夏天無總生物鹼及其製備方法和應用的製作方法
2023-06-05 18:53:16
專利名稱：夏天無總生物鹼及其製備方法和應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及從行氣活血、通絡止痛中藥夏天無中製備的一種總生物鹼及其製備方法，此總生物鹼在藥品中的應用。
背景技術：
中藥夏天無為罌粟科植物伏生紫堇Corydalis decumbens(Thunb)pers的乾燥塊莖，為一常用的行氣活血，通絡止痛藥，可用於中風偏癱，跌扑損傷，風溼性關節炎，坐骨神經痛等諸多血液循環障礙疾病的治療。臨床上夏天無以水煎液或研末入藥。
目前國內外已有夏天無片和夏天無注射液生產上市，夏天無片是由原藥材夏天無打粉與其醇提浸膏混合、制粒、壓片而成；其注射液則是由原藥材夏天無經水提醇沉工藝，按常規方法經灌裝、封口等步驟製得。這些製劑，工藝相當粗糟，且內含物不很明確，內在質量很難控制。經華科醫藥智慧財產權諮詢中心檢索，尚無夏天無總生物鹼藥品或保健品製劑。
發明內容
本發明要解決的技術問題是，針對上述現有技術的不足，在對中藥夏天無的主要有效成份和藥理作用進行深入研究後，在夏天無中經特殊工藝分離出主要有效成份，即夏天無總生物鹼，並建立提取所述總生物鹼的製備方法，提出該總生物鹼在治療相關疾病藥品中的應用。
本發明的技術方案之一是，提出一種用罌粟科植物伏生紫堇的乾燥塊莖為原料提取的夏天無總生物鹼，該總生物鹼的重量百分比組成包括阿片鹼25-65％，四氫巴馬丁10-25％，比枯枯靈5-10％，巴馬丁10-25％，其他生物鹼及提取物5-20％，其總生物鹼含量用UV法或HPLC法檢測不少於80％。
本發明的技術方案之二是，提出一種製備所述夏天無總生物鹼的方法，其步驟是(1)以罌粟科植物伏生紫堇的乾燥塊莖為原料，加入該原生藥原料重量3-5倍的極性溶劑浸泡12-36小時後，再用5-20倍的極性溶劑進行滲漉提取，提取時間1-3天，收集滲漉液至無生物反應，合併滲漉液；所述極性溶劑為濃度是2-3％的磷酸、鹽酸、硫酸、醋酸水溶液之一，或者是重量百分比濃度為50-95％的乙醇或甲醇溶液；(2)將滲漉液轉換為其是所述原生藥原料重量的1-3倍的提取液，並且a、當所用極性溶劑為所述乙醇或甲醇溶液時，對所述滲漉回收溶劑至無醇味，所得浸膏用濃度為1-2％的磷酸、鹽酸、硫酸、醋酸水溶液之一的酸水溶液加熱溶解，過濾，再用濃度為5-20％的NaoH或KoH溶液調整濾液PH值為6-7並定容其為所述原生藥原料重量的1-3倍重量體積比(即，例如當原生藥原料重量為1Kg時，濃縮液體積為1-3升，後同)；b、當所用極性溶劑為所述酸的水溶液時，用濃度為5-20％NaoH或KoH溶液調整濾液PH值為6-7，濃縮並定容其為原生藥原料重量的1-3倍重量體積比；(3)將上述所得提取液進行大孔樹脂吸附層析，以1-3N NaoH溶液洗脫或以層析擔體吸附去除雜質；(4)用極性洗脫液洗脫夏天無總生物鹼，收集洗脫液，回收溶劑使洗脫液濃縮至原生藥原料重量的0.3-0.4倍；所述極性洗脫液為濃度是1-5％的硫酸、磷酸、鹽酸、醋酸溶液之一，或者是重量百分比為50-95％乙醇或甲醇溶液；(5)用濃度為5-20％NaoH或KoH調整溶液PH值至9-12，析出沉澱，濾取沉澱物，用飽和食鹽水洗滌沉澱物至中性，乾燥；(6)用乙醇、甲醇、丙酮、氯仿中的一種有機溶劑溶解乾燥後的中性沉澱物，過濾，回收溶劑至濾液為沉澱物重量的3-8倍重量體積比，放置析晶，濾取，結晶乾燥，即得夏天無總生物鹼。
