一種靜注人免疫球蛋白的製備方法

2023-09-17 19:13:25 1

一種靜注人免疫球蛋白的製備方法
【專利摘要】本發明提供了一種生產靜注人免疫球蛋白的方法，此方法具體包括：組分I+II+III(或組分II+III)沉澱的溶解；分離組分I+III-1(或組分III-1)沉澱；分離組分I+III-2(或組分III-2)沉澱；分離組分II沉澱；組分II沉澱溶解、過濾；超濾、透析、濃縮；純化、過濾；超濾透析、濃縮、配製，此方法針對傳統工藝方法的各步驟以及各步驟參數作出了改進，各步驟以及各步驟參數的特定組合可有效從I+II+III(或組分II+III)沉澱中提取靜注人免疫球蛋白，解決靜注人免疫球蛋白純度偏低，多聚體等含量偏高的技術難題，降低人們用藥風險，保障人們用藥安全。
【專利說明】一種靜注人免疫球蛋白的製備方法

【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物製藥領域，尤其涉及一種靜注人免疫球蛋白的製備方法。

【背景技術】
[0002] 免疫球蛋白是由B淋巴細胞合成、分泌的一種糖蛋白，主要存在於循環系統中，細 胞表面也有分布。免疫球蛋白的主要功能在於抵抗各種病原微生物對人體的感染。主要用 於：①原發性和繼發性免疫缺陷病；②特發性血小板減少性紫癜；③川崎病；④愛滋病的治 療；⑤其他適應症，如糖尿病、類風溼性關節炎、重症肌無力、自身免疫性貧血、再生障礙性 貧血等。免疫球蛋白生產工藝是由美國哈佛大學醫學院Cohn教授研宄開發的一種低溫乙 醇蛋白分離工藝，該技術通過多步調節低溫乙醇法的五大要素：離子強度、PH值、溫度、乙 醇濃度和蛋白質含量來實現分離1+11+111(或組分Π+ΙΙΙ)沉澱中的組分II，再經進一步 提純得到靜注人免疫球蛋白。這種傳統的生產工藝採用兩步法提取靜注人免疫球蛋白，其 最大的缺陷是生產的靜注人免疫球蛋白純度偏低，多聚體等含量偏高，容易引起輸注後的 不良反應。因為其中的多聚體分子量較大可引起類過敏反應、抗補體活性以及血壓下降，隨 著研宄的深入其治療範圍在不斷增加，如皮膚病、器官移植、腫瘤、白血病等，有的病人需要 長期使用或單次大劑量輸注，這樣風險就會大大增加。


【發明內容】

[0003] 本發明要解決的技術問題是提供一種製備純度高，多聚體含量、抗補體活性、激肽 釋放酶原激活劑含量較低的靜注人免疫球蛋白的製備方法。
[0004] 本發明提供了一種靜注人免疫球蛋白的製備方法，包括如下步驟：
[0005] 步驟一：組分I+II+III或組分II+III沉澱的溶解
[0006] 將組分I+II+III沉澱或組分II+III沉澱用磷酸二氫鈉的水溶液完全溶解；
[0007] 步驟二：分離組分I+III-I沉澱或組分m-ι沉澱
[0008] 調節上述組分I+II+III沉澱溶解液或組分II+III沉澱溶解液pH值至5. 00? 5. 20,調節溫度至-0. 5?0. (TC，再用-20°C以下95%的乙醇溶液調節至乙醇終濃度為 7. 5?8. 5%，並調整pH值至5. 00?5. 20,調節溫度至-3. (TC?-2. (TC，攪拌使其反應完 全，按每IOOOkg懸液加入娃藻土 3. 5?4. 5kg和珍珠巖2. 0?3. 0kg，攪拌，開始懸液壓濾， 控制過濾壓力為0?0. 3MPa，過濾速度為20?90kg/min，濾出液溫度-3. 0?-I. (TC，收集 組分I+III-I上清液或組分III-I上清液；
[0009] 步驟三：分離組分I+II 1-2沉澱或組分II1-2沉澱
[0010] 調整組分I+III-I上清液或組分III-I上清液pH值至5. 10?5. 30,用-20 °C 以下95 %的乙醇調節乙醇終濃度至14?16%，並調整pH值至5. 10?5. 30,反應溫度 至-5. 0°C?-4. 0°C，攪拌使其反應完全，按每IOOOkg懸液加入娃藻土 2. 0?3. Okg和珍珠 巖2. 0?3. 0kg，攪拌，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0?0. 3MPa，過濾速度為20?90kg/ min，濾出液溫度-5. 0?-3. 0°C，收集組分I+III-2上清液或組分III-2上清液；
[0011] 步驟四：分離組分II沉澱
[0012] 每1000敁1+111-2上清液或組分111-2上清液加入25?35%的氯化鈉溶液 18. 4?22. 4kg，調節pH值至6. 90?7. 10,用-20°C以下95%的乙醇調節乙醇濃度至19? 21 %，調整pH值至6. 90?7. 10,調節反應溫度至-8. 0?-6. 0°C，攪拌使其反應完全，按每 IOOOkg懸液加入珍珠巖0. 5?I. 0kg，攪拌，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 300MPa，過濾 速度為20?90kg/min，濾出液溫度-7. 5?-5. 5°C，上清排放，收集組分II沉澱；
[0013] 步驟五：組分II沉澱溶解、過濾
[0014] 將收集的組分II沉澱加入注射用水攪拌至完全溶解，調整pH值至6. 90?7. 10， 調節溫度至0. 0?4. 0°C，繼續攪拌，按每IOOOkg溶解懸液加入娃藻土 I. 0?2. Okg和珍珠 巖I. 0?2. 0kg，攪拌，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 200MPa，過濾速度為10?60kg/min，濾 出液溫度0. 0?5. 0°C，壓濾分離過濾液，調節過濾液pH值至3. 80?4. 10 ;
[0015] 步驟六：超濾、透析、濃縮
[0016] 將過濾液濃縮至蛋白質含量為8?12%，然後用2?5°C、4?6倍體積的注射用 水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8?9%，再調整pH值至6. 50?7. 30,用注射用 水稀釋控制蛋白質含量為50. 0?100. Og/L ;
[0017] 步驟七：純化、過濾
[0018] 將步驟六濃縮後的製品用0.0?4.0°C的注射用水稀釋蛋白質含量至1.5? 2. 0%，稀釋後在每IOOOkg製品加入磷酸二氫鈉I. 0?3. Okg和氯化鈉0. 2?I. 0kg，調整 pH值至6. 90?7. 10,調節溫度至0. 0?0. 5°C，用-20°C以下95 %的乙醇調節乙醇濃度至 1. 5?2. 5 %，調節溫度至-2. 0?-I. (TC，攪拌使其反應完全，按每IOOOkg懸液加入珍珠巖 I. 0?2. 0kg，攪拌，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 200MPa，過濾速度為10?60kg/min，濾出 液溫度-2. 0?-I. (TC，調節濾出液pH值至3. 80?4. 10,調節溫度至-2. 0?-I. (TC ;
[0019] 步驟八：超濾透析、濃縮、配製
[0020] 將步驟七經pH和溫度調節後的濾出液經超濾濃縮至蛋白質含量為8?12%，然 後用注射用水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8?9%，按最終製品每升含麥芽糖 95?105g加入麥芽糖，調節pH值至3. 90?4. 30,用注射用水稀釋控制最終蛋白質含量為 5. 20?5. 50%，再進行除菌、除病毒過濾、低pH孵放和除菌分裝，即得到靜注人免疫球蛋白 半成品。
[0021] 所述步驟一中所述磷酸二氫鈉的水溶液為組分I+II+III或組分II+III沉澱重量 的6?8倍，濃度為0. Olmol/L，攪拌時間為6小時以上。
[0022] 所述步驟二、三、四和五中用來調節PH值的溶劑為lmol/L醋酸溶液或0· 5mol/L 氫氧化鈉溶液。
[0023] 所述步驟六中將過濾液濃縮至蛋白質含量為8?12%是採用膜規格為30KD超濾 器濃縮。
[0024] 本發明提供了一種生產靜注人免疫球蛋白的方法，此方法針對傳統工藝方法 的各步驟以及各步驟參數作出了改進，各步驟以及各步驟參數的特定組合可有效從 1+11+111(或組分II+I II)沉澱中提取靜注人免疫球蛋白，解決靜注人免疫球蛋白純度偏 低，多聚體等含量偏高的技術難題，降低人們用藥風險，保障人們用藥安全。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0025] 圖1為本發明原料組分I+II+III (或組分II+III)沉澱的生產工藝流程圖。
[0026] 圖2為傳統的靜注人免疫球蛋白生產工藝流程圖。
[0027] 圖3為本發明的靜注人免疫球蛋白生產工藝流程圖。

【具體實施方式】
[0028] 本發明中的原料組分I+II+III沉澱和II+III沉澱可以採用最常規的工藝生產， 例如可以按照圖1的以下步驟製備：
[0029] 一、組分 I+II+III 製備
[0030] 1血漿計量：將合併融化後的健康人血漿（由單採血漿站採集並經過兩次檢驗和 符合窗口期管理的要求）計量。
[0031] 2調整蛋白質含量：用0. 9%氯化鈉溶液調節血漿蛋白質含量至4. 8?5. 3%。
[0032] 3調節pH值：用pH4. 0醋酸-醋酸鈉緩衝液調節pH值至6. 20?6. 30。
[0033] 4調節乙醇濃度：加入95%乙醇調節乙醇終濃度至20±1%。
[0034] 5複測及調整pH值：加完95 %乙醇後複測pH值應為6. 60?6. 70。如pH值小 於6. 60,則應用0. 5mol/L氫氧化鈉調節至此範圍內；如pH值大於6. 70,則應用pH4. 0醋 酸-醋酸鈉緩衝液調節至此範圍內。
[0035] 6調節反應溫度：調節反應溫度至-5. 0?-4. (TC，溫度到達目標值後繼續攪拌反 應2小時以上，得到組分I+II+III懸液，這時其蛋白質含量為3. 5?4. 5%。
[0036] 7加入助濾劑：每IOOOkg組分I+II+III懸液加入硅藻土 3. 5?4. 5kg、珍珠巖2? 3kg，加完上述助濾劑後，繼續攪拌10分鐘以上。
[0037] 8懸液壓濾：在壓濾機上組裝濾板，調節液壓190?240bar壓緊壓濾機，用20 %平 衡液對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間20?40分鐘，用預冷潔淨壓縮 空氣吹乾濾板，使排放溫度達到-5. 0?-3. (TC，組分FI+II+III壓濾所有步驟的預冷壓縮 空氣溫度均為-7. 0?-3. (TC。開始懸液壓濾，控制過濾速度為20?90kg/min，檢查濾液 澄清度，進口壓力為〇· 300MPa，濾出液溫度為-5. 0?-3. 0°C。
[0038] 9罐頂洗：懸液壓濾完成後，用20 %平衡液50?IOOkg對懸液罐的罐體進行清洗 回收，洗液經壓濾機後進入目標罐。罐頂洗完成後，設定吹掃時間30?60分鐘，用預冷潔 淨壓縮空氣吹乾濾板；接著用20%平衡液經過懸液罐的旁路對壓濾機進行清洗回收，回收 液進入目標罐，出液50?150kg後結束。設定吹掃時間30?150分鐘，用預冷潔淨壓縮空 氣吹乾濾板。
[0039] 10收集沉澱：鬆開壓濾機，收集組分I+II+III沉澱，收集完後放置_30°C以下冷庫 保存。
[0040] 二、組分II+III沉澱製備
[0041] 1離心冷沉澱
[0042] I. 1血漿計量：融化合併後的血漿計量。
[0043] 1. 2離心冷沉澱：通過輸送管道將血漿送往離心間，使用離心機進行冷沉澱離心 分離，出液溫度控制在0. 5?2. 5°C，出液速度小於2. 5kg/min，收集離心上清。
[0044] 2組分I製作、離心
[0045] 2· 1組分I的製作
[0046] 2. I. 1離心冷沉澱後的上清計量。
[0047] 2. L 2調節pH值：用pH4. 0醋酸-醋酸鈉緩衝液調節pH至L 00?L 20。
[0048] 2. 1. 3調節乙醇濃度：用95%乙醇調節乙醇濃度至8. 0±0. 5%。
[0049] 2. 1. 4複測及調整pH值：加完95%乙醇後複測pH值應為7. 00?7. 20。如pH值小 於7. 00,則應用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調節至此範圍內；如pH值大於7. 20,則應用pH4. 0 醋酸-醋酸鈉緩衝液調節至此範圍內。
[0050] 2. 1. 5調節反應溫度：調節反應溫度至-2. 5?-I. 5°C，溫度到達目標值後攪拌反 應30分鐘以上。
[0051] 2. 1. 6覆核蛋白質含量：最終蛋白質含量應為4. 5?5. 5%。
[0052] 2. 2組分I離心：離心出液速度為每臺離心機小於2. Okg/min，檢查出液澄清度，出 液溫度為-2. 0?-I. (TC，收集離心上清。
[0053] 3組分II+III製作、壓濾
[0054] 3. 1 組分 II+III 製作
[0055] 3. I. 1離心組分I後的上清計量。
[0056] 3. 1. 2調整蛋白質含量：用8%平衡液將蛋白質含量調整至4. 00?5. 00%。
[0057] 3. L 3調節pH值：用pH4. 0醋酸-醋酸鈉緩衝液調節pH至6. 40?6. 50。
[0058] 3. 1.4調節乙醇濃度：用95%乙醇調節乙醇濃度至20±1%。
