現工業化生產。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。
具體實施例方式實施例I :
以黃皮根皮為原料，取1kg，粉碎，置於萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，CO2流量為30kg/h，萃取壓力為45MPa，萃取溫度為55°C，解析壓力為7. 5MPa，解析溫度為28°C，萃取O. 5h，得到縫狀芸香素粗提物，用氯仿溶解，用矽膠拌樣，矽膠為200目，揮幹氯仿，上中壓 矽膠柱層析，柱徑高比為1:15，壓力控制在O. 8MPa，石油醚-乙酸乙酯混合溶液3: 1、3:10、3:20梯度洗脫，收集目標流分，將目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，體積比為9:7:9:5，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，檢測波長為247nm，收集高濃度流分，減壓濃縮，放置結晶，60°C溫度下真空乾燥，得到縫狀芸香素白色結晶，含量99. 2%。實施例2:
以黃皮根皮為原料，取1kg，粉碎，置於萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，CO2流量為22kg/h，萃取壓力為35MPa，萃取溫度為40°C，解析壓力為6. 5MPa，解析溫度為25°C，萃取3h，得到縫狀芸香素粗提物，用氯仿溶解，用矽膠拌樣，矽膠為300目，揮幹氯仿，上中壓矽膠柱層析，柱徑高比為1:15，壓力控制在O. 6MPa，石油醚-乙酸乙酯混合溶液3:2、3:10、3:17梯度洗脫，收集目標流分，將目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，體積比為7:6:8:5，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，檢測波長為247nm，收集高濃度流分，減壓濃縮，放置結晶，50°C溫度下真空乾燥，得到縫狀芸香素白色結晶，含量99. 4%。實施例3:
以黃皮根皮為原料，取1kg，粉碎，置於萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，CO2流量為28kg/h，萃取壓力為20MPa，萃取溫度為50°C，解析壓力為6MPa，解析溫度為30°C，萃取lh，得到縫狀芸香素粗提物，用氯仿溶解，用矽膠拌樣，矽膠為300目，揮幹氯仿，上中壓矽膠柱層析，柱徑高比為1:15，壓力控制在O. 8MPa，石油醚-乙酸乙酯混合溶液3:1、3:11、3:19梯度洗脫，收集目標流分，將目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，體積比為8:5:6: 5，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，檢測波長為247nm，收集高濃度流分，減壓濃縮，放置結晶，45°C溫度下真空乾燥，得到縫狀芸香素白色結晶，含量98. 5%。實施例4:
以黃皮根皮為原料，取1kg，粉碎，置於萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，CO2流量為25kg/h，萃取壓力為35MPa，萃取溫度為60°C，解析壓力為6MPa，解析溫度為35°C，萃取lh，得到縫狀芸香素粗提物，用氯仿溶解，用矽膠拌樣，矽膠為300目，揮幹氯仿，上中壓矽膠柱層析，柱徑高比為1:15，壓力控制在O. 9MPa，石油醚-乙酸乙酯混合溶液3:3、3:13、3:20梯度洗脫，收集目標流分，將目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，體積比為9:5:6: 4，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，檢測波長為247nm，收集高濃度流分，減壓濃縮，放置結晶，40°C溫度下真空乾燥，得到縫狀芸香素白色結晶，含量98. 7%。實施例5:
以黃皮根皮為原料，取1kg，粉碎，置於萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，CO2流量為20kg/h，萃取壓力為40MPa，萃取溫度為30°C，解析壓力為7MPa，解析溫度為45°C，萃取2h，得到縫狀芸香素粗提物，用氯仿溶解，用矽膠拌樣，矽膠為200目，揮幹氯仿，上中壓矽膠柱層析，柱徑高比為1:15，壓力控制在O. 6MPa，石油醚-乙酸乙酯混合溶液3: 2、3:14、3:20梯度洗脫，收集目標流分，將目標流分濃縮，注入 高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，體積比為6:5:6: 4，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，檢測波長為247nm，收集高濃度流分，減壓濃縮，放置結晶，55°C溫度下真空乾燥，得到縫狀芸香素白色結晶，含量為98. 9%。
權利要求
1.一種縫狀芸香素的提取分離方法，其特徵在於，包括下列步驟 (1)提取以黃皮根皮為原料，置於萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，萃取壓力為20-45MPa，萃取溫度為30_60°C，解析壓力為6-7. 5MPa，解析溫度為25_45°C，萃取0. 5_3h，得到縫狀芸香素粗提物； (2)柱層析粗提物用氯仿溶解，用矽膠拌樣，揮幹氯仿，上中壓矽膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯混合溶液梯度洗脫，收集目標流分； (3)高速逆流色譜將目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，收集高濃度流分； (4)結晶將高濃度流分減壓濃縮，放置結晶，40-60°C溫度下真空乾燥，得到白色結晶。
2.根據權利要求I所述的一種縫狀芸香素的提取分離方法，其特徵在於所述步驟(I)中 C02 流量為 20-30kg/h。
3.根據權利要求I所述的一種縫狀芸香素的提取分離方法，其特徵在於所述步驟(2)中矽膠為200-300目，柱徑高比為1:15，壓力控制在0. 6-0. 9MPa，石油醚-乙酸乙酯體積比為 3:1-20。
4.根據權利要求I所述的一種縫狀芸香素的提取分離方法，其特徵在於所述步驟(3)正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水體積比為6-9:5-7:6-9:4-5，紫外檢測波長為247nm。
全文摘要
本發明屬於醫藥技術領域，公開了一種繸狀芸香素的提取分離方法。方法是以黃皮根皮為原料，進行超臨界二氧化碳萃取，解析物用氯仿溶解，用矽膠拌樣，揮幹氯仿，上中壓矽膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯混合溶液梯度洗脫，收集目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，收集高濃度流分，濃縮，結晶，分離結晶，乾燥得到繸狀芸香素。本發明分離效果好，產品純度可達98%以上，適合工業化生產。
文檔編號C07D493/04GK102633807SQ201210119310
公開日2012年8月15日 申請日期2012年4月23日 優先權日2012年4月23日
發明者萬冬梅, 劉東鋒 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司