青貯飼料添加劑及其製備方法與應用的製作方法

2023-05-05 06:02:16 3

專利名稱：青貯飼料添加劑及其製備方法與應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種中草藥型青貯飼料生物添加劑及應用，特別涉及一種青貯飼料添 加劑及其製備方法與應用。
背景技術：
青貯飼料比同類青飼料直接利用或製成乾草的消化率要高，並且青貯飼料乾物質 中的可消化粗蛋白質、總養分和能量含量也較高，經過青貯發酵後青貯飼料細胞壁成分消 化率也會明顯提高。但是，自然狀態下青飼料的緩衝值高，可溶性碳水化合物含量低，自然 狀態下青貯比較困難，這種現象在豆科牧草中尤為明顯。青貯添加劑能加快青貯發酵速度， 提高青貯飼料品質。近年來，國內外的青貯添加劑的種類主要有銨類化合物、有機酸類、尿 素和生物防腐劑等，但無機化學類添加劑有一定的腐蝕性，對人和家畜存在安全隱患，而生 物類添加劑多從國外進口，成本較高。
目前，在畜禽疾病的預防與治療中向飼料中添加抗生素、激素、化學合成藥比較常 見，雖然其效果明顯，但常常在產品中有殘留，危害消費者健康，三致(致癌、致畸、致突變) 現象嚴重，同時易產生抗藥性。為了得到高效、安全、無公害的畜產品，在畜禽飼料中添加中 草藥成為一種新趨勢。但目前國內外生產中，多以中藥粗粉和飼料混合後直接飼喂，這在集 約化養殖的情況下使用非常不方便，從而大大限制了中草藥在防治動物疾病方面的規模化 應用，並且中草藥製劑的年產量也非常有限，根本滿足不了實際需要。將中草藥製劑添加到 青貯原料中進行發酵，在提高青貯品質的同時，也為中草藥的推廣應用提供了有效途徑。發明內容
本發明的目的是提供一種青貯飼料添加劑及其製備方法與應用。
本發明提供的青貯飼料添加劑，其活性成分為下述a)或b)的組合物
由黃芪的提取物和山楂的提取物組成的組合物；其中，兩種提取物混合在一起；
由黃芪的提取物和山楂的提取物組成的組合物；其中，兩種提取物分別獨立包裝。
所述a)和b)組合物中，黃芪，又名黃耆，為豆科草本植物蒙古黃芪、膜莢黃芪的 根；山楂，為薔薇科植物山裡紅或野山楂的成熟果實。
所述a)和b)組合物中，黃芪的提取物和山楂的提取物的質量比為O.75-1. 25 O. 75-1. 25，具體為 O. 75 O. 75 或1:1 或1. 25 1.25。
其中，所述黃芪的提取物是用水從黃芪中提取得到的水溶性物質；具體的，所述 黃芪的提取物按照包括如下步驟的方法製備而得將黃芪加水浸泡30min後煮沸，文火 煎煮後進行第一次過濾，得到第一次濾液和濾渣，向所得濾渣中加水150ml後再文火煎 煮後，進行第二次過濾，將所得第二次濾液和第一次濾液合併，文火煎煮濃縮至固含量為O.96-1. 04g/ml，得到所述黃芪的提取物；
所述山楂的提取物是用水從山楂中提取得到的水溶性物質；具體的，所述山楂的 提取物按照包括如下步驟的方法製備而得將山楂加水浸泡30min後煮沸，文火煎煮後進行第一次過濾，得到第一次濾液和濾渣，向所得濾渣中加水150ml後再文火煎煮後，進行第 二次過濾，將所得第二次濾液和第一次濾液合併，文火煎煮濃縮至固含量為O. 96-1. 04g/ ml，得到所述山楂的提取物；
所述黃芪或山楂與浸泡水的用量比具體均為24. 5-25. 5g 249_251mL，更具體為 25g : 25OmL ；