本發明的技術方案之三是，提出第二種製備所述夏天無總生物鹼的方法，其步驟是(1)以罌粟植物狀伏生紫堇的乾燥莖塊為原料，加入該原生藥原料重量3-5倍的極性溶劑浸泡12-36小時後，再用5-20倍的極性溶劑進行滲漉提取，提取時間1-3天，收集滲漉液至無生物鹼反應，合併滲漉液；所述極性溶劑是指濃度為2-3％的磷酸、鹽酸、硫酸、醋酸水溶液之一，或者是重量百分比濃度為50-95％的乙醇或甲醇溶液；(2)製取提取液a、當所用極性溶劑為所述乙醇或甲醇時，對滲漉液回收溶劑至無醇味，所得浸膏用原生藥原料重量的0.3-0.4倍重量體積比酸水加熱溶解，過濾，得提取液；所述酸水是指濃度為1-2％的磷酸、硫酸、醋酸、鹽酸的水溶液之一；b、當所用極性溶劑為所述酸水溶液時，將所述滲漉液濃縮至原生藥原料重量的0.3-0.4倍重量體積比，得提取液；(3)用濃度為5-20％NaoH或KoH溶液調整提取液的PH值為10-12，再加入NaCl使成飽和食鹽水溶液，放置沉澱，濾取沉澱物，抽乾後又用沉澱物10-20倍重量的酸水將沉澱物溶解，過濾，濾液用濃度為5-20％NaoH或KoH溶液調整提取液的PH值為10-12，再加入Nacl使成飽和食鹽水溶液，放置沉澱，濾取沉澱物，用飽和食鹽水洗滌沉澱物至中性；所述酸水是指濃度為5-10％的磷酸、硫酸、醋酸、鹽酸的水溶液之一；(4)用乙醇、甲醇、丙酮、氯仿之一的有機溶劑溶解所述中性沉澱物，過濾，回收溶劑至濾液為沉澱物重量的3-8倍重量體積比，放置析晶，濾取，結晶乾燥，即得夏天無總生物鹼。
本發明的技術方案之四是，提出一種夏天無總生物鹼在製備血小板激活因子與自由基所致損傷疾病的藥物中的應用。
本發明的技術方案之五是，提出一種夏天無總生物鹼在治療腦血管疾病、高血壓偏癱、小兒麻痺後遺症、坐骨神經痛、風溼關節痛的藥物中的應用。
以下對本發明做出進一步說明。
經本發明研究得知，夏天無總生物鹼(Rhizoma corydalis decumbent totalalkaloids)是將夏天無的主要有效成分--生物鹼類，經特殊工藝提取分離為一複合生物鹼。該總生物鹼其內含物已比較明確，主要含有原阿片鹼(Protopine)、紫堇鹼(Corydqline)、四氫巴馬亭(Tetrahydropalmatine)、巴馬亭(Palmatine)、比枯枯靈(Bicuculline)、藥根鹼(Jatrorrhizine)、二氫巴馬亭、二氫紫堇鹼等，總生物鹼含量≥80％；其中主要有效成分原阿片鹼含量為25～65％，四氫巴馬亭含量為10～25％，比枯枯靈含量為5～10％，巴馬亭含量為10～25％，其它生物鹼及提取物為5～20％。該夏天無總生物鹼的指紋圖符合所附圖1、2所示。
