茶多酚的新用途的製作方法

2023-12-05 11:33:56 3

專利名稱：：茶多酚的新用途的製作方法
技術領域：
：本發明涉及茶多酚的新用途，具體地，是在抗空腸彎曲桿菌的禽類藥物中的用途。屬獸藥領域。
背景技術：
：空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejimi,Cj)是彎曲菌屬的一種，是革蘭氏陰性菌。1973年Dekeyser和Butzler從急性腸炎患者糞便分離到該菌並首次確定其致病性，後來發現可引起人和動物的各種疾病，如人類發燒、急性腸炎和格林-巴利症候群。近年報導中，空腸彎曲桿菌常在兒童引起腸道外感染，如敗血症、腦膜炎、膽囊炎、腹膜炎、心內膜炎、血栓性靜脈炎和反應性關節炎等；此外，還可引起牛和綿羊流產，火雞的肝炎和藍冠病，童子雞和雛雞壞死性肝炎，雛雞、犢牛、仔豬的腹瀉等多種疾病。據調查，市場上出售的75%的活禽和80%的禽肉中含有彎曲桿菌，接觸或食用禽類產品被認為是主要感染途徑。雞盲腸一旦被空彎曲菌感染，這些細菌可在長達8周的實驗期內持續存在，且雞源性菌株經傳代後毒力增強。由此可見，禽群空腸彎曲菌水平傳播，長期帶菌是家禽隨日齡增長，帶菌升高的主要原因。至今在食品安全問題上仍然是世界範圍內關注的焦點，世界公共衛生的重要課題之一。目前尚無預防彎曲桿菌感染的疫苗，對彎曲桿菌的預防和控制只能針對其流行環節和發病特點採取對症治療的原則。國內暴發彎曲桿菌主要採用中西結合的療法，如張立富等對發病嚴重的雞舍，每隻雞肌肉注射氨苄青黴素5mg，連注35天，同時用氯黴素水溶液飲用7天。在每噸飼料中拌入500g強力黴素飼餵5天後，改用氯黴素飲水5天，配合使用中藥熟地、當歸、白菊花、枸杞子各150g，茺蔚子、柴胡、青箱子、車前子、草決明、黃芩各100g，水煎供200隻育成雞內服，1天1劑，連用1015天，經治療，3天後病情逐漸好轉，除個別嚴重病雞不能控制死亡外，l周后基本完全康復。廖瓊妃等對上杭縣舊縣鄉暴發雞弧菌性肝炎的診治種，採用環丙沙星原粉，按lg加15kg水進行全群飲水，連用5d;挑出病雞或疑似病雞50羽，慶大黴素按l萬u/kg體重肌注，每天1次，連用3d，5d後病情得到控制。劉宗鳳等治療該病嚴重的孔雀，每隻孔雀肌肉注射氮苄青黴素10mg，35天為1個療程；同時用氯黴素水溶液飲用7天，在每噸飼料中拌入500g強力黴素詞餵5天後，改用氯黴素飲歸、白菊花、枸杞子各100g，柴胡、青葙子、草決明、車前子、黃芩、茺蔚子各70g，煎水，供100隻雛孔雀內服，每天1劑，連用510天；經治療，5天後病情逐漸好轉，除個別嚴重病例不能控制死亡夕卜，其餘的10天基本恢復正常。彎曲桿菌的血清型多，目前彎曲桿菌有5660個血清型，而且人畜感染途徑仍然不完全清楚，預防和治療帶來了巨大的困難。單純靠疫苗不能完全控制，而且目前臨床上應用的疫苗效果並不理想；噬菌體、細菌素的應用還處於研究階段；抗生素治療極易產生耐藥性及藥物殘留；而天然藥物無殘留，不產生耐藥性，無毒性或毒性小。因此，很有必要大力開發天然藥物來預防和治療彎曲桿菌病，解決臨床耐藥性問題和食品安全問題。茶多酚(TeaPolyphenols)是茶葉中多酚類物質的總稱，包括黃垸醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等，其中以黃烷醇類物質(兒茶素)最為重要。