一種連翹及含連翹產品的檢測方法

2023-12-02 05:30:51

一種連翹及含連翹產品的檢測方法
【專利摘要】本發明涉及一種連翹及含連翹產品的檢測方法，其對照品為五福花苷酸，或用連翹苷對照品為五福花苷酸替代物，用校正因子計算五福花苷酸含量。在現有產品中，有個別商家為了以次充好，用連翹葉來替代連翹果實，導致最終產品效果差，發明人意外的發現：連翹葉中不含五福花苷酸，利用檢測五福花苷酸可以控制連翹產品質量的合法性，以保證含連翹產品的質量。
【專利說明】一種連翹及含連翹產品的檢測方法

【技術領域】
[0001] 本發明涉及中藥的檢測方法領域，具體涉及一種連翹及含連翹產品的檢測方法。

【背景技術】
[0002] 連翹是中國臨床常用傳統中藥之一，又名黃花條、連殼、青翹、落翹、黃奇丹等，果 實入藥。連翹是清熱解毒的中藥，主治熱病初起，風熱感冒，發熱，心煩，咽喉腫痛，急性腎炎 等。
[0003] 連翅的入藥部位為連翅（Forsythiasuspensa(Thunb. )Vahl)的乾燥果實。秋季 果實初熟尚帶綠色時採收，除去雜質，蒸熟，曬乾，習稱青翹；果實熟透時採收，曬乾，除去雜 質，習稱老翹。
[0004] 在《中國藥典》2010年版中，有連翹提取物和連翹的含量檢測方法，具體如下：
[0005] 連翹，有兩種成分連翹苷（C27H34O14)、連翹酯苷（C29H36O15),限定連翹苷不低於 0. 15 %，連翹酯苷A不少於0. 25 %，具體含量檢測方法為：
[0006] 連翹苷
[0007] 色譜條件與系統適用性試驗，以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈-水 (25 :75)為流動相；檢測波長為277nm，理論板數按連翹苷峰應不低於3000;
[0008] 對照品溶液的製備：取連翹苷對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含0.2mg 的溶液，即得；
[0009] 供試品溶液的製備：取本品粉末（過五號篩）約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中， 精密加入甲醇15ml，稱定重量，浸漬過夜，超聲處理（功率250W，頻率40kHz) 25分鐘，放冷， 再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液5ml，蒸至近幹，加中性氧 化鋁0. 5g拌勻，加在中性氧化鋁柱（100-200目，lg，內徑為1-1. 5cm)上，用70%乙醇80ml 洗脫，收集洗脫液，濃縮至幹，殘渣用50 %甲醇溶解，轉移至5ml量瓶中，並稀釋至刻度，搖 勻，濾過，取續濾液，即得。
[0010] 測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各?〇μ1，注入液相色譜儀，測 定，即得。
[0011] 連翹酯苷A
[0012] 色譜條件與系統適用性試驗，以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈-0. 4% 冰醋酸溶液（15 :85)為流動相；檢測波長為330nm，理論板數按連翹酯苷F峰計算應不低於 5000；
[0013] 對照品溶液的製備：取連翹酯苷A對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含 O-Img的溶液，即得（臨用配製）；
[0014] 供試品溶液的製備：取本品粉末（過五號篩）約〇.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶 中，精密加入70%甲醇15ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz) 30分鐘，放 冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
[0015]測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各1〇μ1，注入液相色譜儀，測 定，即得。
[0016] 連翹提取物中，連翹苷A不得少於6.0%，連翹苷不得少於0.5%。其製備方法為， 取連翹，粉碎成粗粉，加水煎煮三次，每次1. 5小時，濾過，合併濾液，濾液於60°C以下減壓 濃縮至相對密度1. 10-1. 20 (室溫）的清膏，放冷，加入4倍量乙醇，攪勻，靜置2小時，濾過， 濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧乾燥，即得。
[0017] 關於連翹提取物的含量測定方法，具體為：
[0018] 色譜條件與系統適用性試驗，以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇為流動 相A，以水為流動相B，按照下表進行梯度洗脫，檢測波長為235nm，理論板數按連翹酯苷F峰 計算應不低於4000 ;
[0019]
[0020]