本發明研究表明，夏天無總生物鹼具有多方面的心腦血管藥理及神經系統藥理作用。①抑制血小板聚集，抑制血栓形成；明顯升高GAMP/CGMP比值。②具有擴張血管、顯著而持久的降壓作用；③具有擴張冠脈血管，增加冠脈血流量的作用；④具有顯著的鎮痛作用；⑤具有士的寧樣興奮脊髓作用，有助於促進腦血管意外引起癱瘓肢體功能的恢復。可用於高血壓偏癱，小兒麻痺後遺症、坐骨神經痛。下述藥效尚未見報導(1)夏天無總生物鹼抑制血小板激活因子誘發的血小板凝聚作用動物紐西蘭家兔，體重2-3公斤，雌雄兼備，儀器Chronolog型血小板凝聚儀，血小板激活因子(PAF)為Sigma公司產品，其他試劑均為國產分析純，夏天無總生物鹼為實施例1方法製得，取家兔耳正中動脈血10毫升(檸檬酸納-檸檬酸-葡萄糖溶液∶全血＝1∶6抗凝)，500轉/分離心5分鐘，得富血小板血漿，2000轉/分分離5分鐘得血小板，以PH6.5的無鈣臺氏液洗涕兩次，每次洗後200轉/分分離5分鐘，棄上清，加PH7.4含0.25％牛血清白蛋白50mM三羥甲基氨基甲烷-臺氏液(TTBSA)調整血小板濃度至2×108/毫升，即為家兔洗滌血小板懸液(WRP)。取018毫升WRP，37℃(本文所提及的溫標均為攝氏溫標)預熱後加入0.01毫升夏天無總生物鹼溶液，加0.01毫升血小板激活因子後以比濁法記錄血小板聚集曲線，空白對照管以蒸餾水代替夏天無總生物鹼溶液，以夏天無總生物鹼管血小板聚集率與空白管血小板聚集率比較，計算血小板聚集抑制率。
結果PAF濃度夏天無總生物鹼濃度(mg/ml)血小板聚集抑制率(％)2nM0.0 0.00.00832.90.01660.00.03279.4結果表明，夏天無總生物鹼抑制血小板激活因子誘發的家兔洗滌血小板聚集具明顯的量效關係，其他實施方法製得的夏天無總生物鹼依本法實驗所得數據與上述結果趨勢相同。
(2)夏天無總生物鹼抑制血小板激活因子誘發的血小板釋放5-羥色胺(5-TH)的作用以上法製得的WRP，取0.8毫升WRP，加入夏天無總生物鹼(實施例1方法製得)溶液，37℃預熱2分鐘後加10毫升血小板激活因子37℃反應4分鐘2000轉/分離心10分鐘，取上清液0.3毫升加TTBS07毫升，再加0.3毫升100％三氯醋酸3500轉/分離心20分鐘，取0.5毫升上清液，加2毫升0.05％鄰苯二甲醛/HCI溶液，100℃水浴加熱10分鐘，水冷後加2毫升氯仿混勻後3500轉/分離心20分鐘，取上清1毫升測定5-TH螢光(EX360NM EM475NM)陰性對照管以蒸餾水代替夏天無總生物鹼溶液，以同濃度夏天無總生物鹼TTBSA稀釋液代替WRP管為試劑空白，各反應管測定值均扣除試劑空白值測得5-TH螢光值F(EX360NM，EM475NM)結果PAF夏天無總生物鹼濃度(mg/ml)F(EX360NM，EM475NM)2NM0354.7O.05 329.60.10 309.00.15 263.80.30 234.6結果表明夏天無總生物鹼抑制血小板激活因子導致的5-TH釋放具明顯的量效關係，其它實施例方法製得的夏天無總生物鹼依本法所得數據與上述結果趨勢相同。
(3)擴張腦血管和下肢血管的作用。並可對抗去甲腎上腺素引起的腦血管與下肢血管的緊張狀態。
方法腦循環實驗用健康雄性犬24隻，體重12.4±1.5kg，靜脈注射戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉，按一般腦循環實驗方法，測定頸總動脈血壓及頸內動脈血流量(以之代表腦血流量)，計算每100g腦組織的血流量和腦血管阻力。下肢循環實驗用健康雄性犬24隻，體重11.6±1.3kg(SD)。靜脈注射戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉，測定股動脈血壓及血流量(以之代表下肢血流量)，以血壓除以血流量算出下肢血管阻力。
