一種減輕激素副作用的中藥組合物的製作方法
2023-10-20 19:51:57 4
專利名稱：一種減輕激素副作用的中藥組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種減輕激素副作用的組合物，尤其是用於減輕糖皮質激素副作用的中藥組合物。
背景技術：
糖皮質激素(Glucocorticoid；GC)是一組類固醇藥物，又稱為皮質激素(簡稱激素)，它是現代醫學的一種重要藥物。1949年，Hench等首次應用皮質激素治療類風溼關節炎取得成功。皮質激素療效顯著，大多用於抗炎及抑制免疫，特別是抑制體液免疫。
但是，由於皮質激素具有嚴重的副作用而使其臨床應用受到了限制。應用皮質激素而引起的併發症和副作用可分為三類第一類是由於激素過多而引起皮質醇增多症的外在表現，如肥胖、滿月臉、水牛背、多毛、紫紋、興奮不寐、易飢多食等；第二類是激素過多引起代謝紊亂，如骨質疏鬆、高血糖、高血脂、高血壓、消化性潰瘍甚至出血、抑制免疫功能、容易感染；第三類是激素長期應用後導致腎上腺皮質受抑制而成廢用性萎縮，此類患者對激素常呈依賴狀態而不易撤除，而且遇到大的應激，如手術或嚴重感染，隨時可能發生急性腎上腺皮質功能不足的危象而威脅生命。
現代臨床藥理學研究表明，短期使用皮質激素安全範圍是很廣的，但長期服用，即使是中等劑量也會出現多種嚴重的機能障礙。這是由於皮質激素對糖、蛋白質、脂肪、骨的代謝作用以及下丘腦垂體-腎上腺-胸腺(HPAT)軸的抑制所致。因此，研究如何減輕皮質激素的副作用是臨床迫切需要解決的難題，具有重要的實際意義。
如何減輕激素的副作用和併發症，歐美、日本等先進國家已投入很大人力、物力開展這方面的研究。目前，醫學界正致力於解決GC(皮質激素)副作用的研究，主要包括(1)改變皮質激素的化學結構；(2)改變給藥途徑，如局部關節用藥、皮膚用藥、呼吸道用藥等；(3)在使用GC同時加用其它藥物，以減輕GC的副作用。
國外在以上三方面做了不少工作，取得了一定效果，但尚未做到既不影響其抗炎、抑制體液免疫這一主要作用，又能較全面糾正其副作用和併發症，而且使其自身腎上腺不受抑制，並有利於激素撤除。
國內同樣缺乏解決這一臨床治療的難題的理想方案。
綜上所述，本領域迫切需要開發既可減輕激素副作用同時又不幹預激素免疫抑制的正作用的組合物。
發明內容
本發明的目的是提供一種既可減輕激素副作用同時又不幹預激素免疫抑制的正作用的組合物。本發明還提供了所述組合物的製法和用途。
在本發明的一個方面，是提供了一種組合物，它含有藥學上可接受的載體以及以下活性成分(a)1-5重量份淫羊藿總黃酮；(b)1-8重量份知母總皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸。
上述的組合物，按組合物的總重量計，淫羊藿總黃酮的濃度為5.53％-41.66％，知母總皂苷的濃度為8.24％-44.4％，或甘草次酸的濃度為1.92×10-3％-1.22％。
本發明的另一方面是提供了一種上述組合物的製備方法，它包括下述步驟將(a)1-5重量份淫羊藿總黃酮；(b)1-8重量份知母總皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸與藥學上可接受的載體混合，從而得到上述組合物。
在上述的製備方法中，所述的淫羊藿總黃酮以總黃酮含量≥50％的淫羊藿總黃酮提取物形式加入，知母總皂苷以總皂苷含量≥50％的知母總皂苷提取物形式加入。
更佳地，所述的淫羊藿是朝鮮淫羊藿(Epimeddium koreanum Nakai)地上部分。
在本發明的另一個方面，是提供了一種組合物，它含有選自下組的必要組份(a)30-90重量份數的淫羊藿；(b)60-120重量份數的知母；(c)15-90重量份數的甘草或0.0005-0.05重量份甘草次酸；以及50-1000重量份數的藥學上可接受的載體。
