一種酚紅比色雙試劑及其測定血清碳酸氫根的方法
2023-11-01 16:11:52 2
專利名稱：一種酚紅比色雙試劑及其測定血清碳酸氫根的方法
技術領域：
本發明涉及一種在臨床檢查中用於分析測定血清碳酸氫根的酚紅比色雙試劑及使用該試劑分析測定血清碳酸氫根的方法。
背景技術：
血清碳酸氫根是臨床常規測定項目，對診斷酸鹼平衡紊亂有著重要意義。目前國內外測定血清碳酸氫根(分子式HCO3-)的方法主要有血氣分析儀法、電極法、酶法及滴定法。但這些方法都不同程度地存在著一定的缺陷.
1、血氣法 原理根據pH＝pk+log[HCO3-]/α.PCO2，通過測出pH、PCO2計算出HCO3-濃度。需要價格10萬至幾十萬元昂貴的血氣分析儀才能測定，分析儀中有三個電極即pH電極、CO2分壓電極、氧分壓電極。基層醫院因經濟原因難以採用，而且需抽取動脈血，也不適合臨床常規應用。
2、電極法 原理樣品酸化後CO2穿過矽橡膠膜擴散到稀釋的碳酸氫鹽緩衝液中，結果引起的PH改變後若用PH電極測定，則與總CO2含量有關。雖簡便快速，但儀器昂貴且測定成本較高，基層醫院仍難以應用，結果的準確性受CO2電極的狀態影響較大，測定線性在10-50mmol/L，低於10mmol/L的標本結果測定不準。
3、酶法 原理磷酸烯醇丙酮酸(PEP)+HCO3-後在PEP羧化酶作用下生成草醯乙酸和磷酸；乙醯乙酸+NADH+H+在蘋果酸脫氫酶作用下生成蘋果酸和NAD+。
酶法優點是特異性較強，可以進行半自動和全自動測定。但缺陷是試劑主要依賴進口，多為乾粉單一試劑，受溶解液的pH值、試劑瓶口徑、平衡時間長短等因素影響較大，試劑空白不穩定，需經常進行定標，試劑成本高(4-10元/ml)，試劑保存期短，單一試劑不能自動消除樣本空白對結果的幹擾。測定線性5-40mmol/L，高於40mmol/L的標本需要稀釋後重做，相對較麻煩，測定標準液為單一碳酸氫鈉溶液，穩定性差。
4、滴定法原理血清中加入過量標準鹽酸溶液，使酸與HCO3-起中和反應，釋放出CO2，然後以標準的NaOH溶液滴定剩餘的鹽酸，以NaOH的消耗量計算出血清HCO3-含量，以血清原來的pH值作為滴定終點。優點是標本量少時省時省力，成本低廉，但缺點是精密度差，特別是低結果標本滴定準確非常困難，大批量測定時費時費力，不能用於自動化分析。
通過比較以上現有測定技術，綜合存在以下缺陷(1)測定條件要求高，需要昂貴的儀器，不能在各級醫院開展應用(如血氣法和電極法)。(2)測定試劑需要依賴進口(酶法)，成本高，酶試劑不穩定保存期短，單一試劑不能消除標本內源性幹擾。(3)滴定法為手工測定法，誤差大，不能用於儀器測定，成本雖低，應用越來越少。
發明內容
本發明的目的是提供一種酚紅雙色對比的酚紅比色雙試劑，該試劑成份穩定，保存期長，所採用的標準液基質成份與血清基本相同；以及利用該試劑進行測定血清碳酸氫根的方法，該方法準確可靠，操作簡便，成本低廉，能適應各級實驗室應用。
為了達到上述目的，本發明採取的技術方案是本發明是將血氣法和滴定法的測定原理科學地結合起來，根據朗-伯比爾定律，利用酚紅雙色對比法，採用液體雙試劑分步反應與顯色，通過自動測定顯色液吸光度來計算血清碳酸氫根濃度。
本發明的試劑為雙試劑，包含有測定液和標準液；測定液包含有R1試劑、R2試劑；R1試劑為中和血清中部分碳酸氫根的酸性反應試劑，R2試劑為顯色的酚紅溶液。標準液包含有A液、B液；在測定時把A液和B液等量混合為標準液，標準液的基質成分與血清基本接近。標準液中的A液、B液具有成分穩定，保存期長的特點。
R1試劑包含有氯化鈉、疊氮鈉、鹽酸、TritonX-100、蒸餾水等，pH4.5～6.8；氯化鈉、疊氮鈉、鹽酸、TritonX-100、蒸餾水的配比為氯化鈉(AR級)3.0g～15.0g，疊氮鈉(AR級)0.5g～5.0g，1mol/L鹽酸0.6ml～2.0ml(可用相同摩爾數的硫酸、草酸、硝酸代替)；TritonX-100(AR級)0.5ml～5.0ml。
蒸餾水1000ml。
R1試劑的製取方法將氯化鈉、疊氮鈉、鹽酸、TritonX-100、溶於蒸餾水中，並調整pH值。
