新型微管蛋白聚合抑制劑苯甲醯基苯基脲(bpu)硫類似物的設計和合成的製作方法

2023-06-02 17:12:21 2

專利名稱：：新型微管蛋白聚合抑制劑苯甲醯基苯基脲(bpu)硫類似物的設計和合成的製作方法
技術領域：
：苯甲苯基脲(BPU)硫類似WE治療各種鄉的癌症中的效力。
背景技術：
：本發明涉及效力增強和水溶性增加的新型苯甲苯基脲(BPU)和苯甲tt^S硫脲(BPTU)氧、硫、亞術a磺^^似物的設計和合成。更特別地，本發明針對BPU的硫、夢剄虧酸和硼^^似物的合成。在癌症的治療中，對許多癌織物缺魏擇性以及腫瘤對化療的內在或獲得性耐受性的出現成為主要障礙。作為細胞基本成分的微管，在各種細胞生理過程中起到重要的作用，包括有絲分裂和細胞分化。抗有絲分裂劑可分為兩大類(1)微管穩定劑，例如紫杉醇和多西紫杉醇(docetaxel)，它們可Sih微管蛋白的解聚作用。儘管這^t/質中的一些已作為抗增殖劑被用於人類惡粗中瘤的治療中，但它們2M了經由外排泵^ii介導的藥物耐受。苯甲鵬苯基脲(BPU)化合物最初作為殺蟲劑被開發，而且它們的抗腫瘤活性是在隨機篩選的過程中被發現的。人們合成了BPU的各種類似物，並通過檢測它們的細胞毒活賊粒構效絲(Okada^H.，etal.，Chem.Pharm.Bull.，39:2308-2315(1991))。為了6fcttl理化學'M，還開發了有機和水溶性BPU衍生物。參見Okad^H.,改al.，Chem.Pharm.Bull"42:57-61(1994);和Okada^H.，改al.，Chem.Phann.Bull，47:430"433(1999)o在NCI，根據對不同癌細胞系的細胞毒性篩選了六種這樣的類似物。它們M抗體外的幾種癌細胞系和在體內的幾種腫瘤模型中均表現出強大的抗腫瘤活性。這些化合物還被報導能有效抑制微管蛋白的聚合作用(Holligshea^M.G,改al.,Proc.Am.Assoc,CancerRes"39:164(1979))。這醜質中的一種，化合物1(NSC-639829),(Holligshea^M.G,etal.，Proc.Am.Assoc.CancerRes"39:164(1979))目前正在患有頑固性轉織病人的I期臨床i微中進行iff古。參見Messersmith^W.A.,etal.，Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.，22:203(2003);禾卩Edelman，M.J.,etal.，Proc.Am.Soc.Clin.Oncol"22:137(2003)。先前己報導了一組BPU類似物的合成和抗月中瘤i刊介(Gurulingapp4H.，etal.，BiooiB.Med.Chem.Lett,,14:2213-2216(2004))。這裡還需要改善有機和水溶性BPU衍生物的物理化學性質。為達到這個目的，本發明通過用硫脲替換脲部分以及用硫、亞碸或碸基替換醚鍵，公開了一系列BPU的新合成衍生物。這類新物質的活性對細胞培養中的癌細胞具有更加明顯的毒性。
發明內容在一個實施方案中，本發明提供了如式XXX結構表示的化合物formulaseeoriginaldocumentpage9R和R2獨立地為H、NH2、N02、Cl、Br、I、CN、NHMe、NMe2、Me、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；Re禾口R7獨立地為H、NH2、N02、F、Cl、Br、I、CN、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；Y為S、SO或S。2;R3為0或S;R4和Rs獨立地為H、烷基、芳基或-SR化，其中R化為取代的烷基、環烷基、芳基、雜環，或者與任選包含一至三個3拉地選自N、O和S雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；Rg和R9獨立地為H、烷基或滷素；n為l-5之間的整數；m為0-4之間的整數；r為l-3之間的;s為0-2之間的整數；q為14之間的整數；和p為0-3之間的整數。在另一個實施方案中，本發明樹共了一種如式XXXI結構表示的化合物:(XXXI)其中R4和R2獨立地為H、NH2、N02、F、Cl、Br、I、CN、NHMe、NMe2、Me、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；R6禾口R7獨ii也為H、NH2、N02、F、Br、I、CN、NHMe、麗&、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；Y為S、SO、S。2或0;R4和R5獨^i也為H、烷基、芳基或-SRk)，其中R化為取代的烷基、環烷基、芳基、雜環，或者與任選包含一至三個^i:地選自N、O和S雜原子的飽和或未飽禾口4-至6-元環稠合的取代的苯基；Rs和R9獨立地為H、烷基或滷素；n為l-5之間的整數；m為0-4之間的皿；r為l-3之間的M;s為0-2之間的整數；q為l-4之間的整數；禾Bp為0-3之間的整數。如式xxxn結構表示的化合物(XXXII)其中，R^為NH2、NHMe、NMe2或N02，並且R2獨立地為H、NH2、N02、CN、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；R4和Rs獨立地為H、烷基、芳基或-SR化，其中R,o為取代的'離、環烷基、芳基雜環，或者與任選包含一至三個3tei雌自N、O和S雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；Rs和R9獨立地為H、烷基或卣素；n為1-5之間的整數；m為0-4之間的整數；r為l-3之間的;S為0-2之間的整數；並且其中，如果R!為位於鄰位的N02，n為l，m為0，s為0，r為l，&和Rs為H，那麼R8不為位於對位的碘、Br或H。附圖簡述X寸應的附圖被納入組成說明書的一部分，用以說明本發明的1M實施方案，並與描述一起解釋本發明的原理。在附圖8-16中，測定了試驗化合物對七種胰腺細胞系的細胞毒性作用。橫坐標表示暴露於胰腺細胞系的試驗化合物的不同稀釋。縱坐標(細胞數)表示與零時刻的細胞數目相比暴露於特定濃度的試驗化合物後存在的胰腺細胞數百。在附圖17-34中，測定了試驗化合物對前列腺癌細胞系LAPCM(圖10-15)、CWR22R(圖16-21)和LnCaP(圖22-27)的生長抑制作用。橫坐標表示測定時暴露的天數。縱坐標(細胞數)表示與零時刻的細胞數目相比，暴露於特定濃度的i微化合物後存在的胰腺細胞數目。圖1示意性地描述了本發明化合物的合成路線圖。圖2示意性地描述了環-A苯膨針布的胺基酸前藥的合成。圖3示意性地描述了BPU硫類似物的環-A苯胺修飾的氨甲醯基硫基(carbamylosulfenyl)衍生物的合成路線圖。圖4示意性地描述了本發明化合物4a和4b的合成路線圖。圖5示意性地描述了本發明化合物的合成路線圖。圖6示意性地描述了本發明環-A和脲{的前藥的合成路線圖。圖7是證明化合物6n和1所致MCF-7細胞凋亡的條形圖。圖8描述了將七種胰腺細胞系暴露於作為對照的不同濃度化合物1時得到的齊糧響應曲線。圖9描述了將七種胰腺細胞系暴露於不同濃度的本發明化合物6n附尋到的劑量響應曲線。圖10描述了將七種胰腺細胞系暴露於不同濃度的本發明化合物7d時得到的劑量響應曲線。圖11描述了將七種胰腺細胞系暴露於不同濃度的本發明化合物6d時得到的劑量響應曲線。圖12描述了將七種胰腺細胞系暴露於不同濃度的本發明化合物6h時得到的劑量響應曲線。圖13描述了將七種胰腺細胞系暴露於不同濃度的本發明化合物7b時得到的劑量響應曲線。圖14描述了將七種胰腺細胞系暴露於不同濃度的本發明化合物6g時得到的劑量響應曲線。圖15描述了將七種胰腺細胞系暴露於不同濃度的本發明化合物8g時得到的劑量響應曲線。圖16描述了將七種胰腺細胞系暴露於不同濃度的本發明化合物8h時得到的劑量響應曲線。圖17描述了相對於僅j頓輸啲對照，將不同濃度的本發明化合物1暴露於人類前列腺癌細胞系LAPCM時得到的劑量響應曲線。圖18描述了相對於僅j頓翻啲對照，將不同濃度的本發明化合物61暴露於人類前列腺癌細胞系LAPC4時得到的劑量響應曲線。圖19描述了相對於僅{頓溶齊啲對照，將不同濃度的本發明化合物6h暴露於人類前列腺癌細胞系LAPC4時得到的齊[J量響應曲線。圖20描述了相對於僅使用溶劑的對照，將不同濃度的本發明化合物6n暴露於人類前列腺癌細胞系LAPC4時得到的劑量響應曲線。圖21描述了相對於僅使用溶齊啲對照，將不同濃度的本發明化合物7d暴露於人類前列腺癌細胞系LAPC4時得到的劑量響應曲線。圖22描述了相對於僅使用溶劑的對照，將不同濃度的本發明化合物8h暴露於人類前列腺癌細胞系LAPC-4時得到的劑量響應曲線。圖23描述了相對於僅j頓歸啲對照，將不同濃度的本發明化合物1暴露於人類前列腺癌細胞系CWR22R時得至啲劑量響應曲線。圖24描述了相對於僅使用溶齊啲對照，將不同濃度的本發明化合物61暴露於人類前列腺癌細胞系CWR22R時得到的劑量響應曲線。圖25描述了相對於僅4頓溶齊啲對照，將不同濃度的本發明化合物6h暴露於人類前列腺癌細胞系CWR22R時得到的齊懂響應曲線。圖26描述了相對於僅使用溶齊啲對照，將不同濃度的本發明化合物6n暴露於人類前列腺癌細胞系CWR22R日射導到的劑量響應曲線。圖27描述了相對於僅使用溶齊啲對照，將不同濃度的本發明化合物7d暴露於人類前列腺癌細胞系CWR22R時得到的劑量響應曲線。圖28描述了相對於僅使用溶劑的對照，將不同濃度的本發明化合物8h暴露於人類前列腺癌細胞系CWR22R時得到的劑量響應曲線。圖29描述了相對於僅^ffl溶劑的對照，將不同濃度的本發明化合物1暴露於人類前列腺癌細胞系LnCaP時得到的劑量響應曲線。圖30描述了相對於僅使用溶劑的對照，將不同濃度的本發明的化合物61暴露於人類前列腺癌細胞系LnCaP時得到的劑量響應曲線。圖31描述了相對於僅j頓溶劑的對照，將不同濃度的本發明化合物6h暴露於人類前列腺癌細胞系LnCaP時得到的齊糧響應曲線。圖32描述了相對於僅使用溶齊啲對照，將不同濃度的本發明化合物6n暴露於人類前列腺癌細胞系LnCaP時得到的劑量響應曲線。圖33描述了相對於僅使用溶劑的對照，將不同濃度的本發明化合物7d暴露於人類前列腺癌細胞系LnCaP時得到的劑量響應曲線。圖34描述了相對於僅使用溶劑的對照，將不同濃度的本發明化合物8h暴露於人類前列腺癌細胞系LnCaP時得到的劑量響應曲線。圖35A描述了化合物6n和7d的化學結構。圖35B描述了暴露於化合物6n和7d96小時後的集落生長(clonogenicgrowth)圖。兩種細胞系暴露於1至10nmol/L範圍內的6n後，集落形成能力(clonogeniccapability)明顯受損(HS766T和XPA3)以及三種細胞系(Pancl、XPA3和ASPC1)暴露於7d後集落能力明顯受損。對於兩種藥物，最耐受的細胞係為E3JD13，其在濃度^1MmoI/L下具有低水平的集落存活力。圖35C描述了顯示MAPTmRNA水平在寬範圍(65,000-倍)改變的條形圖和凝膠。在mRNA和蛋白質之間具有明顯的相關性，三種最少的mRNA-表達細胞系也表現出低蛋白表達。還檢測到MAPT蛋白的兩種同種型(45和65kDa)，它們具有不同的分布。具有最低mRNA表達的細胞系顯示出痕量的65-KDa同種型，而除L36PL表達兩者外其它的細胞系存在一定，號的對立性。在高蛋白-就細胞系中，沒有檢湖倒同種型毅和活性之間的關聯。圖35D描述了表示0.1Mmol/L時的集落形成(X軸)與各細胞系中MAPTmRNA水平(Y軸)關聯的示圖。圖35E描述了表示各細胞系中HI類P-微管蛋白和MAPT表達的對比圖。圖36描述了用研究藥物(化合物7d和6n)治療胰腺癌異體移植的體內生長測定。圖36A描述了顯示化合物7d和6n的生長抑制率和MAPT表達的條形圖。圖36B描述了比較化合物7d、6n和多西紫杉醇療效的條形圖。與對照相比，P<0.05(Student'si微)。圖37顯示了化合物6n(圖37A)和圖37B中7d的九個治療組，;f有數據點的綜合分析。黑點表示對照的腫瘤；灰點表示被治療的腫瘤。具體實施例方式在一個實施方案中，這裡使用的縮略語具有化學和生物領域的其常規含義。在另一個實施方案中，根據常規的化學反應方程式從左至右書寫來描述基團，它們等同地包含化學中從右向左書寫所述結構能得至啲相同基團，例如，-CH20-與-OCH2-相等。在另一個實施方案中，術語"烷基"，除非另有描述，其自身或作為其他取代基的一部分表示直(即無支鏈的)或支鏈，或環狀烴基團，或其組合，它們可以是完^t包和的、單或多不飽和的，並且可以包括具有指定的碳原子數(即C1-C10表示一至十個碳)的二禾哆價基團。在另一個實施方案中，飽和烴基團的實例包括但不限於，例如甲基、乙基、正丙基異丙基、正丁基叔丁基、異丁基、仲丁基、環己基、(環己基)甲基環丙基甲基的基團，例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基的同系物和異構體等等。在另一個實施方案中，不飽和的烷基是具有一個或多個雙鍵或三鍵的基團。在另一個實施方案中，不飽和烷基包括但不限於，乙烯基、2-丙烯基、巴豆基(crotyl)、2-異雌基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)、乙鵬、l-和3-丙炔基、3-丁》據，以及高級的同系物和異構體。在另一個實施方案中，術語"亞烷基"其自身或作為其他取代基的一部分，表示衍生自烷基，例如但不限於-CH2CH2CH2CH2-的二價基團。在另一個實施方案中，烷基(或亞烷基)具有從1至24個碳原子，包括那些具有10個或更少碳原子的基團。在另一個實施方案中，"低級烷基"或"低級亞烷基"是較短鏈的烷基或亞烷基，通常具有八個或更少的碳原子。在另一個實施方案中，術語"烷氧基"、"烷氨基"和"烷硫基"(或硫f^氧基)依照它們的常規含義4頓，分別指代夷陛與分子中其它部分通過氧原子、氨基或硫原子連接的烷基。