本發明的另一方面是，提供的組合物可以是粉劑、口服液、片劑或膠囊製劑；還可以是藥物組合物、食物組合物、或飲食補充劑。
在本發明的另一個方面，是提供了一種組合物，它由以下組分構成(a)1-5重量份淫羊藿總黃酮；(b)1-8重量份知母總皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸。
本發明所提供的組合物可以用於製備減輕激素副作用的藥物，較佳地，所述的激素是糖皮質激素。
本發明提供的組合物具有既減輕激素副作用同時又不幹預激素免疫抑制正作用的有益效果。
具體實施例方式
淫羊藿溫補腎陽，而知母滋陰瀉火。然而，這兩味藥材難以有效地配伍在一起。發明人經過廣泛而深入的研究，通過添加一定量的甘草次酸(或甘草提取物或甘草)，可以將滋陰瀉火的知母與溫補腎陽的淫羊藿有效地配伍在一起，形成一種新的組合物。當該組合物配合激素使用時，可糾正激素應用過程中內在的陰陽轉化，既不影響激素的正作用，又有顯著拮抗或減輕激素副作用的效果。在此基礎上完成了本發明。
為了便於理解本發明，本發明人提出本發明組合物可降低副作用的可能的機理。然而，應指出的是，本發明並不受該機理的任何限制。本發明的機理如下糖皮質激素應用於疑難危重病症都有顯著療效，但由於其嚴重的副作用而使其臨床應用受到了一定的限制。外源性糖皮質激素在有效抗炎作用的同時通過負反饋機制抑制HPAT軸臨床病人的血漿促腎上腺皮質激素(ACTH)和皮質醇及淋巴細胞增殖反應明顯下降；實驗動物還表現為下丘腦單胺類遞質被激活；垂體、腎上腺、胸腺重量減輕；室旁核，正中隆起CRH神經細胞與神經纖維減少，垂體ACTH分泌細胞減少，腎上腺束狀帶與胸腺皮質萎縮；NKCC活性淋巴細胞產生IL-2，γ-IFN水平降低等等。中醫認為皮質激素是外源性「純陽」之品，作用於人體後，腎精陰陽失衡，初始陰精內斂，滋養之性被遏導致腎陰虛。停藥減激素時，腎陰封蟄日久，陰液漸虧至陰損及陽，使腎陽不振，腎動態平衡失調，陰陽消長由腎陰虛——腎陽虛——陰陽俱虛。
使用滋陰和溫補腎陽的中藥能在一定程度上改善上述各項指標，又不影響其抗炎這一主要治療作用，提示滋陰和溫補腎陽的中藥具有對抗外源性糖皮質激素抑制神經內分泌免疫的保護作用。
如本文所用，術語「必要組份」指必要的中藥藥材，即淫羊藿(Epimeddiumkoreanum Nakai)、知母(Anemarrhena asphodeloides Bge)和甘草(Glycyrrhizauralensis Fisch)。
如本文所用，術語「必要成分」指作為活性成分的必要的化學物質，即淫羊藿總黃酮、知母總皂苷和甘草次酸。
如本文所用，術語「基本上由……構成」指在組合物中，除了含有必要成分或必要組份之外，還可含有少量的且不影響有效成分的次要成分和/或雜質。例如，可以含有甜味劑以改善口味、抗氧化劑以防止氧化，以及其他本領域常用的添加劑。
如本文所用，術語「藥學上可接受的載體」指用於治療劑給藥的載體，包括各種賦形劑和稀釋劑。該術語指這樣一些藥劑載體它們本身並不是必要的活性成分，且施用後沒有過分的毒性。合適的載體是本領域普通技術人員所熟知的。在Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.，N.J.1991)中可找到關於藥學上可接受的賦形劑的充分討論。在組合物中藥學上可接受的載體可包括液體，如水、鹽水、甘油和乙醇。另外，這些載體中還可能存在輔助性的物質，如崩解劑、潤溼劑、乳化劑、pH緩衝物質等。來自於淫羊藿、知母、甘草的除必要成分(即淫羊藿總黃酮、知母總皂苷和甘草次酸)之外的非必要成分，以及其他非必要成分(例如其他輔助性藥材)，也包括在藥學上可接受的載體的定義中。
例如，本發明的組合物還可以含有以下中藥材或其提取物或活性成分熟地、生地、肉桂、附子、菟絲子、黃芪、鎖陽、肉蓯蓉、補骨脂、人參、玄參、天冬、麥冬、山藥、仙茅、丹皮、澤瀉、夏枯草等。