茶多酚又稱茶鞣或茶單寧，是形成茶葉色香味的主要成份之一，也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。茶多酚用途廣泛，如清除活性氧自由基，阻斷脂質過氧化過程，提高人體內酶的活性，從而起到抗突變、抗癌症的功效；防治高脂血症引起的疾病增強微血管強韌性、降血脂，預防肝臟及冠狀動脈粥樣硬化；降血壓；降血糖；防止腦中風；抗血栓；提高人體的綜合免疫能力的功效，可用於通過調節免疫球蛋白的活性，間接實現提高人體綜合免疫能力；抗風溼因子；抗菌抗病毒的功效，抗變態反應和皮膚過敏反應；舒緩腸胃緊張、防炎止瀉和利尿作用；促進VC的吸收，防治壞血病；改進人體對鐵的吸收，有效防止貧血；抗脂質過氧化，預防衰老；對重金屬鹽和生物鹼中毒的抗解作用；防輻射損傷，減輕放療的不良反應；茶多酚具有優異的抗輻射功能，茶多酚可吸收放射性物質，阻止其在人體內擴散，被稱為天然的紫外線過濾器；茶多酚能夠阻擋紫外線和清除紫外線誘導的自由基，從而保護黑色素細胞的正常功能，抑制黑色素的形成；同時對脂質氧化產生抑制，減輕色素沉著，防齲固齒和清除口臭的作用；助消化作用等等。目前茶多酚多用於人體疾病，用於動物(獸藥)中的報導較少。人用藥與獸藥在使用上有較大的差別。獸藥是用來預防、治療和診斷動物疾病的藥物。獸藥的使用對象是動物，它包括所有的家禽、各種飛禽走獸等野生動物和魚類等；它是專門為防治動物的疾病而生產的，它適合於動物的生理機能、代謝特點和一些特有的動物病。獸藥的許多劑型，規定的用藥劑量，投藥的途徑與方法，都是根據動物本身的特點而制定的。樹如許多藥物都是大劑量規格，是專門為某些大動物生產的；某些藥物適合於混在水或飼料內，只適合動物使用。人用藥物是專門用於醫治人類疾病的藥。人與種屬不同的4各種動物，對藥物的反應差異有時很大。比如反芻動物對某些麻醉藥比較敏感；牛對汞劑耐受性很低；禽類對呋喃類藥物易發生中毒；抗生素對草1^動物易引起消化機能失常等等。
發明內容本發明的技術方案是提供了茶多酚的新用途，具體地，是在製備抗空腸彎曲桿菌的禽類藥物中的用途。本發明的另一技術方案是提供了該含有茶多酚的用於抗空腸彎曲桿菌的藥物組合物。本發明提供了茶多酚在製備抗空腸彎曲桿菌的禽類藥物中的用途。其中，所述的藥物是治療禽類細菌性痢疾的藥物。本發明還提供了一種抗空腸彎曲桿菌的藥物組合物，它是含有有效量的茶多酚為活性成分，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分製備而成的製劑。所述的茶多酚的有效劑量為0.01g7g/kg禽體重/天。進一步優選地，所述的茶多酚的有效劑量為0.251.0g/kg禽體重/天。更進一步優選地，所述的茶多酚的有效劑量為0.5g/kg禽體重/天。其中，所述的製劑為散劑、片劑、丸劑、顆粒劑或膠囊劑。本發明還提供了該藥物組合物在製備治療禽類細菌性痢疾的藥物中的用途。本發明藥物組合物是通過開發天然藥物來預防和治療彎曲桿菌病及治療禽類細菌性痢疾，解決了臨床耐藥性問題和食品安全問題。以下通過具體實施方式對本發明作進--步的詳細描述，但並不限制本發明，本領域技術人員可以根據本發明作出各種改變和變形，只要不脫離本發明的精神，均應屬於本發明所附權利要求的範圍。具體實施例方式實施例1本發明治療禽類細菌性痢疾的藥物取茶多酚40g，加入藥學上常用的輔料，製備成散劑。