癌變細胞集落的培養體系、檢測分析系統以及檢測方法
2023-07-24 09:51:41
專利名稱：癌變細胞集落的培養體系、檢測分析系統以及檢測方法
技術領域：
本發明涉及癌變細胞集落的檢測分析系統、癌變細胞集落檢測方法以及使用於癌變細胞集落檢測方法中的癌變細胞集落的培養體系。更加詳細地說，本發明涉及含有軟瓊脂且通過軟瓊脂多層法加以實施的培養體系，和將使用該培養體系的細胞培養以及經過培養的細胞半自動化而檢測出癌細胞集落的系統及其方法。
背景技術：
雖然醫療技術已經取得了顯著的進步，但在日本癌症依然是自從1981年以來主要的死亡原因。因此，整個社會開始關注癌症的預防工作。所以，必須在首先了解癌症發病過程的基礎上才能更好地預防癌症。
通常致癌性物質滯留在體內時，可以通過生物體自身的防禦能力而代謝掉大部分致癌性物質，並從體內排出。滯留在體內的一部分致癌物質經歷三個階段後將會最終導致癌症。首先，這些致癌物質在短時間(例如幾天時間)內將會對細胞基因帶來障礙，從而導致產生變異細胞。該變異細胞經歷數年乃至數十年的潛伏期從而成為前期癌變細胞。最後，前期癌變細胞以較快的速度(例如一年時間)增殖，從而導致癌症。直至成為這樣的前期癌變細胞為止，我們自身都不會有任何感覺，而且現在的醫療技術也很難檢測出前期癌變細胞，所以一旦診斷為癌症，那麼剩下的時間就不多了。
另一方面，通過流行病學調查得知大部分的癌症發病原因是由於我們生活的環境、特別是與飲食相關的生活習慣所造成的，這種看法已經越來越受到重視；為了實現長壽健康的社會，已經對「飲食與癌症預防」的關聯性寄予了熱切的關注。
但是，如上所述從變異細胞成為癌細胞將要經歷較長的時間，因此為了預防癌症，必須持續性地阻礙這個較長的癌變過程。現今，難以驗證由於改善飲食所達成的癌症預防效果，只有依靠流行病學調查來獲知預防效果。因此，迫切希望能開發出檢驗食品材料預防癌症有效方法以及探明其作用機理。
作為開發檢驗食品材料預防癌症的方法以及探明其作用機理的方法之一，在Proceedings of the National Academy of Science of the UnitedStates of America.98卷、13號、7510～7515頁上記載了一種檢驗方法，其通過在瓊脂培養基中形成集落後再計算測定該集落數量，從而檢驗由於致癌劑所造成的正常細胞癌變以及癌細胞發展。
但是，現有技術中在瓊脂培養基濃度以及厚度方面存在問題，無法獲得穩定的細胞集落數量。而且，培養時間較長，需要20～30天。而且，在現有技術中，可以在顯微鏡下用肉眼觀察集落的檢測，雖然可以計算出集落數量，但是無法分析集落大小以及分布。而且，計算集落數量非常需要時間以及體力，同時，計數的結果會因為實驗者的不同而出現個體差異，所以存有精度方面的問題，這也成為了該檢驗方法所需解決的課題。而且，為了可以使用該檢驗方法實行計數，實驗者的熟練程度也時該檢驗方法所需解決的課題。
發明內容
因此，本發明的目的在於提供一種癌變細胞集落的檢測分析系統以及檢測分析方法，其可以迅速且正確地檢測出將會引起細胞癌變的環境中存在的細胞致癌劑和可以抑制細胞癌變的藥品或食品等。
本發明者鑑於上述課題而積極探討後，發現對癌變細胞的培養條件進行標準化，並將依照該標準培養的癌變細胞以數字數據形式存入計算機等演算機構中，然後對存入的數字數據進行特殊處理，由此可解決上述課題從而完成本發明。
第一發明是一種癌變細胞集落的培養體系，其特徵在於其基於瓊脂多層培養法調製而成，並且包含底層和上層；所述上層具有2.4mm厚度，並含有培養基、0.5％～0.6％濃度的軟瓊脂、以及選自由致癌誘變物質以及抗癌劑所組成組中的至少一種物質；所述上層具有1.6mm厚度，並含有培養基、0.3％～0.4％濃度的軟瓊脂和細胞。
