人參皂苷Rg₁的用途的製作方法

2023-05-10 11:28:11

專利名稱：人參皂苷Rg1的用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，具體涉及人參皂苷Rgl的用途。
背景技術：
血栓病是由於血栓引起的血管狹窄與閉塞，使主要臟器發生缺血和梗塞從而引發 機能障礙的各種疾病。據統計，我國腦血栓中風的發病人群多達700萬，其中每年約100萬 人死亡，倖存者大多留有後遺症，需長期住院治療或家庭照顧，血栓病已成為嚴重危害人類 健康的公共衛生問題，研究開發療效好、安全性高的抗血栓藥物對人類健康具有十分重要 的意義。目前，臨床推薦使用的抗血栓生物藥物雖然療效確切，但不良反應較多，且價格昂 貴，限制了臨床使用。理想的抗血栓藥應當具有有效(與梗死相關的動脈開通率較高)、安 全(出血發生率低，特別是顱內出血)、使用方便、能溶解陳舊血栓、能抗PAI、無抗凝血反 應、復發率低、對血壓無影響、無抗原性、價格合理等特點。現代中醫藥研究表明，具有活血 化淤或理氣化瘀作用的中藥及其單體化合物具有調節血管內皮細胞抗血栓作用，與目前已 經上市的抗血栓藥物相比，中藥天然藥物具有安全性好價格低廉等優點，因此，研究開發中 藥天然藥物的新型抗血栓藥物是未來的重要發展方向。 藥物劑量的確定由多因素決定，包括活性化合物的藥理活性與藥理活性強度、量 效關係/時效關係、藥物吸收與生物利用度、量毒關係等，活性化合物一般具有多種藥理活 性，通常優選具有突出優勢與最強的藥理活性作為適應症開發方向，藥理活性與藥理活性 強度是藥物劑量擬定的基石；量效關係/時效關係是藥物劑量擬定的科學基礎與核心；藥 物吸收與生物利用度是藥物劑量擬定的校正係數；量毒關係是藥物劑量選擇的利弊綜合權 衡；因此藥物劑量的確定是一項複雜的系統工程，需要經過科學系統的研究與反覆評價，綜 合優選利弊權衡的結果，藥物劑量的確定是成藥研究開發的核心與關鍵。劑量與療效關係 極為密切，藥物劑量是決定療效的核心，療效是檢驗治療成敗的標準，藥物劑量科學與否對 治療效果有著決定性意義。活性化合物的量效關係表現為，當活性化合物達到一定劑量時 才能發揮藥理效應，該劑量叫作"最小有效量"或"閾劑量";隨著劑量增加，藥理作用繼續增 強；但增加到一定劑量時藥理作用達到平臺期，稱為"最大效應";繼續增加劑量則藥理作用 反而降低。量效關係研究是藥物安全性和有效性評價的科學基礎，理想的劑量應具有最佳 的療效以及較小的不良反應。量效關係研究的重要意義在於以下幾個方面是藥物安全性 和有效性評價的科學基礎，是註冊管理部門作出科學判斷的重要依據；為臨床試驗提供合 理的給藥劑量和給藥方案，節約資源；是藥物註冊撰寫說明書的重要內容等。中藥天然有效 成分由於歷史原因，已有的研究主要屬於藥理活性探索研究的科學發現，缺乏科學系統的 量效關係/時效關係研究、藥物代謝動力學研究與量毒關係研究等成藥研究的必須基礎。
"三七皂甙Rgl對大鼠實驗性血栓形成，血小板聚集率及血小板內游離鈣水平的影 響"(《中國藥理學與毒理學雜誌》1998年2月；12(1) :40-42)、"人參皂苷Rgl對中性粒細 胞與血小板之間粘附的影響"(《中草藥》2002年第33巻第2期，138-140)等文獻公開了人 參皂苷具有抗血栓的藥理作用，分別採用了 5mg/kg和25mg/kg劑量的人參皂苷Rgl對
3大鼠進行藥效學實驗，這樣的實驗雖然可以在一定程度上證明了人參皂苷Rgi具有抗血栓 的藥理作用，但這種劑量的選擇沒有任何根據，只是為了簡單的藥效證明而"想當然"的用 藥劑量，而人參皂苷Rgi的成藥研究還需要進一步、深入的研究，比如量效關係研究，才能明 確人參皂苷Rgi在什麼劑量下起效、什麼劑量進入平臺期，這需要科研人員更進一步的創造 性的勞動才能獲得。 基於上述原因，我們針對人參皂苷R^抗血栓方面進行科學系統的量效關係研
究，發明了人參皂苷Rgl抗血栓作用的起效劑量、優效劑量等，即人參皂苷Rgl起效劑量在
1. 25mg，進入平臺期劑量在20mg，劑量達到50mg時藥理作用下降，充分說明人參皂苷Rgl的