在另一個實施方案中，術語"雜烷基"其自身或與其^1^語聯用，除非另有描述，表示穩定的直鏈或支鏈，或環狀烴基團，或由所述數目的碳原子和選自O、N、P、Si和S的雜原子組成的其組合，並且其中的氮原子和硫原子可任選地被氧化，氮雜原子可任選地被^l對七。在另一個實施方案中，雜原子O、N、P和S和Si可位於雜烷基任意的內部位置，或位於所述烷基連接到分子乘除部分的位置上。實例包括但不限於，-CH2-CH2-0-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CHrCHrN(CH3)-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CHrCH2、-S(0)-CH3、-CHrCHrS(0)2-CH3、-CH=CH-0-CH3、-Si(CH3)3、-CHrCH=N-OCH3、-CH=CH-N(CH3)-CH3、0-CH3、-0-CHrCH3和-CN。在另一個實施方案中，最多兩個雜原子可以是連續的，例如-CH2-NH-OCH3和-CH2-0-Si(CH3)3。同樣地，術語"雜亞烷基"其自身或作為其他取代基的一部分，表示衍生自雜烷基的二價基團，例如但不限於-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。在另一個實施方案中，對於雜亞烷基，雜原子還可以位於鏈的任一端或兩端(例如亞烷基氧基、亞烷基二氧基、亞烷基氨基、亞烷基二氨基等)。在另一個實施方案中，對於亞烷基和雜亞烷基連接基團，式中連接基團的書寫方向沒有隱含連接基團的朝向。在另一個實施方案中，式-C(0)2-R'-表示-C(0)2R'-和-R'C(O)r。在另一個實施方案中，這裡使用的雜烷基包括那些通過雜原子連接到分子剩餘部分上的基團，例如-C(O)R'、-C(O)NR'、-NR'R"、-OR'、-SR，/或-S02R'。在另一個實施方案中，在列舉"雜烷基"後列舉特定的雜烷基例如-NR'R"等，其應被理解為術語雜烷基和-NR'R"不是多餘的戱目互排斥。在另一個實施方案中，描述了特定的雜烷基以更為清楚。在另一個實施方案中，術語"雜烷基"在此不應被理解為排除了特定的雜烷基，例如-NR'R"等。在另一個實施方案中，術語"環烷基"和"雜環烷基"其自身或與其他術語聯用時，除非有其他描述，分別表示"烷基"和"雜烷基"的環狀形式。在另一個實施方案中，對於雜環烷基，雜原子可位於所述雜環連接到分子剩餘部分的位置上。在另一個實施方案中，環烷基包括但不限於環戊基、環己基、l-環己烯基、3-環己烯基、環庚基等等。在另一個實施方案中，雜環垸基包括但不限於l-(l,2,5,6-四氫吡啶基)、l-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-嗎啉基、3-嗎啉基、四氫呋喃-2-基、四氫呋P南-3-基、四氫噻吩-2-基、四氫噻吩-3-基、l-哌嗪基、2-哌嗪基等等。在另一個實施方案中，術語"滷(代)(halo)"或"滷素"其自身或作為其他取代基的一部分，除非另有描述，表示氟、氯、溴或碘原子。在另一個實施方案中，術語例如"卣烷基"的意思包括單卣烷基和多卣烷基。在另一個實施方案中，術語"滷(Cl-C4)烷基"的意思是包括但不限於，三氟甲基、2,2,三氟乙基、4-氯丁基3-溴丙基等等。在另一個實施方案中，術語"芳基"，除非另有描述，表示多不飽和芳香烴取代基，其為*或稠合在一起的^^，接的多環(優選1至3環)。在另一個實施方案中，術語"雜芳基"指代包含一至四個選自N、O和S的雜原子的芳基(或環)，其中氮和硫原子任選地被氧化，和氮原子任淑也被^l對七。在另一個實施方案中，雜芳基通過碳或雜原子連接到分子的剩餘部分。芳基和雜芳基非限制性的實例，包括苯基、l-萘基、2-萘基、4-聯苯基、l-吡縫、2-吡咯基、3-吡、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、妣嗪基、2-噁唑基、4-噁唑基、2_苯基_4-噁唑基、5-噁唑基、3-異噁唑基、4-異噁唑基、5-異噁唑基、2-噻唑基、4陽噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯並噻唑基、嘌呤基、2-苯並咪唑基、5-吲哚基、l-異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。在另一個實施方案中，上述指出的每種芳基和雜烷基環系統的取代基團可選自下述可接受的取代基的組中。在另一個實施方案中，術語"芳基"當與其他術語(例如芳氧基芳硫氧基、芳烷基)聯用時，包括上述定義的芳基和雜芳。在另一個實施方案中，術語"芳烷基"的意思包括那些其中芳基連接到烷基上的基團(例如節基、苯乙基吡啶基甲基等等)，包括那些其中碳原子(例如亞甲基)已被例如氧原子取代的烷基(例如雜甲基2-吡P定基氧基甲基3-(l-萘錄基)丙基等)。在另一個實施方案中，術語"氧代"在這裡表示以雙鍵鍵合到碳原子上的氧。在另一個實施方案中，上述的每個術語(例如"烷基"、"雜烷基"、"芳基"和"雜芳基")的意思包括所指出的基團的取代和未取代形式。每種基團的，取代基在下文麟。在另一個實施方案中，烷基和雜烷基(包括那些常稱為亞烷基、烯基、雜亞烷基、雜烯基、炔基、環烷基、雜環烷基、環烯基、和雜環烯基的基團)的取代基是選自但不限於以下各種基團中的一種或多種-OR'、=0、=NR，、=N-OR，、-NR，R"、-SR，、-齒素、-SiR，R"R，"、-OC(O)R，、-C(O)R'、-C02R，、-CONR，R"、-OC(O)NR，R"、-NR，，C(O)R，、畫NR，-C(O)NR"R，"、-NR，，C(0)2R，、-NR-C(NR'R"R")=NR""、-NR-C(NR，R")=NR"，、-S(O)R，、-S(0)2R，、-S(0)2NR，R"、-NRS02R，、-CN和-N02，其數目為零到(2m，+l)，其中m，是這類基團中碳原子的總數。在另一個實施方案中，R'、R"、R"鄰R""各自ttt獨立地表示氫、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的環烷基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基(例如1-3卣素取代的芳基)、取代或未取代的烷基、烷氧基或硫代烷氧基，或者芳烷基。在另一個實施方案中，本發明的化合物包括一個以上的R基團，例如，當存在一個以上這樣的基團時，每個R基團獨立ite自R，、R"、R"，和R""。在另一個實施方案中，當R，和R"連接到相同的氮原子時，它們與氮原子一起形成一個4-、5-、6-或7-元環。在另一個實施方案中，NR，R"是指包括但不限於1-吡咯烷基和4-嗎啉基。在另一個實施方案中，所述領域的技術人員可理解術語"烷基"的意思包括含有鍵合到非氫基團上的碳原子的基團，例如滷烷基(例如-CF3和-CH2CF3)和醯基(例如-C(0)CH3、-C(0)CF3、畫C(0)C恥CH3等等)0在另一個實施方案中，與所述烷基基團的取代基相似，各種芳基和雜芳基的取代基可選自例如滷素、-OR'、-NR'R"、-SR'、-滷素、-SiR，R"R，"、OC(0)R，、-C(O)R'、C02R，、-CONR，R"、OC(O)NR，R"、-NR"C(O)R'、NR，C(O)NR，，R，"、-NR"C(0)2R，、NR-C(NR，R"R"，)=NR""、NRC(NR，R")=NR"，、-S(O)R，、-S(0)2R，、-S(0)2NR'R，，、NRS02R，、-CN和-N02、-R，、-N3、CH(Ph)2、氟(Cl-C4)烷氧基和氟(C1-C4)烷基，其數目為零至芳環系統中開放價態的總和；並且其中R'、R"、R，"和R，"1繼^^i鵬自氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基取代或未取代的環烷基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的雜芳基。在另一個實施方案中，本發明的化合物包括一個以上的R基團，例如當存在一種以上的這種基團時，每個R基團獨立地選自R，、R"、R"鄰R，，"。在另一個實施方案中，位於芳基或雜芳環相鄰原子上的兩個取代基可任選地形成式T-C(O)-(CRR')q-U-的環，其中T和U獨立地為-NR-、-O-、-CRR，-或單鍵，並且q為0至3的整數。在另一個實施方案中，位於芳基或雜芳環相鄰原子上的兩個取代基可任選地被式A-(CH2)r-B-的基團取代，其中A和B獨立地為-CRR，-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、S(O)r、S(0)2NR，-或單鍵，並且r為l至4的整數。在另一個實施方案中，像這樣形成的新環的一個單鍵可任選地被雙鍵替換。在另一個實施方案中，位於芳基或雜芳環相鄰原子上的兩個取代基可任選地被式-(CRR，)s-X'-(C"R"，)d-的取代基替換，其中s和d3拉地為0至3的整數，並且X，為-O-、NR，-、-S-、-S(O)-、-8(0)2-或-8(0)2服，-。在另一個實施方案中，取代基R、R，、R"和R"，雌獨iJ:雌自氫、取代或未取代的烷基、取代或未取代的環烷基、取代或未取代的雜環烷基、取代或未取代的芳基、和取代或未取代的雜芳基。在另一個實施方案中，術語"雜原子"或"環雜原子"的意思包括氧(0)、氮(N)、硫(S)、磷(P)和矽(Si)。在另一個實施方案中，術語"藥學可接受的鹽"包括用相對無毒的酸或鹼與活性化合物製備的鹽，其取決於這裡所述化合物中的特定取代基。在另一個實施方案中，本發明的化合物包括相對酸性的官能團，通過將這類化合物的中性形式與純的(neat)或在適宜的情性溶劑中的足量的所需鹼接觸獲ffW卩成鹽。在另一個實施方案中，藥學可接受的鹼加成鹽包括鈉、鉀、鈣、銨、有機氨、或鎂鹽、或相似的鹽。在另一個實施方案中，本發明的化合物中包含相對鹼性的官能團，通過將這類化合物的中性形式與純的或在適宜的惰性溶劑中的足量所需酸接觸獲得酸加成鹽。藥學可接受的酸加成鹽的實例包括那些衍生自無機酸，例如鹽酸、氫溴酸、硝酸、碳酸、一氫碳酸、磷酸、一氫磷酸、二氫磷酸、硫酸、一氫硫酸、氫碘酸或亞磷酸等等的鹽，以及衍生自相對無毒的有機酸例如醋酸、丙酸、異丁酸、馬來酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富馬酸、乳酸、苦杏仁酸、鄰苯二甲酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、擰檬酸、酒石酸、甲烷磺酸等等。在另一個實施方案中，還包括胺基酸的鹽例如精氨酸鹽等和有機酸例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等的鹽(參見例如Bergeetal.，"PharmaceuticalSalts",JournalofPharmaceuticalScience,1977，66,1-19)。在另一個實施方案中，本發明的某些特定化合物同時包括鹼和酸官能團，使得化合物既能轉化為[]成鹽，又能轉化為酸加成鹽。化合物的中性形式通過將鹽與鹼或酸接觸，並且以常規方式分離母體化合物生成。在另一個實施方案中，化合物的母體形式在某些物理性質上與各種鹽形式不同，例如在極性溶劑中的溶解度。在另一個實施方案中，本發明提供前藥形式的化合物。在另一個實施方案中，這裡所述的化合物的前藥是那些在生理條件下易於進行化學變化來提供本發明化合物的化合物。在另一個實施方案中，前藥在先體外後體內環境中通過化學或生化方法轉化為本發明的化合物。在另一個實施方案中，當前藥與適宜的酶或化學試劑置於經皮貼劑lt庫時，緩慢轉化為本發明的化合物。在另一個實施方案中，本發明的某些化合物可以未溶劑化和溶劑化形式存在，包括水合形式。在另一個實施方案中，溶劑化形式等價於未溶劑化形式，並且被納入本發明的範圍。在另一個實施方案中，本發明的化合物可以多種晶體或無定形形式存在。在另一個實施方案中，所有物理形式對於本發明的應用而言都等價，並且被納A^發明的範圍。在另一個實施方案中，本發明的化合物具有不對稱的碳原子(光學中心)或雙鍵；外消旋體、非X寸映異構體、互變異構體、幾何異構體和單獨的異構體均被納入本發明的範圍。在另一個實施方案中，本發明的化合物不包括那些本領域已知的非常不穩定合成和/或分離的那些。在另一個實施方案中，本發明的化合物還可在組成這類化合物的一個或多個原子上包含非天然比例的原子同位素。在另一個實施方案中，化合物可被放射性同位素方婦中性f斜己，例如氚(3H)、贐125(1251)或碳-14(14C)。在另一個實施方案中，本發明化合物的所有同位素變體，不論是方婦寸性的還是非放射性的，均被納A^發明的範圍。在另一個實施方案中，在兩個基團"任選i雌接形成環"的情況下，所述兩個基團與它們所連接的單個原子或多個原子共價鍵合在一起形成取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的環烷基、或取代或未取代的雜環烷餅。在另一個實施方案中，術語"芳烷基"、"雜芳烷基"、"環烷基-烷基"和"雜環烷基-烷基"在這裡分別指代通過亞烷基連接到好剩餘部分的芳基、雜芳基環烷基和雜環烷基。在另一個實施方案中，"芳烷基"、"雜芳烷基"、"環烷基-烷基"或"雜環烷基-烷基"是被取代的，一個或多個取代基可分別共i維合到所述亞烷基和/或芳基、雜芳基環烷基和雜環烷基上。在另一個實施方案中，"C1-C20"芳烷基、雜芳烷基、環烷基-烷基或雜環烷基-烷基;^l過C1-C20亞烷基分別將芳基雜芳基C4-C8環烷基和4至8元雜環烷基連接到^T剩餘部分的基團。在另一個實施方案中，"C1-C8"芳烷基、雜芳烷基、環烷基-烷基或雜環烷基-烷基是通過Cl-C8亞烷割各芳基、雜芳基、C5-C7環烷基，禾口5至7元雜環烷基分別結合到分子乘除部分的基團。