重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠的製作方法
2024-01-28 08:20:15 1
專利名稱：重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠的製作方法
技術領域：
本發明涉及生物製品領域。特別是涉及一種重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠及其製備方法。
背景技術：
鹼性成纖維細胞生長因子(Basic fibroblast growth factor，簡寫為bFGF)主要分布於中胚層和神經胚層來源的組織器官，對許多組織細胞有作用，可促進細胞分裂，調節細胞代謝，影響細胞的形態、浸潤、分化和衰老，對角膜的上皮細胞基質細胞核內皮細胞均可產生影響，對鹼燒傷角膜上皮的再生、角膜基質層和內皮層的修復均有促進作用。重組牛鹼性成纖維細胞生長因子(Recombinant bovine basic fibroblast growth factor，簡寫為rb-bFGF)是由含有高效表達牛鹼性成纖維細胞生長因子基因的大腸桿菌，經發酵、分離和高度純化後得到的活性因子。rb-bFGF可治療各種原因引起的角膜上皮缺損和點狀角膜病變、復發性淺層點狀角膜病變、輕中度乾眼症、大泡性角膜炎、角膜擦傷、輕中度化學燒傷、角膜手術及術後癒合不良、地圖狀(或營養性)單皰性角膜潰瘍等。眼用凝膠是一種用於眼部的凝膠劑，由於用於眼部的製劑要求細膩均勻、無刺激、 易塗布等，因此，眼用凝膠對輔料的種類和用量要求極嚴。同時，為了獲得持久的藥效，眼用凝膠中凝膠基質的選擇也非常重要。中國專利申請200510036465(申請人為南海朗肽製藥有限公司)公開了一種用於治療燒傷創面等疾病的重組人鹼性成纖維細胞生長因子外用凝膠劑，其由重組人鹼性成纖維細胞生長因子原液和可藥用輔料組成，其中可藥用輔料選自卡波姆940NF、透明質酸鈉、 海藻糖、甘露醇、右旋糖酐40、肝素鈉。中國專利申請200510009218(申請人為北京雙鷺立醫藥科技有限公司)公開了一種治療創傷、燒燙傷等疾病的重組人鹼性成纖維細胞生長因子外用凝膠劑，其凝膠基質包括增稠劑(選自重量百分比為0. 1-10%的羧甲基纖維素鈉、 甲基纖維素、聚乙二醇、卡波姆、甲殼胺)、保溼劑、防腐劑、穩定劑、PH調節劑和水。上述兩個專利申請雖然公開了重組人鹼性成纖維細胞生長因子的凝膠劑及其輔料組成，但它們僅適合通過外用給藥的途徑來治療創傷等，而對於如何將重組牛鹼性成纖維細胞生長因子通過特定的輔料選擇製備得到適用於眼部的凝膠劑並未做任何教導。因此，仍然有需要開發一種刺激性小、易塗布、藥效持久的重組人鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠。
發明內容
本發明的目的是提供一種刺激性小、易塗布、藥效持久的重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠及其製備方法。本發明的發明目的通過以下的實施方式來實現。一種重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠，其特徵在於所述眼用凝膠的組分及用量為