如本文所用，術語「本發明的組合物」包括藥物組合物、食品組合物和飲食補充劑，是指它們含有或基本上由(1)淫羊藿或淫羊藿總黃酮；(2)知母或知母總皂苷；和(3)甘草或甘草次酸構成。通常，淫羊藿+知母+甘草的重量佔組合物總重量的30-99％，較佳地50-99％，更佳地60-90％。
在本發明的藥物組合物中，作為必要組份的三種中藥藥材是(1)淫羊藿，其中的活性成分是淫羊藿總黃酮；(2)知母；其中的活性成分是知母總皂苷；和(3)甘草，其中的活性成分是甘草次酸。
更佳地，所述的淫羊藿是朝鮮淫羊藿(Epimeddium koreanum Nakai)地上部分。
除了按必要活性成分來限定本發明的組合物之外，還可用必要組份(藥材)的配比來限定本發明的組合物。
在本發明組合物中，按重量計，三種必要的活性成分的配比如下(a)1-5重量份，較佳地1.5-3.5重量份的淫羊藿總黃酮；(b)1-8重量份，較佳地1.5-5重量份的知母總皂苷；(c)0.0005-0.05重量份，較佳地0.0015-0.025重量份的甘草次酸。
在本發明組合物中，按重量計，三種必要藥材的合適配比是30-90重量份數淫羊藿，較佳地40-80重量份數，更佳地50-70重量份數的淫羊藿；60-120重量份數知母，較佳地70-110重量份數，更佳地80-100重量份數的知母；15-90重量份數甘草，較佳地30-70重量份數，更佳地40-60重量份數的甘草，且淫羊藿+知母+甘草的重量佔組合物總重量的30-99％，較佳地50-99％，更佳地60-95％。餘量的物質是藥學上可接受的載體，例如澱粉、麥芽糊精等。
本發明的藥物組合物或飲食補充劑，可以通過常規方法製成任何常規的製劑形式，優選的是粉劑、丸劑、口服液、片劑或膠囊製劑。
本發明的組合物可用常規方式施用，例如口服。在使用藥物組合物時，按3種活性成分的總重量計，通常每天給藥量為至少約5毫克/千克體重，而且在大多數情況下不超過約50毫克/千克體重，較佳地該劑量是約5毫克/千克體重-約50毫克/千克體重。當然，具體劑量還應考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟練醫師技能範圍之內的。
在本發明的另一方面，提供了一種製備本發明藥物組合物或飲食補充劑的方法，它包括下述步驟將(a)1-5重量份淫羊藿總黃酮；(b)1-8重量份知母總皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸與藥學上可接受的載體混合，從而得到本發明所述的組合物。
或者，將相應重量份的淫羊藿、知母和甘草藥材混合在一起，從而得到藥材組合物。當然，還可用常規方法對所述的藥材組合物進行提取，以便於服用。
在另一優選例中，可以分別用本領域已知方法提取淫羊藿、知母和甘草藥材中的有效部位或有效成分，即淫羊藿總黃酮、知母總皂苷和甘草次酸(或含這些有效成分的提取物)，然後將其混合在一起，製得本發明的組合物。
另一方面，本發明的組合物可用於製備減輕激素副作用的藥物，較佳地，所述的激素是糖皮質激素。
本發明的主要優點在於(a)本發明的組合物具有顯著減輕激素的副作用，又不影響皮質激素抗炎免疫抑制等藥理作用。
(b)組份簡單、活性成分明確且針對性強；(c)成本低廉。
下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明而不用於限制本發明的範圍。下列實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照製造廠商所建議的條件。
實施例1提取淫羊藿總黃酮(1)將朝鮮淫羊藿(Epimeddium koreanum Nakai)地上部分粉碎成粗粉；(2)取一份(1千克)粗粉，每次加15倍水，水煎煮三次，每次1小時，得到水煮提取液，然後將提取液減壓濃縮至原料重量的2倍；(3)過濾除去不溶物，濾液上處理好的D101大孔吸附樹脂，上樣量(相當於生藥量)與樹脂用量的比例為1∶2(W/V)，用10倍柱床體積的去離子水洗脫；(4)用15倍柱床體積的20％乙醇洗脫；(5)用10倍柱床體積的60％乙醇洗脫，收集60％乙醇洗脫液，濃縮蒸乾得到淫羊藿總黃酮提取物。