[0059] 3. L 5複測及調節pH值：加完95%乙醇後複測pH值應為6. 60?6. 70。如pH值 小於6. 60,則應用0. 5mol/L氫氧化鈉調節至此範圍內；如pH值大於6. 70,則應用pH4. 0醋 酸-醋酸鈉緩衝液調節至此範圍內。
[0060] 3. 1. 6調節反應溫度：調節反應溫度至-5. 0?-4. (TC，溫度到達目標值後繼續攪 拌反應2小時以上。
[0061] 3. 1. 7覆核蛋白質含量：最終蛋白質含量應為3. 0?4. 5%。
[0062] 3. 2組分II+III沉澱壓濾
[0063] 除加入的助濾劑量不一樣之外，其餘操作步驟和上述的"本發明中的原料組分 I+II+III生產步驟"中的"步驟2組分I+II+III沉澱壓濾"一致（其中助濾劑加量為每 IOOOkg 組分 II+III 懸液加入硅藻土 5. 5±0. 5kg、珍珠巖 3. 5±0. 5kg)。
[0064] 利用原料組分I+II+III沉澱和II+III沉澱製備靜注人免疫球蛋白半成品，工藝 流程如圖3所示，包括如下步驟：
[0065] 步驟一：組分I+II+III (或組分II+III)沉澱的溶解
[0066] 將組分I+II+III (或組分II+III)沉澱用沉澱6?8倍重量的0· 0?4. (TC的含 0. Olmol/L磷酸二氫鈉的水溶液攪拌6小時以上至完全溶解，得到組分I+II+III (或組分 ΙΙ+ΠΙ)沉澱溶解液。
[0067] 其中0. 0?4. 0°C的含0. 01mol/L磷酸二氫鈉的水溶液的配製方法為：按每 1000kg注射用水稱取I. 38kg磷酸二氫鈉加入攪拌至完全溶解。
[0068] 步驟二：分離組分I+III-I (或組分II1-1)沉澱
[0069] 用lmol/L醋酸溶液調節上述組分I+II+III (或組分II+III)沉澱溶解液pH值至 5. 00?5. 20,用-15°C冷媒降溫至-0· 5?0· 0°C，用-20°C以下95% (v/v)乙醇溶液調節 至乙醇終濃度為7. 5?8. 5% (v/v)，並用lmol/L醋酸溶液或0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調整 pH值至5. 00?5. 20,用-15°C冷媒調節最後懸液溫度至-3. (TC?-2. (TC，以攪拌速度為 50?IOOrpm攪拌2?3小時，反應完全後按每IOOOkg懸液加入娃藻土 3. 5?4. 5kg和珍 珠巖2. 0?3. 0kg，以攪拌速度為50?IOOrpm攪拌30分鐘，用8%平衡液800?1200Kg對 整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間20?40分鐘，用-4. 0?0. (TC預冷潔 淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規格680*779mm)，使排放溫度 達到-3. 0?-I. 0°C。開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0?0. 3MPa，過濾速度為20?90kg/ min，濾出液溫度-3. 0?-I. (TC，懸液壓完設定吹掃時間30?60分鐘，用預冷潔淨壓縮空 氣吹乾濾板，用8%平衡液800?IOOOKg對壓濾機進行清洗回收，回收液併入壓濾上清液 罐，設定吹掃時間30?150分鐘，再使用-4. 0?0. (TC預冷潔淨壓縮空氣進行吹乾，收集組 分I+III-I (或組分II1-1)上清液，組分I+III-I (或組分II1-1)沉澱高壓滅菌後廢棄；
[0070] 所用的8%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入-20°c以下的95% (v/v) 乙醇77. 7kg得到8% (v/v)的乙醇溶液；然後在每1000kg 8%的乙醇溶液中加入磷酸氫二 鈉3. 58kg ;用冰醋酸調節pH值至4. 90?5. 10 ;用-15°C冷媒調節溫度至-3. 0?-2. (TC。
[0071] 步驟三：分離組分1+111-2(或組分II1-2)沉澱
[0072] 用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調整組分I+III-I (或組分II1-1)上清液pH值至 5. 10?5. 30,用-20 °C以下95 % (v/v)乙醇調節乙醇終濃度至14?16 % (v/v)，並用 lmol/L醋酸或0· 5mol/L氫氧化鈉調整pH值至5. 10?5. 30,用-15°C冷媒調節反應溫度 至-5. 0°C?-4. 0°C，以攪拌速度為50?IOOrpm攪拌2?3小時，反應完全後按每IOOOkg懸 液加入娃藻土2. 0?3. Okg和珍珠巖2. 0?3. 0kg，以攪拌速度為50?IOOrpm攪拌30分鐘， 用15%平衡液800?1200Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間20? 40分鐘，用-6. 5?-2. 5°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號： PX50,規格680*779mm)，使排放溫度達到-5. 0?-3. 0°C。開始懸液壓濾，控制過濾壓力為 0?0. 3MPa，過濾速度為20?90kg/min，濾出液溫度-5. 0?-3. (TC，懸液壓完設定吹掃時 間30?60分鐘，用預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用15 %平衡液800?IOOOKg對壓濾機進行 清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設定吹掃時間30?150分鐘，再使用-6. 5?-2. 5°C 預冷潔淨壓縮空氣進行吹乾，收集組分I+II 1-2 (或組分II1-2)上清液，組分I+II 1-2 (或 組分II1-2)沉澱高壓滅菌廢棄；
[0073] 所用的15%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙 醇158. 3kg得到15 % (v/v)的乙醇；然後在每IOOOkg 15 %乙醇中加入磷酸氫二鈉 3. 58kg ; 用冰醋酸調節pH值至5. 10?5. 30 ;用-15°C冷媒調節溫度至-5. 0?-4. (TC ;
[0074] 步驟四：分離組分II沉澱
[0075] 稱取組分1+111-2(或組分III-2)上清液的重量，每IOOOKg上清液加入25? 35 % (m/v)氯化鈉溶液18. 4?22. 4kg，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至6. 90? 7. 10,用-20°C以下95% (v/v)乙醇調節乙醇濃度至19?21 % (v/v)，複測並調整pH值 至6. 90?7. 10 (用lmol/L醋酸或0· 5mol/L氫氧化鈉調整），用-15°C冷媒調節反應溫度 至-8. 0?-6. (TC，繼續攪拌反應2?3小時，其攪拌速度為50?100RPM，反應完全後按每 IOOOkg懸液加入珍珠巖0. 5?I. 0kg，攪拌30分鐘，其攪拌速度為50?100RPM，用20 % (v/ v)乙醇1000?2000Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間20?40分 鍾，用-?ο. O?-6. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規 格680*779mm)，使排放溫度達到-7. 5?-5. 5°C，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 300MPa， 過濾速度為20?90kg/min，濾出液溫度-7. 5?-5. 5°C，上清直接經過乙醇排放管路排放， 當組分II懸液罐重量低於200kg時，壓濾上清不再排放而直接進入懸液罐從而形成一個循 環管路，循環IOmin後上清開始繼續經過乙醇排放管路排放，待懸液全部壓濾完後，設定吹 掃時間為30?150分鐘，用-10. 0?-6. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，收集組分II沉 澱；
[0076] 所用的20%乙醇配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下的95% (v/v)乙 醇225. 5kg得到20% (v/v)的乙醇，用-15°C冷媒調節溫度至-8. 5?-6. 5°C ;
[0077] 步驟五：組分II沉澱溶解、過濾
[0078] 將收集的組分II沉澱用沉澱5?7倍重量的0. 0?4. (TC的注射用水溶解，在攪 拌速率為50?IOOrpm下攪拌4小時以上至沉澱完全溶解，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液或 lmol/L醋酸溶液調整pH值至6. 90?7. 10 ;用-15°C冷媒調節溫度至0. 0?4. (TC ;繼續 在攪拌速率為50?IOOrpm下攪拌反應2?3小時，溶解完全後按每IOOOkg溶解懸液加入 娃藻土 I. 0?2. Okg和珍珠巖I. 0?2. 0kg，在攪拌速率為50?IOOrpm下攪拌30分鐘， 用0. 0?4. (TC注射用水300?500kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時 間10?30分鐘，用0. 0?4. 0°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型 號：Steril S100,規格：349*384mm)，使排放溫度達到0. 0?4. 0°C，開始壓濾，控制過濾壓 力為0. 200MPa，過濾速度為10?60kg/min，濾出液溫度0. 0?5. (TC，溶解液壓完設定吹掃 時間10?30分鐘，壓濾分離溶解懸液，用50?200kg 0. 0?4. (TC注射用水對壓濾機進行 清洗回收，用〇. 〇?4. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，回收液併入濾液罐，設定吹掃時間 為10?30分鐘，用0. 0?4. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用lmol/L醋酸溶液調節濾液 pH值至3. 80?4. 10,過濾沉澱高壓滅菌廢棄；
[0079] 步驟六：超濾、透析、濃縮
[0080] 用膜規格為30KD超濾器將過濾液濃縮至蛋白質含量為8?12% (m/v)，然後用 2?5°C、4?6倍體積的注射用水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8?9% (m/v)，再 用0. 5mol/L的NaOH溶液調整製品pH值至6. 50?7. 30,用注射用水稀釋控制蛋白質含量 為 50. 0 ?100. Og/L ;
[0081] 步驟七：純化、過濾
[0082] 將濃縮後的製品轉移至球蛋白精製罐，用0. 0?4. 0°C的注射用水稀釋蛋白質 含量至1. 5?2. 0 % (m/v)，稀釋後在每IOOOkg製品加入磷酸二氫鈉I. 38kg和氯化鈉 0· 585kg，用0· 5mol/L氫氧化鈉溶液或lmol/L醋酸溶液調整pH值至6. 90?7. 10,用-15°C 冷媒調節溫度至〇. 〇?〇. 5°C，用-20°C以下95% (v/v)乙醇調節乙醇濃度至1.5?2. 5% (v/v)，用_15 °C冷媒調節最終溫度至-2. 0?-I. 0°C，在攪拌速率為50?IOOrpm下繼續 攪拌反應2?3小時，反應完全後按每IOOOkg懸液加入珍珠巖I. 0?2. 0kg，在攪拌速率 為50?IOOrpm下攪拌30分鐘，用-2. 0?-I. (TC的2 %乙醇300?500kg對整個壓濾管 道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間10?30分鐘，用-2. 0?2. (TC預冷潔淨壓縮空 氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100,規格：349*384mm)，使排放溫度 達到-2. 0?-L 0°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0· 200MPa，過濾速度為10?60kg/min， 濾出液溫度-2. O?-I. 0°C，懸液壓濾完設定吹掃時間為10?30分鐘，用50?200kg 2%乙醇對壓濾機進行清洗回收，回收液併入濾液罐，用-2. 0?2. (TC預冷潔淨壓縮空氣 吹乾濾板，用〇.5mol/L鹽酸溶液調節過濾上清液pH值至3. 80?4. 10 ;調節最終溫度 至-2. 0 ?-I. 0°C ;