實驗數據以M±SE表示。所有表中，除特殊註明者外，*表示給藥前比較P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
結果1.對麻醉犬腦血流動力學的作用結果見表1表1夏天無總鹼、普託品動脈注射對麻醉犬腦血流動力學的作用(x±SD)n＝6
結果表明注射總鹼、普託品和罌粟鹼均使腦血流增加，腦血管阻力減低。總鹼與罌粟鹼尚使血壓下降。
2.對下肢循環的作用表2夏天無總鹼、普託品對麻醉犬下肢血流量動力學的作用(X±SD)n＝6
Δ動脈給藥後3分鐘平均值，靜脈給藥後5分鐘結果表明夏天無總鹼使血壓明顯下降。
3.對去甲腎上腺素引起的腦血管功能狀態變化的影響結果見表3、表4。
表3夏天無總鹼對去甲腎上腺素引起的腦血管功能狀態變化的影響(X±SD)n＝6血壓mmHg 腦血流量ml/min腦血流阻力mmHg/ml/min給藥前 122.1±3.8 120.4±17.2 1.08±0.14去甲腎 171.0±2.8 108.3±11.8 1.66±0.18上腺素總鹼130.0±6.1**195.0±19.9**0.82±0.09**結果表明夏天無總鹼使腦血流量增加，腦血管阻力減低，血壓下降。表明總鹼可解除去甲腎上腺素引起的腦血管緊張狀態。
表4夏天無總鹼對去甲腎上腺素引起的下肢血管功能狀態變化的影響(X±SD)n＝6血壓mmHg 下肢血流量ml/min 下肢血流阻力mmHg/ml/min給藥前 109.0±10.265.1±18.01.81±0.19去甲腎 167.0±12.085.6±11.52.07±0.21上腺素總鹼145.0±7.6**142.6±5.0**1.10±0.05**結果表明夏天無總鹼可解除去甲腎上腺素所引起的下肢血管緊張狀態。
(4)鎮痛作用選用體重18-20克的昆明種小鼠隨機分組。給藥後1/2-1h，每鼠腹腔注射0.6％冰醋酸0.1ml/kg，20min內小鼠紐體次數如表5表5夏天無總生物鹼的鎮痛作用(小鼠扭體法)(X±SD)n＝16組別 劑量扭體數 抑制率 P值mg/Kg X±SD ％生理鹽水 -- 21.6±10.6延胡索乙素0.054.7±3.6 81.72％ P＜0.01夏天無總鹼0.057.2±5.6 69.67％ P＜0.010.1 5.1±5.7 76.83％ P＜0.010.153.9±7.2 89.76％ P＜0.01結果表明夏天無總鹼對小鼠有明顯的鎮痛作用(5)具有士的寧樣興奮脊髓作用，有助於促進腦血管意外引起癱瘓肢體功能的恢復。
本發明總生物鹼可用於製備治療具血小板激活因子及自由基損傷的血液循環障礙性疾病，特別是高血壓偏癱、小兒麻痺後遺症、坐骨神經痛的藥物組合物。此組合物含活性成分夏天無總生物鹼及藥物可接受的賦形劑、載體或稀釋劑，以常規方法將其製成藥物製劑。
製備該組合物時，可將夏天無總生物鹼與載體混合或用載體包埋，此載體可以是膠囊或其他裝載形式。載體可為固體、半固體或液體物質，它作為夏天無總生物鹼的載體、賦形劑或介質。該組合物可以是膠囊、凍乾粉針、大輸液、滴眼液、凝膠劑、小針劑、噴霧劑、片劑、栓劑等多種形式。