重組牛鹼性成纖維細胞生長因子1000-3000IU ；蛋白保護劑0.01-0. 25mg;凝膠基質0. 5-1. 5mg ；pH調節劑適量；注射用水加至0.鈿1;其中，所述的蛋白保護劑選自人血白蛋白、甘露醇和聚乙二醇，優選人血白蛋白； 所述的凝膠基質選自羥丙基甲基纖維素和卡波姆；所述的PH調節劑為氫氧化鈉或鹽酸；在一個優選的實施方式中，重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠的組分及用量為重組牛鹼性成纖維細胞生長因子1680IU ；蛋白保護劑O.ang;凝膠基質1. OOmg ；pH調節劑適量；注射用水加至0. 4ml ；其中，所述的蛋白保護劑為人血白蛋白；所述的凝膠基質為羥丙基甲基纖維素和卡波姆；所述的PH調節劑為氫氧化鈉或鹽酸；本發明重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠的製備方法包含以下步驟(1)將凝膠基質用適量注射用水溶脹，調pH值使形成透明凝膠，然後在121°C熱壓滅菌，冷卻後備用；(2)將重組牛鹼性成纖維細胞生長因子和蛋白保護劑溶於適量的注射用水中，用 0.22 um濾膜過濾除菌；(3)在無菌條件下將步驟⑴得到的透明凝膠和步驟(2)得到的溶液混合均勻，分裝即得。優選的，製備方法為(1)將0. 5-1. 5mg凝膠基質用適量注射用水溶脹，調pH值使形成透明凝膠，然後在 121°C熱壓滅菌，冷卻後備用；(2)將1000-3000IU重組牛鹼性成纖維細胞生長因子和0. 01-0. 25mg蛋白保護劑溶於適量的注射用水中，用0. 22 μ m濾膜過濾除菌；(3)在無菌條件下將步驟⑴得到的透明凝膠和步驟⑵得到的溶液混合均勻，分裝即得。本發明具有以下的優點和效果①本發明的眼用凝膠劑為患有各種原因引起的角膜上皮缺損和點狀角膜病變、復發性淺層點狀角膜病變、輕中度乾眼症、大泡性角膜炎、角膜擦傷、輕中度化學燒傷、角膜手術及術後癒合不良、地圖狀(或營養性)單皰性角膜潰瘍等的眼部疾病患者提供了一種可替換的用藥形式；②本發明的眼用凝膠劑易塗布、細膩均勻、作用持久、對眼部無刺激性；③本發明的眼用凝膠劑使用方便、經濟實用，增加了病人的依從性。
具體實施方式
下面結合本發明較佳的實施例做進一步的說明，這些實施例應理解為不會限制本發明的實施範圍，其變型及等同方式均被涵蓋在本發明的保護範圍內。實施例1 處方
重組牛鹼性成纖維細胞生長因子1680000IU; 人血白蛋白0.2 g; 羥丙基甲基纖維素1.00 g;
氫氧化鈉適量；
注射用水加至400 ml:_
共制1000支具體製備方法為將羥丙基甲基纖維素和用適量注射用水溶脹，調pH值使形成透明凝膠，然後在 121°C熱壓滅菌，冷卻後備用；將重組牛鹼性成纖維細胞生長因子和人血白蛋白溶於適量的注射用水中，用0. 22μπι濾膜過濾除菌；在無菌條件下將上述的透明凝膠和濾液混合均勻， 分裝即得。實施例2 處方
重組牛鹼性成纖維細胞生長因子1600000 IU; 人血白蛋白0.08 g; 甘露醇0.10 g 卡波姆0.78 g；
羥丙基甲基纖維素0.21 g 氫氧化鈉適量；
注射用水加至400 ml;_
共制1000支具體製備方法為將卡波姆、羥丙基甲基纖維素和用適量注射用水溶脹，調pH值使形成透明凝膠， 然後在121°C熱壓滅菌，冷卻後備用；將重組牛鹼性成纖維細胞生長因子、人血白蛋白和甘露醇起溶於適量的注射用水中，用0. 22 μ m濾膜過濾除菌；在無菌條件下將上述的透明凝膠和濾液混合均勻，分裝即得。實施例3 處方重組牛鹼性成纖維細胞生長因子1700000 IU; 甘露醇0.07 g； 聚乙二醇0.08 g卡波姆 1.14 g
鹽酸適量；
注射用水加至400 ml;_