[0083] 所用的2%乙醇配製方法為：每1000kg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙醇 18. 2kg，用-15°C冷媒調節溫度至-2. 0?-I. (TC ;
[0084] 步驟八：超濾透析、濃縮、配製
[0085] 將步驟七經pH和溫度調節後的濾出液經超濾濃縮至蛋白質含量為8?12% (m/ V)(進口壓力< 4. Obar，回流壓力< 2. Obar)，然後用2?5°C 10?13倍體積的注射用水 進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8?9% (m/v)，按最終製品每升含麥芽糖95?105g 加入麥芽糖，用〇· 5mol/L鹽酸溶液或0· 5mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至3. 90?4. 30， 用注射用水稀釋控制最終蛋白質含量為5. 20?5. 50% (m/v)，再進行除菌、除病毒過濾、低 PH孵放和除菌分裝，即得到靜注人免疫球蛋白半成品。
[0086] 產品檢測：本發明對製備得到的所述靜注人免疫球蛋白半成品的蛋白質含量、純 度、PH值、殘留的乙醇含量、多聚體含量、ACA (抗補體活性）、PKA (激肽釋放酶原激活劑）含 量均進行了檢測，並與國家標準（2010年版《中國藥典》）和現有技術進行了對比，其結果如 表1所示。
[0087] 實施例1
[0088] 步驟一：組分I+II+III沉澱的溶解
[0089] 將組分I+II+III56. 3kg用394. 54kg的0. 7°C的含0. 54kg磷酸二氫鈉的水溶 液（含磷酸二氫鈉〇. 54kg，注射用水394. Okg)攪拌6小時以上至完全溶解，得到組分 I+II+III 沉澱溶解液 450. 8kg。
[0090] 步驟二：分離組分I+III-1沉澱
[0091] 用lmol/L醋酸溶液3. Okg調節上述組分I+II+III沉澱溶解液pH值至5. 03， 用-15°C冷媒降溫至-0· 4°C，再加入-20. 8°C的95% (v/v)乙醇溶液28. 2kg，並用0· 5mol/ L氫氧化鈉溶液調整pH值至5. 12,用-15°C冷媒調節最後懸液溫度至-2. 6°C，以攪拌速度 為90rpm攪拌2小時，反應完全後加入娃藻土 I. 9kg和珍珠巖I. 2kg，以攪拌速度為80rpm 攪拌30分鐘，用8%平衡液927Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間 29分鐘，用-I. 7°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規 格680*779mm)，使排放溫度達到-I. 8°C。開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 20MPa，過濾 速度為79kg/min，濾出液溫度-2. (TC，懸液壓完設定吹掃時間49分鐘，用預冷潔淨壓縮空 氣吹乾濾板，用8%平衡液927Kg對壓濾機進行清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設定 吹掃時間82分鐘，再使用-2. 2°C預冷潔淨壓縮空氣進行吹乾，收集組分I+III-1上清液 1372. 7kg，組分I+III-1沉澱39. 4kg高壓滅菌後廢棄；
[0092] 所用的8%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下的95% (v/v) 乙醇77. 7kg得到8% (v/v)的乙醇溶液；然後在每1000kg 8%的乙醇溶液中加入磷酸氫二 鈉3. 58kg ;用冰醋酸調節pH值至5. 01 ;用-15°C冷媒調節溫度至-2. 8°C。
[0093] 步驟三：分離組分I+II1-2沉澱
[0094] 用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液0. 7kg調整組分I+III-1上清液pH值至5. 24,再加 入-21. 3°C的95% (v/v)乙醇102. 5kg，並用0· 5mol/L氫氧化鈉調整pH值至5· 20,用-15°C 冷媒調節反應溫度至-4. 9°C，以攪拌速度為77rpm攪拌2. 9小時，反應完全後加入硅藻土 3. 7kg和珍珠巖3. 7kg，以攪拌速度為75rpm攪拌30分鐘，用15 %平衡液982Kg對整個壓 濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間29分鐘，用-5. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾 板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規格680*779mm)，使排放溫度達到-3. 8°C。開始 懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 21MPa，過濾速度為78kg/min，濾出液溫度-4. 1°C，懸液壓完 設定吹掃時間46分鐘，用預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用15%平衡液879Kg對壓濾機進行 清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設定吹掃時間99分鐘，再使用-4. 5°C預冷潔淨壓縮 空氣進行吹乾，收集組分Ι+Π1-2上清液2345. 4kg，組分I+II1-2沉澱16. 9kg高壓滅菌廢 棄；
[0095] 所用的15%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙 醇158. 3kg得到15 % (v/v)的乙醇；然後在每IOOOkg 15 %乙醇中加入磷酸氫二鈉 3. 58kg ; 用冰醋酸調節pH值至5. 25 ;用-15°C冷媒調節溫度至-4. 8°C ;
[0096] 步驟四：分離組分II沉澱
[0097] 在上述組分I+III-2上清液中加入30% (m/v)氯化鈉溶液47. 8kg，用0. 5mol/L 氫氧化鈉溶液37. 5kg調節pH值至7. 07,再加入-20. 1°C的95% (v/v)乙醇154. 9kg，用 lmol/L醋酸調整pH值至7. 00,用-15°C冷媒調節反應溫度至-7. 2°C，繼續攪拌反應2. 3小 時，其攪拌速度為70RPM，反應完全後加入珍珠巖I. 9kg，攪拌30分鐘，其攪拌速度為70RPM， 用-6.8°C的20% (v/v)乙醇1536Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時 間30分鐘，用-8. 4°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規 格680*779mm)，使排放溫度達到-7. 0°C，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 15MPa，過濾速 度為70kg/min，濾出液溫度-6. 2°C，上清直接經過乙醇排放管路排放，當組分II懸液罐重 量低於200kg時，壓濾上清不再排放而直接進入懸液罐從而形成一個循環管路，循環IOmin 後上清開始繼續經過乙醇排放管路排放，待懸液全部壓濾完後，設定吹掃時間為100分鐘， 用-7. 7°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，收集組分II沉澱17. 4kg ;
[0098] 所用的20%乙醇配製方法為：每1000kg注射用水加入-20°C以下的95% (v/v)乙 醇225. 5kg得到20% (v/v)的乙醇，用-15°C冷媒調節溫度至-6. 8°C ;
[0099] 步驟五：組分II沉澱溶解、過濾
[0100] 將步驟四收集的組分II沉澱用104. 7kg的I. 4°C的注射用水溶解，在攪拌速率 為72rpm下攪拌4. 1小時至沉澱完全溶解，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液I. 4kg調整pH值至 7. 03 ;用-15°C冷媒調節溫度至2. (TC;繼續在攪拌速率為74rpm下攪拌反應3小時，溶解完 全後加入娃藻土 0. 19kg和珍珠巖0. 19kg，在攪拌速率為72rpm下攪拌30分鐘，用I. 3°C注 射用水432kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間18分鐘，用I. 9°C預冷 潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100,規格：349*384mm)， 使排放溫度達到2. 5°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 12MPa，過濾速度為20kg/min，濾出 液溫度2. 0 °C，溶解液壓完設定吹掃時間24分鐘，壓濾分離溶解懸液，用130kg 1. 0 °C注射 用水對壓濾機進行清洗回收，用I. 5°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，回收液併入濾液罐，設 定吹掃時間為19分鐘，用0. 0?4. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，得到沉澱I. 4kg，濾液 252. 4kg，用lmol/L醋酸溶液3. Okg調節濾液pH值至4. 00,過濾沉澱高壓滅菌廢棄，這時濾 液蛋白質含量為I. 53%，蛋白質總量為3. 91kg。
[0101] 步驟六：超濾、透析、濃縮
[0102] 用膜規格為30KD超濾器將步驟五得到的濾液濃縮至蛋白質含量為10% (m/v)， 重39. lkg，然後用3. 9°C、195. 5kg的注射用水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 6% (m/v)，再用0. 5mol/L的NaOH溶液2. 3kg調整製品pH值至6. 90,用注射用水稀釋控制蛋白 質含量為7. 1%，稀釋後重量為55. Ikg ;
[0103] 步驟七：純化、過濾
[0104] 將濃縮後的製品轉移至球蛋白精製罐，用1.2°C的注射用水稀釋蛋白質含量至 1. 83% (m/v)，稀釋後重量為213. 6kg，然後加入磷酸二氫鈉0. 29kg和氯化鈉0. 13kg，用 0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調整pH值至6. 97,用-15°C冷媒調節溫度至0. 2°C，再加入_21°C的 95% (v/v)乙醇3. 9kg，用-15°C冷媒調節最終溫度至_1.3°C，在攪拌速率為69rpm下繼續 攪拌反應2. 4小時，反應完全後加入珍珠巖0. 33kg，在攪拌速率為69rpm下攪拌30分鐘， 用-I. 7°C的2%乙醇424kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間18分 鍾，用-I. 4°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100,規 格：349*384mm)，使排放溫度達到-I. 4°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 12MPa，過濾速度為 30kg/min，濾出液溫度-I. 5°C，懸液壓濾完設定吹掃時間為20分鐘，用139kg 2%乙醇對壓 濾機進行清洗回收，回收液併入濾液罐，用-I. 4°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用0. 5mol/ L鹽酸溶液2. 3kg調節過濾上清液pH值至3. 95,調節最終溫度至-I. 3°C，得到沉澱I. 6kg， 濾液357. 8kg，其中濾液蛋白質含量為1. 04%。
[0105] 所用的2%乙醇配製方法為：每IOOOkg注射用水加入-20°C以下95% (v/v)乙醇 18. 2kg，用-15°C冷媒調節溫度至-I. 4°C ;
[0106] 步驟八：超濾透析、濃縮、配製
[0107] 將步驟七經pH和溫度調節後的濾出液經超濾濃縮至蛋白質含量為9. 6% (m/v) (重量為38·7kg)(進口壓力3·9bar，回流壓力l·8bar)，然後用3·7°C的 426kg的注射用水 進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 64% (蛋白質總量為3. 71kg) (m/v)，加入麥芽糖 6. 64kg，用0. 5mol/L鹽酸溶液調節pH值至3. 97,用注射用水稀釋控制最終蛋白質含量為 5. 33% (m/v)，配製後得到重量為69. 7kg、收率為6. 3kg/kL的血漿。配製完成後進行除菌、 除病毒過濾、低PH孵放和除菌分裝，即得到靜注人免疫球蛋白半成品。
[0108] 廣品檢測：