在第一發明所述的癌變細胞集落的培養體系中，重要的是底層與上層分別具有規定的構成。即，將培養體系設為固定條件，由此可獲得具有重現性的檢測以及分析結果。
另外，第一發明中，優選培養體系上層中含有的細胞是新生小鼠皮膚細胞JB6株。
JB6細胞是從新生小鼠皮膚的第一代培養細胞所確立的細胞株。該細胞具有非腫瘤性，僅通過促癌劑(TPA、TNF-α、EGF)處理即可具有形成軟瓊脂集落的能力。而且，該細胞通過TPA一段時間的處理，可以獲得集落能，再加以促進將會處於前期癌變狀態，因此可以認為該細胞是促癌檢測系和分析其作用機理中優異的材料。並且，在本發明的檢測系中表現出癌抑制活性的多數化合物在各種動物實驗階段已證實了同樣的致癌抑制效果。因此，現在該檢測系作為可以迅速檢測出促進致癌抑制效果的方法而受到重視。
第二發明是一種癌變細胞集落的檢測分析系統，其特徵在於使用基於瓊脂多層培養法所調製的培養體系，該培養體系包含具有規定尺寸的底層和具有規定尺寸的上層；所述底層含有培養基、軟瓊脂、以及選自由致癌誘變物質以及抗癌劑所組成組中的至少一種物質；所述上層含有培養基、軟瓊脂和細胞；並且該檢測分析系統包含光學顯微鏡，其用於觀察通過該培養體系所培養的癌變集落；包含電子數據轉換機構，其用於將顯影在該光學顯微鏡中的集落影像轉換為電子數據；以及包含計算機系統，其用於處理通過該電子數據轉換機構所轉換的電子數據；該計算機系統中採用了一種圖像分析軟體，其用於灰色化該電子數據，進行校準，並通過減法和單一閾值進行二值化，進而分析選自由有無集落、集落數量和集落尺寸分布所組成組中的至少一種情況。
通過這樣的構成，可以迅速且正確地檢測出環境中存在的將會引起細胞癌變的細胞致癌劑，而且可以迅速且正確地檢測出能夠抑制細胞癌變的藥品或食品。
在第二發明中，該計算機系統根據從已知的致癌誘變物質所獲得的標準數據而獲取分析結果，優選該計算機系統對上述已知的致癌誘變物質的分析結果與選自由致癌誘變物質以及抗癌劑所組成組中的至少一種物質的分析結果進行比較。
將已知成分作為標準物質，可以較為容易地調查出未知成分的癌變動向。另外，本發明中所使用的專用語「癌變動向」，其是指物質具有癌抑制作用或者誘變作用中任何一種作用。
進而，在第二發明中，優選上述已知的致癌誘變物質選自由TPA、TNF-α和活性氧源所組成的組。
這些物質的致癌誘變動向是眾所周知的，如果以其作為標準物質並與這些物質相比較，則可以容易地掌握未知物質的癌誘變動向或者癌抑制動向。
第三發明是一種癌變細胞集落的檢測分析方法，其特徵在於使用本發明所述的檢測分析系統；並且含有如下階段(A)選擇具有致癌作用或者抗癌作用的物質並調製出上述培養體系的階段；(B)在上述培養體系中根據規定條件在規定時間內培養癌變細胞的階段；(C)通過顯微鏡以及電子數據轉換機構，將上述經過培養的癌變細胞以電子圖像數據形式傳送到計算機系統的階段；以及(D)將上述傳送來的電子圖像數據灰度化，進行校準，並根據減法和單一閾值進行二值化，進而分析選自由有無集落、集落數量和集落尺寸分布所組成組中的至少一種情況的階段。
通過這樣的構成，可以迅速且正確地檢測出環境中存在的將會引起細胞癌變的細胞致癌劑或者可以抑制細胞癌變的藥品或食品等。
在第三發明的階段(A)中，優選具有致癌作用或者抗癌作用的物質是食品或者源自食品的物質。
食品的抗癌作用以及致癌性是現在最受重視的問題。本發明可以檢測出這些食品或源自食品的物質的癌變動向。
而且，在第三發明的階段(B)中，優選培養體系的培養條件為大約37℃、5％二氧化碳氣體中培養15天～30天。
通過將培養條件標準化，從而可以在同一條件下高精度且高重現性地實施檢測。