多種載體、賦形劑或稀釋劑可用於本組合物，如乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、卡波姆、甘油、甘露醇、澱粉、聚乙二醇、明膠等。該製劑中還加入潤滑劑、潤溼劑、矯味劑、助懸劑、防腐劑等。本發明的組合物可使用本領域通常採用的任何方法製備，以達到對患者使用後，活性成分發揮最大藥效的目的。
此藥物組合物可經口服，靜脈注射，肌肉注射，經皮或皮下注射給藥，經直腸給藥等。可單次或多次連續使用，而藥物組合物使用劑量則應根據病人的具體情況決定，一般應控制在0.0005-0.05g夏天無總生物鹼/公斤體重·天。
本發明採取1-5％酸水提取或50-90％鹼性乙醇、甲醇提取。大孔吸附樹脂吸附柱層析洗脫法除雜質後，製得一純度較高的夏天無總生物鹼。這些方法在夏天無成分提取製備過程中的應用尚未見報導，它們可有效地除去胺基酸及糖類、鞣質等雜質，明顯提高夏天無總生物鹼的純度，本發明的方法製備所得的夏天無總生物鹼均無胺基酸和游離糖及鞣質反應，採用UV法及HPLC法測得其含量≥80％；其薄層色譜圖均可見與對照品原阿片鹼、四氫巴馬亭、巴馬亭、比枯枯鹼、藥根鹼五個相應位置輪廓清晰的斑點，提示本發明的夏天無總生物鹼純度高，且此法操作簡便，易於掌握，可作為夏天無總生物鹼製備方法。
由以上可知，本發明提供了夏天無總生物鹼及其製備方法和所述總生物鹼在藥品中的應用，它們克服了已有技術的缺陷，並實現了夏天無總生物鹼內在質量的可控制。
圖1和圖2是表明本發明總生物鹼有效成份存在的指紋圖，其中圖1是夏天無總生物鹼薄層色譜圖，圖2是高效液相HPLC指紋圖。在圖中1---原阿片鹼，2---比枯枯靈，3---四氫巴馬亭，4---夏天無總生物鹼，5---巴馬亭，a---原阿片鹼，b---巴馬亭，c---比枯枯靈，d---四氫巴馬亭。
具體實施例方式
實施例1一種夏天無總生物鹼，它的重量比組分包括原阿片鹼45％、四氫巴馬丁15％，巴馬丁20％，比枯枯靈5％，其他生物鹼及提取物15％。
實例2(製備方法)取1千克夏天無生藥粗粉，加2％的磷酸(鹽酸或硫酸或醋酸)溶液3公斤浸泡過夜，裝入滲濾筒，用2％的上述溶液滲濾，收集滲濾液至生物鹼反應呈陰性反應為止。滲濾液用10％的氫氧化鈉調PH值至6左右，濃縮至0.4克生藥/毫升即可。以備分離用。
取濃縮液，上柱床體積為2000毫升的大孔吸附樹脂AB-8(或D201、D3520、D4020、D101、H103)以1N的NaOH溶液洗脫至色淺，再用蒸餾水洗至中性。再改用50-95％乙醇洗脫，收集洗脫液至生物鹼反應為陰性即可，洗脫液回收乙醇至無醇，用10％的氫氧化鈉溶液調至12左右，並加NaCI使成飽和食鹽水溶液，放置使完全沉澱，收集沉澱，飽和食鹽水溶液洗至中性，乾燥粉碎即得夏天無總生物鹼粗品。
取分離項下所得粗品10g，每次加100ml95％的乙醇回流提取3次，過濾合併濾液，回收溶劑至50mI，放置析晶即得夏天無總生物鹼(Rhizoma corydalis decumbent totalalkaloids)精品。含量為86.3％實施例3(製備方法)取1千克夏天無生藥粗粉，用濃氨水拌勻，涼幹，加入3公斤90％的乙醇浸泡過夜，裝入滲濾筒，用90％的乙醇滲濾，收集滲濾液至生物鹼反應呈陰性反應為止，回收乙醇至無醇，浸膏用1％的磷酸(硫酸或鹽酸或醋酸)溶液調PH 5至6，體積約為3000毫升，靜置過夜，取上清液備用即可。