[0109] 所述靜注人免疫球蛋白半成品的蛋白質含量為5. 28%，其純度為98. 9%，PH值為 4.00，其中殘留的乙醇含量為小於0.0258/1001111，多聚體含量為1.1%，404(抗補體活性） 為6IU/ml，PKA (激肽釋放酶原激活劑）含量為小於10 %。
[0110] 實施例2
[0111] 步驟一：組分Ι+Π+ΙΙΙ沉澱的溶解
[0112] 將組分I+II+III沉澱56. Okg用I. 1°C的含磷酸二氫鈉的水溶液（含磷酸二氫鈉 0. 54kg，注射用水391. 7kg)攪拌6小時以上至完全溶解，得到組分I+II+III沉澱溶解液 448. 2kg。
[0113] 步驟二：分離組分I+III-1沉澱
[0114] 用lmol/L醋酸溶液2. 9kg調節上述組分I+II+III沉澱溶解液pH值至5. 10， 用-15°C冷媒降溫至-0. 3°C，再加入-20. 5°C的95% (v/v)乙醇溶液28. Okg，並用0. 5mol/ L氫氧化鈉溶液調整pH值至5. 13,用-15°C冷媒調節最後懸液溫度至-2. 9°C，以攪拌速度 為82rpm攪拌2. 8小時，反應完全後加入娃藻土 I. 9kg和珍珠巖I. 2kg，以攪拌速度為89rpm 攪拌30分鐘，用8%平衡液1044Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時 間26分鐘，用-2. 7°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50， 規格680*779mm)，使排放溫度達到-2. 0°C。開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 23MPa，過濾 速度為75kg/min，濾出液溫度-I. 9°C，懸液壓完設定吹掃時間48分鐘，用預冷潔淨壓縮空 氣吹乾濾板，用8%平衡液930Kg對壓濾機進行清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設定 吹掃時間100分鐘，再使用-I. 2°C預冷潔淨壓縮空氣進行吹乾，收集組分I+III-1上清液 1373. lkg，組分I+III-1沉澱39. 2kg高壓滅菌後廢棄；
[0115] 所用的8%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下的95% (v/v) 乙醇77. 7kg得到8% (v/v)的乙醇溶液；然後在每1000kg 8%的乙醇溶液中加入磷酸氫二 鈉3. 58kg ;用冰醋酸調節pH值至5. 04 ;用-15°C冷媒調節溫度至-2. 6°C。
[0116] 步驟三：分離組分I+II1-2沉澱
[0117] 用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液0. 7kg調整組分I+III-1上清液pH值至5. 17,再加 入-20. 4°C的95% (v/v)乙醇102. 5kg，並用0. 5mol/L氫氧化鈉調整pH值至5. 21，用-15°C 冷媒調節反應溫度至-4. (TC，以攪拌速度為72rpm攪拌2. 8小時，反應完全後加入硅藻土 3. 7kg和珍珠巖3. 7kg，以攪拌速度為77rpm攪拌30分鐘，用15 %平衡液924Kg對整個壓 濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間32分鐘，用-4. 5°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾 板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規格680*779mm)，使排放溫度達到-3. 9°C。開始 懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 21MPa，過濾速度為67kg/min，濾出液溫度-4. 3°C，懸液壓完 設定吹掃時間43分鐘，用預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用15%平衡液897Kg對壓濾機進行 清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設定吹掃時間81分鐘，再使用-4. 2°C預冷潔淨壓縮 空氣進行吹乾，收集組分Ι+Π1-2上清液2363. 9kg，組分I+II 1-2沉澱16. 8kg高壓滅菌廢 棄；
[0118] 所用的15%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙 醇158. 3kg得到15 % (v/v)的乙醇；然後在每IOOOkg 15 %乙醇中加入磷酸氫二鈉 3. 58kg ; 用冰醋酸調節pH值至5. 23 ;用-15°C冷媒調節溫度至-4. 7°C ;
[0119] 步驟四：分離組分II沉澱
[0120] 在上述組分I+III-2上清液中加入30% (m/v)氯化鈉溶液48. 2kg，用0. 5mol/L 氫氧化鈉溶液37. 8kg調節pH值至7. 04,再加入-2L (TC的95 % (v/v)乙醇156. lkg，用 lmol/L醋酸調整pH值至7. 01，用-15°C冷媒調節反應溫度至-6. 9°C，繼續攪拌反應3. 0小 時，其攪拌速度為78RPM，反應完全後加入珍珠巖2. 0kg，攪拌30分鐘，其攪拌速度為78RPM， 用-7. (TC的20% (v/v)乙醇1473Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時 間30分鐘，用-7. 8°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規 格680*779mm)，使排放溫度達到-6. 8°C，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 18MPa，過濾速 度為64kg/min，濾出液溫度-6. 5°C，上清直接經過乙醇排放管路排放，當組分II懸液罐重 量低於200kg時，壓濾上清不再排放而直接進入懸液罐從而形成一個循環管路，循環IOmin 後上清開始繼續經過乙醇排放管路排放，待懸液全部壓濾完後，設定吹掃時間為119分鐘， 用-8. 4°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，收集組分II沉澱17. 3kg ;
[0121] 所用的20%乙醇配製方法為：每1000kg注射用水加入-20°C以下的95% (v/v)乙 醇225. 5kg得到20% (v/v)的乙醇，用-15°C冷媒調節溫度至-6. (TC ;
[0122] 步驟五：組分II沉澱溶解、過濾
[0123] 將步驟四收集的組分II沉澱用104. Ikg的I. 1°C的注射用水溶解，在攪拌速率 為77rpm下攪拌4. 7小時至沉澱完全溶解，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液I. 4kg調整pH值至 6. 98 ;用-15°C冷媒調節溫度至I. 4°C;繼續在攪拌速率為79rpm下攪拌反應2. 9小時，溶解 完全後加入娃藻土 0. 18kg和珍珠巖0. 18kg，在攪拌速率為76rpm下攪拌30分鐘，用I. 8°C 注射用水371kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間22分鐘，用2. 3°C預 冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100,規格：349*384mm)， 使排放溫度達到I. 7°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 13MPa，過濾速度為20kg/min，濾出液 溫度2. 9°C，溶解液壓完設定吹掃時間19分鐘，壓濾分離溶解懸液，用122kg的I. 6°C注射 用水對壓濾機進行清洗回收，用I. 5°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，回收液併入濾液罐，設 定吹掃時間為25分鐘，用0. 0?4. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，得到沉澱I. 3kg，濾液 243. 7kg，用lmol/L醋酸溶液2. 9kg調節濾液pH值至3. 93,過濾沉澱高壓滅菌廢棄，這時濾 液蛋白質含量為1.57%，蛋白質總量為3. 87kg。
[0124] 步驟六：超濾、透析、濃縮
[0125] 用膜規格為30KD超濾器將步驟五得到的濾液濃縮至蛋白質含量為10. 2 % (m/v)， 重37. 9kg，然後用4. 0°C、189. 7kg的注射用水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 8% (m/v)，再用0. 5mol/L的NaOH溶液2. 2kg調整製品pH值至6. 91，用注射用水稀釋控制蛋白 質含量為7. 3%，稀釋後重量為53. Okg ;
[0126] 步驟七：純化、過濾
[0127] 將濃縮後的製品轉移至球蛋白精製罐，用I. (TC的注射用水稀釋蛋白質含量至 1. 83% (m/v)，稀釋後重量為211. 4kg，然後加入磷酸二氫鈉0. 29kg和氯化鈉0. 12kg，用 lmol/L醋酸溶液調整pH值至6. 93,用-15 °C冷媒調節溫度至0. 4°C，再加入-20. 2 °C的 95% (v/v)乙醇3. 8kg，用-15°C冷媒調節最終溫度至_1.5°C，在攪拌速率為66rpm下繼續 攪拌反應2. 8小時，反應完全後加入珍珠巖0. 32kg，在攪拌速率為63rpm下攪拌30分鐘， 用-I. 4°C的2%乙醇351kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間24分 鍾，用-0.7°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100， 規格：349*384mm)，使排放溫度達到-I. 6°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. llMPa，過濾速度 為30kg/min，濾出液溫度-I. 5°C，懸液壓濾完設定吹掃時間為21分鐘，用134kg的2 %乙 醇對壓濾機進行清洗回收，回收液併入濾液罐，用-I. 5°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用 0. 5mol/L鹽酸溶液2. 2kg調節過濾上清液pH值至3. 93,調節最終溫度至-I. 5°C，得到沉澱 1. 6kg，濾液350. 5kg，其中濾液蛋白質含量為1. 05%。
[0128] 所用的2%乙醇配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙醇 18. 2kg，用-15°C冷媒調節溫度至-I. 4°C ;
[0129] 步驟八：超濾透析、濃縮、配製
[0130] 將步驟七經pH和溫度調節後的濾出液經超濾濃縮至蛋白質含量為10. 3% (m/v) (重量為35. 7kg)(進口壓力3. 3bar，回流壓力I. Obar)，然後用3. 2°C的393kg的注射用水 進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 43% (蛋白質總量為3. 68kg) (m/v)，加入麥芽糖 6. 54kg，用0. 5mol/L鹽酸溶液調節pH值至3. 96,用注射用水稀釋控制最終蛋白質含量為 5. 35% (m/v)，配製後得到重量為68. 7kg，收率為6. 2kg/kL血漿。配製完成後進行除菌、除 病毒過濾、低PH孵放和除菌分裝，即得到靜注人免疫球蛋白半成品。
[0131] 產品檢測：
[0132] 所述靜注人免疫球蛋白半成品的蛋白質含量為5. 34%，其純度為98. 8%，PH值為 4. 01，其中殘留的乙醇含量為小於0. 025g/100ml，多聚體含量為1. 2%，ACA(抗補體活性） 為8IU/ml，PKA (激肽釋放酶原激活劑）含量為小於10 %。
[0133] 實施例3
[0134] 步驟一：組分I+II+III沉澱的溶解
[0135] 將組分I+II+III沉澱54. 6kg用3. 1°C的含磷酸二氫鈉的水溶液（含磷酸二氫鈉 0. 53kg，注射用水382. Ikg)攪拌6小時以上至完全溶解，得到組分I+II+III沉澱溶解液 437. 3kg。
[0136] 步驟二：分離組分I+III-1沉澱
