抗血小板活化因子的藥物化合物的製作方法

2023-11-01 16:38:27

專利名稱：抗血小板活化因子的藥物化合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一類具有血小板活化因子(PAF)拮抗作用的藥物，尤其涉及一種抗血小板活化因子的藥物化合物。
背景技術：
銀杏作為藥用植物由來已久，公元1000年左右，我國民間就使用銀杏葉治療哮喘與支氣管炎。隨著藥物提取工藝標準化和藥理作用活性研究的深入，世界各國，特別是德國、法國等歐洲國家已將銀杏提取物(GBE)廣泛用於治療呼吸系統、心腦血管系統等疾病。銀杏內酯是存在於銀杏葉及根莖中的一系列二萜類化合物，化學性質相當穩定。銀杏內酯是血小板活化因子(platelet-activating factor，PAF)的強拮抗物，血小板活化因子是一個很強的生理調節器，在很多生理現象上扮演著重要角色，如過敏、發炎及哮喘等等，因此尋找適當的PAF對抗物來作為醫療上的使用便是醫學界一個很重要的課題。
銀杏內酯B(Ginkgolide B，GB)是從銀杏葉中提取的一種六環籠狀結構的二萜化合物，是迄今發現的最強的血小板活化因子(PAF)拮抗劑，它直接參與血栓形成，可刺激冠狀動脈和腦動脈，引起它們的收縮、痙攣，導致心肌和腦組織缺血。近年研究還發現，有較強的抗炎作用。在炎症反應中，中性白細胞膜磷脂經活化磷脂酶A2的LPA作用，水解成花生四烯酸(AA)。AA在5-脂氧酶(5-LO)的作用下進一步代謝為白三烯(LTs)和羥基二十碳四烯酸(HETEs)等產物，其中，某些產物是重要的炎症介質，而磷脂酶A2的活化需要細胞內鈣參與。銀杏內酯B具有影響大鼠中性白細胞花生四烯酸代謝酶及細胞內游離鈣的作用。其抗炎作用可能與其抑制中性白細胞溶酶體酶的釋放、超氧陰離子的產生以及細胞內鈣水平的升高有關。
但是銀杏內酯B是一種六環籠狀結構的二萜化合物，剛性結構，不溶於水，生物利用度差，致使藥效的充分發揮受到限制，影響臨床應用效果。

發明內容
本發明提供一種能夠提高水溶性、生物利用度好並有利於充分發揮藥效的抗血小板活化因子的藥物化合物。
本發明採用如下技術方案一種抗血小板活化因子的藥物化合物，該藥物化合物是在銀杏內酯B的10位羥基上連接有含氮基團，其結構式如下 其中，X為含1-8個碳原子的連接骨架，R1和R2為H或者碳數為1-8的烴基。
與現有技術相比，本發明具有如下優點本發明是以銀杏內酯B為母體，經結構修飾，成為銀杏內酯B的含氮衍生物，改善了水溶性，提高生物利用度，增強療效；尤其是在其成鹽後，其水溶性、生物利用度及療效均有大幅度提高和增強。
具有血小板活化因子(PAF)拮抗作用，可用於缺血性中風、炎症、哮喘等與PAF因子相關的疾病預防及臨床治療。
(1)銀杏內酯B的結構修飾前後的譜圖分析如下銀杏內酯B(即結構修飾前)的質譜(MS)及氫譜(1H-NMR)圖譜解析MS424(分子離子峰)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)1.01(s，9H，t-Bu)，1.09(d，3H，14-Me)，1.70(dd，1H，8-H)，1.91(ddd，1H，7α-H)，2.12(dd，1H，7β-H)，2.83(q，1H，14-H)，4.02(dd，1H，1-H)，4.63(d，1H，2-H)，4.90(d，1H，1-OH)，5.00(d，1H，10-H)，5.29(d，1H，6-H)，6.06(s，1H，12-H)，6.47(s，1H，3-OH)，7.46(d，1H，10-OH)
10-O-(二甲基胺基乙基)銀杏內酯B(即結構修飾後)的質譜(MS)及氫譜(1H-NMR)圖譜分析MS495(分子離子峰，2.49)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)1.03(s，9H，t-Bu)，1.08(d，3H，14-Me)，1.74(dd，1H，8-H)，1.85(ddd，1H，7α-H)，2.14(dd，1H，7β-H)，2.18(s，6H，N(CH3)2)，2.29，2.62，3.56，4.38(d×2，t×2，1H×4，NCH2CH2O)，2.82(q，1H，14-H)，4.08(d，1H，1-H)，4.55(d，1H，2-H)，5.14(s，1H，10-H)，5.31(d，1H，6-H)，6.14(s，1H，12-H)，6.40(s，1H，3-OH)，7.22(s，1H，1-OH)分析說明a.質譜的分子離子峰以及的總氫數可見在原分子結構中引入了一分子二甲基胺基乙基基團，取代了原分子結構中的一個氫原子。
b.1H-NMR譜中，10-H的峰型由底物的雙重峰，在產物中變成單峰，說明以上基團與10-位羥基成醚。
c.1-位羥基上的氫與引入基團上的氮原子會存在氫鍵的可能，因此化學位移為7.22的單峰歸宿為1-位羥基氫。
(2)結構修飾前後的化合物水溶性比較將結構修飾前後化合物水溶性進行簡單的對比，同樣取15mg的樣品加水1ml，觀察溶解狀況。