R2試劑包含有酚紅、氯化鈉、TritonX-100、蒸餾水等，酚紅、氯化鈉、TritonX-100、蒸餾水的配比為1.0g/L～10.0g/L酚紅濃溶液0.6ml～20.0ml，氯化鈉(AR級)3.0g～15.0g，TritonX-100(AR級)0.5～5.0ml，蒸餾水1000ml。
R2試劑的製取方法將精確稱取1.0g/L～10.0g/L酚紅溶於蒸餾水中，加1mol/LNaOH10ml～40ml，製取中間液，過濾備用。在使用時，將該中間液與氯化鈉、TritonX-100溶於蒸餾水中，製取R2試劑。
為適應各型全自動生化儀的使用，R2試劑可以是濃縮型R2試劑。濃縮型R2試劑包含有酚紅、氯化鈉、TritonX-100、蒸餾水等，酚紅、氯化鈉、TritonX-100、蒸餾水的配比為1.0g/L～10.0g/L酚紅濃溶液0.6ml～20.0ml，氯化鈉(AR級)3.0g～15.0g，TritonX-100(AR級)0.5～5.0ml，蒸餾水250ml。
濃縮型R2試劑的製取方法在使用時，將中間液、氯化鈉、TritonX～100溶於蒸餾水中。
A液為30.0mmol/L～80.0mmol/LNaHCO3溶液，A液的製取方法將NaHCO3(AR級)溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水中。
B液為pH7.20～7.50磷酸鹽緩衝液B液包含有KH2PO4、Na2HPO4.12H2O、TritonX-100、疊氮鈉、蒸餾水等。KH2PO4、Na2HPO4.12H2O、TritonX-100、疊氮鈉、蒸餾水的配比為KH2PO4(AR級)1.0g～2.0g，Na2HPO4.12H2O(AR級)10.0g～20.0g，TritonX-100(AR級)0.5ml～5.0ml，疊氮鈉(AR級)0.5g～5.0g，蒸餾水1000ml。
B液的製取方法將KH2PO4、Na2HPO4.12H2O、TritonX-100、疊氮鈉溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水1000ml，調節pH值在7.20～7.50範圍內。
標準液臨用前取A、B二液等量混合為標準液，標準液的濃度值在15.0mmol/L～40.0mmol/L之間，pH值在7.45～7.85之間。
利用本發明的酚紅比色雙試劑對血清碳酸氫根(HCO3-)進行測定，其測定原理如下根據H-H方程即pH＝pK+log[HCO3-]/α.pCO2原理，pH的高低主要取決於血清HCO3-與pCO2的比值大小，當待測血清和標準液與試劑R1混合，中和掉血清和標準液中部分HCO3-，顯色液pH的高低則主要取決於血清中剩餘部分HCO3-濃度。用試劑R2酚紅顯色，其顯色液吸光度在558nm與血清HCO3-濃度成線性關係。與同樣處理的標準液比色即可求出血清中碳酸氫根濃度。
本發明的血清碳酸氫根測定的方法有兩種全自動分析法、手工測定法。
手工測定法取三支試管，分別標記測定管(R)、標準管(S)、對照管(B)。在測定管(R)中加入待測血清，在標準管(S)中加入與血清等量的標準液；然後在測定管(R)、標準管(S)、對照管(B)中各加入血清10倍量的R1試劑(此時對照管(B)中只有R1試劑)；混勻放36～38℃水浴580～620秒鐘；R1試劑中的酸中和掉部分碳酸氫根，經加溫反應後CO2分壓下降在0.32～0.34kPa左右；取出再各加入與R1試劑等量的R2試劑(顯色反應)，置半自動生化儀以對照管(B)調零比色測定(測定結果)。
在半自動生化儀比色測定時，設置參數為比色法為終點法，波長546nm，溫度37℃，比色光徑1cm，吸液量不少於500μl，標準液濃度25.0mmol/L。
根據測定結果計算出血清HCO3-濃度。計算方法為血清HCO3-濃度(mmol/L)＝AR/AS×標準應用液濃度(mmol/L)。
式中AR為測定管(R)吸光度值，AS為標準管(S)吸光度值。
全自動分析法首先確定主要線性參數，然後測定血清，與線性參數進行對比，計算出血清HCO3-。