在另一個實施方案中，這裡j頓的"取代基"是J離自下列的基團(A)OH、NH2、SH、CN、-CF3、氧基、滷素、未取代的烷基、未取代的雜烷基、未取代的環烷基、未取代的雜環驢、未取代的芳基、未取代的雜芳基禾口(B)垸基雜烷基、環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基，其被選自下列的至少一種取代代(i)氧基、-OH、-NH2、SH、-CN、CF3、滷素、未取代的烷基、未取代的雜烷基、未取代的環烷基、未取代的雜環烷基、未取代的芳基、未取代的雜芳基，和(ii)烷基、雜烷基、環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基其被選自下列的至少一種取代代(a)氧基、-OH、-NH2、SH、-CN、CF3、卣素、未取代的烷基、未取代的^^烷基、未取代的環烷基、未取代的雜環烷基、未取代的芳基、未取代的雜芳基，和(b)'織、雜烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基其被選自氧基、-OH、NH2、-SH、-CN、CF3、滷素、未取代的烷基、未取代的雜烷基、未取代的環烷基、未取代的雜環烷基、未取代的芳基和未取代的雜芳基中至少一種取代代。在另一個實施方案中，這裡使用的"大小限定的取代基"或"大小限定的取代基團"是指選自上述所有作為"取代基"的取代基，其中每種取代或未取代的烷基是取代或未取代的C1-C20烷基，每種取代或未取代的雜烷基是取代或未取代的2至20元的雜烷基，每種取代或未取代的環烷基是取代或未取代的C4-C8環烷基，以及每種取代或未取代的雜環烷基是取代或未取代的4至8元的雜環烷基。在另一個實施方案中，這裡使用的"低級取代基"或"低級取代基團"的意思是指選自上述所有作為"取代基"的取代基，其中每種取代或未取代的烷基是取代或未取代的Cl-C8烷基，每種取代或未取代的雜烷基是取代或未取代的2至8元的雜烷基，每種取代或未取代的環'烷基是取代或未取代的C5-C7環烷基，以及每種取代或未取代的雜環烷基是取代或未取代的5至7元的雜環烷基。在另一個實施方案中，術語"治療"是指任何治療或改善損傷、病理或病症的成功標誌，包括任何客觀或主觀的參數，例如撤銷；緩解；症狀的緩解或使損傷、病理或病症對病人而言更能忍受；減緩退化或衰落的速率；緩解退化終點的虛弱性；改善病人的身體或心理的健康。在另一個實施方案中，治療或症狀的緩解是基於客觀或主觀的參數；包括身##查、神經精神性檢査，和/或精神評估的結果。在另一個實施方案中，本發明的方法通過減少意識或認知障礙的發病率成功地治療了病人的譫妄狀態。在另一個實施方案中，術語"高級烷基"是指那些具有至少六個碳原子的烷基。在另一個實施方案中，術語"低級烷基"是指那些一至五個碳原子的烷基。在另一個實施方案中，本發明提供了一種抗增殖的水溶性高生物利用度化合物，其具有通式①formulaseeoriginaldocumentpage22X在另一個實施方案中，A、B和Z獨立地為取代的烷基、環烷基、芳基、雜環，或與任選包含一至三個獨立iiM自N、O禾PS雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；'X，為氧或硫；'Y'為硫、亞碸或碸；X,為CO或氫；Rs為氫鵬基或芳基；X2為氫或SR6，其中R6為取代的烷基、環烷基、芳基雜環，或與任選包含一至三個獨^t也選自N、O和S雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基。在另一個實施方案中，本發明進一步用具有通式(n)-(XXI)的化合物定義Yj、廣卿MO(IV)其中R4和R3獨立地為H、F、Cl、Br、I、CN、N02、NH2、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；Rs為烷基或芳基；R4為取代的吡啶、嘧啶、噻唑、吡唑、苯並噻唑、n引哚、苯並呋喃或^i可雜環；'X'為氧或硫；'Y'為硫、亞碸或碸；禾口n為任意整數。formulaseeoriginaldocumentpage24(￥1)其中R4和R2獨立地為H、F、Cl、Br、I、CN、N02、NH2、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；Rs為取代的吡啶、嘧啶、噻唑、吡唑、苯並噻唑、吲哚、苯並呋喃或任何雜環；'X,為氧或硫；'Y'為硫、亞碸或碸；禾口n為任意徵。a'乂y、(VUD,其中A、B禾口D獨1ZJ:也為取代的烷基、環烷基、芳基雜環或與任選包含一至三個獨立ite自N、O禾卩S雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；'X'為氧或硫；禾口'Y'為硫、亞碸或碸。乂HHC^、乂x、Z、z、J細、y、Zl、z\0Ri-N—Rs(XVI)fI錢Q^-^M^！拷:8(XVIII)Z、z、n咖、*zh、b、\Z、didN、f，D:,x、(卿其中A、B和D獨立地為取代的烷基、環烷基、芳基、雜環或與任選包含一至三個獨立地選自N、O和S雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；R和R2獨立地為H、F、Cl、Br、I、CN、N02、NH2、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；R3為取代的吡啶、嘧啶、噻唑、吡唑、苯並噻唑、n引哚、苯並呋喃或任何雜環；R4和R5獨立地為取代的烷基或芳基；和'X'為氧或硫。在另一個實施方案中，本發明的化合物為化合物XXX:其中R!和R2獨^jt也為H、NH2、N02、Cl、Br、I、CN、NHMe、NMe2、MeCF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；R6和R7獨立地為H、NH2、N02、F、Cl、Br、I、CN、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；Y為S、SO或S02;R3為0或S;R4和R5獨立地為H或烷基芳基或-SRu)，其中Ru)為取代的烷基、環烷基、芳基、雜環，或者與任選包含一至三個^5:地選自N、O和S雜原子的飽和或未飽禾口4_至6-元環稠合的取代的苯基；Rs和R9獨立地為H、烷基或齒素；n為l-5之間的整數；m為0-4之間的，；r為l-3之間的M;s為0-2之間的整數；q為l"4之間的整數；禾口p為0-3之間的整數。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中R4是氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中Rs是氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中R4和R5是氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中R6是甲基。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中Rs是Br。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中^是NH2。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中R,是N02。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中Rs在X寸位。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中R,在鄰位。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中s為0。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中m為0。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXX，其中s和m為0。在另一個實施方案中，本發明的化合物用式6n表示在另一個實施方案中，本發明的化合物用式7d表示:在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI:其中R和R2獨立地為H、NH2、N02、F、Cl、Br、I、CN、NHMe、NMe2、MeCF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；R6和R7獨立地為H、NH2、N02、F、Br、I、CN、NHMe、雨&、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；Y為S、SO、S02或0;R4和Rs獨立地為H、烷基、芳基或-SRk)，其中Rn)為取代的烷基、環烷基、芳基、雜環或者與任選包含一至三個獨1^也選自N、O和S雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的^S;Rs和R9獨立地為H或烷基或滷素；n為l-5之間的整數；m為0-4之間的M^r為l-3之間的整數；s為0-2之間的整數；q為l"4之間的整數；禾口p為0-3之間的整數。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中R4是氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中Rs是氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中R4和Rs是氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中R6是甲基。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中Rg是Br。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中Ri是NH2。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中R,是N02。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中Rs^t位。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中R,在鄰位。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中s為0。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中m為0。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中Rs^位，R,在鄰位，並且s和m為0。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物xxxn:(雄JI)其中R,為NH2、NHMe、NMe2或N02，並且R2獨立地為H、NH2、N02、CN、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；R4和Rs獨立地為H、烷基、芳基或-SRk)，其中Ru)為取代的烷基、環烷基、芳基、雜環或者與任選包含一至三W蟲忠雌自N、O禾口S雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；.Rs和R9獨立地為H、烷基或滷素；n為l-5之間的整數；m為0-4之間的S^;r為l-3之間的;s為0-2之間的整數；禾口其中，如果I^為在鄰位的N02，n為l，m為0，s為0，r為l，&和115為H，那麼Rs不為^"位的碘、溴或氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物xxxn，其中R4是氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXH，其中Rs是氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXn，其中R4和R5是氫。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXn，其中Rg是Br。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXn，其中Ri是NH2。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXE，其中R4是N02。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物xxxn，其中Rstot位。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物xxxn，其中R在鄰位。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中s為0。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中m為0。在另一個實施方案中，本發明的化合物是化合物XXXI，其中Rs在對位，並且Ri位於鄰位，以及s和m為0。在另一個實施方案中，本發明的化合物具有表1劍共的式。這些化合物根29tableseeoriginaldocumentpage30tableseeoriginaldocumentpage31tableseeoriginaldocumentpage32tableseeoriginaldocumentpage33在另一個實施方案中，本發明提供了藥物組合物。戶艦藥物組合物包括藥學可接受的賦形劑和具有式a-xxi和xxx-xxxn)的化合物在另一個實施方案中，本發明進一步用具有通式(xxi)-(xxin)的化合物定義，其中A、B、D、E和G獨:iJ:也為取代的烷基、環烷基、芳基、雜環或者與任選包含一至三個獨立i:te自N、O和S雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；'X'為氧或硫。