所述煎煮步驟中，文火煮沸時間具體為25-35分鐘，更具體為30分鐘；
所述過濾步驟中，濾布孔徑具體為O. 9mm-1. 1mm,更具體為Imm ；
所述固含量均具體為lg/mL。
所述青貯飼料添加劑具體為青貯飼料發酵促進劑。所述青貯飼料發酵促進劑是一 種在發酵前加入青貯原料中，與所述青貯原料一起進行厭氧發酵從而促進發酵的青貯飼料 添加劑。
本發明提供的製備所述青貯飼料添加劑的方法，包括如下步驟將前述黃芪的提 取物和山楂的提取物進行混合或獨立包裝，得到所述青貯飼料添加劑的活性成分。
本發明提供的製備青貯飼料的方法，包括如下步驟在青貯原料中添加前述青貯 飼料添加劑後進行厭氧發酵，得到所述青貯飼料。
上述方法中，青忙原料為製作青忙飼料的原料，即青飼料(也叫青綠飼料、綠飼 料)，是指可以用作飼料的植物新鮮莖葉，主要包括天然牧草、栽培牧草、田間雜草、菜葉類、 水生植物、嫩枝樹葉等。
所述青貯飼料是將青飼料在厭氧的條件下進行發酵得到的飼料。
所述青貯原料的含水量為60% -75%，具體為60%或65%或70%或60-70%或 65-70% ；
所述青貯飼料添加劑的添加量以所述a)或b)組合物的乾重計，是所述青貯原料 質量的O. 75% -1. 25%，具體為含水量為60% -75% (或60%或65%或70%或60-70%或 65-70% )青貯原料的質量的O. 75% -1. 25%。
所述厭氧發酵步驟中，溫度為15_30°C，時間為30-90天，具體為45天。
按照前述方法製備得到的青貯飼料，也屬於本發明的保護範圍。其中，所述青貯飼 料具有下述至少一種特性
I)粗蛋白含量高於對照；
2)氨態氮與總氮的比值低於對照；
3)中性洗滌纖維含量低於對照；
4)酸性洗滌纖維含量低於對照；
5) pH值低於對照；
6)乳酸高於對照，丁酸低於對照。
所述對照為經過如下方法製備的飼料除不加所述青貯飼料添加劑外，其它條件 均與前述方法相同。
所述青貯飼料均為豆科牧草青貯飼料，具體為苜蓿屬青貯飼料，更具體為以紫花 苜蓿為青貯原料製備的青貯飼料；
所述青貯原料為豆科牧草，具體為苜蓿屬牧草，更具體為紫花苜蓿(Medicago sativa)。
本發明將由黃芪和山楂組成的混合物作為青貯飼料添加劑與青貯原料共同發酵, 能夠促進乳酸菌生長繁殖和提高青貯飼料的發酵品質，所製備的青貯飼料，與不加所述青 貯飼料添加劑的對照相比，其粗蛋白含量升高，和/或氨態氮與總氮的比值降低，和/或中 性洗滌纖維含量降低，和/或酸性洗滌纖維含量降低，和/或PH值降低。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明作進一步闡述，但本發明並不限於以下實施例。所 述方法如無特別說明均為常規方法。所述原材料如無特別說明均能從公開商業途徑而得。 下面以紫花苜猜(Medicago sativa)作為青忙原料為例，闡明本發明的技術方案。
實施例1、青貯飼料添加劑的製備
稱取黃芪25g，250mL去離子水浸泡30min後煎煮，沸後文火煎煮30min，用孔徑為 Imm的4層紗布進行第一次過濾得到第一次濾液和藥渣，在藥渣中加入150ml水，文火煎煮 30min後進行第二次過濾，將所得第二次濾液與第一次濾液合併後，文火煎煮濃縮至25ml， 使其固含量為lg/ml，即為100%中草藥原液，該100%中藥原液即為黃芪的提取物。