量效研究有著充分的科學意義。 本發明通過以下技術方案實現的。 1. 25mg-40mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
2. 5mg-40mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
10mg-30mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
20mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
其中人參皂苷R^可以是藥物製劑的原料藥。 本發明所述的劑量(mg)是按照動物實驗研究的結果換算出人的使用劑量。
本發明所述的藥物製劑包括但不限於注射液、輸液、粉針劑、凍乾粉針劑、片劑、膠 囊劑、顆粒劑、滴丸、微丸等。
本發明有益的技術效果 1、現有技術有人參皂苷R^具有抗血栓藥理活性的發現，但使用的劑量較大，大於 50mg(現有文獻藥理學實驗大鼠給藥劑量為5mg/kg，換算成人的使用劑量為[5X60/6 = 50])，而這個劑量在量效關係中屬於藥理作用的下降階段；人參皂苷Rg工量效關係表明，起 效劑量為1. 25mg，進入平臺期劑量為20mg，持續至45mg，達到50mg時藥理作用降低，即在量 效曲線中屬於藥效下降階段。 2、本發明探明了人參皂苷R^的起效劑量、優效劑量，為藥物劑量的確定奠定了扎 實的科學基礎。 3、本發明探明了人參皂苷R^的起效劑量、優效劑量，為臨床研究劑量優選奠定了 科學基礎。 4、本發明人參皂苷R^抗血栓作用的量效曲線，為研究人參皂苷RgJ乍用機制研究 奠定了良好基礎。 5、本發明人參皂苷Rgl劑量用量比現有技術小(現有技術大於等於50mg)，潛在的 安全性更好。 本發明人參皂苷Rgl包括但不限於純度為90% _100%的人參皂苷Rgl。 本發明人參皂苷R^可以由現有技術進行製備，也可以通過可以由人參、三七、西
洋參、越南人參、竹節參，葫蘆科絞股藍屬絞股藍、緣果絞股藍等植物的根、莖、葉、花蕾中得
到總皂苷，再經過高效液相色譜製備方法進行純化得到，也可以由矽膠柱層析進行單體分
離，高效液相色譜法控制終點得到，等等； 本發明人參皂苷Rgl包括但不限於由下述方法得到 取三七、人參、西洋參或絞股藍提取得到的總皂苷，總皂苷加水溶解，濾過，濾液通過非極性或弱極性大孔吸附樹脂柱，水洗，洗脫液棄去，20 % -60 %乙醇洗脫，收集洗脫液， 濃縮、乾燥，乾燥物加水溶解，濾過，濾液通過非極性或弱極性大孔吸附樹脂柱，水洗，洗脫 液棄去，再用10% _50%乙醇洗脫，洗脫液棄去，再用20% _60%乙醇洗脫，收集洗脫液，濃 縮乾燥，得人參皂苷Rgl粗品，加入有機溶劑加熱回流提取，提取液濾過，濾液回收溶劑至 幹，殘渣乾燥，得到人參皂苷Rgl。 上述步驟中的總皂苷可以直接由市場購買或根據科技文獻製備；所述大孔樹脂柱包括但不限於HPD-100、 HPD-100A、 HPD_300、 HPD-400、 HPD-400A、
HPD-450、 D101、 1300-1、 1400或AB-8。 所述有機溶劑包括但不限於乙酸乙酯、丙酮、正丁醇、乙醇、甲醇中的一種或幾種。
—、量效關係研究 我們科研人員通過預實驗，確定了人參皂苷Rgl大於0. lmg時具有藥理活性，具體 量效關係通過下述實驗確定得到
對大鼠頸動脈血栓形成的影響 實驗動物Wistar大鼠，雌雄兼用，體重180 220g。
實驗藥物本發明人參皂苷Rgl。
實驗試劑戊巴比妥鈉。
實驗儀器十六導生理信號採集分析系統。
實驗方法將大鼠隨機組即空白對照組、人參皂苷Rgl不同劑量組，尾靜脈給藥，
空白對照組給予等體積的蒸餾水。末次給藥後lh開始實驗。大鼠在2.5%戊巴比妥鈉腹
腔注射麻醉下，仰臥固定，切開頸部皮膚，分離右側長約1. 5cm的頸總動脈，用塑料紙遮蓋
附近組織，避免組織溫度對血管溫度的影響。在動脈近心端下放置剌激電極，遠心端下放置
連接儀器之半導體溫度探頭，打開儀器開關，通過剌激電極給予2mA直流電剌激7min以損