[0137] 用lmol/L醋酸溶液2. 9kg調節上述組分I+II+III沉澱溶解液pH值至5. 06， 用-15°C冷媒降溫至-0· 2°C，再加入-20. 8°C的95% (v/v)乙醇溶液27. 3kg，並用0· 5mol/ L氫氧化鈉溶液調整pH值至5. 19,用-15°C冷媒調節最後懸液溫度至-3. (TC，以攪拌速 度為83rpm攪拌2. 1小時，反應完全後加入娃藻土 I. 9kg和珍珠巖I. 2kg，以攪拌速度為 SOrpm攪拌30分鐘，用8%平衡液919Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃 時間34分鐘，用-2. 5°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50， 規格680*779mm)，使排放溫度達到-2. 2°C。開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 24MPa，過濾 速度為63kg/min，濾出液溫度-2. 4°C，懸液壓完設定吹掃時間49分鐘，用預冷潔淨壓縮空 氣吹乾濾板，用8%平衡液897Kg對壓濾機進行清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設定 吹掃時間89分鐘，再使用-I. 6°C預冷潔淨壓縮空氣進行吹乾，收集組分I+III-1上清液 1329. 3kg，組分I+III-1沉澱38. 2kg高壓滅菌後廢棄；
[0138] 所用的8%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入-20°C以下的95% (v/v) 乙醇77. 7kg得到8% (v/v)的乙醇溶液；然後在每1000kg 8%的乙醇溶液中加入磷酸氫二 鈉3. 58kg ;用冰醋酸調節pH值至5. 11 ;用-15°C冷媒調節溫度至-2. 1°C。
[0139] 步驟三：分離組分I+II1-2沉澱
[0140] 用0· 5mol/L氫氧化鈉溶液0· 7kg調整組分I+III-1上清液pH值至5. 20,再加 入-21. 6°C的95% (v/v)乙醇99. 3kg，並用0· 5mol/L氫氧化鈉調整pH值至5. 23,用-15°C 冷媒調節反應溫度至-4. 5°C，以攪拌速度為72rpm攪拌2. 5小時，反應完全後加入娃藻土 3. 6kg和珍珠巖3. 6kg，以攪拌速度為75rpm攪拌30分鐘，用15 %平衡液1012Kg對整個壓 濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間35分鐘，用-5. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾 板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規格680*779mm)，使排放溫度達到-3. 5°C。開始 懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 24MPa，過濾速度為71kg/min，濾出液溫度-4. 1°C，懸液壓完 設定吹掃時間40分鐘，用預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用15%平衡液890Kg對壓濾機進行 清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設定吹掃時間99分鐘，再使用-4. 8°C預冷潔淨壓縮 空氣進行吹乾，收集組分Ι+ΠΙ-2上清液2310. 0kg，組分I+III-2沉澱16. 4kg高壓滅菌廢 棄；
[0141] 所用的15%平衡液配製方法為：每1000kg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙 醇158. 3kg得到15 % (v/v)的乙醇；然後在每IOOOkg 15 %乙醇中加入磷酸氫二鈉3. 58kg ; 用冰醋酸調節pH值至5. 23 ;用-15°C冷媒調節溫度至-4. 3°C ;
[0142] 步驟四：分離組分II沉澱
[0143] 在上述組分I+III-2上清液中加入30% (m/v)氯化鈉溶液47. 1kg，用0. 5mol/L 氫氧化鈉溶液37. Okg調節pH值至7. 07,再加入-20. 1°C的95% (v/v)乙醇152. 6kg，用 lmol/L醋酸調整pH值至7. 07,用-15°C冷媒調節反應溫度至-7. 2°C，繼續攪拌反應2. 3小 時，其攪拌速度為78RPM，反應完全後加入珍珠巖I. 9kg，攪拌30分鐘，其攪拌速度為78RPM， 用-6.4°C的20% (v/v)乙醇1477Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時 間30分鐘，用-7. 9°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規 格680*779mm)，使排放溫度達到-6. 8°C，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 20MPa，過濾速 度為79kg/min，濾出液溫度-6. 4°C，上清直接經過乙醇排放管路排放，當組分II懸液罐重 量低於200kg時，壓濾上清不再排放而直接進入懸液罐從而形成一個循環管路，循環IOmin 後上清開始繼續經過乙醇排放管路排放，待懸液全部壓濾完後，設定吹掃時間為119分鐘， 用-8. 1°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，收集組分II沉澱16. 9kg ;
[0144] 所用的20%乙醇配製方法為：每1000kg注射用水加入_20°C以下的95% (v/v)乙 醇225. 5kg得到20% (v/v)的乙醇，用-15°C冷媒調節溫度至-6. 4°C ;
[0145] 步驟五：組分II沉澱溶解、過濾
[0146] 將步驟四收集的組分II沉澱用101. 5kg的I. 5°C的注射用水溶解，在攪拌速率 為72rpm下攪拌4. 9小時至沉澱完全溶解，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液I. 3kg調整pH值至 7. 04 ;用-15°C冷媒調節溫度至I. 6°C;繼續在攪拌速率為74rpm下攪拌反應2. 3小時，溶解 完全後加入娃藻土 0. 18kg和珍珠巖0. 18kg，在攪拌速率為76rpm下攪拌30分鐘，用I. 5°C 注射用水408kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間15分鐘，用2. 3°C預 冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100,規格：349*384mm)， 使排放溫度達到2. 0°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. lOMPa，過濾速度為29kg/min，濾出液 溫度2. 4°C，溶解液壓完設定吹掃時間19分鐘，壓濾分離溶解懸液，用128kg的I. 1°C注射 用水對壓濾機進行清洗回收，用2. 1°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，回收液併入濾液罐，設 定吹掃時間為18分鐘，用0. 0?4. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，得到沉澱I. 4kg，濾液 246. 7kg，用lmol/L醋酸溶液3. Okg調節濾液pH值至3. 94,過濾沉澱高壓滅菌廢棄，這時濾 液蛋白質含量為1.59%，蛋白質總量為3. 98kg。
[0147] 步驟六：超濾、透析、濃縮
[0148] 用膜規格為30KD超濾器將步驟五得到的濾液濃縮至蛋白質含量為10. 3% (m/v)， 重38. 6kg，然後用3. 6°C、193. Okg的注射用水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 5% (m/v)，再用0. 5mol/L的NaOH溶液2. 2kg調整製品pH值至6. 99,用注射用水稀釋控制蛋白 質含量為7. 9%，稀釋後重量為50. 3kg ;
[0149] 步驟七：純化、過濾
[0150] 將濃縮後的製品轉移至球蛋白精製罐，用I. 1°C的注射用水稀釋蛋白質含量至 1. 74% (m/v)，稀釋後重量為228. 5kg，然後加入磷酸二氫鈉0. 32kg和氯化鈉0. 13kg，用 lmol/L醋酸溶液調整pH值至6. 93,用-15 °C冷媒調節溫度至0. TC，再加入-21. 7 °C的 95% (v/v)乙醇4. 2kg，用-15°C冷媒調節最終溫度至_1.8°C，在攪拌速率為62rpm下繼續 攪拌反應2. 1小時，反應完全後加入珍珠巖0. 35kg，在攪拌速率為69rpm下攪拌30分鐘， 用-I. 5°C的2%乙醇359kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間15分 鍾，用-〇· 8°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100， 規格：349*384mm)，使排放溫度達到-I. 5°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 15MPa，過濾速度 為26kg/min，濾出液溫度-I. 7°C，懸液壓濾完設定吹掃時間為19分鐘，用148kg的2 %乙 醇對壓濾機進行清洗回收，回收液併入濾液罐，用-〇. 6°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用 0. 5mol/L鹽酸溶液2. 2kg調節過濾上清液pH值至3. 94,調節最終溫度至-I. 6°C，得到沉澱 1. 7kg，濾液381. 8kg，其中濾液蛋白質含量為0. 99%。
[0151] 所用的2%乙醇配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙醇 18. 2kg，用-15°C冷媒調節溫度至-I. 5°C ;
[0152] 步驟八：超濾透析、濃縮、配製
[0153] 將步驟七經pH和溫度調節後的濾出液經超濾濃縮至蛋白質含量為9.9% (m/v) (重量為38·2kg)(進口壓力3·2bar，回流壓力l·5bar)，然後用3·3°C的 420kg的注射用水 進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 79% (m/v)(蛋白質總量為3. 78kg)，加入麥芽糖 6. 72kg，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至4. 04,用注射用水稀釋控制最終蛋白質含量 為5.35% (m/v)，配製後得到重量為70. 6kg，收率為6. 4kg/kL的血漿。配製完成後進行除 菌、除病毒過濾、低PH孵放和除菌分裝，即得到靜注人免疫球蛋白半成品。
[0154] 產品檢測：
[0155] 所述靜注人免疫球蛋白半成品的蛋白質含量為5. 28%，其純度為98. 8%，PH值為 4. 03,其中殘留的乙醇含量為小於0. 025g/100ml，多聚體含量為1. 0%，ACA(抗補體活性） 為6IU/ml，PKA (激肽釋放酶原激活劑）含量為小於10 %。
[0156] 實施例4
[0157] 步驟一：組分II+III沉澱的溶解
[0158] 將組分II+III沉澱55. 3kg用3. 9°C的含磷酸二氫鈉的水溶液（含磷酸二氫鈉 0. 53kg，注射用水386. 8kg)攪拌6小時以上至完全溶解，得到組分II+III沉澱溶解液 442. 6kg。
[0159] 步驟二：分離組分III-I沉澱
[0160] 用lmol/L醋酸溶液2. 9kg調節上述組分II+III沉澱溶解液pH值至5. 01， 用-15°C冷媒降溫至-0· 5°C，再加入-22. (TC的95% (v/v)乙醇溶液27. 7kg，並用0· 5mol/ L氫氧化鈉溶液調整pH值至5. 18,用-15°C冷媒調節最後懸液溫度至-2. 5°C，以攪拌速度 為90rpm攪拌2. 5小時，反應完全後加入娃藻土 I. 9kg和珍珠巖I. 2kg，以攪拌速度為80rpm 攪拌30分鐘，用8%平衡液1002Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時 間26分鐘，用-3. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50， 規格680*779mm)，使排放溫度達到-2. 2°C。開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 25MPa，過 濾速度為69kg/min，濾出液溫度-I. 6°C，懸液壓完設定吹掃時間46分鐘，用預冷潔淨壓縮 空氣吹乾濾板，用8%平衡液931Kg對壓濾機進行清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設 定吹掃時間80分鐘，再使用-2. 3°C預冷潔淨壓縮空氣進行吹乾，收集組分III-I上清液 1368. 6kg，組分III-I沉澱38. 7kg高壓滅菌後廢棄；