按照與上相同的方法，將黃芪替換為山楂，得到山楂的提取物。
將上述黃芪的提取物和山楂的提取物分別以質量比O. 75 O. 75,1 I和1.25 1. 25混合在一起，依次得到青貯飼料添加劑I) -3)。
實施例2、用實施例1的青貯飼料添加劑製備紫花苜蓿青貯飼料
一、材料
青忙原料取初花期劉割的紫花苜猜(Medicago sativa)鮮草進行晾曬,期間進 行多時間多點採樣，用微波爐快速乾燥法測定含水量，當其水分分別達到75%時，用鍘刀切 割至2-3cm,獲得青忙原料。
二、實驗方法
將青貯原料分為四組，包括青貯飼料添加劑1-3試驗組和對照組。
其中，青貯飼料添加劑I組按Ikg鮮草中添加乾重計的15g的實施例1的青貯飼 料添加劑I);
青貯飼料添加劑2組按Ikg鮮草中添加乾重計的20g的實施例1的青貯飼料添加 劑2)；
青貯飼料添加劑3組按Ikg鮮草中添加乾重計的25g的實施例1中的青貯飼料添 加劑3)；
對照組不添加任何物質。
將按上述方法製備的藥液均勻噴灑在苜蓿鮮草上，再將鮮草放到聚丙烯袋中，每 袋200g左右，用真空封口機封口，在室溫條件下(25-38°C )進行青貯發酵，45天後開袋。在 青貯45天以及開袋後在空氣中暴露第1、3、5、7天取樣，進行實驗室分析，主要分析pH值、 乾物質、粗蛋白、氨態氮、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維，開袋後發黴程度，實驗結果見表1、 表2和表3。
反應青貯飼料品質各指標的測定方法如下
(I)乾物質測定
用烘箱烘乾法測定取青貯原料或青貯飼料鮮樣稱重記下重量，在烘箱中65°C乾燥48h直到恆重，並記錄所稱的重量以計算乾物質(DM)含量。
(2) pH 值測定
準確稱取剪碎的青貯10. Og,加入90mL蒸餾水攪拌均勻後用組織攪碎機攪拌I分 鍾。定性濾紙和四層紗布過濾，用PH測定儀測定濾液的pH值。
(3)氨態氮/總氮值的測定(Broderick和Kang, 1980)採用苯酹_次氯酸鈉比色 法測定
苯酚試劑將O. 05g亞硝基鐵氰化鈉(Na2Fe (CN) 5 · NO · 2H20，297. 95，化學純 (25g))溶解在O. 5L蒸餾水中，再加入I ImL苯酚溶液或9. 9g結晶苯酚(C6H50 , 94. 11, Phenol A. R.，500g，分析純)，定容到IL後貯存在棕色的玻璃試劑瓶中。
次氯酸鈉試劑將5gNa0H溶解在2/3L的蒸餾水中，再加入20.1gNa2HPO4加熱至溶 解。冷卻後加入14. 7ml含8. 5%活性氯的次氯酸鈉溶液(74. 44，分析純，活性氯不低7% ) 並混勻，定容到1L。
標準氨溶液稱取O. 6607g經100。。24小時烘乾的(NH4)2S04(132. 14，化學純) 溶於蒸餾水中，並定容至100ml，配製成lOOmmol/L的氨儲備液，將上述儲備液稀釋配製成1.0,2.0,3.0,4.0,5. OmmoI/L五種不同濃度梯度的標準液。
簡要操作步驟向每隻試管中加入50ul經適當倍數稀釋的樣本液或標準液，空白 為50ul蒸懼水；向每支試管中加入2. 5ml的苯酹試劑,搖勻；再向每隻試管中加入2ml次氯 酸鈉試劑，並混勻；將混合液在95°C水浴中加熱顯色反應5分鐘；冷卻後，630nm波長下比 色。