傷動脈內皮細胞。隨著動脈管腔內血栓逐漸形成，血流逐漸被阻斷，動脈遠端的溫度逐漸下
降。當血流完全阻斷時，溫度突降，儀器報警，顯示動脈血管堵塞時間，即自電剌激開始至血
栓形成時間(超過50min以50min計)。 實驗結果結果見表l。 表l對大鼠頸動脈血栓形成的影響
組別劑量血拴形成時間
mg/kgmin
空白對照組—11.6±2.6
人參皂苷Rgi劑量1組0.10014.3±2.4
人參皂苷Rgi劑量2組0.12015.7±2.1
人參皂苷Rgi劑量3組0.12516.9±2.8*
人參皂苷Rgi劑量4組0.14017.3±2.6*
人參皂苷Rgl劑暈5組0.16017.4±2.8*
人參皂苷Rgl劑量6組0.18017.6±2.9*
人參皂苷Rg,劑量7組0.20018.2±3.1*人參皂苷劑量8組0.250'19.3±3.6**
人參皂苷Rgl劑量9組0.30019.9±3.7**
人參皂苷Rgi劑量10組0.40020.7士3.3" 注與空白對照組比較，*P < 0. 05， **P < 0. 01。 表2對大鼠頸動脈血栓形成的影響
組別劑量血栓形成時間
mg/kgmin
空白對照組11.9±2.7
人參皂苷Rg,劑量11組0.825.6±3.7**
人參皂苷R&劑量12組1.027.3±4.2**
人參皂苷Rg,劑量13組1.527.9±3.5**
人參皂苷Rgi劑量14組2.029.4±4.0**
人參皂苷11&劑量15組3,029.3±4.2**
人參皂苷R&劑量16組4.029.5±3.8**
人參皂苷Rg,劑量17組5.021.4±3.5**
人參皂苷R^劑量18組5.518.2士4.1" 注與空白對照組比較，*P < 0. 05， **P < 0. 01。 表3對大鼠頸動脈血栓形成的影響
組別齊糧血栓形成時間
mg/kgmin
空白對照組—12.1±2.4
人參皂苷Rgi劑量19組4.526.4±3.9**
人參皂苷Rgl劑量20組4.624.8±3.6**
人參皂苷11&劑量21組4.722.9±4.0**
人參皂苷劑量22組4.822.7±4.1**
人參皂苷Rgi劑量23組4.921.6±3.6**
人參皂苷Rgi劑量24組5.021.1士3.5**
人參皂苷Rgl劑量25組5.319.2±4.0**
人參皂苷Rgt劑量26組5,518,3±3.9* 注與空白對照組比較，*P < 0. 05， **P < 0. 01。 實驗結論通過上述實驗表明，人參皂苷Rgl的起效劑量為0. 125mg(大鼠)，換算 成人的劑量為1.25mg(0. 125X60/6)(以下同)，劑量為20mg進入平臺期， 一直至45mg，劑 量為50mg時為藥效下降階段。 實驗討論上述量效關係研究表明，人參皂苷Rg工的起效劑量很小，優效劑量
2. 5mg-40mg或10mg-30mg範圍內，而成藥研究過程中，劑量的選擇應在量效曲線上升階段，
這樣對臨床用藥具有很好的選擇，量效曲線的確定，為臨床試驗確定合理的給藥劑量和給
藥方案，加快開發進程，節約研究資源；量效關係研究是確定藥物安全性和有效性評價的必
須內容，是註冊管理部門作出科學判斷的重要依據；量效關係研究是藥物註冊撰寫說明書
的重要內容；這方面的資料對於每個病人中安全有效用藥十分重要，有助於確定合適的初
始劑量，並是按病人的特殊需要調整劑量及確定最大劑量(即超過此劑量不增加療效，相
反會帶來不可接受的不良反應)的最佳方法。 二、藥效學驗證實驗 對大鼠靜脈血栓形成的影響
6
實驗動物健康SD大鼠，體重240-260g。
實驗藥物本發明人參皂苷Rgl。
實驗方法取大鼠隨機分組模型對照組、人參皂苷Rgl不同劑量組，各實驗組尾
靜脈給藥。給藥7天後，於末次給藥1小時，水合氯醛(350mg/kg， ip)麻醉，開腹分離下腔靜
脈，於左腎靜脈下方用粗絲線結紮下腔靜脈，縫合腹部。6h後重新開腹，在結紮處下方2cm
處夾閉血管，剖開管腔，取出血栓，稱重。 實驗結果見表4。 表4對大鼠靜脈血栓形成的影響
組別劑量血栓溼重抑制率
mg/kgmg
模型對照組一31.25± 13.69—