[0161] 所用的8%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入-20°C以下的95% (v/v) 乙醇77. 7kg得到8% (v/v)的乙醇溶液；然後在每1000kg 8%的乙醇溶液中加入磷酸氫二 鈉3. 58kg ;用冰醋酸調節pH值至5. 00 ;用-15°C冷媒調節溫度至-2. 2°C。
[0162] 步驟三：分離組分II1-2沉澱
[0163] 用0· 5mol/L氫氧化鈉溶液0· 7kg調整組分III-I上清液pH值至5. 16，再加 入-20. 2°C的95% (v/v)乙醇102. 2kg，並用0· 5mol/L氫氧化鈉調整pH值至5. 22,用-15°C 冷媒調節反應溫度至-4. 9°C，以攪拌速度為79rpm攪拌2. 4小時，反應完全後加入硅藻土 3. 7kg和珍珠巖3. 7kg，以攪拌速度為75rpm攪拌30分鐘，用15 %平衡液917Kg對整個壓 濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間32分鐘，用-4. 2°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾 板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規格680*779mm)，使排放溫度達到-4. 5°C。開始 懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 23MPa，過濾速度為71kg/min，濾出液溫度-4. 4°C，懸液壓完 設定吹掃時間42分鐘，用預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用15%平衡液851Kg對壓濾機進行 清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設定吹掃時間94分鐘，再使用-4. 3°C預冷潔淨壓縮 空氣進行吹乾，收集組分III-2上清液2313. 2kg，組分III-2沉澱16. 6kg高壓滅菌廢棄；
[0164] 所用的15%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙 醇158. 3kg得到15 % (v/v)的乙醇；然後在每IOOOkg 15 %乙醇中加入磷酸氫二鈉3. 58kg ; 用冰醋酸調節pH值至5. 16 ;用-15°C冷媒調節溫度至-4. (TC ;
[0165] 步驟四：分離組分II沉澱
[0166] 在上述組分組分III-2上清液中加入30% (m/v)氯化鈉溶液47. 2kg，用0. 5mol/ L氫氧化鈉溶液37. Okg調節pH值至7. 07,再加入-20. (TC的95% (v/v)乙醇152. 8kg，用 lmol/L醋酸調整pH值至7. 06,用-15°C冷媒調節反應溫度至-7. 5°C，繼續攪拌反應2. 3小 時，其攪拌速度為79RPM，反應完全後加入珍珠巖I. 9kg，攪拌30分鐘，其攪拌速度為79RPM， 用-6. 1°C的20% (v/v)乙醇1517Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時 間30分鐘，用-7. 6°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規 格680*779mm)，使排放溫度達到-6. 3°C，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 20MPa，過濾速 度為61kg/min，濾出液溫度-6. 3°C，上清直接經過乙醇排放管路排放，當組分II懸液罐重 量低於200kg時，壓濾上清不再排放而直接進入懸液罐從而形成一個循環管路，循環IOmin 後上清開始繼續經過乙醇排放管路排放，待懸液全部壓濾完後，設定吹掃時間為107分鐘， 用-7. 8°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，收集組分II沉澱17. Ikg ;
[0167] 所用的20%乙醇配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下的95% (v/v)乙 醇225. 5kg得到20% (v/v)的乙醇，用-15°C冷媒調節溫度至-6. 1°C ;
[0168] 步驟五：組分II沉澱溶解、過濾
[0169] 將步驟四收集的組分II沉澱用102. 8kg的I. 5°C的注射用水溶解，在攪拌速率 為76rpm下攪拌4. 6小時至沉澱完全溶解，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液I. 3kg調整pH值至 6. 97 ;用-15°C冷媒調節溫度至I. 8°C;繼續在攪拌速率為80rpm下攪拌反應2. 9小時，溶解 完全後加入娃藻土 0. 18kg和珍珠巖0. 18kg，在攪拌速率為76rpm下攪拌30分鐘，用I. 8°C 注射用水350kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間15分鐘，用I. 9°C預 冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100,規格：349*384mm)， 使排放溫度達到2. 3°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. llMPa，過濾速度為29kg/min，濾出液 溫度2. 4°C，溶解液壓完設定吹掃時間22分鐘，壓濾分離溶解懸液，用118kg的I. 6°C注射 用水對壓濾機進行清洗回收，用2. 1°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，回收液併入濾液罐，設 定吹掃時間為25分鐘，用0. 0?4. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，得到沉澱I. 5kg，濾液 238. 2kg，用lmol/L醋酸溶液2. 9kg調節濾液pH值至3. 90,過濾沉澱高壓滅菌廢棄，這時濾 液蛋白質含量為1.65%，蛋白質總量為3. 98kg。
[0170] 步驟六：超濾、透析、濃縮
[0171] 用膜規格為30KD超濾器將步驟五得到的濾液濃縮至蛋白質含量為10. 2 % (m/v)， 重39. 0kg，然後用3. 4°C、195. 2kg的注射用水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 9% (m/v)，再用0. 5mol/L的NaOH溶液2. Ikg調整製品pH值至6. 99,用注射用水稀釋控制蛋白 質含量為8. 0%，稀釋後重量為49. 8kg ;
[0172] 步驟七：純化、過濾
[0173] 將濃縮後的製品轉移至球蛋白精製罐，用1.6°C的注射用水稀釋蛋白質含量至 1. 85% (m/v)，稀釋後重量為215. 2kg，然後加入磷酸二氫鈉0. 30kg和氯化鈉0. 13kg，用 lmol/L醋酸溶液調整pH值至6. 97,用-15 °C冷媒調節溫度至0. 2 °C，再加入-21. 8 °C的 95% (v/v)乙醇3. 9kg，用-15°C冷媒調節最終溫度至_1.5°C，在攪拌速率為68rpm下繼續 攪拌反應2. 3小時，反應完全後加入珍珠巖0. 33kg，在攪拌速率為60rpm下攪拌30分鐘， 用-I. 7°C的2%乙醇371kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間23分 鍾，用-I. 2°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100， 規格：349*384mm)，使排放溫度達到-I. 5°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 13MPa，過濾速度 為23kg/min，濾出液溫度-I. 7°C，懸液壓濾完設定吹掃時間為15分鐘，用137kg的2%乙 醇對壓濾機進行清洗回收，回收液併入濾液罐，用-〇. 6°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用 0. 5mol/L鹽酸溶液2. Ikg調節過濾上清液pH值至3. 94,調節最終溫度至-I. 6°C，得到沉澱 1. 6kg，濾液357. 2kg，其中濾液蛋白質含量為1. 06%。
[0174] 所用的2%乙醇配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙醇 18. 2kg，用-15°C冷媒調節溫度至-I. 3°C ;
[0175] 步驟八：超濾透析、濃縮、配製
[0176] 將步驟七經pH和溫度調節後的濾出液經超濾濃縮至蛋白質含量為9. 8% (m/v) (重量為38·6kg)(進口壓力3·9bar，回流壓力l·7bar)，然後用3·l°C的 425kg的注射用水 進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 60% (蛋白質總量為3. 78kg) (m/v)，加入麥芽糖 6. 85kg，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至3. 99,用注射用水稀釋控制最終蛋白質含量 為5. 26% (m/v)，配製後得到重量為71. 9kg，收率為6. 4kg/kL的血漿。配製完成後進行除 菌、除病毒過濾、低PH孵放和除菌分裝，即得到靜注人免疫球蛋白半成品。
[0177] 產品檢測：
[0178] 所述靜注人免疫球蛋白半成品的蛋白質含量為5. 30%，其純度為99. 0%，PH值為 3. 95,其中殘留的乙醇含量為小於0. 025g/100ml，多聚體含量為1. 3%，ACA(抗補體活性） 為6IU/ml，PKA (激肽釋放酶原激活劑）含量為小於10 %。
[0179] 實施例5
[0180] 步驟一：組分II+III沉澱的溶解
[0181] 將組分II+III沉澱54. 8kg用1.4°C的含磷酸二氫鈉的水溶液（含磷酸二氫鈉 0. 53kg，注射用水383. 9kg)攪拌6小時以上至完全溶解，得到組分II+III沉澱溶解液 439.3kg。
[0182] 步驟二：分離組分I+III-I (或組分II1-1)沉澱
[0183] 用lmol/L醋酸溶液2. 9kg調節上述組分II+III沉澱溶解液pH值至5. 03， 用-15°C冷媒降溫至-0· 2°C，再加入-21. 4°C的95% (v/v)乙醇溶液27. 5kg，並用0· 5mol/ L氫氧化鈉溶液調整pH值至5. 16,用-15°C冷媒調節最後懸液溫度至-2. 6°C，以攪拌速 度為84rpm攪拌2. 9小時，反應完全後加入娃藻土 I. 9kg和珍珠巖I. 2kg，以攪拌速度為 86rpm攪拌30分鐘，用8%平衡液910Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃 時間26分鐘，用-2. 6°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50， 規格680*779mm)，使排放溫度達到-I. 9°C。開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 25MPa，過 濾速度為62kg/min，濾出液溫度-I. 6°C，懸液壓完設定吹掃時間42分鐘，用預冷潔淨壓縮 空氣吹乾濾板，用8%平衡液889Kg對壓濾機進行清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設 定吹掃時間93分鐘，再使用-2. 8°C預冷潔淨壓縮空氣進行吹乾，收集組分III-I上清液 1323. 3kg，組分III-I沉澱38. 4kg高壓滅菌後廢棄；
[0184] 所用的8%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下的95% (v/v) 乙醇77. 7kg得到8% (v/v)的乙醇溶液；然後在每1000kg 8%的乙醇溶液中加入磷酸氫二 鈉3. 58kg ;用冰醋酸調節pH值至5. 13 ;用-15°C冷媒調節溫度至-2. 8°C。
[0185] 步驟三：分離組分II1-2沉澱