(4)酸性洗滌纖維(ADF)、中性洗滌纖維(NDF)測定採用範氏洗滌纖維法測定；
NDF藥品的配製(一個纖維袋0. 5g樣品)稱取1. 86g乙二胺四乙酸二鈉(EDTA， 372.24)，0.68g硼酸鈉(Na2B4O7 · IOH2O,化學純381. 37)，3g十二烷基硫酸鈉(化學純 288. 38), Iml乙二醇乙醚(化學純90. 12) ;0· 456g無水磷酸氫二鈉(化學純141. 96)，0. 5g 無水亞硫酸鈉。溶入IOOml蒸餾水中。
簡要操作步驟稱量濾袋的重量去皮後，稱量0. 4500-0. 5500g樣品放入濾袋，用 封口機在距離袋口 4mm處封口。準確稱量一個空白濾袋，將濾袋放置在濾袋架上，放入纖維 分析儀中，放入重錘確保最上層濾袋可以浸沒在液面下，在開始前要向纖維儀內加入4. Oml 的Alpha-澱粉酶,在B 口處放入澱粉酶加液(8. Oml的Alpha-澱粉酶稀釋至250ml)。纖維 儀洗滌過，將濾袋取出，在105°C完全乾燥2-4小時，冷卻稱重。
ADF藥品的配製稱取20g十六烷三甲基溴化氨(CTAB，化學純364. 47)溶於 IOOOmlO. 5mol/L硫酸溶液中(0. 5mol/L硫酸取55. 74ml濃硫酸加入蒸懼水定容至1L)。
簡要操作步驟稱量濾袋的重量去皮後，稱量0. 4500-0. 5500g樣品放入濾袋，用 封口機在距離袋口 4mm處封口。準確稱量一個空白濾袋，將濾袋放置在濾袋架上，放入纖 維分析儀中，放入重錘確保最上層濾袋可以浸沒在液面下。纖維儀洗滌過，將濾袋取出，在 105°C完全乾燥2-4小時,冷卻稱重。
(5)粗蛋白質的測定採用凱式定氮法
含溴甲酹綠和甲基紅指示劑的1%的硼酸溶液將IOOg硼酸(Boric cid,61. 83, H3BO3,分析純，(500g))溶於10升蒸懼水配成I %硼酸溶液。添加IOOml溴甲酹綠(Bromo cresol green, C21H14O5Br4S, 698. 02, (5g))溶液(IOOmg 溴甲酹綠溶於 100ml 乙醇)。添加70ml甲基紅溶液(IOOmg溶於IOOml乙醇)。O.1N HCl 16. 6ml鹽酸加入IOOOml蒸懼水中。 再加入 40% NaOH;催化劑SK2SO4 CuSO4 = 15 I。
簡要的操作步驟將草樣烘乾草樣粉碎過Imm篩，稱量草樣5. Og左右，將其放入消煮管中加5. Og的催化劑和10. Oml的濃硫酸，放在消煮爐上，於410°C下消煮I小時左右，消煮好後冷卻，用凱式定氮儀測定。
(6)有機酸的測定
採用高效液相色譜SHIMADZE-10A測定乳酸和揮發性脂肪酸(乙酸、丙酸和丁酸)。 色譜柱Shodex Rspak KC-811S-DVB gel Column30X8mm ;檢測器！SFO-MlOAVp ;流動相 3mmol/L高氯酸;流速lml/min ;柱溫50°C ;檢測波長2IOnm ;進樣量5μ I。
簡要的操作步驟準確稱取剪碎的青貯10. Og,加入90mL蒸餾水攪拌均勻後用組織攪碎機攪拌I分鐘。定性濾紙和四層紗布過濾，再用濾器將濾液過濾，可放在_20°C的條件下備用，用液相色譜儀測定。
(7)發黴程度的觀察
青貯45天開袋後，觀察各組的發黴情況，按發黴程度分為O (未見黴斑)、I (輕度發黴)、2(嚴重發黴)。