進而，在第三發明的階段(D)中，優選使用在該計算機系統中所運行的圖像分析軟體來實施分析，並進行瓊脂凝膠的透明度均勻化，處理顯微鏡散射光線，然後分析選自由集落形狀、尺寸以及數量的計算測定和大小分布所組成組中的至少一種情況；並且，優選通過圖像差分處理辨別無用物與集落的形狀，將長徑/短徑的數值小於等於1.6的細胞集落辨別為癌變細胞集落。
通過使用該圖像分析軟體，可以高精度且高重現性地實施檢測。而且，通過使用圖像分析軟體，無需熟練技能即可實施檢測。
圖1是表示本實施例所述的癌變細胞集落檢測分析系統概略的模式圖。
圖2是表示使用本實施例所述的癌變細胞集落檢測分析系統對培養體系的底層中添加有薯汁濃縮液的情況進行測定所得結果的曲線圖。
圖3是表示使用本實施例所述的癌變細胞集落檢測分析系統對培養體系的底層中添加有藍莓花青素的情況進行測定所得結果的曲線圖。
圖4是表示使用本實施例所述的癌變細胞集落檢測分析系統對培養體系的底層中添加有來源於中藥大黃的大黃酸的情況進行測定所得結果的曲線圖。
圖5是表示使用本實施例所述的癌變細胞集落檢測分析系統對培養體系的底層中分別添加有花色素中含有的芍藥素、錦葵色素、天竺葵色素、花青素(cyanidin)和翠雀花素的情況進行測定所得結果的曲線圖。
具體實施例方式
以下，說明本發明的實施形態。
首先，圖1簡要表示出了本發明所述的癌變細胞集落檢測分析系統。由該圖1可知，本發明所述的癌變細胞集落檢測分析系統主要包含培養體系1和檢測系2；所述培養體系1基於規定的瓊脂多層培養法調製而成；所述檢測系2用於檢測分析通過上述培養體系所培養的癌變細胞。
(培養體系)本發明中所使用的培養體系1是基於瓊脂多層培養法調製而成的，並且包含底層11和上層12；所述底層11具有規定的尺寸，並含有培養基、軟瓊脂、以及選自由致癌誘變物質以及抗癌劑所組成組中的至少一種物質；所述上層12具有規定的尺寸，並含有培養基、軟瓊脂和細胞。
底層11中所使用的培養基可以從現有公知的培養基中適當選擇使用，例如可以使用EMEM(Eagle氏最小基礎培養基)加上5％牛胎兒血清。而且，關於底層11中所使用的軟瓊脂培養基，也可以使用現有公知的培養基，但考慮到重現性方面，特別優選使用同一廠家生產的培養基。在本發明中，形成底層11的軟瓊脂的濃度例如為0.5％～0.6％，優選規定為0.5％的固定量。而且，厚度也規定為例如2.4mm的固定厚度。在這樣所構成的底層11中，添加規定量的致癌衍生劑或者抗癌劑用於調整本發明培養體系1中的底層11。
另外，對於上層12以及底層11的瓊脂凝膠濃度和厚度來說，為便於顯微鏡拍攝，需要瓊脂凝膠具有一定透明度，因此要求研究瓊脂凝膠濃度和厚度，選擇不會對細胞培養造成影響並且也可以便於顯微鏡拍攝的瓊脂凝膠濃度和厚度。
至於此時所使用的致癌誘變劑，可以添加已經充分確定致癌性的已知的致癌誘變劑，例如TPA、TNF-α、活性氧源以及未知致癌性的致癌性物質。如後所述，添加已知的致癌性誘變劑，使用在規定條件下所調製的本發明培養體系1實行培養，使用經過檢測分析的數據作為標準數據，等量添加要求檢測分析的未知成分後與該標準數據相比較，由此可以分析未知成分的致癌性。
而且，以同樣方式也可以在底層11中添加抗癌劑，例如各種醫藥用抗癌劑或食品等。進而，例如在底層11中一起添加致癌誘變劑與抗癌劑，也可以分析該抗癌劑的抗癌作用。
本發明培養體系1中的上層12具有規定尺寸並含有規定濃度的軟瓊脂以及用於使癌細胞生長的細胞。
上層12中所使用的軟瓊脂需要設定為例如濃度0.3％～0.4％以及厚度1.6mm等規定條件。
本發明中對所使用的細胞沒有特別的限制，優選JB6細胞。