人參皂苷Rgt劑量1組17.31士5.89**44.61
人參皂苷Rg!劑量2組110.75±3.69**#65.60
人參皂苷11&劑量3組1.59.52±3.04**#69.54
人參皂苷Rgi劑量4組28.15±2.75**#73.92 注與對照組比較**P < 0. 01， *P < 0. 05 ;與人參皂苷劑量1組比較#P < 0. 05 實驗結論上述藥效學實驗表明，人參皂苷RgJ0mg組、15mg組、20mg組比人參皂 苷Rgl50mg組具有更好的藥理作用(P < 0. 05)，充分說明本發明具有科學意義。 三、實施例 實施例1 1. 25mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。 實施例2 40mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。 實施例3 2. 5mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。 實施例4 10mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。 實施例5 30mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。 實施例6 20mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。 實施例7 2mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。 實施例8 35mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。 實施例9 5mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。 實施例10 15mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
實施例11 39mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
實施例2 25mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
上述實施例人參皂苷Rg1可以是藥物製劑的原料藥。 本發明所述的劑量(mg)是按照動物實驗研究的結果換算出人的使用劑量。
本發明所述的藥物製劑包括但不限於注射液、輸液、粉針劑、凍乾粉針劑、片劑、膠 囊劑、顆粒劑、滴丸、微丸等。 注本發明所要求保護的具體技術方案，不限於上述實施例所表達的技術方案的 具體組合。
權利要求
1.25mg-40mg的人參皂苷Rg1在製備治療抗血栓藥物中的應用。
2. 2. 5mg-40mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
3. 10mg-30mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
4. 20mg的人參皂苷Rgl在製備治療抗血栓藥物中的應用。
5. 根據權利要求1-4任一項所述的應用，其中人參皂苷Rgl為活性成分製備的藥物製劑。
全文摘要
本發明公開了1.25mg-40mg的人參皂苷Rg1在製備治療抗血栓藥物中的應用；2.5mg-40mg的人參皂苷Rg1在製備治療抗血栓藥物中的應用；10mg-30mg的人參皂苷Rg1在製備治療抗血栓藥物中的應用；20mg/kg的人參皂苷Rg1在製備治療抗血栓藥物中的應用。量效關係表明，本發明劑量人參皂苷Rg1具有很好的藥理作用，進一步說明本發明具有更寬的安全範圍。
文檔編號A61K31/704GK101757008SQ20081022764
公開日2010年6月30日 申請日期2008年11月28日 優先權日2008年11月28日
發明者孫德傑, 楊毅, 林治榮, 顧群 申請人:北京本草天源藥物研究院