試驗所得數據用Excel軟體處理，並用SPSS17. O軟體中的單因素方差分析程序對數據進行方差分析和多重比較。
三、實驗結果
表1、青貯飼料添加劑對苜蓿青貯發酵品質的影響(表中所得百分含量均以乾物質為基礎)
權利要求
1.一種青貯飼料添加劑，其活性成分為下述a)或b)的組合物由黃芪的提取物和山楂的提取物組成的組合物；其中，兩種提取物混合在一起；由黃芪的提取物和山楂的提取物組成的組合物；其中，兩種提取物分別獨立包裝。
2.根據權利要求1所述的添加劑，其特徵在於所述a)和b)組合物中，黃芪的提取物和山楂的提取物的質量比為O. 75-1. 25 O. 75-1. 25，具體為O. 75 O. 75或1:1或1. 25 1. 25。
3.根據權利要求1或2所述的添加劑，其特徵在於所述黃芪的提取物是用水從黃芪中提取得到的水溶性物質；所述山楂的提取物是用水從山楂中提取得到的水溶性物質。
4.根據權利要求1-3任一所述的添加劑，其特徵在於所述青貯飼料添加劑為青貯飼料發酵促進劑。
5.一種製備權利要求1-4任一所述青貯飼料添加劑的方法，包括如下步驟將權利要求1-4任一所述黃芪的提取物和山楂的提取物進行混合或獨立包裝，得到所述青貯飼料添加劑的活性成分。
6.一種製備青貯飼料的方法，包括如下步驟在青貯原料中添加權利要求1-4任一所述青貯飼料添加劑後進行厭氧發酵，得到所述青貯飼料。
7.根據權利要求6所述的方法，其特徵在於所述青貯原料的含水量為60%-75% ； 所述青貯飼料添加劑的添加量以所述a)或b)組合物的乾重計，是所述青貯原料質量的 O. 75% -L 25% ;或，所述厭氧發酵步驟中，溫度為15-30°C，時間為30-90天，具體為45天。
8.權利要求7或8任一所述方法製備得到的青貯飼料。
9.根據權利要求8所述的青貯飼料，其特徵在於所述青貯飼料具有下述至少一種特1)粗蛋白含量聞於對照；2)氨態氮與總氮的比值低於對照；3)中性洗滌纖維含量低於對照；4)酸性洗滌纖維含量低於對照；5)pH值低於對照；6)乳酸高於對照，丁酸低於對照。所述對照為經過如下方法製備的飼料除不加所述青貯飼料添加劑外，其它條件均與權利要求6或7所述的方法相同。
10.根據權利要求1-4任一所述青貯飼料添加劑、權利要求5所述製備青貯飼料添加劑的方法、權利要求6或7所述的製備青貯飼料的方法、權利要求8或9所述青貯飼料添加劑， 其特徵在於所述青貯飼料均為豆科牧草青貯飼料，具體為苜蓿屬青貯飼料，更具體為以紫花苜蓿為青貯原料製備的青貯飼料；所述青貯原料為豆科牧草，具體為苜蓿屬牧草，更具體為紫花苜蓿。
全文摘要
本發明公開了一種青貯飼料添加劑及其製備方法與應用。該青貯飼料添加劑，其活性成分為下述a)或b)的組合物由黃芪的提取物和山楂的提取物組成的組合物；其中，兩種提取物混合在一起或分別獨立包裝。本發明製備的青貯飼料具有下述至少一種特性1)粗蛋白含量高於對照；2)氨態氮與總氮的比值低於對照；3)中性洗滌纖維含量低於對照；4)酸性洗滌纖維含量低於對照；5)pH值低於對照；6)乳酸高於對照，丁酸低於對照。
文檔編號A23K1/14GK103053808SQ201310028700
公開日2013年4月24日 申請日期2013年1月25日 優先權日2013年1月25日
發明者楊富裕, 陸銀, 張蘊薇, 玉柱, 鄧海軍, 徐然, 周靜, 梁超 申請人:中國農業大學