將該製劑溶於水，按每天茶多酚的用量為0.5g/kg體重口服，連續用藥5天。以下通過藥效學試驗證明本發明的有益效果。試驗例1本發明藥物的抑菌試驗一、材料器材平皿離心管(1.5ml、10ml)移液槍槍頭酒精燈打孔器三角瓶直尺酒精棉球普通營養瓊脂培養基空腸彎曲桿菌基礎培基受試藥物茶多酚待測細菌空腸彎曲桿菌二、方法1、空腸彎曲桿菌含菌培養基的製備取布氏肉湯增菌液每100ml空腸彎曲菌基礎培養基加入lml布氏肉湯增菌液，並加入5%綿羊血。分裝培養基，打孔備用。2、抑菌試驗將茶多酚配成100mg/ml的溶液，5種液體樣品(29、35、37、41、44)直接用原樣篩選，分別加樣(約6ul)，將平皿培養基置於37r:溫箱中培養24小時後，觀察結果。3、MIC測定首先對茶多酚對倍稀釋，做六個稀釋度使濃度分別為50g/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml、3.125mg/ml、1.5625mg/ml。分別加入製備好的培養基中。三、實驗結果_抑菌圈直徑(mm)藥品編號_空腸彎曲桿菌茶多酚30備註加樣孔直徑為6mm最小抑菌濃度(MIC)測定結果(mg/ml)藥品編號_空腸彎曲桿菌茶多酚3.125mg/ml上述試驗證明，茶多酚對於空腸彎曲桿菌有明顯的抑制作用。試驗例2本發明藥物對細菌性痢疾的治療效果的臨床試驗1目的評價茶多酚對細菌性痢疾的臨床用藥效果。2材料2.1茶多酚由實施例1的方法製備，為黃褐色乾燥粉末；試驗動物來自成都新津商品雞場，為80日齡商品蛋雞，表現為腹瀉，糞便稀薄成黃綠色，但採食和飲水未見異常，隨機選擇病雞400隻，並隨機分成高、中、低、不加藥物的對照組，每組100隻。2.2試劑及儀器亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)、SS瓊脂培養基、超淨工作檯、隔水式恆溫培養箱、乾燥箱、振蕩培養箱、高壓滅菌鍋等。3方法3.1雞群空腸彎曲桿菌帶菌率的檢測3丄1採集肛門拭子1份，棉拭子直接用生理鹽水洗滌，提取DNA，用PCR直接檢測空腸彎曲桿菌帶菌率，PCR的反應條件為94°C5min，94°Clmin，58°Clmin，72°Clmin，共35個循環，72°C10min結束反應。3.2給藥方法3.2.1將茶多酚溶於水，每天按每公斤體重口服A組0.25g/kg;B:0.5g/kg;C:lg/kg;D:對照組，連續用藥5天。3.2.2用藥後雞群帶菌率的測定分別於用藥第5天採集各組肛門拭子用於測定空腸彎曲桿菌帶菌率。4結果4.1雞群對藥物的反應A組用3天藥後，有31隻腹瀉症狀減輕，69隻腹瀉症狀很嚴重；用藥5天後，有46隻腹瀉症狀減輕，54隻仍然有嚴重的腹瀉症狀。B組雞群在用藥後第3天，有67隻病雞腹瀉症狀消失，精神狀態比用藥前有一定程度的好轉，用藥後第5天，僅ll只弱雞有輕度腹瀉，但病雞的精神狀態明顯好轉。C組用藥3天後，71隻腹瀉症狀減輕，29隻有嚴重腹瀉，但採食量降低，精神沉鬱，用藥5天後，有75隻未出現腹瀉症狀，但精神沉鬱，採食量仍然沒有恢復，有7隻出現死亡，19隻腹瀉症狀減輕。D組為不加藥的對照組，100隻仍然見腹瀉，糞便稀薄成黃綠色，但採食和飲水未見異常。雞群用藥後的有效率見表1tableseeoriginaldocumentpage7茶多酚在每天0.251.0g/kg體重口服，連續用藥5天，治療細菌性痢疾，藥效明顯，且對雞群空腸彎曲桿菌帶菌率有一定程度的消除作用。