主要線性參數的確定反應類型兩點終點法；反應溫度36～38℃；主波長530～570nm，次波長不設；孵育時間580～620秒鐘；標準液置於標準管(S)內，R1試劑、R2試劑均為標準液的10倍的量(R2試劑為濃縮型時，濃縮型R2試劑為標準液的2.5倍的量)；反應方向正反應。第一點讀數290～310秒鐘，第二點讀數580～620秒鐘；兩點線性校正，以此為基準。
將待測血清置於測定管(R)內，R1試劑、R2試劑均為血清的10倍的量；採用濃縮型R2試劑時，濃縮型R2試劑為血清的2.5倍的量；反應方向正反應；反應溫度36～38℃；主波長530～570nm，次波長不設；孵育時間580～620秒鐘；第一點讀數290～310秒鐘，第二點讀數580～620秒鐘。再將讀數與基準進行對比，並根據測定結果計算出血清HCO3-濃度。其計算方法同手工測定方法中的計算方法。
由於本發明採用測定液與血清分步反應、顯色，再利用測定液與標準液分步反應、顯色，將兩者顯色結果進行對比，來計算血清碳酸氫根濃度。測定液包含有R1試劑、R2試劑；R1試劑為中和血清中部分碳酸氫根的酸性反應試劑，R2為顯色的酚紅溶液。標準液包含有A液、B液；在測定時把A液和B液等量混合為標準液，標準液的基質成分與血清基本接近。標準液中的A液、B液成分穩定，保存期長。測定方法可用手工測定法，該方法操作簡單。試劑和標準液所用的藥品為常見和價格低廉的藥品，成本低。因此本發明具有試劑成份穩定，保存期長，基質成份與血清基本相同；以及利用該試劑進行測定血清碳酸氫根的方法準確可靠，操作簡便，成本低廉，是一種能適應各級實驗室應用的血清碳酸氫根測定的方法；該測定方法既能滿足手工測定，也能滿足全自動、半自動的測定等特點。
具體實施例方式
本發明的酚紅比色試劑為雙試劑，包含有測定液和標準液；測定液包含有R1試劑、R2試劑；R1試劑為中和血清中部分碳酸氫根的酸性反應試劑，R2為顯色的酚紅溶液。標準液包含有A液、B液；在測定時把A液和B液等量混合為標準液，標準液的基質成分與血清基本接近。
測定液的實施例測定液實施例1R1試劑pH4.5～pH5.0氯化鈉(AR級)4.0g～6.0g；疊氮鈉(AR級)0.5g～1.0g；lmol/L鹽酸1.6ml～2.0ml(可用相同摩爾數的硫酸、草酸、硝酸代替)、TritonX-100(AR級)0.5ml～1.5ml。
溶於1000ml蒸餾水中。
R2試劑1.0g/L～3.0g/L酚紅濃溶液精確稱取酚紅(AR級)1.0g～3.0g，溶於1000ml
蒸餾水中，加1mol/LNaOH20ml～40ml，製取中間液，過濾備用。
在使用時，取中間液4.5ml～20.0ml，氯化鈉(AR級)3.0g～7.0g，TritonX-100(AR級)0.5ml～1.5ml，溶於蒸餾水1000ml。
當R2試劑為濃縮型時R1試劑與R2試劑體積為4∶1劑型(主要適用各型全自動生化儀)R1試劑配製方法不變。只將R2試劑體積濃縮4倍(蒸餾水體積為250ml，試劑成份不變)。
測定液實施例2R1試劑與R2試劑體積為1∶1劑型(適用於半自動和全自動)R1試劑pH5.1～pH5.5氯化鈉(AR級)5.0g～12.0g；疊氮鈉(AR級)1.0g～3.5g；1mol/L鹽酸1.1ml～1.5ml(可用相同摩爾數的硫酸、草酸、硝酸代替)，TritonX-100(AR級)1.5ml～3.5ml。
溶於1000ml蒸餾水中。
R2試劑3.1g/L～5.0g/L酚紅濃溶液精確稱取酚紅(AR級)3.1g～5.0g，溶於1000ml蒸餾水中，加lmol/LNaOH 20ml～25ml，製取中間液，過濾備用。使用時，取中間液1.5ml～6.0ml，氯化鈉(AR級)5.0g～9.0g，TritonX-100(AR級)2.0ml～5.0ml，溶於蒸餾水1000ml。
R1試劑與R2試劑體積為4∶1劑型(主要適用各型全自動生化儀)R1試劑配製方法不變。只將R2試劑體積濃縮4倍(蒸餾水體積為250ml，試劑成份不變)。
測定液實施例3R1試劑與R2試劑體積為1∶1劑型(適用於半自動和全自動)Rl試劑pH5.6～PH6.0氯化鈉(AR級)6.0g～11.0g，疊氮鈉(AR級)2.5g～4.0g，1mol/L鹽酸0.7ml～1.5ml(可用相同摩爾數的硫酸、草酸、硝酸代替)，TritonX-100(AR級)1.0ml～3.5ml，溶於1000ml蒸餾水中。