【權利要求】
1. 一種連翹及含連翹產品的檢測方法，其對照品為五福花苷酸，或用連翹苷對照品為 五福花苷酸替代物，用校正因子計算五福花苷酸含量。
2. 根據權利要求1所述的檢測方法，其特徵在於，所述含連翹產品為連翹與其他中藥 組合製成的產品，優選地，所述含連翹產品為雙黃連口服液、雙黃連注射液、雙黃連膠囊、雙 黃連顆粒、雙黃連片、雙黃連糖漿、雙黃連滴丸、雙黃連泡騰片、雙黃連氣霧劑、注射用雙黃 連（凍幹）、雙黃連栓、小兒熱速清口服液、小兒熱速清糖楽、小兒熱速清顆粒、複方苳蘭口 服液。
3. 根據權利要求1所述的檢測方法，其特徵在於，雙黃連口服液中每lml含五福花苷酸 以連翹苷計不得少於〇. 4mg。
4. 根據權利要求1-3任一項所述的檢測方法，其特徵在於，該方法包括五福花苷酸的 檢測方法，具體為：色譜條件與系統適用性試驗、對照品的製備、供試品的製備、檢測。
5.根據權利要求4所述的檢測方法，其特徵在於，所述色譜條件與系統適用性試驗為： 色譜柱：Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18，以0.05%甲酸乙腈溶液為流動相A，以0.05% 甲酸溶液為流動相B，；柱溫為20°C;流速為每分鐘0. 9ml ;檢測器：二極體陣列檢測器，定性 鑑別檢測條件：波長掃描範圍：190-400nm，檢測波長：236nm，278nm ;定量測定檢測條件：檢 測波長：〇min，236nm，20min，278nm，理論板數按連翅苷峰計算不低於6000。
6. 根據權利要求4所述的檢測方法，其特徵在於，所述梯度洗脫的程序見下表：
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7. 根據權利要求4所述的檢測方法，其特徵在於所述供試品溶液的製備： 連翹藥材：取藥材l_2g，置錐形瓶中，加40%甲醇25-50ml，搖勻，稱重，超聲2小時，補 重，用0. 22ym的微孔濾膜濾過，取續濾液即得；或 含連翹產品：精密量取本品lml(或0.5g)置5ml量瓶中，加40%甲醇稀釋至刻度，搖 勻，用0. 22ym的微孔濾膜濾過，取續濾液即得。
8. 根據權利要求4-7任一項所述的檢測方法，其特徵在於，該方法包括以下步驟： 對照品溶液的製備：取五福花苷酸對照品適量，精密稱定，加40%甲醇製成每lml含 100ug的溶液，即得； 供試品溶液的製備： 連翹藥材：取藥材l_2g，置錐形瓶中，加40%甲醇25-50ml，搖勻，稱重，超聲2小時，補 重，用0. 22ym的微孔濾膜濾過，取續濾液即得；或 含連翹產品：精密量取本品lml(或0.5g)至5ml量瓶中，加40%甲醇稀釋至刻度，搖 勻，用0. 22ym的微孔濾膜濾過，取續濾液即得； 色譜條件與系統適用性試驗：色譜柱：AgilentZorbaxEclipse父08-(：18(150111111\4.61111111.(1.，511111)，配父08-(：18預柱 ；流動相：以0.05%甲酸乙腈溶液為 流動相A，以0. 05%甲酸溶液為流動相B，線性梯度洗脫程序見下表；流速：0. 9ml/min;檢 測波長：〇min236nm，20min278nm;柱溫：20°C;進樣量：5iU;
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9.根據權利要求4-7任一項所述的檢測方法，其特徵在於，該方法包括以下步驟： 對照品溶液製備：取連翹苷對照品適量，精密稱定，加40 %甲醇製成每lml含 200-260yg的溶液，即得； 對照藥材溶液製備：取連翹對照藥材〇. 1-0. 5g至5ml量瓶中，精密稱定，加40%甲醇 至近5ml，密塞，超聲處理2小時，功率250W，頻率40kHz，放冷，加40%甲醇至刻度，搖勻， lOOOOrpm離心lOmin，取上清液，再用0. 22ym的微孔濾膜濾過，取續濾液即得； 供試品溶液製備： 連翹藥材：取藥材l_2g，置錐形瓶中，加40%甲醇25-50ml，搖勻，稱重，超聲2小時，補 重，用0. 22ym的微孔濾膜濾過，取續濾液即得；或 含連翹產品：精密量取本品〇. 5-2ml(或0. 5-2g)至5ml量瓶中，加40%甲醇稀釋至刻 度，搖勻，用〇. 22 的微孔濾膜濾過，取續濾液即得； 色譜條件：色譜柱：AgilentZorbaxEclipseXDB-C18(150mmX4.6mmi.d.，5um)，配 XDB-C18預柱；流動相：（0.01 %-0.4%)(甲酸、乙酸、磷酸）乙腈溶液（A)-(0.01 %-0.4%)(甲酸、乙酸、磷酸）溶液（B)，按照線性梯度洗脫表運行41min，具體見下表；色譜圖記錄 35min ;流速：0? 80-1. 10ml/min ;柱溫：20-25°C;進樣量：2-10 iil，檢測器：二極體陣列檢測 器，定性鑑別條件：波長掃描範圍：190-400nm，檢測波長：236nm，278nm ;定量檢測條件：檢 測波長：〇min，236nm，20min，278nm ;
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10.權利要求1-9任一項所述的檢測方法在檢測連翹及含連翹產品的應用。
【文檔編號】G01N30/02GK104483411SQ201410835171
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月29日 優先權日:2014年12月29日
【發明者】方同華, 邵青, 葛志偉, 嶽大彪, 許照芹, 周廣紅, 席桂才, 代喜國, 王倩, 馮慧, 賈文娟 申請人:黑龍江珍寶島藥業股份有限公司