說明通過結構修飾後，銀杏內酯B衍生物及其相應的鹽水溶性能夠改變原銀杏內酯B不溶於水的性狀。
(3)結構修飾前後抗血小板聚集活性比較血小板聚集反應與體內血栓形成、動脈粥樣硬化等發病機制密切相關。這類疾病是當前危害人類健康，導致死亡率最高的禍首之一。而防治血栓栓塞性疾病藥物，包括①抗凝劑②抗血小板藥③溶血栓劑等的藥理作用均與抑制血小板聚集反應有關。
血小板聚集實驗系採用比濁法，觀察藥物對ADP(或凝血酶、花生四烯酸、膠原)誘導的大鼠血小板聚集反應的作用，以抑制聚集百分率為指標，評價藥物的抗血小板聚集作用。模型名稱血小板聚集測定法；實驗動物SD大鼠；測試體系體外。

評判＜30％ 無效30-55％弱效55-70％顯效＞70％ 強效說明銀杏內酯B通過結構修飾後的產物，改變水溶性後，藥物活性也隨之大大增加。


圖1a、圖1b是銀杏內酯B的H譜圖。
圖2a、圖2b是銀杏內酯B的質譜圖。
圖3a、圖3b是10-O-(二甲基胺基乙基)銀杏內酯B的H譜圖。
圖4a、圖4b是10-O-(二甲基胺基乙基)銀杏內酯B的質譜圖。
具體實施例方式
本發明是通過對銀杏內酯B的結構修飾，獲得一類新的母體結構不變的含氮衍生物，將其製成相應的有機酸或者無機酸鹽，可提高水溶性，克服銀杏內酯B不溶於水的不利因素等缺陷。本發明在製備時，可以將600mg銀杏內酯B溶於40mL N，N-二甲基甲醯胺中，依次加入等摩爾滷代含氮化合物和10倍摩爾量碳酸鉀，加熱回流2小時，反應基本完全。停止加熱，冷卻，過濾，濾餅丙酮洗滌數次，合併濾液，減壓濃縮得淡黃色固體，該固體柱層析，乙酸乙酯/石油醚(1∶1)洗脫，得目標化合物，收率30-40％。
實施例1一種抗血小板活化因子的藥物化合物，其特徵在於該藥物化合物是在銀杏內酯B的10位羥基上連接有含氮基團，其結構式如下 其中，X為含1-8個碳原子的連接骨架，R1和R2為H或者碳數為1-8的烴基，為進一步改善了水溶性，提高生物利用度，增強療效，本實施例可將上述修飾有含氮基團的銀杏內酯B成鹽，即藥物化合物是10位羥基上連接有含氮基團的銀杏內酯B的有機酸鹽，該有機酸鹽為枸櫞酸鹽或乙醯水楊酸鹽；上述藥物化合物也可以是10位羥基上連接有含氮基團的銀杏內酯B的無機酸鹽，該無機酸鹽為硫酸鹽或鹽酸鹽。本發明可以根據臨床需要，製成各種藥物製劑，口服製劑如片劑、膠囊、顆粒、軟膠囊、口服液等，注射劑如注射液、粉針、輸液等。
實施例2、10-O-(二甲基胺基乙基)銀杏內酯B及其鹽酸鹽的製備工藝流程 經過中國科學院上海科技查新諮詢中心查新，報告稱在所檢索的文獻範圍和時限內，未見與該化合物10-O-(二甲基胺基乙基)銀杏內酯B結構完全相同的物質報導，證明該化合物具有新穎性，該化合物的結構發現。
實施例3 10-O-(對二甲胺基苯甲基)銀杏內酯B及製備工藝流程 實施例4 10-O-(間二甲胺基苯甲基)銀杏內酯B及製備工藝流程
實施例5 10-O-(鄰二甲胺基苯甲基)銀杏內酯B及製備工藝流程 實施例6 10-O-(對二甲胺基苯甲基)銀杏內酯B及製備工藝流程 實施例7 10-O-(1-吡嗪基乙基)銀杏內酯B及製備工藝流程
實施例8、10-O-(氨基乙基)銀杏內酯B及製備工藝流程 實施例9、10-O-(甲胺基乙基)銀杏內酯B及製備工藝流程 實施例10、10-O-(3-二甲胺基烯丙基)銀杏內酯B及製備工藝流程
實施例11、10-O-(二甲基胺基乙基)銀杏內酯B乙醯水楊酸鹽及製備工藝流程 實施例12、10-O-(二甲基胺基乙基)銀杏內酯B枸櫞酸鹽及製備工藝流程
權利要求
1.一種抗血小板活化因子的藥物化合物，其特徵在於該藥物化合物是在銀杏內酯B的10位羥基上連接有含氮基團，其結構式如下 其中，X為含1-8個碳原子的連接骨架，R1和R2為H或者碳數為1-8的烴基。
2.根據權利要求1所述的抗血小板活化因子的藥物化合物，其特徵在於藥物化合物是10位羥基上連接有含氮基團的銀杏內酯B的有機酸鹽。
3.根據權利要求2所述的抗血小板活化因子的藥物化合物，其特徵在於該有機酸鹽為枸櫞酸鹽或乙醯水楊酸鹽。
4.根據權利要求1所述的抗血小板活化因子的藥物化合物，其特徵在於藥物化合物是10位羥基上連接有含氮基團的銀杏內酯B的無機酸鹽。
5.根據權利要求4所述的抗血小板活化因子的藥物化合物，其特徵在於該無機酸鹽為硫酸鹽或鹽酸鹽。
全文摘要
本發明公開了一種抗血小板活化因子的藥物化合物，該藥物化合物是在銀杏內酯B的10位羥基上連接有含氮基團，其結構式如右下式，其中，X為含1－8個碳原子的連接骨架，R
文檔編號C07D307/00GK1900082SQ200510041060
公開日2007年1月24日 申請日期2005年7月18日 優先權日2005年7月18日
發明者秦引林, 夏鵬, 張倩, 陳瑛, 何龍其 申請人:秦引林