在另一個實施方案中，本發明提供了具有通式(XXX)的抗增殖化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了具有通式(XXX)的水溶性化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了具有通式(XXX)的高生物利用度化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了具有通式(XXX)的高生物利用度的抗增殖、水溶性化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了具有通式(XXXI)的抗增殖化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了具有通式(XXXI)的7jC溶性化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了具有3K(XXXI)的高生物利用度化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了具有通式(XXXI)的高生物利用度的抗增殖、水溶性化合物。在另一個實施方案中，本發明掛共了具有通式(xxxn)的抗增殖化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了具有3K(xxxn)的水溶性化合物。在另一個實施方案中，本發明掛共了具有通式(xxxn)的高生物利用度化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了具有通式(xxxn)的高生物禾,度的抗增殖、tK溶性化合物。在另一個實施方案中，本發明提供了包含本發明化合物的藥物組合物。在另一個實施方案中，本發明提供的本發明藥物組合物通過所屬領域技術人員已知的方法用於醫學中。在另一個實施方案中，本發明提供的本發明藥物組合物通過本發明方法用於醫療中以治療疾病例如癌症。在另一個實施方案中，本發明提供的這裡描述的藥物組合物典型地被用於需要這類治療的對象中的各種人類疾病的化療，例如但不限於骨質疏鬆、牛皮癬、腎衰竭，和免疫抑制疾病。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物組合物包括1至3000毫克的式(i-xxi或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物組合物包括1至2500毫克的式(I-XXI或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物組合物包括200至3000毫克的式(I-XXI或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物組，包括200至2000毫克的式(I-XXI或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物組合物包括i至1800毫克的式(i-xxi或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明^f共的藥物組合物包括300至1800的毫克式(i-xxi或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物組合物包括500至1500毫克的式(I-XXI或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物組合物包括1000至3000毫克的式(I-XXI或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明Jlf共的藥物組合物包括1500至2500毫克的式(I-XXI或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明提供的本發明化合物以各種口服、胃腸外和局部劑型製備和給藥。在另一個實施方案中，本發明提供的口服製劑包括片劑、丸抓粉末、糖衣片、膠囊、液體、錠劑、凝膠、糖漿、漿劑、混懸劑等適於患者攝入的劑型。在另一個實施方案中，本發明提供的本發明化合物還可通過注射給藥，也就是說通過靜脈內、肌內、皮內、皮下、十二指腸內或腹膜內給藥。在另一個實施方案中，本發明提供的這裡所述的化合物通過吸入給藥，例如經鼻腔。在另一個實施方案中，本發明提供的本發明化合物經皮膚給藥。在另一個實施方案中，本發明提供的本發明化合物經眼內、陰道內和直腸內途徑給藥，包括栓劑、吹入劑、粉劑和氣霧劑製劑(例如類固醇吸入劑，參見Rohatagi,J.Clin.Pharmacol.35:1187-1193,1995;Tjwa,Ann.AllergyAsthmaImmunol.75:107-111,1995)。在另一個實施方案中，本發明提供的這裡描述的藥物組合物適用於經口給藥。在另一個實施方案中，本發明掛共的藥物組合物是片齊啲形式。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物組合物是膠囊的形式。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物組合物包括藥學可接受的載體或賦形劑，以及式(i-xxi或xxx-xxxn)的化合物或式(i-xxi或xxx-xxxn)的化合物的藥學可接受的鹽。為了由本發明的化合物製備藥物組合物，藥學可接受的載體既可以是固體也可以是液體。在另一個實施方案中，本發明提供了固體形式的製劑，包括粉劑、片劑、丸劑、膠囊、扁囊劑、栓抓以及可分,粒。在另一個實施方案中，本發明提供的固體載體是一種或多種物質，它們還可用作稀釋劑、芳香劑、黏合劑、防腐劑、片劑崩解劑或者包封材料。在另一個實施方案中，本發明提供的帝擠訴n給藥的詳細技術在科學和專利文獻中已有充分記載，參見例如最新版的Remington'sPharmaceuticalSciences,MaackPublishingCo,EastonPA("Remington's")。在另一個實施方案中，本發明以粉劑形式提供，載體是精細分散的固體，其與精細分散的活性成分混合。在另一個實施方案中，本發明以片劑形式提供，活性成分與具有必需的粘合性質的載體以適宜的比例混合，然後以預期的形狀和大小壓制。在另一個實施方案中，本發明樹共的粉劑和片齊11^^含有5%或10%至70%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明以粉劑和片劑J^共，含有2%至90%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明以粉劑和片齊腿供，t含有2%至50%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明以粉齊訴口片齊腿供，4皿含有5%至90%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明以粉劑和片劑提供，4纖含有5%至30%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明以粉劑和片劑提供，優選含有10%至50%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明以粉齊訴口片齊U掛共，雌含有30%至70%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明以粉劑和片齊腿供，j雄含有50%至90%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明以粉劑和片劑提供，優選含有40%至60%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明以粉劑和片劑^f共，4，含有2°/。至20%的活性化合物。在另一個實施方案中，本發明樹共的適宜載體為碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖、乳糖、果膠、糊精、澱粉、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點的蠟、可可脂等等。在另一個實施方案中，本發明提供的術語"製劑"是指包括活性化合物和作為載體用於提供膠囊的包封材料的製劑，其中活性成分與或不與載體一起被載體包圍，從而與之結合。同樣地，扁囊劑和錠劑也包括在其中。在另一個實施方案中，本發明提供的片劑、粉劑、膠囊、丸劑、扁囊劑和錠劑用作適用於口服給藥的固體劑型。在另一個實施方案中，本發明提供的適宜固體賦形劑為碳水化合物或蛋白質填充劑，包括但不限於糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；來自玉米、小麥、水稻、馬鈴薯或其他植物的澱粉；纖維素例如甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉；以及植物膠(gum)，包括阿拉伯膠和西黃蓍膠；以及蛋白，例如明膠和膠原蛋白。在另一個實施方案中，本發明提供的組合物進一步包含崩解劑或增溶劑，例如但不限於交聯的聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、海藻酸或其鹽，例如海藻酸鈉。在另一個實施方案中，本發明提供的糖衣片芯包含適宜的包衣，例如但不限於濃縮糖溶液，其還可以包含阿拉伯膠、滑石粉、聚乙烯吡咯垸酮、卡波普凝膠、聚乙二醇，禾口/或二氧化鈦、漆溶液，和適宜的有機溶劑或、蹄廿混合物。在另一個實施方案中，本發明提供將染料或色素添加到片劑或糖衣片包衣中，以用於產品識別或表徵活性化合物的量(即齊糧)。在另一個實施方案中，本發明的藥物製劑經口腔使用，例如採用明膠製成的推入配合型膠囊，和明膠製成的軟的密封膠囊，以及包衣例如甘油或山梨醇。在另一個實施方案中，本發明提供的推入配合型膠囊包含本發明的化合物，其與填充劑或粘合齊胸如乳糖或澱粉，潤滑劑例如滑石或硬脂酸鎂，和任選地穩定劑混合。在另一個實施方案中，本發明以軟膠囊的形式iif共，將本發明化合物溶解或懸浮於適宜的液體中，例如脂肪油、液4W蠟或液體聚乙二醇，其中含或不含穩定劑。在另一個實施方案中，為了製備栓劑，首先將低熔點的蠟例如脂肪酸甘油酯或可可脂熔化，然後如通過攪拌使活性成分均勻分散於其中。在另一個實施方案中，本發明提{著將熔化的均勻混合物傾倒入方便的模具中使其冷卻然後固化。在另一個實施方案中，本發明掛共的液體製劑包括溶液劑、混懸劑禾昭L劑，例如水或7K/丙二醇溶液。在另一個實施方案中，本發明提供的用於胃腸外注射的液體製劑通過在聚乙二醇水溶液中製備。在另一個實施方案中，本發明^f共的適於口服應用的水溶液通過將活性成分溶解在水中，並根據需要添加適宜的難劑、芳香劑、穩定齊脾口增稠劑製備。在另一個實施方案中，本發明提供的適合於口服應用的水混懸劑通過將精細分散的活性成分分散到包含粘性物質的水中，例如天然或合成植物膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、西黃蓍膠和阿拉伯膠，分散劑或潤溼劑例如天然存在的磷脂(例如卵磷脂)，環烴和脂肪酸的縮合產物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)，環氧乙烷和長鏈脂肪醇的縮合產物(例如十七碳乙烯氧基十六醇(heptadecaethyleneoxycetanol))，環氧乙垸與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物(例如聚氧乙烯山梨醇單油酸酯)，或環氧乙垸與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物(例如聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯)。在另一個實施方案中，本發明提供的水混懸劑包含一種或多種防腐齊,如對羥基苯甲酸乙酯或正丙酯、一種或多種著色劑、一種或多種芳香劑和一種或多種甜味劑，例如蔗糖、阿斯巴甜或糖精。調節製劑的同滲濃度。在另一個實施方案中，本發明提供的還包括固體形式的製劑，它們在使用前的短時間內被轉化為用於口服給藥的液體形式的製劑。在另一個實施方案中，本發明提供的這類液體形式包括溶液劑、混懸劑和乳劑。在另一個實施方案中，本發明提供的這些帝劍除了活性成分外，還包含著色劑、芳香劑、穩定劑、緩衝抓AI和天然甜味抓分散劑、增稠劑、增蹄轉等。在另一個實施方案中，本發明提供的油混懸劑通過將本發明化合物懸浮在植物油例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油，或者礦物油例如液體石蠟，或其混合物中製備。在另一個實施方案中，本發明提供的油混懸劑包含增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。在另一個實施方案中，本發明加入甜味劑，例如甘油、山梨醇或蔗糖，以提供可口的口服製劑。在另一個實施方案中，本發明提供的這些製劑通過加入抗氧齊胸如抗壞血酸來保存。作為可注射油載體的實例參見Minto，J.Pharmacol.Exp.Then,281:93-102(1997)。在另一個實施方案中，本發明提供的本發明藥物製劑還可以7jC包油乳劑的形式存在。在另一個實施方案中，本發明掛共的油相^M的植物油或礦物油，或其混合物。在另一個實施方案中，本發明^f共的適宜的乳化劑包J躍然存在的植物膠,例如阿拉伯膠和西黃蓍膠，天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂，衍生自脂肪酸和己糖醇酐得到的酯或偏酯，例如脫水山梨醇油酸酯，以及這些偏酯與環氧乙烷的縮合產物，例如聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯。在另一個實施方案中，本發明提供的乳齊腿包含甜味劑和芳香劑，與糖漿劑和酏劑中類似。這類製劑還可包含緩和劑、防腐劑或著色劑。在另一個實施方案中，本發明提供的化合物通過局部途徑經皮膚傳遞，製備成給藥棒(applicatorstick)、溶液、龍懸劑、乳劑、凝膠、膏劑、軟膏劑、糊抓膠凍劑、敷劑(paints)、粉劑和氣霧劑。在另一個實施方案中，本發明掛共的化合物以微球傳遞，在體內緩漫釋放。例如，經皮內注射含藥微球來給予微球，然後在皮下緩慢釋放(參見Rao,J.BiomaterSci.Polym.Ed.,7:623-645(1995);作為生物可降解的注射凝膠製劑(參見例如GaoPharm.Res.,12:857-863(1995);或作為口服給藥的微球(參見例如Eyles,J.Pharm.Pharmacol"49:669-674(1997)。經皮和皮內途徑均會g提供數周或數月的恆定傳遞。在另一個實施方案中，本發明提供的化合物以鹽的形式提供，並且由許多酸形成，包括但不限於鹽酸、硫酸、醋酸、乳酸、酒石酸、馬來酸、琥珀酸等。在另一個實施方案中，本發明提供的鹽傾向於比對應的游離鹼形式更易溶於水溶液或其他質子溶劑中。在另一個實施方案中，本發明提供的製劑中包含1mM-50mM的組氨酸、0.1%-2%的蔗糖、2%-7%的甘露醇的pH範圍為4.5至5.5的凍乾粉，，用前與緩衝液混合。在另一個實施方案中，具有本發明齊U型的本發明化合物對於胃腸外給藥十分有用，例如靜脈內(IV)給藥或者體腔或器官腔內給藥。在另一個實施方案中，本發明提供的用於給藥的製劑通常包括本發明化合物溶解於藥學可接受載體中的溶液。在另一個實施方案中，本發明提供的採用的可接受載體和溶劑包括水和林格氏液，一種氯化鈉等滲液。在另一個實施方案中，本發明提供的無菌不揮發性油可常規地作為溶劑或混懸介質。為此，任何剌激性小的不揮發性油均可使用，包括合成的一或二甘油酯。在另一個實施方案中，本發明提供的月旨肪酸例如油酸同樣可被用於可注射製劑中。在另一個實施方案中，本發明提供的溶液是無菌的，並且通常沒有不期望的物質。在另一個實施方案中，本發明提供的這些製劑用常規的己知滅菌技術進行滅菌。在另一個實施方案中，本發明提供的製劑包含模擬生理^f牛所需的藥學可接受的輔助物質，例如pH調節劑和緩衝劑、毒性調節劑，例如醋酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化韓、乳酸鈉等等。在另一個實施方案中，本發明樹共的這些製劑中的化合物濃度可廣泛變化，主要是根據流體體積、粘稠度、體重等選擇，以符合所選擇的特定給藥模式和病人的需求。在另一個實施方案中，本發明提供的用於IV給藥的製劑可以是無菌的注射製劑，例如無菌注射水或油混懸液。在另一個實施方案中，本發明提供的這種混懸液根據本領域已知技術使用那些適宜的分散劑或潤溼劑和助懸劑配製。在另一個實施方案中，本發明提供的無菌注射製劑還可以是在無毒胃腸外可接受的稀釋劑或溶齊鵬如1，3-丁二醇溶液中的無菌^lt溶液或龍懸液。在另一個實施方案中，本發明提供的含有本發明化合物的製劑通過使用與細胞膜融合或被吞噬的脂質體而進行傳遞，如艦使用連接到脂質體上的配體，或直接連接到與導致內吞作用的細胞的表面膜蛋白受體結合的寡核苷酸上的配體。在另一個實施方案中，本發明提供使用脂質體，特別是在脂質體表面攜有靶細胞特異性，或其他優選定向於特定器官的配體的情況下，在體內可將本發明的化合物集中傳遞到靶細胞。(參見例如Al-Muhammed，J.Microencapsul.,13:293-306,1996;Chonn，Curr.Opin.Biotechnol"6:698-708(1995);Os加，Am.J,Hosp.Pharm.，46:1576-1587(1989)。在另一個實施方案中，本發明提供的藥物製劑優選為單位劑型。在另一個實施方案中，本發明提供的這種形式的製劑被細分為含有適宜量活性成分的單位劑量。在另一個實施方案中，本發明以包裝制齊啲形式提供所述單位齊鵬，所述包裝包含分離的許多製劑，例如片劑、膠囊和在小瓶或安瓿中包裝的粉劑。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑型為膠囊、片劑、扁囊劑或錠劑本身，或包裝形式的適當數目的這些齊鵬。在另一個實施方案中，根據化學成分的特定應用和效價，本發明提供的單位劑量製劑中活性成分的量(本發明的化合物)在0.05mg至10000mg內變化或調節，更典型的是1.0mg至1000mg，最典型的是10mg至500mg。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑量製劑中活性成分的量(本發明的化合物)在0.05mg至1000mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明掛共的單位劑量製劑中活性成分的數量(本發明的化合物)在1mg至1000mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑量製劑中活性成分的數量(本發明的化合物)在5mg至800mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑量製劑中活性成分的數量(本發明的化合物)在50mg至1000mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑量製劑中活性成分的數量(本發明的化合物)在10mg至200mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑量製劑中活性成分的數量(本發明的化合物)在50mg至500mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑量製劑中活性成分的數量(本發明的化合物)在500mg至4000mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑量製劑中活性成分的數量(本發明的化合物)在1000mg至3000mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑量帝擠U中活性成分的數量(本發明的化合物)在1mg至100mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明提供的單位劑量製劑中活性成分的數量(本發明的化合物)在10mg至100mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明掛共的單位劑擠忡活性成分的數量(本發明的化合物)在100mg至800mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明劍共的單位劑量製劑中活性成分的數量(本發明的化合物)在500mg至1000mg內變化或調節。在另一個實施方案中，本發明提供的組合物如果需要，還可包含其他相容的治療物質。在另一個實施方案中，本發明提供了一種需要化療的障礙或病症的治療方法。在另一個實施方案中，本發明提供對需要這類治療的患者給予具有上述提供的結構式之一的有效量化合物。在另一個實施方案中，本發明提供的本發明化合物的用量在治療受感染病人的疾病時有效。在另一個實施方案中，本發明提供的一系列疾病狀態可通過化療治癒。在另一個實施方案中，本發明提供的疾病狀態例如包括但不限於癌症、腎衰竭、骨質疏鬆、牛皮癬、腎衰竭和免疫抑制紊亂。在另一個實施方案中，本發明提供的治療方法包括對需要這類治療的病人給予治療有效量的根據式(I-XXI或XXX-XXXE)的化合物或其藥學可接受鹽。在另一個實施方案中，本發明提供的治療方法包括對需要這類治療的病人給予治療有效量的式i-xxi或xxx-xxxn的化合物或其藥學可接受鹽。在另一個實施方案中，本發明提供的治療方法包括對需要這類治療的病人給予治療有效量的式為i-xxi或xxx-xxxn的化合物，以及所屬領域技術人員已知的適於治療特定疾病的化合物。在另一個實施方案中，本發明Jlf共了一種通過化療治療障礙鵬症的方法，所述方法包括對需要這類治療的病人給予有效量的本發明化合物，例如式(i-xxi或xxx-xxxn)的化合物。在另一個實施方案中，本發明提供的足以治療疾病的本發明化合物的用量被定義為"治肺效量"。在另一個實施方案中，本發明劍共的劑量方案和用量對這種應用有效，即"給藥方案"取決於多種因素，包括疾病或病症的階段、疾病或病症的嚴重程度、病人的總體健康瞎況、病人的生理狀況、年齡等等。在另一個實施方案中，本發明在為病人計算給藥方案時，還考慮了給藥模式。在另一個實施方案中，本發明在劑量方案中考慮本領域已知的藥動學參數，即吸收速率、生物利用度、代謝、清除等等(參見例如Hidalgo-Aragones,J.SteroidBiochem.Mol,Biol.,58:611-617(1996);Groning，Ph謹azie,51:337-341(1996);Fotherby，Contraception,54:59-69(1996);JohnsonJ.Pharm.Sci.,84:1144-1146(1995);Rohatagi，Ph謹azie,50:610-613(1995);Brophy，Eur.J.Clin.Pharmacol"24:103-108(1983);最新的Remington's,同前)。在另一個實施方案中，本發明提供的技術狀態允許臨床醫師確定每個病人個體、所治療的疾病或病症的給藥方案。在另一個實施方案中，本發明提供的對含有本發明化合物的製劑的單次給藥或多次給藥，是根據病人需要和耐受的劑量和頻率來給予。在另一個實施方案中，本發明衛共的帝躋u應當提供能有效治療戶;M疾病狀態的足量活性物質。在另一個實施方案中，本發明提供的口服給予本發明化合物的藥物製劑的日劑量為約0.5至約20mg每千克體重每天。在一個可選擇的實施方案中，所用劑量為約1mg至約4mg每千克體重每患者每天。在另一個實施方案中，本發明提供的口服給予本發明化合物的藥物製劑的日劑量為約0.5至約10mg每千克體重每天。在另一個實施方案中，本發明提供的口服給予本發明化合物的藥物製劑的日齊U量為約10至約200mg每千克體重每天。在另一個實施方案中，本發明提供的口月趙^本發明化合物的藥物製劑的日劑量為約0.5至約2mg每千克體重每天。在另一個實施方案中，本發明提供的口服給予本發明化合物的藥物製劑的日劑量為約1至約20mg每千克體重每天。在另一個實施方案中，本發明提供的口服給予本發明化合物的藥物製劑的日劑量為約5至約15mg每千克體重每天。在另一個實施方案中，本發明提供的口服給予本發明化合物的藥物製劑的日劑量為約O.Ol至約2mg每千克體重每天。在另一個實施方案中，本發明提供的口服給予本發明化合物的藥物製劑的日劑量為約0.5至約20mg每千克體重每天。在另一個實施方案中，特別是將藥物給予相對於口服給藥而言在解咅IJ學上為被隔斷的位置例如腦脊液(CSF)區時，本發明提供以較低的劑量用於血流、體腔或器官腔中。在局部給藥中使用明顯較高的劑量。在另一個實施方案中，本發明提供的製備可胃腸外給藥的含有本發明化合物製劑的實際方法^)(寸所屬領域技術人員而言已知或明顯的那些，更詳細的描述參見例如出版物Remington's,同前。還可參見Nieman，"ReceptorMediatedAntisteroidAction,"Agarwal,etal.，eds,,DeGruyter，NewYork(1987)。在另一個實施方案中，本發明提供的包括本發明化合物的藥物組合物在可接受載體中製備後，被放置於適宜的容器中，並註明治療的適應症。在另一個實施方案中，本發明提供的用於本發明化合物的給藥的這種標籤可包括，例如涉及用量、給藥頻率和方法的說明。在另一個實施方案中，本發明提供一種治療人類癌症或腎衰竭的藥盒，其包括本發明的化合物和教導本發明化合物適應症、劑量和給藥方案的指導材料。在另一個實施方案中，本發明提供體外抑制癌細胞增殖的方法。在另一個實施方案中，本發明提供先體外-後體內抑制癌細胞增殖的方法。在另一個實施方案中，本發明提供體內抑制癌細胞增殖的方法。在另一個實施方案中，本發明提供用本發明化合物治療患有癌症的主體的方法。在另一個實施方案中，本發明患有癌症的主體出5則中瘤和/或細胞轉移。在另一個實施方案中，用本發明化合物治療的癌症有腎上腺皮質癌、肛門癌、膀胱癌、腦腫瘤、腦幹神經膠質瘤、腦腫瘤、小腦星形細胞瘤、大腦星形細胞瘤、室管膜瘤、成神經管細胞瘤、幕上原始的神經外胚葉腫瘤(supratentorialprimitiveneuroectodermal)、松果體瘤、下丘腦神經膠質瘤、乳癌、類癌瘤、癌瘤、子宮頸癌、結腸癌、子宮內膜癌、食管癌、肝外膽管癌、尤文家族腫癌(pnet)、顱外生殖細胞瘤、目艮癌、眼內黑素瘤、膽囊癌、胃癌、生殖細胞瘤、睪M卜生殖細鵬中瘤(extmgonadal)、妊娠性滋養層細胞瘤、頭與頸癌、下咽癌、胰島細胞癌、喉癌、白血病、急性淋巴細胞白血病、口腔癌、肝癌、肺癌、小細胞、淋巴瘤、AIDS相關的、淋巴瘤、中樞神經系統(初級)、淋巴瘤、表皮T細胞、淋巴瘤、霍奇金斯病、非霍奇金斯病、惡性間皮細胞瘤、黑素瘤、merkd細胞癌、腫瘤性鱗狀細胞癌、多發性骨髓瘤、原生質細胞腫瘤、蕈樣肉芽腫病、骨髓增生異常症候群、骨髓增生障礙、鼻咽癌、成神經細胞瘤、口咽癌、骨肉瘤、卵巢上皮癌、卵巢生殖細胞瘤、卵巢低惡性潛在性月中瘤、胰腺癌、外分泌腺ttl夷腺癌(exocrine,pancreaticcancer)、胰島細胞癌、鼻旁竇和鼻腔癌、甲狀旁腺癌、陰莖癌、嗜鉻細胞瘤、腦下垂體癌、原生質細胞腫瘤、前列腺癌、橫im肉瘤、橫im肉瘤、腎細胞癌、唾液腺癌、惡性皮膚網狀細胞增多糹鈴徵、劍夫癌、表皮T細胞淋巴瘤、皮膚癌、卡波濟肉瘤、皮膚癌、黑素瘤、小腸癌、軟組織肉瘤、軟組織肉瘤、睪丸癌、胸腺瘤、惡性甲狀腺癌(malignant,thyroidcancer)、Mif癌、子宮癌、肉瘤、兒童罕見癌、陰道癌、外陰癌或腎母細胞瘤。實驗詳述部分材料結射式驗用式6n和式7d:表示的化合物進行微管蛋白測定。