JB6細胞是從新生小鼠皮膚的第一代培養細胞所確立的眾所周知的細胞株。(N.H.Colburn et al.，Nature，281，589(1979))。該細胞具有非腫瘤性，僅通過促癌劑(TPA、TNF-α、EGF)處理即可具有形成軟瓊脂集落的能力。而且，該細胞通過TPA一段時間的處理，可以獲得集落能，再加以促進將會處於前期癌變狀態，因此可以認為該細胞是檢測致癌促進或者分析致癌促進作用機理的優異材料(參照Z.Dong etal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91，609(1994)；Z.Dong et al.，MolCarcinog.，19，204(1997)；J.J.Li et al.，Cancer Res.，57，3569(1997)；C.Huang et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95，156(1998)；以及J.Y.Chung et al.，Cancer Res.，59，4610(1999))。而且，在如後所述的與本發明相同的檢測系中，表現出癌抑制活性的多數化合物在各種動物實驗階段已證實出同樣的致癌抑制效果(參照M.R.Young etal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，96，9827(1999)；以及Y.Zhao etal.，Cancer Res.，61，6082(2001))。因此，現在使用該JB6細胞的檢測方法作為可以迅速地檢測出致癌促進抑制效果的方法而受到重視。通過在本發明中使用該細胞，無需太多的時間和體力即可將由於實驗者不同而造成的測定誤差減少到最小。
在本發明中，將如此構成的軟瓊脂置於培養皿上，在規定溫度例如42℃溶解，從而形成培養體系1。
經過如此調製的培養體系1在規定條件下加以培養。通過規定該培養體系1的培養條件，可以在短時間內穩定地實施癌細胞的組織培養，可以獲得具有重現性的檢測分析結果。
例如，在本發明中，培養條件是在大約37℃的溫度、5％二氧化碳氣體中培養15～30天，優選在恆溫箱中培養15天，從而可以實施具有重現性的檢測分析。
(檢測系)
本發明癌變細胞集落檢測分析系統中的檢測系2主要包含顯微鏡21、與該顯微鏡21相連接的電子數據轉換機構即數位相機22以及計算機系統23。
本發明中所使用的顯微鏡21是具有已知放大倍率的光學顯微鏡，只要可以與數位相機22等電子數據轉換機構相連接，就沒有特別限制。
數位相機22是電子數據轉換機構，將使用顯微鏡21放大的模擬圖像轉換為作為電子數據的數字圖像數據，例如JPEG、TIFF、PCX、GIF格式等數字圖像數據。通過數位相機22，數字圖像數據將會保存在內置於數位相機22中的記錄介質上，經由該記錄介質可以存入計算機系統23中，優選經由例如USB(通用串行總線)等接口直接傳送到計算機系統23中。
本發明檢測系2中所使用的計算機系統23主要包含存儲器，用於運行保持在存儲器中的程序的演算處理裝置(CPU，中央處理單元)、RAM(隨機存儲器)、用於存取數位相機22所拍攝的數字圖像數據的接口例如USB接口或記憶卡讀寫器等存取內置於數位相機22中的記錄介質的機構等。該計算機系統23的存儲器中保存有作業系統、圖像分析軟體等程序和數字圖像數據等。
在本發明中，從數位相機22中讀取的培養結果即數字圖像數據可以通過圖像分析軟體加以分析。該圖像分析軟體例如可以將數字圖像數據灰度化，進行校準，並根據減法和單一閾值進行二值化，進而分析有無集落、集落數量和/或集落尺寸分布。此時，優選根據顯微鏡拍攝的目的而使瓊脂凝膠的透明度均勻，並處理顯微鏡散射光線，更優選通過在該技術領域中眾所周知的方法實施圖像差分處理，由此辨別無用物和癌變細胞集落的形狀。此時，細胞癌變集落通常為圓形，因此如果癌變細胞集落判定條件中長徑/短徑的數值小於等於1.6，則可以在除去細長的無用物等後再實施分析。