取上述提取溶液，上柱床體積為2000毫升的大孔吸附樹脂AB-8(D101或D201、D3520、D4020、H103)以1％的NaOH溶液洗脫至色淺，再用蒸餾水洗至中性。再改用50-95％乙醇洗脫，收集洗脫液至生物鹼反應為陰性即可，洗脫液回收乙醇至無醇，用10％的氫氧化鈉溶液調至12左右，放置使完全沉澱，收集沉澱，水洗至中性，乾燥粉碎即得夏天無總生物鹼粗品。
取分離項下所得粗品10g，每次加50ml氯仿回流提取2次，過濾合併濾液，回收溶液至幹，再用100ml乙醇溶解，回收溶液至40ml放置析晶即得夏天無總生物鹼精品。含量為90.6％
實施例4(製備方法)取上述提取方法一、二項下的提取液上至柱床體積為2000ml的大孔樹脂D101(或D201、D3520、D4020、AB-8、H103)以1N的NaOH溶液洗脫至色淺，再用蒸餾水洗至中性。改用2％的硫酸(或磷酸或醋酸)溶液洗脫至無生物鹼反應即可。用20％NaOH調PH至7-8，濃縮乾燥粉碎即得夏天無總生物鹼粗品。
取粗品10g，每次加100ml甲醇回流提取3次，過濾合併濾液，回收溶液，放置析晶即得夏天無總生物鹼精品。含量為81％實施例5(製備方法)取提取方法一、二項下的提取物，上至柱床體積為2000ml的大孔樹脂AB-8(或D101、D201、D3520、D4020、H103)以2％硫酸(或磷酸或醋酸)溶液洗脫至無生物鹼反應即可。用15％NaOH溶液調PH至7-8.5，濃縮乾燥粉碎即得粗品備用。
取分離項下所得粗品10g，每次加100ml95％的乙醇回流提取3次，過濾合併濾液，回收溶液，放置析晶即得夏天無總生物鹼精品。含量為82％實施例6(製備方法)取1千克夏天無生藥粗粉，用10ml濃氨水拌勻，涼幹，加入3公斤95％的乙醇或甲醇浸泡過夜，裝入滲濾筒，用95％的乙醇或甲醇滲濾，收集滲濾液至生物鹼反應呈陰性反應為止，回收溶劑至無醇，浸膏用1-2％的磷酸(硫酸或鹽酸或醋酸)溶液調PH＜5，加熱溶解，過濾，濾液用5-20％的NaOH溶液調PH至12，並加入NaCI使成飽和食鹽水溶液，放置使沉澱完全，濾取沉澱，抽乾後又用沉澱物10-20倍重量的酸水將沉澱物溶解，過濾，濾液用濃度為5-20％NaoH或KoH溶液調整提取液的PH值為10-12，再加入Nacl使成飽和食鹽水溶液，放置沉澱，濾取沉澱物，飽和食鹽水洗至中性，反覆用85％的乙醇精製即得。含量為80.2％實施例7(製劑)夏天無總生物鹼口服硬膠囊劑夏天無總生物鹼5克幹澱粉100克上述組分混合制粒後裝入1000個硬膠囊，即得夏天無總生物鹼口服硬膠囊劑實施例8(製劑)夏天無總生物鹼注射劑夏天無總生物鹼2g注射用水 適量全量1000毫升取100克夏天無總生物鹼加1％HCI使全部溶解，加500毫升注射用水，再用1％NaOH調PH5-6，過濾，以適量注射用水加至1000毫升按常規方法經灌裝，封口等步驟製得夏天無總生物鹼注射劑。
實施例9(製劑)夏天無總生物鹼葡萄糖大輸液夏天無總生物鹼 10g葡萄糖 適量注射用水 適量取夏天無總生物鹼1克加1％磷酸溶液使溶解，再用1％NaOH調PH5-6，加適量葡萄糖和注射用水後，按常規方法經灌裝，封口等步驟生產即得夏天無總生物鹼大輸液。