[0186] 用0· 5mol/L氫氧化鈉溶液0· 7kg調整組分III-I上清液pH值至5. 21，再加 入-20. 6°C的95% (v/v)乙醇98. 8kg，並用0· 5mol/L氫氧化鈉調整pH值至5. 23,用-15°C 冷媒調節反應溫度至-4. 5°C，以攪拌速度為78rpm攪拌2. 7小時，反應完全後加入娃藻土 3. 6kg和珍珠巖3. 6kg，以攪拌速度為77rpm攪拌30分鐘，用15 %平衡液933Kg對整個壓 濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間32分鐘，用-4. 2°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾 板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規格680*779mm)，使排放溫度達到-3. 6°C。開始 懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 20MPa，過濾速度為60kg/min，濾出液溫度-4. (TC，懸液壓完 設定吹掃時間49分鐘，用預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用15%平衡液886Kg對壓濾機進行 清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設定吹掃時間90分鐘，再使用-4. (TC預冷潔淨壓縮 空氣進行吹乾，收集組分II1-2上清液2299. 4kg，組分II1-2沉澱16. 5kg高壓滅菌廢棄；
[0187] 所用的15%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙 醇158. 3kg得到15 % (v/v)的乙醇；然後在每IOOOkg 15 %乙醇中加入磷酸氫二鈉 3. 58kg ; 用冰醋酸調節pH值至5. 21 ;用-15°C冷媒調節溫度至-4. 9°C ;
[0188] 步驟四：分離組分II沉澱
[0189] 在上述組分組分III-2上清液中加入30% (m/v)氯化鈉溶液46. 9kg，用0. 5mol/ L氫氧化鈉溶液36. 8kg調節pH值至7. 10,再加入-20. 7°C的95% (v/v)乙醇151. 9kg，用 0. 5mol/L氫氧化鈉調整pH值至7. 02,用-15°C冷媒調節反應溫度至-7. 2°C，繼續攪拌反應 2. 7小時，其攪拌速度為72RPM，反應完全後加入珍珠巖I. 9kg，攪拌30分鐘，其攪拌速度為 72RPM，用-6.4°C的20% (v/v)乙醇1501Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定 吹掃時間30分鐘，用-7. 9°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號： PX50,規格680*779mm)，使排放溫度達到-6. 0°C，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 20MPa， 過濾速度為72kg/min，濾出液溫度-6. 7°C，上清直接經過乙醇排放管路排放，當組分II懸 液罐重量低於200kg時，壓濾上清不再排放而直接進入懸液罐從而形成一個循環管路，循 環IOmin後上清開始繼續經過乙醇排放管路排放，待懸液全部壓濾完後，設定吹掃時間為 106分鐘，用-8. 3°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，收集組分II沉澱17. Okg ;
[0190] 所用的20%乙醇配製方法為：每IOOOkg注射用水加入-20°C以下的95% (v/v)乙 醇225. 5kg得到20% (v/v)的乙醇，用-15°C冷媒調節溫度至-6. (TC ;
[0191] 步驟五：組分II沉澱溶解、過濾
[0192] 將步驟四收集的組分II沉澱用102. Okg的I. 9°C的注射用水溶解，在攪拌速率 為78rpm下攪拌5. 0小時至沉澱完全溶解，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液I. 3kg調整pH值至 6. 95 ;用-15°C冷媒調節溫度至I. 9°C;繼續在攪拌速率為74rpm下攪拌反應3. 0小時，溶解 完全後加入娃藻土 0. 18kg和珍珠巖0. 18kg，在攪拌速率為71rpm下攪拌30分鐘，用I. 6°C 注射用水368kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間15分鐘，用I. 9°C預 冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100,規格：349*384mm)， 使排放溫度達到I. 8°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. lOMPa，過濾速度為30kg/min，濾出液 溫度2. 8°C，溶解液壓完設定吹掃時間18分鐘，壓濾分離溶解懸液，用117kg的I. 7°C注射 用水對壓濾機進行清洗回收，用2. 5°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，回收液併入濾液罐，設 定吹掃時間為15分鐘，用0. 0?4. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，得到沉澱I. 4kg，濾液 236. 3kg，用lmol/L醋酸溶液2. 8kg調節濾液pH值至4. 00,過濾沉澱高壓滅菌廢棄，這時濾 液蛋白質含量為1.65%，蛋白質總量為3. 93kg。
[0193] 步驟六：超濾、透析、濃縮
[0194] 用膜規格為30KD超濾器將步驟五得到的濾液濃縮至蛋白質含量為10. 4% (m/v)， 重37. 8kg，然後用3. 5°C、189. Ikg的注射用水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 7% (m/v)，再用0. 5mol/L的NaOH溶液2. Ikg調整製品pH值至6. 97,用注射用水稀釋控制蛋白 質含量為7. 9%，稀釋後重量為49. 8kg ;
[0195] 步驟七：純化、過濾
[0196] 將濃縮後的製品轉移至球蛋白精製罐，用1.5°C的注射用水稀釋蛋白質含量至 1. 69% (m/v)，稀釋後重量為232. 8kg，然後加入磷酸二氫鈉0. 32kg和氯化鈉0. 14kg，用 lmol/L醋酸溶液調整pH值至6. 96,用-15 °C冷媒調節溫度至0. 5 °C，再加入-21. 8 °C的 95% (v/v)乙醇4. 2kg，用-15°C冷媒調節最終溫度至_1.4°C，在攪拌速率為67rpm下繼續 攪拌反應2. 3小時，反應完全後加入珍珠巖0. 36kg，在攪拌速率為61rpm下攪拌30分鐘， 用-I. 7°C的2%乙醇384kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間16分 鍾，用-I. 5°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100， 規格：349*384mm)，使排放溫度達到-I. 3°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. lOMPa，過濾速度 為27kg/min，濾出液溫度-I. 7°C，懸液壓濾完設定吹掃時間為24分鐘，用129kg的2 %乙 醇對壓濾機進行清洗回收，回收液併入濾液罐，用-I. 2°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用 0. 5mol/L鹽酸溶液2. Ikg調節過濾上清液pH值至3. 95,調節最終溫度至-I. 7°C，得到沉澱 1.8kg，濾液367. lkg，其中濾液蛋白質含量為1.02%。
[0197] 所用的2%乙醇配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙醇 18. 2kg，用-15°C冷媒調節溫度至-I. 6°C ;
[0198] 步驟八：超濾透析、濃縮、配製
[0199] 將步驟七經pH和溫度調節後的濾出液經超濾濃縮至蛋白質含量為10. 4% (m/v) (重量為35.91^)(進口壓力3.你&1'，回流壓力1.%&1〇，然後用3.6°〇的3951^的注射用水 進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 49% (m/v)(蛋白質總量為3. 74kg)，加入麥芽糖 6. 70kg，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至4. 01，用注射用水稀釋控制最終蛋白質含量 為5.31 % (m/v)，配製後得到重量為70. 4kg，收率為6. 3kg/kL的血漿。配製完成後進行除 菌、除病毒過濾、低PH孵放和除菌分裝，即得到靜注人免疫球蛋白半成品。
[0200] 產品檢測：
[0201] 所述靜注人免疫球蛋白半成品的蛋白質含量為5. 28%，其純度為99. 0%，PH值為 4. 02,其中殘留的乙醇含量為小於0. 025g/100ml，多聚體含量為1. 2%，ACA(抗補體活性） 為8IU/ml，PKA (激肽釋放酶原激活劑）含量為小於10 %。
[0202] 實施例6
[0203] 步驟一：組分II+III沉澱的溶解
[0204] 將組分II+III沉澱55. 4kg用I. 3°C的含磷酸二氫鈉的水溶液（含磷酸二氫鈉 0. 53kg，注射用水387. 7kg)攪拌6小時以上至完全溶解，得到組分II+III沉澱溶解液 443. 6kg。
[0205] 步驟二：分離組分III-I沉澱
[0206] 用lmol/L醋酸溶液2. 9kg調節上述組分II+III沉澱溶解液pH值至5. 03， 用-15°C冷媒降溫至-0· 2°C，再加入-20. 8°C的95% (v/v)乙醇溶液27. 7kg，並用0· 5mol/ L氫氧化鈉溶液調整pH值至5. 18,用-15°C冷媒調節最後懸液溫度至-3. (TC，以攪拌速度 為86rpm攪拌2. 4小時，反應完全後加入娃藻土 I. 9kg和珍珠巖I. 2kg，以攪拌速度為86rpm 攪拌30分鐘，用8%平衡液1022Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時 間26分鐘，用-2. 6°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50， 規格680*779mm)，使排放溫度達到-I. 6°C。開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 21MPa，過 濾速度為74kg/min，濾出液溫度-2. 2°C，懸液壓完設定吹掃時間42分鐘，用預冷潔淨壓縮 空氣吹乾濾板，用8%平衡液856Kg對壓濾機進行清洗回收，回收液併入壓濾上清液罐，設 定吹掃時間95分鐘，再使用-2. 9°C預冷潔淨壓縮空氣進行吹乾，收集組分III-I上清液 1294. 5kg，組分III-I沉澱38. 8kg高壓滅菌後廢棄；
[0207] 所用的8%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入-20°C以下的95% (v/v) 乙醇77. 7kg得到8% (v/v)的乙醇溶液；然後在每1000kg 8%的乙醇溶液中加入磷酸氫二 鈉3. 58kg ;用冰醋酸調節pH值至5. 01 ;用-15°C冷媒調節溫度至-2. 5°C。
[0208] 步驟三：分離組分II1-2沉澱
[0209] 用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液0. 6kg調整組分III-I上清液pH值至5. 24,再加 入-21. 8°C的95% (v/v)乙醇96. 7kg，並用lmol/L醋酸調整pH值至5.23,用-15°C冷媒調 節反應溫度至-5. 0°C，以攪拌速度為77rpm攪拌2. 0小時，反應完全後加入娃藻土 3. 5kg和 珍珠巖3. 5kg，以攪拌速度為79rpm攪拌30分鐘，用15 %平衡液997Kg對整個壓濾管路及 壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間30分鐘，用-4. 4°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國 Begerow公司生產，型號：PX50,規格680*779mm)，使排放溫度達到-4. 1°C。開始懸液壓濾， 控制過濾壓力為0. 20MPa，過濾速度為71kg/min，濾出液溫度-3. 9°C，懸液壓完設定吹掃時 間45分鐘，用預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用15%平衡液933Kg對壓濾機進行清洗回收， 回收液併入壓濾上清液罐，設定吹掃時間87分鐘，再使用-4. (TC預冷潔淨壓縮空氣進行吹 幹，收集組分III-2上清液2315. 2kg，組分III-2沉澱16. 6kg高壓滅菌廢棄；
[0210] 所用的15%平衡液配製方法為：每IOOOkg注射用水加入-20°C以下95% (v/v)乙 醇158. 3kg得到15 % (v/v)的乙醇；然後在每IOOOkg 15 %乙醇中加入磷酸氫二鈉3. 58kg ; 用冰醋酸調節pH值至5. 17 ;用-15°C冷媒調節溫度至-4. 1°C ;