R2試劑5.1g/L～8.0g/L酚紅濃溶液精確稱取酚紅(AR級)5.1g～8.0g，溶於1000ml蒸餾水中，加1mol/LNaOH 22ml-30ml，製取中間液，過濾備用。使用時，取中間液1.0ml～4.5ml，氯化鈉(AR級)5.0g～13.0g，TritonX-100(AR級)1.5ml～3.6ml，溶於蒸餾水1000ml。
R1試劑與R2試劑體積為4∶1劑型(主要適用各型全自動生化儀)R1試劑配製方法不變。只將R2試劑體積濃縮4倍(蒸餾水體積為250ml，試劑成份不變)。
測定液實施例4R1試劑與R2試劑體積為1∶1劑型(適用於半自動和全自動)R1試劑pH6.0～pH6.8，氯化鈉(AR級)8.0g～15.0g，疊氮鈉(AR級)3.5g～5.0g，1mol/L鹽酸0.6ml～1.2ml(可用相同摩爾數的硫酸、草酸、硝酸代替)，TritonX-100(AR級)1.0ml～2.5ml。
溶於1000ml蒸餾水中。
R2試劑8.1g/L～10.0g/L酚紅濃溶液精確稱取酚紅(AR級)8.1g～10.0g，溶於1000ml蒸餾水中，加lmol/LNaOH 30ml～40ml，製取中間液，過濾備用。使用時，取中間液0.6ml～4.0ml，氯化鈉(AR級)4.0g～10.0g，TritonX-100(AR級)2.3ml～3.8ml，溶於蒸餾水1000ml。
R1試劑與R2試劑體積為4∶1劑型(主要適用各型全自動生化儀)R1試劑配製方法不變。只將R2試劑體積濃縮4倍(蒸餾水體積為250ml，試劑成份不變)。
標準液實施例1A液(30mmol/L～35mmol/LNaHCO3溶液)精確稱取NaHCO3(AR級)2.52克～2.94克溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水1000ml中。
B液pH7.20～7.25磷酸鹽緩衝液KH2PO4(AR級)1.0g～1.8g，Na2HPO4.12H2O(AR級)10.0g～19.1g，TritonX-100(AR級)0.5ml～3.0ml，疊氮鈉(AR級)0.5g～1.9g，溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水1000ml。
用時取A、B等量混合即為標準液(濃度15.0mmol/L～17.5mmol/L)。
標準液實施例2A液(40mmol/L～50mmol/LNaHCO3溶液)精確稱取NaHCO3(AR級)3.36g～4.2g溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水1000ml中。
B液pH7.3～7.35磷酸鹽緩衝液KH2PO4(AR級)1.1g～1.9g，Na2HPO4.12H2O(AR級)10.6g～19.3g，TritonX-100(AR級)2.0ml～4.5ml，疊氮鈉(AR級)1.5g～3.5g，溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水1000ml。
用時取A、B等量混合即為標準液(濃度20.0mmol/L～25.0mmol/L)。
標準液實施例3A液(55mmol/L～60mmol/LNaHCO3溶液)精確稱取NaHCO3(AR級)4.62克～5.04克溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水1000ml中。
B液pH7.4～7.45磷酸鹽緩衝液KH2PO4(AR級)1.2g～1.95g，Na2HPO4.12H2O(AR級)11.0g～19.6g，TritonX-100(AR級)1.5～2.8ml，疊氮鈉(AR級)3.6～5.0g，溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水1000ml。