實施例10(製劑)夏天無總生物鹼栓劑夏天無總生物鹼 5克半合成脂肪酸甘油脂 適量製成 1000粒取半合成脂肪酸甘油脂加熱使融，適當降溫後加入5克夏天無總生物鹼混勻，制栓，冷卻即得夏天無總生物鹼栓劑。
實施例11(製劑) 夏天無總生物鹼片劑夏天無總生物鹼 5克硬脂酸鎂 5克澱粉 20克製成 1000片夏天無總生物鹼，硬脂酸鎂與澱粉混勻後按常規方法經壓片，包衣，裝瓶等工藝即得夏天無總生物鹼片劑。
實施例12(製劑)夏天無總生物鹼滴眼液夏天無總生物鹼1克注射用水 適量夏天無總生物鹼溶解後按常規方法經灌裝，封口等步驟生產即得夏天無總生物鹼滴眼液實施例13(製劑)夏天無總生物鹼凝膠劑夏天無總生物鹼 10克卡波姆941 1.5克甘油10毫升聚乙二醇400 15毫升三乙醇胺5克乙醇15毫升蒸餾水 適量製成1000支取卡波姆1.5克，加少量水溶脹後，加入三乙醇胺，攪勻備用。另取夏天無總鹼10克，加入甘油、乙醇、聚乙二醇400、溶解藥物，攪勻。將上述藥液緩緩加入上述基質中，邊加邊攪拌，加蒸餾水至100克，繼續攪拌均勻，得夏天無總鹼透明凝膠劑。
實施例14(製劑)注射用夏天無總生物鹼夏天無總生物鹼 2克甘露醇 適量制稱1000支取夏天無總生物鹼2克加1％HCI溶液使溶解，再用1％NaOH調PH5-6，加入適量甘露醇，凍幹分裝。
實施例15(製劑)夏天無總生物鹼口服顆粒劑夏天無總生物鹼 5克乳糖200克糊精795克上述組分混合後制粒，分裝成500袋。即得夏天無總生物鹼口服顆粒劑實施例16(製劑)夏天無總生物鹼噴霧劑夏天無總生物鹼 5克乙醇295克二氟二氯甲烷700克將總鹼溶於乙醇中，濾過，分裝100瓶，每瓶壓入二氟二甲烷7克，即得。
權利要求
1.一種用罌粟科植物伏生紫堇的乾燥塊莖為原料提取的夏天無總生物鹼，該總生物鹼的重量分組成包括原阿片鹼25-60％，四氫巴馬丁10-20％，比枯枯靈10-20％，巴馬丁10-20％，其他生物鹼及提取物5-20％，其總生物鹼含量用UV法或HPLC法檢測不少於80％。
2.一種製備權利要求1所述夏天無總生物鹼的方法，其步驟是(1)以罌粟科植物伏生紫堇的乾燥塊莖為原料，加入該原生藥原料重量3-5倍的極性溶劑浸泡12-36小時後，繼續用5-20倍的極性溶劑進行滲漉提取，提取時間1-3天，收集滲漉液至無生物反應，合併滲漉液；所述極性溶劑為濃度是2-3％的磷酸、鹽酸、硫酸、醋酸水溶液之一，或者是重量百分比濃度為50-95％的乙醇或甲醇溶液；(2)將滲漉液轉換為其是所述原生藥原料重量的1-3倍的提取液，並且a、當所用極性溶劑為所述乙醇或甲醇溶液時，對所述滲漉回收溶劑至無醇味，所得浸膏用濃度為1-2％的磷酸、鹽酸、硫酸、醋酸水溶液之一的酸水溶液加熱溶解，過濾，再用濃度為5-20％的NaoH或KoH溶液調整濾液PH值為6-7並定容其所述原生藥原料重量的1-3倍重量體積比；b、當所用極性溶劑為所述酸的水溶液時，用濃度為5-20％NaoH或KoH溶液調整濾液PH值為6-7，濃縮並定容其為原生藥原料重量的1-3倍重量體積比；(3)將上述所得提取液進行大孔樹脂吸附層析，以1-3N NaoH溶液洗脫或以層析擔體吸附去雜質；(4)用極性洗脫液洗脫夏天無總生物鹼，收集洗脫液，回收溶劑使洗脫液濃縮至原生藥原料重量的0.3-0.4倍；所述極性洗脫液為濃度是1-5％的硫酸、磷酸、鹽酸、醋酸溶液之一，或者是重量百分比為50-95％乙醇或甲醇溶液；(5)用濃度為5-20％NaoH或KoH調整溶液PH值至9-12，析出沉澱，濾取沉澱物，用飽和食鹽水洗滌沉澱物至中性，乾燥；(6)用乙醇、甲醇、丙酮、氯仿中的一種有機溶劑溶解乾燥後的中性沉澱物，過濾，回收溶劑至濾液為沉澱物重量的3-8倍重量體積比，放置析晶，濾取，結晶乾燥，即得夏天無總生物總鹼。