經檢測，結果表明淫羊藿總黃酮提取物的得率約為2％，其中淫羊藿總黃酮含量為62％。
實施例2提取知母總皂苷(1)將知母(Anemarrhena asphodeloides Bge)粉碎成粗粉；(2)取一份(1千克)粗粉，加6倍75％乙醇加熱回流三次，每次1小時，得到提取液，然後將提取液減壓濃縮回收乙醇，水溶液過濾除去不溶物，加水稀釋至4倍藥材重量；(3)稀釋液上處理好的D101大孔吸附樹脂，上樣量(相當於生藥量)與樹脂用量的比例為1∶2(W/V)，用5倍柱床體積的1％NaOH溶液洗脫；(4)用10倍柱床體積的20％乙醇洗脫；(5)用10倍柱床體積的75％乙醇洗脫，收集75％乙醇洗脫液，濃縮蒸乾得到知母總皂苷提取物。
經檢測，結果表明，知母總皂苷提取物的得率約為4％，其中知母總皂苷含量為60％。
實施例3提取甘草次酸(1)將甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)粉碎成粗粉；(2)取一份(1千克)粗粉，每次加10倍含氨0.5％的10％乙醇溶液，在85℃加熱提取三次，每次2小時，得到提取液，然後將提取液減壓濃縮至原體積三分之一；(3)攪拌下滴加濃H2SO4酸化至不再析出沉澱，放置6h，過濾收集沉澱，得到甘草酸粗品；(4)粗品用常規的KOH溶劑處理法，經多步純化製得甘草酸單鉀鹽純品；(5)經5％H2SO4加熱處理，純化後，得到甘草次酸純品。
經檢測，甘草次酸的純度為＞98％。
實施例4製備組合物No.1取用實施例1-3分別獲得的淫羊藿總黃酮提取物30克(含量62％)，知母總皂苷提取物45克(含量60％)，甘草次酸0.014克(含量98％)，混合製得組合物No.1。
實施例5製備藥物製劑在50克實施例4獲得的組合物中加入40克澱粉、5克甲基纖維素、5克硬脂酸鎂，壓片，製得片劑。
每片含60mg淫羊藿總黃酮，90mg知母總皂苷和0.3mg甘草次酸。
實施例6單味、二味、三味藥配比的藥效學研究實驗材料1、實施例1-3方法分別獲得的淫羊藿總黃酮提取物(含量62％)，知母總皂苷提取物(含量60％)，甘草次酸(含量98％)2、造模藥物皮質酮，Sigma公司，批號17721。皮質酮溶於滅菌橄欖油中，工作濃度為5mg/ml。
3、實驗動物2個月的雄性SD大鼠，體重200-230g。
實驗方法1、動物隨機分成五組，每組10隻，分別為正常對照組(NC)，皮質酮模型組(MC)，淫羊藿總黃酮組(A)，淫羊藿總黃酮+知母總皂組(A+B組，A∶B＝3∶4.5)，淫羊藿總黃酮+知母總皂苷+甘草次酸組(A+B+C組，A∶B∶C＝3∶4.5∶0.0014)，試驗用藥量為成人有效劑量的10倍，分別以150mg/kg劑量灌胃給藥，正常對照組，皮質酮模型組以同體積蒸餾水灌胃，每日一次，連續36天。從給藥第六天開始，除正常對照組每天注射同體積橄欖油外，其它各組均皮下注射皮質酮5mg/kg造模，連續造模36天，第36天稱重，氯胺酮麻醉，股動脈採血，無菌取脾臟，分離腎上腺，稱重並計算腎上腺指數(腎上腺重量/100g體重)。
2、血漿皮質醇水平的測定採用Cortisol測定試劑盒(Roche)3、淋巴細胞轉化率測定無菌取脾臟，剪碎，採用淋巴細胞分離液常規分離單個核淋巴細胞，調整細胞濃度至5×106/ml，加入96孔平底細胞培養板中，每孔100μl，同時，每孔加入PHA(Sigma)2μg，並設對照孔，對照孔以完全培養液代替PHA，每份樣本設實驗孔與對照孔各2孔。置37℃、5％CO2條件下常規培養48小時後每孔加入0.5微居裡3H-TdR(購自中國科學院上海核技術開發公司)，18小時後，多頭細胞收集器收集細胞，LKB1214型液閃計數儀測定cpm值。刺激指數＝實驗孔cpm均值/對照孔cpm均值4、統計學辦法數據以X±SD表示，採用SPSS10.0軟體進行統計學處理。