共制1000支具體製備方法為將卡波姆和用適量注射用水溶脹，調pH值使形成透明凝膠，然後在121°C熱壓滅菌，冷卻後備用；將重組牛鹼性成纖維細胞生長因子、甘露醇和聚乙二醇溶於適量的注射用水中，用0. 22μπι濾膜過濾除菌；在無菌條件下將上述的透明凝膠和濾液混合均勻，分裝即得。試驗例1 :rb_bFGF眼用凝膠促進角膜鹼燒傷模型癒合的實驗研究1、試驗方法試驗動物健康紐西蘭白兔，體重2_3kg，雌雄並用，手電筒及裂隙燈檢查眼前段未見異常。120隻動物隨機分為五組，每組M只動物。家兔角膜鹼燒傷模型外眼檢查正常動物，生理鹽水滴洗右眼2次，以0. 5%地卡因滴眼液滴眼2次，表面麻醉，肌注氯胺酮(50mg/kg)，全身麻醉，將濾紙圓片於0. 5mol/L NaOH溶液中浸透，去除多餘液體，小心貼敷於已固定眼球位置的右眼角膜正中區數分鐘，取下濾紙片後立即用生理鹽水衝洗角膜和結膜囊，即製成角膜鹼燒傷模型。試驗樣品陰性對照品為不含重組牛鹼性成纖維細胞生長因子的眼用凝膠，輔料組成同實施例1，每日早晚塗於眼部傷患處各一次；本發明樣品為實施例1眼用凝膠，每日早晚塗於眼部傷患處各一次；陽性對照品為素高捷療眼膏，每次一滴，每日四次。給藥方法將陰性對照品、本發明眼用凝膠和陽性對照品分別對模型動物給藥，連續治療二周。評價指標分別在治療1、2、4、6、10、14天時將螢光素染色裂隙燈顯微鏡標準照相照片，經過計算機圖象系統測量分析出各組不同時間角膜上皮癒合面積(結果見表1)和角膜上皮癒合率(結果見表2)。角膜上皮癒合面積和角膜上皮癒合率越高，表明治療效果越好。2、試驗結果表1、各組不同時間的角膜上皮癒合面積(mm2 ；X士S)
權利要求
1.一種重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠，其特徵在於所述眼用凝膠的組分及用量為重組牛鹼性成纖維細胞生長因子1000-3000IU ； 蛋白保護劑0.01-0. 25mg； 凝膠基質0. 5-1. 5mg ； PH調節劑適量； 注射用水加至0. 4ml ；其中，所述的蛋白保護劑選自人血白蛋白、甘露醇和聚乙二醇，所述的凝膠基質選自羥丙基甲基纖維素和卡波姆，所述的PH調節劑為氫氧化鈉或鹽酸；
2.根據權利要求1所述的重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠，其特徵在於所述眼用凝膠的組分及用量為重組牛鹼性成纖維細胞生長因子1680IU ； 蛋白保護劑0. 2mg； 凝膠基質1. OOmg ； PH調節劑適量； 注射用水加至0. 4ml ；其中，所述的蛋白保護劑為人血白蛋白；所述的凝膠基質為羥丙基甲基纖維素和卡波姆；所述的PH調節劑為氫氧化鈉或鹽酸；
3.根據權利要求1所述的重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠的製備方法，其特徵在於包含以下步驟(1)將凝膠基質用適量注射用水溶脹，調PH值使形成透明凝膠，然後在121°C熱壓滅菌，冷卻後備用；(2)將重組牛鹼性成纖維細胞生長因子和蛋白保護劑溶於適量的注射用水中，用 0.22 um濾膜過濾除菌；(3)在無菌條件下將步驟(1)得到的透明凝膠和步驟( 得到的溶液混合均勻，分裝即
全文摘要
一種重組牛鹼性成纖維細胞生長因子眼用凝膠及其製備方法。所述眼用凝膠的組分及用量為重組牛鹼性成纖維細胞生長因子1000-3000IU；蛋白保護劑0.01-0.25mg；凝膠基質0.5-1.5mg；pH調節劑適量；注射用水加至0.4g；本品具有刺激性小、易塗布、藥效持久的特點。
文檔編號A61K47/32GK102389392SQ20111034243
公開日2012年3月28日 申請日期2011年11月2日 優先權日2011年11月2日
發明者姜若峰, 尋新平, 朱愛堂, 藍瑄, 鄭贊順, 陳詠, 陳雄來 申請人:珠海億勝生物製藥有限公司