用時取A、B等量混合即為標準液(濃度27.5mmol/L～30.0mmol/L)。
標準液實施例4A液(70mmol/L～80mmol/LNaHCO3溶液)精確稱取NaHCO3(AR級)5.88克～6.72克溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水1000ml中。
B液pH7.46～7.5磷酸鹽緩衝液KH2PO4(AR級)1.3g～2.0g，Na2HPO4.12H2O(AR級)11.5g～20.0g，TritonX-100(AR級)0.5ml～4.0ml，疊氮鈉(AR級)2.0g～5.0g，溶於新鮮煮沸冷卻的蒸餾水1000ml。
用時取A、B等量混合即為標準液(濃度35.0mmol/L～40.0mmol/L)。
本發明的血清碳酸氫根測定方法的實施例手工測定法取三支一次性塑料試管，分別標記測定管(R)、標準管(S)、對照管(B)。分別在測定管(R)、標準管(S)中加入30μl待測血清和標準液，在測定管(R)、標準管(S)、對照管(B)中各加入R1試劑300μl，混勻放37℃水浴10分鐘；試劑R1中的酸中和掉部分碳酸氫根，經加溫反應後CO2分壓下降在0.33kPa左右；取出再各加入R2試劑300μl(顯色反應)，置半自動生化儀以對照管(B)調零比色測定(測定結果)。設置參數為比色法為終點法，波長546nm，溫度37℃，比色光徑1cm，吸液量500μl，標準液濃度25.0mmol/L。
根據測定結果計算出血清HCO3-濃度。計算方法為血清HCO3-濃度(mmol/L)＝AR/AS×標準應用液濃度(mmol/L)。
式中AR為測定管(R)吸光度值，AS為標準管(S)吸光度值。
全自動分析法首先確定主要線形參數，然後測定血清，與線形參數進行對比，計算出血清HCO3-。
主要線性參數的確定反應類型兩點終點法；反應溫度37℃；主波長546nm，次波長不設；孵育時間600s；標準液20μl，R1試劑200μl，R2試劑200μl(R2試劑為濃縮型時，濃縮型R2試劑為50μl)；反應方向正反應。第一點讀數300s，第二點讀數600s；兩點線性校正，以此為基準。
將血清樣品20μl，R1試劑200μl，R2試劑200μl(R2試劑為濃縮型時，濃縮型R2試劑為50μl)；反應方向正反應；反應溫度37℃；主波長546nm，次波長不設；孵育時間600s；第一點讀數300s，第二點讀數600s。再將讀數與基準進行對比，並根據測定結果計算出血清HCO3-濃度。其計算方法同手工測定方法中的計算方法。
利用本發明的酚紅比色雙試劑及其測定血清碳酸氫根的方法，經吸收光譜、檢測線性、重複性、回收率、對照結果、幹擾試驗(溶血幹擾、膽紅素幹擾、脂血幹擾、肝素幹擾)、試劑穩定性等試驗，並與血氣法、電極法、酶法、滴定法對比(詳見附件酚紅比色雙試劑測定血清碳酸氫根的效果情況的報告)表明，本發明具有試劑成份穩定，保存期長，基質成份與血清基本相同；以及利用該試劑進行測定血清碳酸氫根的方法，該方法準確可靠，操作簡便，成本低廉，能適應各級實驗室應用的血清碳酸氫根測定的方法等特點。
參考文獻(1)柯軍、王以立二氧化碳酶法測定不穩定的因素 臨床檢驗雜誌 1996，14(6)300(2)韓志鈞等主編血氣酸鹼分析 遼寧科學技術出版社 第一版 1993，144(3)孟澤姜劍銘血液酸鹼狀態簡易化學測定 臨床檢驗雜誌 1988，6(3)127-129附件酚紅比色雙試劑測定血清碳酸氫根的效果情況的報告
權利要求
1.一種酚紅比色雙試劑，其特徵在於包含有試劑和標準液；試劑包含有R1試劑、R2試劑；R1試劑為中和血清中部分碳酸氫根的酸性反應試劑，R2為顯色的酚紅溶液；標準液包含有A液、B液；把A液和B液等量混合後為標準液；R1試劑包含有氯化鈉、疊氮鈉、鹽酸、TritonX-100、蒸餾水，pH4.5～6.8；氯化鈉、疊氮鈉、鹽酸、TritonX-100、蒸餾水的配比為氯化鈉(AR級)3.0g～15.0g，疊氮鈉(AR級)0.5g～5.0g，1mol/L鹽酸0.6ml～2.0ml，TritonX-100(AR級)0.5ml～5.0ml，蒸餾水1000ml；R2試劑包含有酚紅、氯化鈉