[0211] 步驟四：分離組分II沉澱
[0212] 在上述組分組分III-2上清液中加入30% (m/v)氯化鈉溶液47. 2kg，用0. 5mol/ L氫氧化鈉溶液37. Okg調節pH值至7. 09,再加入-20. 5°C的95% (v/v)乙醇152. 9kg，用 lmol/L醋酸調整pH值至7. 04,用-15°C冷媒調節反應溫度至-7. 5°C，繼續攪拌反應2. 6小 時，其攪拌速度為74RPM，反應完全後加入珍珠巖I. 9kg，攪拌30分鐘，其攪拌速度為74RPM， 用-6. (TC的20% (v/v)乙醇1587Kg對整個壓濾管路及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時 間30分鐘，用-8. 3°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：PX50,規 格680*779mm)，使排放溫度達到-6. 6°C，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 16MPa，過濾速 度為65kg/min，濾出液溫度-6. (TC，上清直接經過乙醇排放管路排放，當組分II懸液罐重 量低於200kg時，壓濾上清不再排放而直接進入懸液罐從而形成一個循環管路，循環IOmin 後上清開始繼續經過乙醇排放管路排放，待懸液全部壓濾完後，設定吹掃時間為105分鐘， 用-8. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，收集組分II沉澱17. 2kg ;
[0213] 所用的20%乙醇配製方法為：每1000kg注射用水加入_20°C以下的95% (v/v)乙 醇225. 5kg得到20% (v/v)的乙醇，用-15°C冷媒調節溫度至-6. 5°C ;
[0214] 步驟五：組分II沉澱溶解、過濾
[0215] 將步驟四收集的組分II沉澱用103. Okg的I. 1°C的注射用水溶解，在攪拌速率 為71rpm下攪拌5. 0小時至沉澱完全溶解，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液I. 3kg調整pH值至 7. 01 ;用-15°C冷媒調節溫度至I. 6°C;繼續在攪拌速率為74rpm下攪拌反應2. 3小時，溶解 完全後加入娃藻土 0. 18kg和珍珠巖0. 18kg，在攪拌速率為79rpm下攪拌30分鐘，用I. 0°C 注射用水408kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間15分鐘，用I. 6°C預 冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100,規格：349*384mm)， 使排放溫度達到2. 1°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 15MPa，過濾速度為23kg/min，濾出液 溫度2. (TC，溶解液壓完設定吹掃時間25分鐘，壓濾分離溶解懸液，用112kg的I. 9°C注射 用水對壓濾機進行清洗回收，用2. 4°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，回收液併入濾液罐，設 定吹掃時間為22分鐘，用0. 0?4. (TC預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，得到沉澱I. 5kg，濾液 232. 5kg，用lmol/L醋酸溶液2. 8kg調節濾液pH值至3. 97,過濾沉澱高壓滅菌廢棄，這時濾 液蛋白質含量為1.67%，蛋白質總量為3. 93kg。
[0216] 步驟六：超濾、透析、濃縮
[0217] 用膜規格為30KD超濾器將步驟五得到的濾液濃縮至蛋白質含量為10. 2 % (m/v)， 重38. 5kg，然後用3. 0°C、192. 7kg的注射用水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 6% (m/v)，再用0. 5mol/L的NaOH溶液2. Ikg調整製品pH值至6. 91，用注射用水稀釋控制蛋白 質含量為7. 8%，稀釋後重量為50. 4kg ;
[0218] 步驟七：純化、過濾
[0219] 將濃縮後的製品轉移至球蛋白精製罐，用1.4°C的注射用水稀釋蛋白質含量至 1. 81 % (m/v)，稀釋後重量為217. lkg，然後加入磷酸二氫鈉0. 30kg和氯化鈉0. 13kg，用 0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調整pH值至6. 92,用-15°C冷媒調節溫度至0. (TC，再加入-21. 4°C 的95% (v/v)乙醇4. 0kg，用-15°C冷媒調節最終溫度至_1.5°C，在攪拌速率為67rpm下 繼續攪拌反應2. 1小時，反應完全後加入珍珠巖0. 33kg，在攪拌速率為69rpm下攪拌30分 鍾，用-I. 6°C的2%乙醇382kg對整個壓濾管道及壓濾機進行平衡降溫，設定吹掃時間16 分鐘，用-0. 5°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板（德國Begerow公司生產，型號：Steril S100， 規格：349*384mm)，使排放溫度達到-I. 7°C，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 15MPa，過濾速度 為30kg/min，濾出液溫度-I. 3°C，懸液壓濾完設定吹掃時間為19分鐘，用124kg的2 %乙 醇對壓濾機進行清洗回收，回收液併入濾液罐，用-〇. 7°C預冷潔淨壓縮空氣吹乾濾板，用 0. 5mol/L鹽酸溶液2. Ikg調節過濾上清液pH值至3. 98,調節最終溫度至-I. 3°C，得到沉澱 1. 7kg，濾液346. 2kg，其中濾液蛋白質含量為1. 08%。
[0220] 所用的2%乙醇配製方法為：每IOOOkg注射用水加入_20°C以下95% (v/v)乙醇 18. 2kg，用-15°C冷媒調節溫度至-I. 6°C ;
[0221] 步驟八：超濾透析、濃縮、配製
[0222] 將步驟七經pH和溫度調節後的濾出液經超濾濃縮至蛋白質含量為10. 2% (m/v) (重量為36. 6kg)(進口壓力3. 7bar，回流壓力I. Obar)，然後用3. 1°C的403kg的注射用水 進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8. 82% (m/v)(蛋白質總量為3. 73kg)，加入麥芽糖 6. 75kg，用0. 5mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至4. 02,用注射用水稀釋控制最終蛋白質含量 為5.27% (m/v)，配製後得到重量為70. 8kg、收率為6. 3kg/kL的血漿。配製完成後進行除 菌、除病毒過濾、低PH孵放和除菌分裝，即得到靜注人免疫球蛋白半成品。
[0223] 產品檢測：
[0224] 所述靜注人免疫球蛋白半成品的蛋白質含量為5. 33%，其純度為98. 8%，PH值為 4. 02,其中殘留的乙醇含量為小於0. 025g/100ml，多聚體含量為1. 5%，ACA(抗補體活性） 為8IU/ml，PKA (激肽釋放酶原激活劑）含量為小於10 %。
[0225]表 1
[0226]

【權利要求】
1. 一種靜注人免疫球蛋白的製備方法，其特徵在於，包括如下步驟： 步驟一：組分I+II+III或組分II+III沉澱的溶解 將組分I+II+III沉澱或組分II+III沉澱用磷酸二氫鈉的水溶液完全溶解； 步驟二：分離組分I+II1-1沉澱或組分II1-1沉澱 調節上述組分I+II+III沉澱溶解液或組分II+III沉澱溶解液pH值至5. 00?5. 20， 調節溫度至_〇. 5?0. 0°C，再用-20°C以下95%的乙醇溶液調節至乙醇終濃度為7. 5? 8. 5 %，並調整pH值至5. 00?5. 20,調節溫度至-3. 0°C?-2. 0°C，攪拌使其反應完全，按 每1000kg懸液加入娃藻土 3. 5?4. 5kg和珍珠巖2. 0?3. 0kg，攪拌，開始懸液壓濾，控制 過濾壓力為〇?〇. 3MPa，過濾速度為20?90kg/min，濾出液溫度-3. 0?-1. 0°C，收集組分 I+II 1-1上清液或組分II1-1上清液； 步驟三：分離組分I+II 1-2沉澱或組分II1-2沉澱 調整組分I+III-1上清液或組分III-1上清液pH值至5. 10?5. 30,用-20°C以 下95 %的乙醇調節乙醇終濃度至14?16%，並調整pH值至5. 10?5. 30,反應溫度 至-5. 0°C?-4. 0°C，攪拌使其反應完全，按每1000kg懸液加入娃藻土 2. 0?3. 0kg和珍珠 巖2. 0?3. 0kg，攪拌，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0?0. 3MPa，過濾速度為20?90kg/ min，濾出液溫度-5. 0?-3. 0°C，收集組分I+III-2上清液或組分III-2上清液； 步驟四：分離組分II沉澱 每lOOOKg的I+II 1-2上清液或組分II1-2上清液加入25?35%的氯化鈉溶液18. 4? 22. 4kg，調節pH值至6. 90?7. 10,用-20°C以下95%的乙醇調節乙醇濃度至19?21 %，調 整pH值至6. 90?7. 10,調節反應溫度至-8. 0?-6. 0°C，攪拌使其反應完全，按每1000kg 懸液加入珍珠巖0. 5?1. 0kg，攪拌，開始懸液壓濾，控制過濾壓力為0. 300MPa，過濾速度為 20?90kg/min，濾出液溫度-7. 5?-5. 5°C，上清排放，收集組分II沉澱； 步驟五：組分II沉澱溶解、過濾 將收集的組分II沉澱加入注射用水攪拌至完全溶解，調整pH值至6. 90?7. 10,調節 溫度至0. 0?4. 0°C，繼續攪拌，按每1000kg溶解懸液加入硅藻土 1. 0?2. 0kg和珍珠巖 1. 0?2. 0kg，攪拌，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 200MPa，過濾速度為10?60kg/min，濾出 液溫度0. 0?5. 0°C，壓濾分離過濾液，調節過濾液pH值至3. 80?4. 10 ; 步驟六：超濾、透析、濃縮 將過濾液濃縮至蛋白質含量為8?12%，然後用2?5°C、4?6倍體積的注射用水進 行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8?9%，再調整pH值至6. 50?7. 30,用注射用水稀 釋控制蛋白質含量為50. 0?100. 0g/L ; 步驟七：純化、過濾 將步驟八濃縮後的製品用0. 0?4. 0 C的注射用水稀釋蛋白質含量至1. 5?2. 0 %，稀 釋後在每1000kg製品加入磷酸二氫鈉 1. 0?3. 0kg和氯化鈉 0. 2?1. 0kg，調整pH值至 6. 90?7. 10,調節溫度至0. 0?0. 5°C，用-20°C以下95 %的乙醇調節乙醇濃度至1. 5? 2. 5%，調節溫度至-2. 0?-1. 0°C，攪拌使其反應完全，按每1000kg懸液加入珍珠巖1. 0? 2. 0kg，攪拌，開始壓濾，控制過濾壓力為0. 200MPa，過濾速度為10?60kg/min，濾出液溫 度-2. 0?-1. 0°C，調節濾出液pH值至3. 80?4. 10,調節溫度至-2. 0?-1. 0°C ; 步驟八：超濾透析、濃縮、配製 將步驟七經pH和溫度調節後的濾出液經超濾濃縮至蛋白質含量為8?12%，然後用 注射用水進行連續等量透析，濃縮蛋白質含量至8?9%，按最終製品每升含麥芽糖95? l〇5g加入麥芽糖，調節pH值至3.90?4. 30,用注射用水稀釋控制最終蛋白質含量為 5. 20?5. 50%，再進行除菌、除病毒過濾、低pH孵放和除菌分裝，即得到靜注人免疫球蛋白 半成品。
2. 根據權利要求1所述的靜注人免疫球蛋白的製備方法，其特徵在於，步驟一中所述 磷酸二氫鈉的水溶液為組分I+II+III或組分II+III沉澱重量的6?8倍，濃度為0. Olmol/ L，攪拌時間為6小時以上。
3. 根據權利要求1所述的靜注人免疫球蛋白的製備方法，其特徵在於，步驟二、三、四 和五中用來調節PH值的溶劑為lmol/L醋酸溶液或0. 5mol/L氫氧化鈉溶液。
4. 根據權利要求1所述的靜注人免疫球蛋白的製備方法，其特徵在於，所述步驟六中 將過濾液濃縮至蛋白質含量為8?12%是採用膜規格為30KD超濾器濃縮。
【文檔編號】C07K1/34GK104479011SQ201510003962
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2015年1月5日 優先權日:2015年1月5日
【發明者】張戰, 呂東升, 駱遠藝, 鄭庭均, 王錦才, 鄒延平, 謝文杰 申請人:深圳市衛光生物製品股份有限公司