簡要的說，微管蛋白聚合作用在配絲電子》鵬控制器的BeckmanDU7400和DU7500型記錄分光光度計中於350nm下通過比濁法進行。反應混合物包含1.0mg/mL微管蛋白(10Amol/L)、0.8mol/L穀氨酸鈉、4%DMSO和不同濃度的藥物。樣品在3(TC下預先溫育15min，並且用冰冷卻。向每個反應混合物中加入GIP(最終濃度，0.4mmol/L)，並置於保持在(TC的試管中。確定基線，Mit升高到3(TC(~0.5°C/s，30s)，並且聚合反i^S行20min。IQo值M(頓含藥樣品的實驗點的圖形內掛法測定，並與含DMSO但不含藥物的對照反應混合物比較。針化合物得到至少三個獨立的ICso值。細胞系和體外培養割牛細胞系ASPC1、MiaPaca2、HS766T和L36PL由美國組織培養館(AmericanTissueCultureCollection)獲得，其源自胰腺癌。細胞系Pancl、Panc203和Pancl005是低傳f^l夷腺細胞系。細胞系XPA3和XPA4是低傳代的。細胞系E3LZ10和E3JD13是低傳代的胰腺細胞系。對於無性評價(clonogenicassessment),在六孔板上用富集的RPM(10。/o胎牛血清+l。/o青黴素/鏈黴素)以500細胞每孑L接種，並暴露於增加的藥物濃度96h。此後，移走藥物，並在人工計數前允許細胞生長14天。每個藥物濃度的每個實驗做兩份，並獨立iikia行至少三次。對於MAPT蛋白和mRNA表達分析，細胞系在六LIO:用富集的RPMI生長。當細胞到達60%至70%融合時，將它們用冷的PBS衝洗兩次；然後向板中加入溶解緩衝液；將細胞刮趟行蛋白提取。為提取mRNA，用RLT(Qiagen)裂解同樣的實驗組。體內生長抑制研究使用六周齡的雌性無胸腺裸小鼠(Harlan)。研究方案經約翰霍普金斯大學動物保護和使用協會批准，並且動物與美國實驗室動物傲戶協會的指南相一致。將每位來自在約翰霍普金斯醫院進行了外利手術的病人的外科非診斷樣本經皮下植入到一至兩隻小鼠上，每隻小鼠移植兩小片(Fl代)。腫瘤生長到1.5cm3，並隨後取出，分割為小的3X3X3mm的片，並移植到另外的五隻小鼠上，每隻小鼠植入兩個腫瘤(F2代)。在第二次生長傳代後，切除腫瘤並繁殖到^20隻小鼠的組中。這些組構成了F3，或者治療組。來自第三次鼠-鼠傳代的腫瘤待長至200mm3，此時將小鼠隨機分成三個治療組，每組5至6隻小鼠(10個可評價的腫瘤):對照(載體)、6n(50mg/kg，每周腹膜內注射二次)和7d(50mg/kg，每周腹膜內注射二次)。對選擇的組以30mg/kg的劑量每周腹膜內注射一次多西紫杉醇，注射2周。每日監測小鼠的毒性表現，並且每周稱重三次。腫瘤大小用卡尺每周測量兩次後用下式進行評價腫瘤體積-[長度X寬度2]/2。將治療起始時治療小鼠的相對腫瘤生長除以對照小鼠的相鄉中瘤生長計算相細中瘤生長抑制(T/C)。實時逆轉錄-PCR定量分析使用Rneasy微型試劑盒(Qiagen)提取細胞團和腫瘤中的所有RNA。使用iScriptcDNA合成試劑盒(Bio-Rad)，根據製造商的說明合成cDNA。泛素CmRNA的相Xt定量使用iCycleriQ實時PCR監測系統(Bio-Rad)及使用ABITaqman探針得到。以螢光的增加檢測特定PCR產物的累積，並將熒艦循環次數作圖以確定CT值。待分析mRNA的相對魏使用式評估2ACT，其中DC丁=CT(mRNA)-C"泛素C)。樣品採用盲法分析。蛋白印跡分析將等量的蛋白加到10M聚丙烯Stl安凝膠中。凝膠被轉移到在4'C下用對抗MAPT和肌動蛋白的抗體(SantaCruzBiotechnology)過夜溫育的硝基纖維素膜上。免疫反應蛋白使用加強的化學發光法(Amei^ham)檢測。DNA序列分析從細胞系團和冷凍的腫瘤中提取DNA，通過用特定引物選擇，用PCR擴增，以及組成基因和已知隱含突變(MAPT:外顯子9-13)或全基因(TUBB:外顯子1-4)的不同外顯子和內含子的測序來測試。下列的引物設計/用來對MAPT基因測序外顯子9，正5'-CTGCCTAACCCAGTGGTGA-3，和逆5'-CACAGTCCCACGACTCCAC-3，；外顯子10，正5'-CTCTGCCAAGTCCGAAAGTG-3'和逆5'-TCCTGAGAGCCCAAGAAGG-3，；外顯子ll，正5，-ATAAGGGCCTGGGCTTACAC-3，和逆5'-CCGCAAGTTTCACACTCAAC-3，；外顯子12，正5'-TTCAAGTCCTGCTGCAAACC-3，和逆3'-CTCCAGGTGATTGAGACAGG-3，；外顯子13，正5'-AGGCTGCAGTGAGGTGAGAT-3，和逆5，-CCGAGTGACAAAAGCAGGTT-3，(Invitrogen/LifeTechnologies)。下列的引物被設計/用來對TUBB基因測序:外顯子1，正5'-TACATGACCGGCATCGACTA-3'和逆5，-ACAAACTTGAGAGGGGCAAA-3，；外顯子2和3，正5，-AGCGAGACTCCGTCTCAAAA-3，和逆5，-CnTTGCTGTGTCCTTGCAC-3，；外顯子4a，正5，-CGAGGGAAITAnTGAAAAGrrG-3，和逆5'-GGCATCGAAGACCTGCTG-3，；外顯子4b，正5，-TTCTITATGCCTGGCnTGC-3，和逆3'-CCCAGAATGGCAGAAACCTA-3，；外顯子4c，正5'-TCCCTCAGAAnTGTGnTGC-3，禾卩逆5'-GCTCGAGTGAGGGAGGTAGA-3V;外顯子4d，正5'-TGTCAGCAGTATTATCTCCACTTT-3，和逆5'-TTAAGTGTCAAnTAAGGAGA-3，(Invitrogen/LifeTechnologies)。25-pLPCR反應由每種外界引物0.2pmol/L濃度與150ng基因組DNA、包含960jomol/L三磷酸去氧核苷酸的HotMasterMix2.5(Eppendorf)、54匪ol/LKC1、3.0腿ol/LMgCl2和0.6單位的Taq聚合酶糹鵬。熱循環儀的割牛為初始循環在95。C進行3min，然後94JC10個循環進行45s，57.6JC進行lmin，以及72。C進行lmin;89。C下20個循環進行1min，57.6。C進行1min，並且72。C進行1min。PCR產物的淨化由每份樣品以3|iLShrimp鹼性磷酸酶和03ALExonuclease1(GEHealthcare)在37。C下溫育1h，然後是一個8(TC溫育15min的步驟組成。變體的存在通過直接核苷酸測序測定。使用ABI3730XL序列分析儀(AppliedBiosystems)，根據標準雙脫氧終止子方皿行測序。序列使用序列分析儀(Genecodes)分析。僅當兩鏈均出現變化時，才確定為單核苷酸多態5，。統計分析為評價治療效果，使用分級線性回歸模型(hierarchicallinearregressionmodel)並採用隨機截距禾咽定的斜率。在探索性作圖所得結果的基礎上，對斜率固定效應的假設看上去很合理。該模型允許小鼠效應被隱藏在病人效應中，從而充分說明了分級結構。特別地，X寸下列的線性回歸模型進行擬合log(^)=aw時間扭+b2^寸間wXtr^+(3時間^+^，其中yj際病人，/指示小鼠，和f指示時間；J^是小鼠/的腫瘤體積百分比變化(與0天相比)，其為病人乂在時間^的異體移植；以及tt^是小鼠/得到的治療(1=治療，0=對照)，其為病人j'的異體移植。探討了一系歹i膽型以確定^i子的擬合模型，並發王Jli:述模型很合適。在具有以下兩個假設的模型中不包括截距和治療的主要效應(a)在0時間，基線的變化為0(其經驗上是正確的)，以及(b)在基線，治療的和未治療的曲線相交。所述模型使用採用MarkovchainMonteCarlo評估方法評估模型的Win-Bugs軟體進行模擬。先進行10,000次迭代的強化(burnin)，然後鏈式運行額外的20,000次迭代，其每10次迭代時保存用於推算。幾^l^用不同的初始值運行，以保證趨同性。沒有趨同問題出現。所述擬合模型被用來判斷治療效果，並建立擬合回歸線(重新調節Y軸使解析更清楚)。有用變量(例如治療和對照在28天時腫瘤體積所預期的不同)以及95%置信區間(credibleintervals)的點估計分別基於在後分布的平均值和在後分布的第2.5和97.5分位數(quantile)。分別採用Student'st-檢驗和f法比較生物研究得到的平均值和比例。當比較三個或更多的變量時，採用ANOVA。實施例l:合成BPU硫類似物的通用方法通過將相應的苯甲醯異氰酸酯或苯甲醯異硫氰酸酯與苯胺衍生物偶聯，合成得到產率很高的新類似物。苯胺中間體的硫類似物通過將取代的氨基苯硫酚與芳基卣化物反應合成。亞鵬碸衍生物通過硫化物的氧化製備(圖1)。所有化合物通過NMR和LC-MS研究表徵。除非另有描述，反應均在烘乾的圓底燒瓶中超高純度(UHP)氬氣氣氛下進行。所有反應液體試劑均採用注射器或插管轉移，並且通過橡皮隔片加入到燒瓶中。四氫呋喃在使用前立即由二苯甲酮羰游離基新蒸餾得到。除非另有描述，所有其他的溶齊訴卩試齊似接收時的狀態使用。n-BuLi經商徑獲得，並在4頓前用N-新戊醯基-0-甲苯胺滴定。二乙醚(乙醚)和四氫呋喃(THF)在使用前由二苯甲酮羰游離基蒸餾得到。二氯甲烷(CH2C12)在使用前由氫化l丐蒸館得到。其他的所有化合物從AldrichChemicalCo.購買，並且JOT日中沒有經,一步的純化。分析薄層色譜(TLC)用矽膠60F254薄層行(250lm厚；Merck)。柱色譜採用短程(shortpath)賺(粒，5<230目)、快速賺(粒徑400-230目)或Florisil(200目)進行。產量沒有進行優化。產物的純度根據它們的色譜均勻性判斷為〉95M。高效液相色譜(HPLC)採用裝配有兩個25mL/min製備泵頭、4頓填充有60A。矽膠(8lm孑L徑)的RaininDynamax10250mm(半製備)柱的RaininHPLX系統進行，其中柱中的既可以;^鍵合矽膠，也可以是C-18-鍵合的御交。熔點使用Mel-Temp金屬板儀器測定，並且沒有進行校準。核磁共振(NMR)譜在VarianXL-400光譜儀上，以400MHz得到'H譜和以100MHz得到13C譜，VarianXL-500光譜儀上，以500MHz得到&譜和以125MHz得到13C譜。報導了從四甲基甲矽烷(IMS)向低場的化學位移(ppm，S)。1HNMR譜信號的多因素分析J隨如下s(單峰)、d(二重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、dd(兩個二重峰)、dt(兩個三重峰)等。紅外光譜在PerkinElmer1600FT-IR光itili:作為具有NaCl池的液體^l莫以及薄層獲得。強度以s(強67-100%)、m(中34-66%)和w(弱0-33%)報導，並且具有下列的注釋，br(寬峰)、sh(肩峰)等。旋光度在JASCO，P-llOO型旋光計(JapanSpectroscopicCo.,Ltd.)上用鈉D線在實驗部分戶;M的特定化合物的溫度下記錄。分析薄層色譜(TLC)在Merck矽膠薄層板(MerckKieselgel，60,0.25-mm厚)上用F254顯色劑進行。化合物在紫外燈和/或M31用碘、香草醛、對甲氧基苯甲醛或KMn04顯色，並隨後通過加熱槍加熱來顯像。快速色譜(Still,W.C.,etal.，J.Org.Chem.,43:1404(1978))採用Still及其同事報導的在230400目的矽膠(E.M.Science)上用工業和/或HPLC級溶劑進行。中壓液相色譜(MPLC)採用FM泵和預土真充的矽膠柱(MerelyLaborColumns,LiChroprepSi60，40-63m)進行。高壓液相色譜(HPLC)在配M兩個25mL泵頭和設置在254或260nm的RaininDynamaxUV-C雙束可變波長檢測器的RaininHPLX系鄉灶進行，並使用Phenomenex,luna5pC18半製備(250X10mm)柱和ChiralcelOJ半製備(250X10mm)柱。低和高^fj質譜(LRMS和HRMS)使用電子電離或化學電離(EI或CI)進行，(1)對於EI在VG裝置70-S光譜儀中於70eV下運行，或者對於CI用氨(NH3)作為載氣運行，或(2)Finnigan-MATCH5、Fimigan-MAT731、或VG裝置70-VSE光i剖樹於EI在70eV運行，對於CI用甲烷(CH4)運行。化學新的BPU硫衍生物如圖1所示合成。苯胺衍生物4通過將取代的氨基苯酚或氨基苯硫酚與取代的2-氯嘧啶在K2C03和DMSO存在的割牛下反應製得。取代的苯甲醯異氰酸酯或苯甲醯異硫氰酸酯與苯胺衍生物4的8縮合反應得到一系列的BPU和苯甲醯基苯基硫脲(BPTU)類似物6a-n。2-N02基的還原用Fe和AcOH14進行，得到2-NH2衍生物7a-d。亞口碸衍生物8a-h通過與MCPBA(Heynderickx,A.，etal"一.Synthesis,1112-1116(2003))氧化由相應的硫化物製備得到，然後進行色譜純化。所有的化^1用魁正實指定結構的色譜分析表徵。環-A苯胺修飾的胺基酸前藥根據圖2製備。合成策略包括將Boc-保護的胺基酸與BPU上的環-A胺使用偶聯劑鹽酸l-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺(WSCI.HC1)偶聯。最後通過用TFA處理除去Boc保護。環-A苯胺修飾的BPU硫類似物的氨甲S5fcS硫基衍生物根據圖3製備。使用流程圖4帝恪脲和苯甲,修飾的前藥。化合物15通過將14用草醯氯處理製得，以及然後與17和19在二氧六環中偶聯分別得到通式結構20和21的前藥。有代表性的實例見圖5。環-A和脲斷布的前藥都能根據圖6製備。BPU化合物在水中具有樹氐的7jC溶性，並且在常見有機溶劑中的溶解度有限。因此，預期將這些化合物進行修飾來改善它們的生物利用度將能得到生物十頓更好的化合物。體外和體內研究中的先導前藥被用於藥動學分析，以研究穩定性、清除率和代謝曲線。化合物6a-n的合成。