另外，在顯微鏡拍攝時，必然是中心部的光量較多，在中心部周邊視野較暗。因此，為了校正光量分布的影響而實行圖像差分處理。至於圖像差分處理的方法，是先拍攝未加入細胞的瓊脂凝膠培養皿，再將該數字圖像數據作為對照圖像。如果從作為檢測分析對象的樣本圖像中除去該對照圖像，則可以獲得亮度均勻化的樣本圖像。
通過如此構成，可以有效地且高重現性地檢測以及分析在培養體系1中根據規定條件所培養的細胞。
其次，列舉出使用本發明癌變細胞集落檢測分析系統時與使用現有系統時實施檢測分析的差異。
現有系統與本發明系統的差異調製樣本、培養細胞↓誘發細胞癌變(37℃、5％CO2、14天時間)↓ ↓癌變細胞集落檢測分析系統 現有的計算測定法集落顯微鏡拍攝裝置 在顯微鏡下肉眼計數↓ ↓結果 結果(數量、形狀、大小、分布) (僅有集落數量)評估結果精度提高、時間縮短 計算測定者的個體差異分析項目增加 分析項目受限大量分析的容易 大量分析的困難改善研究環境 體力勞動[實施例]其次，使用本發明所述的癌變細胞集落檢測分析系統，在培養體系1的底層11中添加具有抗癌作用的源自食品的物質後加以培養，在下述實施例中表示檢測分析癌變細胞集落後的結果。
(實施例1)在實施例1中，在底層11的瓊脂中添加薯汁濃縮液和TPA並調製出培養體系1。在規定條件下培養該培養體系1，在圖2中表示使用本發明所述的癌變細胞集落檢測分析系統而檢測分析出的結果。圖2中所示的曲線圖中，縱軸表示癌變抑制率，橫軸表示薯汁濃度，並繪製出各濃度薯汁的癌變抑制率。
根據圖2中所示的曲線圖可以獲知如果薯汁濃度增加，則癌變抑制率得到提高。
(實施例2)在實施例2中，在底層11的瓊脂中添加藍莓中含有的藍莓花青素並調製出培養體系1。在規定條件下培養該培養體系1，在圖3中表示使用本發明所述的癌變細胞集落檢測分析系統而檢測分析出的結果。圖3中所示的曲線圖與圖2中所示的曲線圖一樣，其中縱軸表示癌變抑制率，橫軸表示藍莓花青素濃度，並繪製出各濃度藍莓花青素的癌變抑制率。
根據該曲線圖可以獲知如果藍莓花青素濃度增加，則癌變抑制率得到提高。
(實施例3)在實施例3中，在底層11的瓊脂中添加源自中藥中大黃的大黃酸並調製出培養體系1。在規定條件下培養該培養體系1，在圖4中表示使用本發明所述的癌變細胞集落檢測分析系統而檢測分析出的結果。圖4中所示的曲線圖與圖2中所示的曲線圖一樣，其中縱軸表示癌變抑制率，橫軸表示大黃酸濃度，並繪製出各濃度大黃酸的癌變抑制率。
根據該曲線圖可以獲知如果源自大黃的大黃酸濃度增加，則癌變抑制率得到提高。
(實施例4)在實施例4中，在底層11的瓊脂中分別添加花色素中含有的芍藥素、錦葵色素、天竺葵色素、花青素和翠雀花素並分別調製出培養體系1。在規定條件下分別培養培養體系1，在圖5中表示使用本發明所述的癌變細胞集落檢測分析系統而檢測分析出的結果。圖5中所示的曲線圖與圖2中所示的曲線圖一樣，其中縱軸表示癌變抑制率，橫軸表示源自花色素的各成分濃度，並繪製出各成分在各濃度的癌變抑制率。
根據該曲線圖可以獲知如果整體上各成分濃度增加，則癌變抑制率得到提高。可以獲知其中翠雀花素的細胞癌變抑制效果特別高。
以上，如實施例1至實施例4所述可知通過使用本發明的培養體系以及系統，可以定量性地測定癌細胞抑制率。
根據本發明，可以提供一種檢驗方法，其可以迅速且正確地檢測出環境中存在的將會引起細胞癌變的細胞致癌劑和可以抑制細胞癌變的藥品或食品，面向長壽健康的社會，能夠通過食品材料而有效預防癌症。
權利要求
1.一種癌變細胞集落的培養體系，其特徵在於其基於瓊脂多層培養法調製而成；並包含底層，其含有培養基、0.5％～0.6％濃度的軟瓊脂、以及選自由致癌誘變物質以及抗癌劑所組成組中的至少一種物質且具有2.4mm厚度；以及上層，其含有培養基、0.3％～0.4％濃度的軟瓊脂和細胞且具有1.6mm厚度。
2.根據權利要求1所述的癌變細胞集落的培養體系，其特徵在於所述上層中所含有的細胞是新生小鼠皮膚細胞JB6株。