實驗結果見表1、2、3。
1、各組大鼠腎上腺比較表1.各組大鼠腎上腺指數(X±SD)組別 例數 腎上腺指數 PNC 10 24.85±4.68**0.001MC 10 16.60±6.67A10 23.08±4.71* 0.040A+B 10 22.13±4.69* 0.042A+B+C10 25.20±3.95**0.001*與模型組相比P＜0.05；**與模型組相比P＜0.01模型組與正常對照組相比，腎上腺重量顯著減輕，P＜0.01；給藥組A和給藥組A+B腎上腺重量與模型組相比具有顯著性差異P＜0.05；給藥組A+B+C與模型組相比具有極顯著性差異P＜0.01；表明一味藥、二味藥及三味藥配伍均可提高大鼠腎上腺重量，對激素抑制腎上腺的作用均具有對抗效應。
2、各組大鼠淋巴細胞轉化率(LPR)的比較表2.各組大鼠LPR(X±SD)組別例數LPR PNC 10 2.55±1.75**0.000MC 10 1.03±0.27A 10 2.45±0.66**0.001
A+B 10 0.50±0.14 0.335A+B+C 10 0.42±0.15 0.239**與模型組相比P＜0.01與正常對照組相比，模型組淋巴細胞轉化率顯著降低，P＜0.01；給藥組A+B和給藥組A+B+C淋巴細胞轉化率與模型組相比均無顯著性差異，P＞0.05。給藥組A淋巴細胞轉化率與模型組相比有顯著性差異，P＜0.01。表明給藥組A+B和給藥組A+B+C配伍可不幹擾激素對外周淋巴細胞的免疫抑制作用，而單味給藥組A則對激素抑制外周淋巴細胞具有抑制作用。
3、各組大鼠血漿皮質醇含量比較表3.各組大鼠血漿皮質醇含量測定(X±SD)組別 例數 血漿皮質醇 PNC 10 1.67±0.22*0.02MC 10 0.98±0.22A10 1.64±0.11*0.03A+B 10 1.41±0.44 0.21A+B+C10 1.65±0.15*0.03*與模型組相比P＜0.05模型組與正常對照組相比，血漿皮質醇含量顯著減少，P＜0.05，表明腎上腺皮質功能已明顯減退；給藥組A+B血漿皮質醇含量與模型組相比無顯著差異，P＞0.05；給藥組A和給藥組A+B+C血漿皮質醇含量與模型組相比顯著增高，有顯著差異，P＜0.05，結果表明一味藥及三味藥配伍可提高血漿皮質醇含量。
上述結果表明，淫羊藿總黃酮、知母總皂苷和甘草次酸三種配伍可顯著提高皮質酮大鼠血漿皮質醇含量水平，同時顯著增加皮質酮大鼠腎上腺重量，體現出減輕激素負反饋引起的腎上腺皮質功能受抑制的良好作用，對應用激素情況下HPA軸具有一定的保護作用，同時不幹預激素免疫抑制的正作用；而單味淫羊藿總黃酮可顯著提高皮質酮大鼠血漿皮質醇含量水平，並顯著增加皮質酮大鼠腎上腺重量，但對激素抑制淋巴細胞的免疫抑制有顯著的對抗作用。故比較單味淫羊藿總黃酮、二味淫羊藿總黃酮和知母總皂苷配伍及三味淫羊藿總黃酮、知母總皂苷和甘草次酸三種配伍的實驗結果表明，三味藥配伍更為合理，即既不幹預激素免疫抑制作用，又對激素造成的腎上腺皮質內抑制具有良好的保護作用。
實施例7三味藥不同劑量配比的藥效學研究實驗材料1、實施例1-3中分別獲得的淫羊藿總黃酮提取物(含量62％)，知母總皂苷提取物(含量60％)，甘草次酸(含量98％)按3∶4.50.0014重量比所得到的混合物。
2、造模藥物皮質酮，Sigma公司，批號17721。皮質酮溶於滅菌橄欖油中，工作濃度為5mg/ml。
3、實驗動物2個月的雄性SD大鼠，體重200-230g。
實驗方法1、動物隨機分五組，每組10隻，分別為正常對照組(NC)，皮質酮模型組(MC)，給藥高劑量組，中劑量組，低劑量組，高中低劑量組分別以300mg/kg、150mg/kg、50mg/kg劑量灌胃給藥，正常對照組，皮質酮模型組以同體積蒸餾水灌胃，每日一次，連續36天。從給藥第六天開始，除正常對照組每天注射同體積橄欖油外，其它各組均皮下注射皮質酮5mg/Kg造模，連續造模36天，第36天稱重，氯胺酮麻醉，股動脈採血，無菌取脾臟，分離腎上腺和胸腺，稱重並計算臟器指數胸腺指數(胸腺重量/100g體重)、腎上腺指數(腎上腺重量/100g體重)。