l-r4-(5-溴嘧啶-2-基硫敏sulfanyl))苯基l-3-(2-硝基苯甲醯基V脲(6n)將5-溴-2-氯嘧啶(5g，0.026mol)、4-氨基苯硫酚(3.24g，0.026mol)和K2C03(7.14g，0.052mol)在無水DMSO(50mL)中的溶液在120。C下於N2中攪拌2.5小時。7轉卩後，將反應混合物傾倒入水中，並用乙酸乙酯靴。有機層用水和飽和鹽水衝洗，然後千燥。將溶劑蒸發，殘留物用矽膠快速色譜(乙酸乙酯-己烷l:3)純化，得到4-(5-溴啼啶-2-基硫基)苯胺(4n)，產率為74%。1HNMR(400MHz，CDC13):S8.51(s，2H)、7.37(d，J)8.0Hz，2H)、6.72(d，J)8.0Hz，2H)、2.63(s，2H);EI-MSm/z281網+，283[M+2]+。將2-硝基苯甲醯異氰酸酯(3g，0.016mol)在無水1，4-二氧雜環己烷(15ml)的溶液在室溫攪拌下逐滴加入到4n(2.93g，0.01mol)在無水1,4-二氧雜環己垸(15ml)的溶液中。將反應混合物攪拌18小時，然後用水^f畢。過濾收磐冗澱的固體，並用水衝洗。將固體溶解於乙酸乙酯中，以及有機層用水衝洗2-3次，乾燥，並》衫宿，得到l-[4-(5-溴嘧啶-2-基硫基)苯基]-3-(2-硝基苯甲醯)-脲(6n)，產率為92%。1HNMR(400MHz，DMSO-d6):S11.32(br，s，1H)、10.35(br，s，1H)、8.78(s，2H)、8.22(m，1H)、7.91(m，1H)、7.77(m，2H)、7.67(m，2H)、7.57(m2H);EI隱MSm/z473岡+，475[M+2]+;C18H12BrN504SNa[M+Na]+的HRMS計算值:495.9685，實測值:495.9701。分析(C18H12BrN5O4S)C,H，N。化合物7a-d的合成將鐵粉(1.77g，31.63mmol)於80。C分批加入到6n(3g，6.32mmo1)和AcOH(90mL)的混合物中。讓反應混合物回流30min，然後冷卻到室溫，並用水稀釋。過濾收磐冗澱固體。固體溶於過量的乙酸乙酯並過濾。濾液千燥並f織，得至啲殘留物用石掛交快速色譜(乙酸乙酯-己烷2:3)純化，得到7d，產率為62%。1HNMR(400MHz，DMSO-d6):511.92(br，s，1H)、10.73(br，s，1H)、8.75(s，2H)、7.68(m，2H)、7.57(m，2H)、7.25(m，1H)、6.79(m，1H)、6.59(m2H);EI-MSm/z443網+，445[M+2]+;C18H14BrN502SNa[M+Na]+的HRMS計算值:465.9943，實測值:465.9938。分析(C18H14BrN502S)C，H，N。化合物8a-h的合成在(TC下，向攪拌的6n(l.Og，2.11mmo1)的DCM(50mL)溶液分批加入MCPBA(0.364g，2.11匪ol)。將所得混合物在室溫下攪拌6h，並然後用7K稀釋，以及加入Na2C03溶液使其略微鹼性。分離DCM層，且7jC層用DCM萃取。乾燥合併的有機層，蒸發後得到的殘留物用快速柱色譜(乙酸乙酯-甲醇5:1)純化，得到8g，產率為48%。lHNMR(400MHz，DMSO-d6):511.32(br，s，1H)、10.38(br，s，1H)、9.15(s，2H)、8.20(m，1H)、7.88(m，1H)、7.72-7.80(m，6H);EI陽MSm/z489網+，491[M+2]+;C18H12BrN505SNa[M+Na]+的HRMS計算值:511.9634，實測值:511.9632。分析(C18H12BrN505S)C，H，N。1-「4-(5-溴嘧啶-2-磺醯基)苯基1-3-(2-硝基苯甲醯基)-脲(8h)標題化合物根據上述禾驕使用3當量的MCPBA由6n合成，產率為56%。1HNMR(400MHz，DMSO-d6):S11.42(br，s，1H)、10,55(br，s，1H)、9.23(s，2H)、8.21(m，1H)、7.76-7.97(m，7H);EI國MSm/z505關+，507[M+2]+;C18H12BrN506SNa[M+Na]+的HRMS計算值527,9583，實測值527.9592。分析(C18H12BrN506S)C，H，N。這裡i細的術語和魏用作描述性的名詞，沒都蹄勝，並且沒有意圖用這些術語和來排除所示和所描述特徵或部分的等價物，其應被認為各種變形在本發明要求的範圍內都是可能的。此外，本發明任何實施方案的任意一個或多個特徵可與本發明其他任意實施方案的任意一個或多個其他特徵結合，而不超出本發明的範圍。例如，本發明化合物的特徵對於這裡描述的治療疾病的方法而言都有相同的適用性。因此，出於所有目的，這裡引用的所有出版物、專禾訴n專利申請作為參考也被全文弓l入。實施例2:BPU硫^j以物的細胞毒性ifj介使用MTT分析法測定了八種這些類似物6d、6h、6n、6g、7b、7d、8g和8h在七種胰腺細胞系ASPCl、Panel、Panc203、Panc430、Panel005、MiaPaca2和HS766T中的細胞毒性。將細胞胰蛋白酶化，以5乂103細胞/孔接種在96孔板中，並且在用指數增加的藥物濃度治療前，允許細胞在10y。FBS中生長24小時。在96小時的治療期後，將20nl的MTT溶液(5mg/ml在PBS中)添力口到每個L中，並將戶腿板置於37i:下溫育3小時。然後將每個L中的介質用100(il的DMSO替換。搖晃板，並^(頓多孑L板i賣數器(Bio-Rad，Model550，Bio-RadInc.，Hercules，CA)在570nm測定光密度。針藥物濃度的齡實驗操作三份，並且獨立的進行至少3次。IC5o值定義為基於存活曲線計算吸收值減少50%所需的濃度。通過將治療組標準化至對照組評價對藥物治療的反應。化合物的活性與化合物l比較。結果表明，兩種化合物6n和7d比化合物l效力強20倍。生長抑制結果化合物l以及本發明中化合物6n、7d、6d、6h、7b、6g、8g、8h對胰腺細胞系的生長抑制在下列圖8-16中分別進行描述。前列腺癌細胞系的生長抑制測定該MTT測定使用人類前列腺癌細胞系CWR22R、LAPC-4和LnCap使用Promega細胞效價96非方婦中性細胞增殖試劑盒進行。細胞MI夷蛋白酶化並在1000rpm下離心5麼H中，且吸取上清液。細胞用HBSS重新懸浮至濃度為106/ml。將細胞懸浮液在含血清的介質中稀釋並以2000細膨170.21111鋪板。將細胞懸浮液轉移至撫菌溶液槽。^f頓設置在200^d的多通道移液管對細胞鋪板，並過夜溫育進行附著。用於O天MTT測定的板製備如下使用多通道移液管將100^1介質自每孔中移除，並加入15nl的MTT試劑。板在37。C下溫育4小時。在每個孔中加入lOOpl的STOP溶液，並在室溫下溫育1小時。在板讀數器上於570和650nm下測定吸光度。小心移除板上剩餘的所有介質，並用含藥介質處理孔。MTT測定在第0、3、5禾卩7，行。在初步篩選中，四種BPU硫類似物61、6h、6n、7d和8h被篩選出，並且將它們的活性與化合物1進行比較。兩種化合物6n和7d的效力與化合物1相比強20倍。在下列圖17-34中顯示。化合物6n和7d的體外生長抑制分析及推定標記與效力之間的相關性化合物6n和7d在11種胰腺癌細胞系上表示出類似的作用。無性生長在0.01和0.5Mmol/L濃度之間被削弱(圖35B)，在11種細胞系的9種中在較高劑量下沒有集落形成。MAPTmRNA7夂平在較寬(65,000倍)範圍內變化(圖35C)。表達被標準化為最低的樣本，其被規定為值為l。在mRNA和蛋白之間存在關聯，三種最低的mRNA-駄細胞系表現出低蛋白表達。檢測了兩種MAPT蛋白的同種型(45和65kDa)。具有較低MAPTmRNA水平的三種細胞系表達出微量的65-kDa同種型。45-kDa同種型在E3LZ10、ASPC1、Panc203和Pancl005(MAPT-表達第二高的細胞系)中佔優勢，而65-kDa同種型在XPA4、E3JD13和MiaPaCa2(MAPT-表達最高的細胞系)中佔優勢。兩種MAPT同種型在L36PL中的^ii似乎相等。在兩種化合物(0.01和0.1Mmol/L)區別最大的濃度中，三種最敏感的細胞系與那些較低MAPT水平(Panel、HS766T和XPA3)的細胞系一致，並且表現出比那些具有較高MAPT7jC平的細胞系敏感10倍。在八種高蛋白表達細胞系中，同種型的敏和活性之間沒有檢領倒相關性。在圖35D中，描述了對0.1Mmol/L兩種化合物的無性生長和細胞系的MAPTmRNA水平。治療沒有誘發在MAPTmRNA水平的變化。生物學表2(BPU和BPTU類似物對胰腺癌細胞系的生長抑制(IC50)a)比較了用MTT測定得到的一系列新衍生物對七種胰腺癌細胞系的細胞毒性。參見Mosmann，T"J.Immunol.Methods65:55-63(1983)。表2tableseeoriginaldocumentpage53^sJ細MM表示；三組獨立實驗的平均值。在所有被測試的化合物中，化合物6n具有最高的效力，其對Panel、Panc430、Mapaca2和HS766細胞系的1<:50分別為0.085、0.09、0.086和0.088|jM。化合物7d的結果證明，NH2X寸苯甲醯環中N02基團的取代(6n)沒有減小對Panel、Panc203和Mapaca2細胞系的細胞毒性活性。化合物6n和7d對這些細胞系比1有效7至11倍。在6m存在時，細胞系ASPC1、Pancl、Miapaca2和HS766的生長被抑制，其ICso值分別為0.77、0.68、0.74和0.47pM。細胞系Miapaca2和HS766對7c敏感，IC50值分別為0.92和0.27^M。化合物8g對於抑制所有細胞系有效，1(:50值為2.5至8.0一。對於剩餘的化合物，其對所有細胞系的IC5plOpM。進一步評價了MTT分析中對胰腺癌細胞具有明顯抑制活性的化合物對前列腺癌細胞系的抑制，(Mosmara^T.,J.Immunol.Methods65:55-63(1983))，並將結果與化合物1進行比較(表3)。表3證明了BPU和BPTU類似物(IC50)a對前列腺癌細胞系的生長抑制。tableseeoriginaldocumentpage54"IC5o值用nM表示；三組獨立實驗的平均值。參見Mosmann，T.,J/mm朋o/.Me/Zzc^65:55-63(1983)。化合物6n在被測試化合物中的效力最高，其對所有前列腺細胞系的IC50為0.05nM。其比化合物1有效5至20倍。CWR22和LnCap細胞系對7d的生長抑制作用敏感度相同(IC5G)0.5pM)。7c還抑制前列腺癌細胞系LnCap和LAPC-4的細胞生長(IC5Q)0.75ioM)。與相同濃度的1的細胞凋亡率16.1%、19.5%禾卩27.7%相比，以化合物6n處理48小時產生的MCF-7細胞凋亡率分別為29.7。/。(10nM)、51.2%(30nM)和53.6%(100nM)。MCF-7細胞對6n和1的凋亡見圖7，且其中6n比1的殺MCF-7細胞作用更強(Zhu，T"etal.,CancerRes，65:317-324(2005))。M行了這一系列中四種化合物基於機理的微管蛋白組裝分析(Hamel,E.，CellBiochem.Biophys.，38:1-22(2003);禾口Verdier-Pinard，P"etal"Mol.Pharmacol,53:62-76(1998))。如表4所示，6n和6m對於抑制微管蛋白組裝有效，《:5值分別為2.1和4.7mM。將這對直與具有相同作用機理的1.7pM的藥物考布他汀禾口鬼臼毒素，以及2.7pM秋水仙鹼的IQo進行比較。當前數據表明(表4)，劍門的化合物均不連接到微管上的秋7K仙鹼結合位點。表4對微管蛋白聚合作用和秋水仙鹼結合的抑制tableseeoriginaldocumentpage55a對微管蛋白聚合作用的抑制。微管蛋白為10joM(Hamd，E.Ce〃歷oc/zem.~一"38:1-22(2003))。b對[3H]秋水仙鹼結合的抑制。微管蛋白為1HM;[3司秋水仙^g]抑制劑均為5joM(Verdier扁Pinard，P.，etal.，Mo/.屍/2am2腳/，53:62-76(1998))。c無數據。化合物6n和7d的體內劑量確定研究兩種化合物通過腹膜內注射途徑以每組四隻小鼠進行考察，治療持續時間為4周。化合物的兩種初始劑量水平(20mg/kg每周兩次，和30mg/kg每周兩次)與顯著毒性沒有關係。所以，考察了50mg/kg每周二次。6"狀只小鼠中的一隻在第4周重量減少15%，但沒有出現死亡。因此，劑量提高到50mg/kg每周三次。在6n和7d組中，分別有兩隻和一隻小鼠在第3周死亡，並且四分之三和五分之四的乘除動物重量減少>15%。因此，對於腹膜內注射途徑的28天效力研究，劍門選擇兩種化合物均為50mg/kg每周兩次。體內生長抑制分析使用來自九例胰腺癌的腫瘤來建立裸鼠異體移植，並用載體、6n或7d對動物進行治療(圖36A)。效力水平在藥物之間和每種藥物治療的情形之間均不同。圖37樹共了研究中得到的所有娜點的綜合總結。總體上說，對於任何一種物質，儘管6n表現出比7d更大的效力，但治療與對照組的斜率並沒有統計學差異。如圖36A所示，對單個組的評估表明，在以6n治療的腫瘤中，四例在治療28天後具有《50%的平均生長，且五分之一為60%。相反，7d僅在兩例中顯著^^b來生長阻、滯，即43%和59%。MAPT和效力之間的體內相關性為了知道至少能部分解釋所觀察5嫁的因素，我們測定了病人腫瘤的異體移植中MAPT的表達。將,標準化至最低的樣本，將其設定為值為1。在mRNA和蛋白之間存在關聯，三種mRNA表達最高的病例在蛋白印跡中表現出顯著的蛋白表達。MAPT鋭劇氐的五種病例，是那些與它們各自的對照組比較6n表現出統計學顯著的腫瘤生長M^的病例；或者，相反地，對於具有低MAPT水平的病例，6n旨腿著抑審鵬瘤生長。然而，戰病例之一，儘管十分顯著，但卻被認為不相關，因為T/C為60M。根據具有中度MAPT表達以下(5例中的4例)或以上(4例中的0例)的敏感病例比例的比較是統計學顯著的(雙側Fisher's檢驗，P=0.048)。