試驗例3茶多酚的毒理實驗通過小鼠骨髓細胞微核遺傳毒性試驗，高中低三個劑量組89.56、45.63、23.10mg/mL中，茶多酚中劑量組(1/4LD50)和高劑量組(1/2LD50)小鼠嗜多染紅細胞微核率較陰性對照組有顯著性差異，並且隨著劑量的增加，對小鼠的遺傳毒性也相應的增加，存在劑量一效應關係，但其微核率少於環磷醯胺的微核率，說明該中藥製劑有對小鼠骨髓嗜多染紅細胞一定的遺傳毒性，但小於環磷醯胺的遺傳毒性。茶多酚製劑對小鼠精子畸形影響的檢測試驗結果可知，茶多酚組精子畸變率高於陰性對照組精子畸變率，經Wilcoxon秩和檢驗法檢驗有統計學顯著性差異(其顯著水平cx=0.05)。但是因為在實驗組所選劑量範圍內並未出現隨染毒劑量的增加精子畸變率升高的劑量反應關係，所以依照小鼠精子畸形試驗的國家標準(GB15193[1].07-2003)不能判定茶多酚為致精子畸變陽性物。試驗組和對照組畸變精子各型構成較為一致，均以無定型和無鉤形為主。茶多酚小鼠半數致死量的測定報告，以茶多酚的劑量為1280mg/kg、2560mg/kg、5000mg/kg、10000mg/kg、15000mg/kg做為預實驗劑量。結果1280mg/kg、2560mg/kg劑量組的小鼠全部成活，5000mg/kg、10000mg/kg、15000mg/kg劑量組的小鼠全部死亡。小白鼠的死亡高峰出現在灌胃後的34h。該茶多酚的半數致死量為3577.7mg/kg，95%可信限為3105.0mg/kg4122.4mg/kg。根據藥物的毒性分級，茶多酚屬於安全藥品。根據上述三個試驗，茶多酚用於抑制彎曲桿菌病，治療禽類細菌性痢疾的有效劑量為0.01g7g/kg禽體重/天。在該劑量範圍內，具有明顯的藥效，且能解決臨床耐藥性問題和食品安全問題。權利要求1、茶多酚在製備抗空腸彎曲桿菌的禽類藥物中的用途。2、根據權利要求1所述的用途，其特徵在於所述的藥物是治療禽類細菌性痢疾的藥物。3、一種抗空腸彎曲桿菌的藥物組合物，其特徵在於它是含有有效量的茶多酚為活性成分，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分製備而成的製劑。4、根據權利要求3所述的抗空腸彎曲桿菌的藥物組合物，其特徵在於:所述的茶多酚的有效劑量為0.01g7g/kg禽體重/天。5、根據權利要求4所述的抗空腸彎曲桿菌的藥物組合物，其特徵在於:所述的茶多酚的有效劑量為0.251.0g/kg禽體重/天。6、根據權利要求5所述的抗空腸彎曲桿菌的藥物組合物，其特徵在於:所述的茶多酚的有效劑量為0.5g/kg禽體重/天。7、根據權利要求3-6任一一項所述的抗空腸彎曲桿菌的藥物組合物，其特徵在於所述的製劑為散劑、片劑、丸劑、顆粒劑或膠囊劑。8、權利要求3-7任一一項所述的藥物組合物在製備治療禽類細菌性痢疾的藥物中的用途。全文摘要本發明提供了茶多酚的新用途，用於治療禽類細菌性痢疾。本發明藥物組合物是通過開發天然藥物來預防和治療禽類細菌性痢疾，對彎曲桿菌病有抑制作用，解決了臨床耐藥性問題和食品安全問題。文檔編號A61P1/00GK101439035SQ200810181108公開日2009年5月27日申請日期2008年11月21日優先權日2007年11月23日發明者劉海燕,琦康,敏李,丹肖,邊燕紅申請人:通威股份有限公司