3.一種癌變細胞集落的檢測分析系統，其特徵在於使用基於瓊脂多層培養法所調製的培養體系，該培養體系包含底層，其含有培養基、軟瓊脂、以及選自由致癌誘變物質以及抗癌劑所組成組中的至少一種物質且具有規定尺寸，以及上層，其含有培養基、軟瓊脂和細胞且具有規定尺寸；並且所述檢測分析系統包含光學顯微鏡，其用於觀察通過所述培養體系所培養的癌變集落；電子數據轉換機構，其用於將顯影在所述光學顯微鏡中的集落影像轉換為電子數據；以及計算機系統，其用於處理所述電子數據；所述計算機系統中採用了一種圖像分析軟體，其用於將所述電子數據灰度化，進行校準，並根據減法和單一閾值進行二值化，進而分析選自由有無集落、集落數量和集落尺寸分布所組成組中的至少一種情況。
4.根據權利要求3所述的癌變細胞集落的檢測分析系統，其特徵在於所述計算機系統用於比較已知的致癌誘變物質的分析結果與選自由致癌誘變物質以及抗癌劑所組成組中的至少一種物質的分析結果。
5.根據權利要求4所述的癌變細胞集落的檢測分析系統，其特徵在於所述已知的致癌誘變物質選自由TPA、TNF-α和活性氧源所組成的組。
6.一種癌變細胞集落的檢測分析方法，其特徵在於使用根據權利要求4至6中任一權利要求所述的檢測分析系統；並且包括(A)選擇具有致癌作用或者抗癌作用的物質並調製所述培養體系的階段；(B)在所述培養體系中根據規定條件在規定時間內培養癌變細胞的階段；(C)通過顯微鏡以及電子數據轉換機構，將所述經過培養的癌變細胞以電子圖像數據的形式傳送到計算機系統的階段；以及(D)將已經傳送的所述電子圖像數據灰度化，進行校準，並根據減法和單一閾值進行二值化，進而分析選自由有無集落、集落數量和集落尺寸所組成組中的至少一種情況的階段。
7.根據權利要求6所述的癌變細胞集落的檢測分析方法，其特徵在於在所述階段(A)中，所述具有致癌作用或者抗癌作用的物質是食品或者源自食品的物質。
8.根據權利要求6所述的癌變細胞集落的檢測分析方法，其特徵在於在所述階段(B)中，所述培養體系的培養條件是在37℃、5％二氧化碳氣體中培養15天～30天。
9.根據權利要求6所述的癌變細胞集落的檢測分析方法，其特徵在於在所述階段(D)中，通過在所述計算機系統中所運行的圖像分析軟體實施所述分析，並且在使瓊脂凝膠的透明度均勻、對顯微鏡散射光線進行處理後，分析選自由集落形狀、尺寸以及數量的計算測定和大小分布所組成組中的至少一種情況。
10.根據權利要求9所述的癌變細胞集落的檢測分析方法，其特徵在於在所述階段(D)中，所述分析通過圖像差分處理辨別無用物與癌變細胞集落的形狀，將長徑/短徑的數值小於等於1.6的細胞辨別為癌變細胞集落。
全文摘要
本發明提供一種癌變細胞集落的檢測分析系統以及癌變細胞集落的檢測分析方法，該系統和方法可以迅速且正確地檢測出環境中存在的將會引起細胞癌變的細胞致癌劑和可以抑制細胞癌變的藥品或食品，因此本發明的目的在於提供一種癌變細胞集落的檢測分析系統，其使用基於瓊脂多層培養法所調製的培養體系(1)且包含光學顯微鏡(21)、數位相機等電子數據轉換機構(22)以及計算機系統(23)，該計算機系統(23)用於處理通過電子數據轉換機構(22)所轉換的數據；上述培養體系(1)包含底層(11)以及上層(12)，底層(11)具有規定尺寸並含有培養基、軟瓊脂、致癌誘變物質和/或抗癌劑，上層(12)具有規定尺寸並含有培養基、軟瓊脂和細胞。在該計算機系統(23)中採用了一種圖像分析軟體，其用於將電子數據灰度化，進行校準，並根據減法和單一閾值進行二值化，進而分析有無集落、集落數量和集落尺寸分布等。
文檔編號G01N33/50GK1678751SQ03820519
公開日2005年10月5日 申請日期2003年8月27日 優先權日2002年8月28日
發明者侯德興, 藤井信 申請人:侯德興, 藤井信, 自然路有限公司