7d在具有最低MAPT表達的兩個病例中誘導了生長阻滯，但這種趨勢比6n頓辱，因為敏感的病例更少。結果是，7d的預測值更低。6n和7d與多西紫杉醇在體內活性的比較還採用多西紫杉醇治療三例，以比較苯甲醯基苯基脲類物質與已建立的靶向微管的抗癌物質的效力，並確定這種效力與MAPT，之間的關聯(圖36B)。多西紫杉醇與6n和7d—樣，對於具剤氐MAPT表達的病例215特別有效。多西紫杉醇比6n在185上表現出更低的效力，且全部三種物質在那些檢驗中MAPT表達最高的病例194上均沒有活性。m類B-微管蛋白表達和MAPT和I類13-微管蛋白變異的分析還測定了細胞系和腫瘤中ffl類p-微管蛋白的皿水平。儘管在劇氐表達m類(3-微管蛋白的細胞系中是HS766T和Pancl，且最高的為MaPaCa2，但細胞系組作為整體的相關性差(圖35E),並且在m類p-微管蛋白和效力之間沒有相關性。此外，在異體移植中的MAPT和m類P-微管蛋白之間既沒有相關性，而且與效力也沒有關係(m類(3-微管蛋白的最高^ii^應於A6E和286，且有耐受的病例具有低或中度表達，例如194或253;數據沒有列出)。在細胞系的測試板(n=ll)和用於體內研究(n=9)的病人異體移植的病例中，MAPT的外顯子9、10、11、12和13，或I類卩微管蛋白的外顯子1、2、3和4中均沒有發現突變或多態王嫁。根據表2和3，值得一提的是在苯甲醯基2位上的N02和NH2取代，以及在嘧啶環4位上的Br取代在這些化合物的活性中顯然起了重要的作用。這些發現與先前報導的構效關係一致。參見Okada^H.，etal.，Chem.Pharai.Bull.,39:2308-2315(1991);禾卩Gurulingapp^H.,etal.，Bioo堪.Med.Chem.Lett.,14:2213-2216(2004)。此外，用硫脲(6g和6h)取代JKS對活性的影響很小。苯基和嘧啶環之間硫化橋(sulfidebridge)的引入產生比更強的活性。這種變化在化合物6n和7d(表2和3)中可觀察到，這兩種物質均表現出顯著的抗癌作用。例如，觀察發現化合物6n比6m對Panc430的效力增加了lll倍，對Panel和Mia-paca2的效力增加了8倍，對Panc203的效力增加了14倍，對CWR22R的效力增加了100倍，以MLnCap細胞系的效力增加了20倍。同樣，與7c相比，7d對Panc203的活性>117倍，對Mapaca2為9倍，對Panc430為>50倍，對Panel為39倍，以MLAPC-4細胞係為7倍。通過糹絲i化物修飾為亞碸和碸，還可看到8g和8h的活性大大減小(當與6n比較時)。儘管6m和6n對於抑制微管組裝有效，它們對的JC仙鹼結合位點的弱結合親禾叻表明存在著替換的結合位點機理。化合物6n和7d的最佳給藥方案，^/人病人腫瘤獲取的直接胰腺癌異體移植的新型平臺上確定和測試。這些研究表明，化合物6n和7d是進一步開發的最優候選物。此外，發現MAPT表達是胰腺腫瘤細胞和組織的一種標誌，因此可預測化合物6n的效力。由病人獲得的異體移植模型是可行的，並具有高的移植率。對於新藥開發更重要的是，由病人獲得的異體移植不論是從遺傳學角度還是從藥物的敏感度角度，它們隨時間和傳代都是穩定的。同時測試幾種藥物的能力使得可以進行直接比較，並且大量組織的可用性允許進行更細緻的生物分析以及開發連續藥動學評價的新技術。化合物6n和7d在體外均具剤氐的納摩爾範圍的抗增殖活性，並且表現出相同的作用機理，且牽住作為微管蛋白抑帝躋啲效力比後者有效兩倍。這可能解釋了6n在體內具有更高活性的原因。其與MAPT水平增加和對這些苯甲醯基苯基脲類似物的耐受性相聯繫的發現一致，因為MAP包括MAPT大大地增強微管組裝。另外發現在三個病例的直接比較中，6n至少與X寸胰腺癌具有一定活性的抗癌物質"~多西紫杉醇一樣有效(如果不是更好)。與在從相同病人得至啲異體移植中觀賦的其他物質相比，6n比埃洛替尼更好。J]^卜，還考察了MAPT的潛在價值，其為可與微管蛋白結合的蛋白，並且可以力膙它們的組裝和穩定性，並與X寸紫杉醇和多西紫杉醇的敏感性有聯繫。在從細胞系和從病人獲得的異體移植中，mRNA和蛋白水平之間存在著巧妙的關聯，其增加了開發出用於臨床的可行性診斷試驗的可能性。同樣重要的是，在MAPT表達和對所有測試物質的敏感性之間還存在著牢固的逆相關。尤其是，與MAPT駄和6n/7d活性之間相同的逆相關出現在多西紫杉醇(現有技術的臨床數據和臨床前實驗)中，儘管苯甲醯基苯基脲和紫杉烷的作用機理相反(分別為抑制微管組裝和加強組裝)。如上所指出的，MAPT敏與藥物敏感性之間的逆相規於苯甲醯基苯基脲類似物很容易理解，因為MAP通常會大大地加強微管的形成，從而減小幹擾微管形成的藥物作用。綜上所述，本發明的BPU硫類似物對胰腺和前列腺癌細胞系均有優良的生長抑制活性。結果表明化合物6n和7d比化合物1更有效。而且，所得結果特別地顯示化合物6n和7d是有關在前列腺癌細胞系和胰腺癌細胞系中的細胞毒性、生長抑制、IC5o和對微管聚合以及f(7jC仙鹼結合的抑制是最有效的。在A環(BPU中由左至右分別為環A-C)上2位的N02和NH2取代基(如分別在化合物6m和化合物7C中存在的)，以及在C環4位上的Br取代敏這些化合物的活性中明顯起到了重要作用。缺少其中一種或兩種基團的BPU呈現出較弱活性。這裡描述的實驗不包括在A環2位具有N02和NH2取代基和在C環4位上具有Br取代基的O橋化合物。這裡提供的數據還支持了化合物6d、6h、6n、7b、7d、8g和8h就賦予活性很重要的基團而言的構效關係("SAR")。特別地，在A環上2位的N02和NH2取代基(如分別在化合物6n、8g和8h以及化合物7b和d中存在的)，以及在C環4位上的Br取代基(如在化合物6n、7d、8g和8h中存在的)在這些BPU化合物的活性中明顯起到了重要作用，如在微管蛋白聚合的抑制和秋水仙鹼結合測定結果中所暗示的。權利要求1、式XXX結構表示的化合物其中R1和R2獨立地為H、NH2、NO2、Cl、Br、I、CN、NHMe、NMe2、Me、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；R6和R7獨立地為H、NH2、NO2、F、Cl、Br、I、CN、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；Y為S、SO或SO2；R3為O或S；R4和R5獨立地為H、烷基、芳基或-SR10，其中R10為取代的烷基、環烷基、芳基、雜環，或者與任選包含一至三個獨立地選自N、O和S的雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；R8和R9獨立地為H、烷基或滷素；n為1-5之間的整數；m為0-4之間的整數；r為1-3之間的整數；s為0-2之間的整數；q為1-4之間的整數；和p為0-3之間的整數。2、如權利要求1所述的化合物，其中R4和Rs為氫。3、如權利要求1戶脫的化合物，其中R6為甲基。4、如權利要求1所述的化合物，其中Rs為Br。5、如權利要求1所述的化合物，其中Ri為NH2。6、如權利要求1戶服的化合物，其中R!為N02。7、如權禾腰求1戶腿的化合物，其中Rs位於對位。8、如權利要求1戶腿的化合物，其中R"立於鄰位。9、如權利要求1所述的化合物，其中s和m為0。10、組合物，其包含如權利要求1所述的化合物、或其異構體、藥學可接受的鹽、iV-氧化物、tK合物或其任意組合，以及^的載體釋劑。11、一種治療患有胰腺癌的對象的方法，所述方^括X寸所述主體給予如權利要求1所述的化合物、或其藥物產品、水合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而治療患有胰腺癌的m。12、一禾中治療患有前列腺癌的X像的方法，所述方^^括對所述主體給予如權利要求1所述的化合物、或其藥物產品、水合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而治療患有前列腺癌的對象。13、一種抑制胰腺癌細胞複製的方法，所述方^^括對所述主體給予如權利要求1所述的化合物、或其藥物產品、7jC合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而抑制胰腺癌細胞的複製。14、一種抑制前列腺癌細胞複製的方法，所述方跑括X寸戶脫主體給予如權利要求1戶腿的化合物、或其藥物產品、水合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而抑制前列腺癌細胞的複製。15、式XXXI結構的化合物(XXXI)其中R4禾PR2獨ld:也為H、NH2、N02、F、Cl、Br、I、CN、NHMe、NMe2、Me、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；R6禾吸7敝地為H、NH2、N02、F、Br、I、CN、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；Y為S、SO、S02或0;R4和Rs獨立地為H、烷基、芳基或-SRk)，其中Ru)為取代的^、環烷基、芳基雜環，或者與任選包含一至三個獨立i雌自N、O和S的雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；Rs和R9獨立地為H或烷基或卣素；n為1-5之間的整數；m為0-4之間的^f(;r為l-3之間的M;s為0-2之間的整數；q為M之間的整數；禾口p為0-3之間的整數。16、如權利要求15所述的化合物，其中R4和Rs為氫。17、如權利要求15所述的化合物，其中R6為甲基。18、如權利要求15戶M的化合物，其中Rs為Br。19、如權利要求15臓的化合物，其中為NH2。20、如權利要求15所述的化合物，其中為N02。21、如權利要求15戶皿的化合物，其中Rs位於對位。22、如權利要求15戶艦的化合物，其中Ri位於鄰位。23、如權利要求15所述的化合物，其中s和m為0。24、組合物，其包含如權利要求15戶脫的化合物、或其異構體、藥學可接受的鹽、W-氧化物、水合物或其任意組合，以及合適的載體或稀釋劑。25、一種治療患有胰腺癌的)^的方法，戶/M方糹跑括對戶;M主體給予如權利要求15所述的化合物、或其藥物產品、水合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而治療患有胰腺癌的員。26、一種治療患有前列腺癌的X寸象的方法，所述方^括對所述主體給予如權利要求15所述的化合物、或其藥物產品、7jC合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而治療患有前列腺癌的對象。27、一種抑制胰腺癌細胞復帝啲方法，所述方》跑括對所述主體給予如權利要求15所述的化合物、或其藥物產品、水合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而抑制胰腺癌細胞的複製。28、一種抑制前列腺癌細胞複製的方法，所述方^S括對所述主體給予如權利要求15所述的化合物、或其藥物產品、水合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而抑制前列腺癌細胞的複製。29、式xxxn結構的化合物(則l)其中，R!為NH2、NHMe、NMe2或N02，並且R2獨立地為H、NH2、N02、CN、NHMe、NMe2、CF3、COOH、CONHOH、烷基或芳基；R4和Rs獨立地為H、烷基、芳基或-SRh)，其中Ru)為取代的烷基、環烷基、芳基雜環，或者與任選包含一至三個3拉i雌自N、O禾口S的雜原子的飽和或未飽和4-至6-元環稠合的取代的苯基；Rs和R9獨立地為H、烷基或卣素；n為l-5之間的整數；m為0-4之間的M;r為l-3之間的M;S為0-2之間的整數；並且其中如果R,為位於鄰位的N02,n為l，m為0，s為0，r為l，&和115為H，另，麼Rs不為位於對位的碘、Br或H。30、如豐又利要求29所述的化合物，其中R4和Rs為氫。31、如權利要求29所述的化合物，其中Rs為Br。32、如權利要求29戶腿的化合物，其中R,為NH2。33、如權利要求29所述的化合物，其中Rt為N02。34、如權利要求29戶，的化合物，其中Rs位於對位。35、如權利要求29所述的化合物，其中R位於鄰位。36、如權利要求29臓的化合物，其中s和m為0。37、組合物，其包含如權利要求29所述的化合物、或其異構體、藥學可接受的鹽、w-氧化物、水合物或其任意組合，以及，的載體或稀釋劑。38、一種治療患有胰腺癌的)^的方法，所述方&^括對戶;M主體給予如權利要求29所述的化合物、或其藥物產品、水合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而治療患有胰腺癌的x^m。39、一種治療患有前列腺癌的)(的方法，所述方^^括對所述主體給予如權利要求29所述的化合物、或其藥物產品、7jC合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而治療患有前列腺癌的X寸象。40、一種抑制胰腺癌細胞複製的方法，所述方^^括對所述主體給予如權利要求29所述的化合物、或其藥物產品、水合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而抑制胰腺癌細胞的複製。41、一種抑制前列腺癌細胞複製的方法，所述方飽括對所述主體給予如權利要求29所述的化合物、或其藥物產品、水合物、藥學可接受的鹽或其任意組合的步驟，從而抑制前列腺癌細胞的複製。全文摘要本發明涉及新型微管蛋白聚合抑制劑苯甲醯基苯基脲(BPU)硫類似物的設計和合成。本發明提供了一系列BPU類似物；它們的合成與生物活性評價。當與化合物1相比時，發現BPU硫類似物在各種癌細胞系中的效力增加了高達20倍。文檔編號C07D239/32GK101550109SQ200810189798公開日2009年10月7日申請日期2008年9月17日優先權日2007年9月17日發明者A·西梅諾,G·阿呂,M·伊達爾戈,S·R·卡恩申請人:冠軍生物技術公司