、TritonX-100、蒸餾水；酚紅、氯化鈉、TritonX-100、蒸餾水的配比為1.0g/L～10.0g/L酚紅濃溶液0.6ml～20.0ml，氯化鈉(AR級)3.0g～15.0g，TritonX-100(AR級)0.5ml～5.0ml，蒸餾水1000ml；A液為30.0mmol/L～80.0mmol/LNaHCO3溶液；B液為pH7.20～7.50磷酸鹽緩衝液，B液包含有KH2PO4、Na2HPO4.12H2O、TritonX-100、疊氮鈉、蒸餾水，KH2PO4、Na2HPO4.12H2O、TritonX-100、疊氮鈉、蒸餾水的配比為KH2PO4(AR級)1.0g～2.0g，Na2HPO4.12H2O(AR級)10.0g～20.0g，TritonX-100(AR級)0.5ml～5.0ml，疊氮鈉(AR級)0.5g～5.0g，蒸餾水1000ml；標準液臨用前取A、B二液等量混合為標準液，標準液的濃度值在15.0mmol/L～40.0mmol/L之間，PH值在7.45～7.85之間。
2.根據權利要求1所述的酚紅比色雙試劑，其特徵在於所述的R2試劑為濃縮型R2試劑；濃縮型R2試劑包含有酚紅、氯化鈉、TritonX-100、蒸餾水，酚紅、氯化鈉、TritonX-100、蒸餾水的配比為1.0g/L～10.0g/L酚紅濃溶液0.6ml～20.0ml，氯化鈉(AR級)3.0g～15.0g，TritonX-100(AR級)0.5～5.0ml，蒸餾水250ml。
3.一種權利要求1所述的酚紅比色雙試劑測定血清碳酸氫根的方法，其特徵在於手工測定方法取三支試管，分別標記測定管(R)、標準管(S)、對照管(B)，在測定管(R)中加入待測血清，在標準管(S)中加入與血清等量的標準液；然後在測定管(R)、標準管(S)、對照管(B)中各加入血清10倍量的R1試劑；混勻放36～38℃水浴580～620秒鐘；R1試劑中的酸中和掉部分碳酸氫根，經加溫反應後CO2分壓下降在0.32～0.34kPa左右；取出再各加入與R1試劑等量的R2試劑(顯色反應)，置半自動生化儀以對照管(B)調零比色測定(測定結果)；根據測定結果計算出血清HCO3-濃度，計算方法為血清HCO3-濃度(mmol/L)＝AR/AS×標準應用液濃度(mmol/L)；式中AR為測定管(R)吸光度值，AS為標準管(S)吸光度值。
4.一種權利要求1所述的酚紅比色雙試劑測定血清碳酸氫根的方法，其特徵在於全自動分析法首先確定主要線形參數，然後測定血清，與線形參數進行對比，計算出血清HCO3；主要線性參數的確定反應類型兩點終點法；反應溫度36～38℃；主波長530～570nm，次波長不設；孵育時間580～620秒鐘；標準液置於標準管(S)內，R1試劑、R2試劑均為標準液的10倍的量(R2試劑為濃縮型時，濃縮型R2試劑為標準液的2.5倍的量)；反應方向正反應。第一點讀數290～310秒鐘，第二點讀數580～620秒鐘；兩點線性校正，以此為基準；將待測血清置於測定管(R)內，R1試劑、R2試劑均為血清的10倍的量；採用濃縮型R2試劑，濃縮型R2試劑為血清的2.5倍的量；反應方向正反應；反應溫度36～38℃；主波長530～570nm，次波長不設；孵育時間580～620秒鐘；第一點讀數290～310秒鐘，第二點讀數580～620秒鐘。再將讀數與基準進行對比，並根據測定結果計算出血清HCO3-濃度；其計算方法同手工測定方法中的計算方法。
全文摘要
一種酚紅比色雙試劑及其測定血清碳酸氫根的方法，含R1、R2試劑組成的測定液和A、B液等量混合的標準液，R1試劑含3.0g～15.0g氯化鈉、0.5g～5.0g疊氮鈉、0.6ml～2.0ml鹽酸、0.5ml～5.0ml TritonX－100、1000ml蒸餾水等；R2試劑為1.0g/L～10.0g/L酚紅濃溶液；A液為30.0mmol/L～80.0mmol/L NaHCO
文檔編號G01N21/31GK1773263SQ20051010429
公開日2006年5月17日 申請日期2005年10月14日 優先權日2005年10月14日
發明者李和樓, 郭英艾 申請人:李和樓