3.根據權利要求2所述的方法，其特徵是，所述用大孔吸附樹脂吸附層析的提取液與所用大孔吸附樹脂的體積比為1∶1-30。
4.根據權利要求2所述的方法，其特徵是，所述大孔吸附樹脂為AB-8、D101、D201、D3520、D4020、H103中的任一種。
5.一種製備權利要求1所述夏天無總生物鹼的方法，其步驟是(1)以罌粟植物伏生紫堇的乾燥莖塊為原料，加入該原生藥原料重量3-5倍的極性溶劑浸泡12-36小時後，繼續用5-20倍的極性溶劑進行滲漉提取，提取時間1-3天收集滲漉液至無生物鹼反應，合併滲漉液；所述極性溶劑是指濃度為2-3％的磷酸、鹽酸、硫酸、醋酸水溶液之一或者是重量百分比濃度為50-95％的乙醇或甲醇溶液；(2)製取提取液a、當所用極性溶劑為所述乙醇或甲醇時，對滲漉液回收溶劑至無醇味，所得浸膏用原生藥原料重量的0.3-0.4倍重量體積比酸水加熱溶解，過濾，得提取液；所述酸水是指濃度為1-2％的磷酸、硫酸、醋酸、鹽酸的水溶液之一；b、當所用極性溶劑為所述酸的水溶液時，將所述滲漉液濃縮至原生藥原料重量的0.3-0.4倍重量體積比，得提取液；(3)用濃度為5-20％NaoH或KoH溶液調整提取液的PH值為10-12，再加入Nacl使成飽和食鹽水溶液，放置沉澱，濾取沉澱物，用飽和食鹽水洗滌沉澱物至中性；(4)用乙醇、甲醇、丙酮、氯仿之一的有機溶劑溶解所述中性沉澱物，過濾，回收溶劑至濾液為沉澱物重量的3-8倍重量體積比，放置析晶，濾取，結晶乾燥，即得夏天無總生物鹼。
6.一種夏天無總生物鹼在製備血小板激活因子與自由基所致損傷疾病的藥物中的應用。
7.一種夏天無總生物鹼在治療腦血管疾病、高血壓偏癱、小兒麻痺後遺症、坐骨神經痛、風溼關節痛的藥物中的應用。
8.權利要求1的夏天無總生物鹼，其特徵在於，可以製成膠囊、凍乾粉針、顆粒劑、大輸液、滴眼液、凝膠劑、小針劑、片劑、栓劑等。
全文摘要
本發明分為夏天無總生物鹼及其製備方法和在藥品中的應用。總生物鹼主要包括原阿片鹼25－65％、四氫巴馬亭10－25％、比枯枯靈5－10％、巴馬亭10－20％、其它生物鹼及提取物5－20％；其一種製備方法是以夏天無為原料，加入適量的極性溶劑滲漉提取，收集滲漉液至無生物鹼反應，合併滲漉液，濃縮得到濃縮液，把經上述步驟得到的濃縮液進行大孔吸附樹脂吸附層析，以鹼水洗脫除去雜質；或以樹脂吸附雜質，再以極性洗脫液洗脫夏天無總生物鹼，收集洗脫液，回收溶劑，濃縮在醇溶液中結晶即得。本發明還提出了所述總生物鹼在製備治療血小板激活因子與自由基所致損傷、腦血管、高血壓偏癱，小兒麻痺後遺症、坐骨神經痛、風溼關節痛疾病的藥物中的應用。
文檔編號C07D491/00GK1535969SQ0311826
公開日2004年10月13日 申請日期2003年4月11日 優先權日2003年4月11日
發明者林海, 康建南, 李梅連, 黎格勒, 肖豔萍, 鄭正春, 魏雲, 黃河清, 黃雲, 周海波, 林 海 申請人:湖南醫藥工業研究所, 湖南一格製藥有限公司