2、血漿皮質醇水平的測定採用Cortisol測定試劑盒(Roche)3、淋巴細胞轉化率測定無菌取脾臟，剪碎，採用淋巴細胞分離液常規分離單個核淋巴細胞，調整細胞濃度至5×106/ml，加入96孔平底細胞培養板中，每孔100μl，同時，每孔加入PHA(Sigma)2μg，並設對照孔，對照孔以完全培養液代替PHA，每份樣本設實驗孔與對照孔各2孔。置37℃、5％CO2條件下常規培養48小時後每孔加入0.5微居裡3H-TdR(購自中國科學院上海核技術開發公司)，18小時後，多頭細胞收集器收集細胞，LKB1214型液閃計數儀測定cpm值。刺激指數＝實驗孔cpm均值/對照孔cpm均值
4、統計學辦法數據以X±SD表示，採用SPSS10.0軟體進行統計學處理。
實驗結果見表4、5、6、7、8。
1、各組大鼠體重比較表4.各組大鼠體重比較(X±SD)組別 例數 體重NC10 308.36±11.93**MC10 266.55±14.94高劑量10 282.36±11.41*中劑量10 288.55±13.39**低劑量10 298.00±18.13***與模型組相比P＜0.05；**與模型組相比P＜0.01模型組與正常對照組相比，體重顯著減輕，P＜0.05；高劑量給藥組、中劑量給藥組及低劑量給藥組體重與模型組相比均具有顯著性差異，P＜0.05，P＜0.01；表明高、中、低三種劑量配伍均可提高大鼠體重，抵消激素對全身皮膚、結締組織、肌肉等各組織的消耗作用。
2、各組大鼠胸腺重量的比較表5.各組大鼠胸腺指數(X±SD)組別 例數 胸腺指數NC10 151.01±26.33**MC10 91.51±28.23高劑量10 100.70±14.44△中劑量10 127.39±18.41**低劑量10 144.38±25.42**△與模型組相比P＞0.05。**與模型組相比P＜0.01模型組與正常對照組相比，胸腺重量顯著減輕，P＜0.01；高劑量給藥組對胸腺重量無明顯增加作用，P＞0.05；中劑量給藥組及低劑量給藥組胸腺重量與模型組相比均具有極顯著性差異，P＜0.01；表明中、低劑量配伍可提高大鼠胸腺重量，抵消激素對中樞淋巴器官的抑制。
3、各組大鼠腎上腺體重比較表6.各組大鼠腎上腺指數(X±SD)組別 例數 腎上腺指數NC10 16.45±6.00**MC10 7.52±0.42高劑量10 18.07±3.83**中劑量10 17.61±4.46**低劑量10 13.99±3.40****與模型組相比P＜0.01模型組與正常對照組相比，腎上腺重量顯著減輕，P＜0.01，表明激素對腎上腺具有抑制作用；高劑量給藥組、中劑量給藥組及低劑量給藥組腎上腺重量與模型組相比均具有極顯著性差異，P＜0.01，表明高、中、低三種劑量配伍均可提高大鼠腎上腺重量，對激素抑制腎上腺的作用具有對抗效應。
4、各組大鼠淋巴細胞轉化率(LPR)的比較表7.各組大鼠淋巴細胞轉化率LPR(X±SD)組別 例數 LPRNC10 1.30±0.23*MC10 0.96±0.12高劑量10 0.91±0.09△中劑量10 0.97±0.12△低劑量10 1.14±0.10△*與模型組相比P＜0.05；△與模型組相比P＞0.05模型組與正常對照組相比，淋巴細胞轉化率顯著降低，P＜0.05，表明激素對外周淋巴細胞具有抑制作用；高劑量給藥組、中劑量給藥組及低劑量給藥組淋巴細胞轉化率與模型組相比均無顯著性差異，P＞0.05，表明高、中、低三種劑量配伍均不幹擾激素對外周淋巴細胞的免疫抑制作用。
5、各組大鼠血漿皮質醇含量比較表8.各組大鼠血漿皮質醇含量測定(X±SD)組別 例數 血漿皮質醇NC10 3.68±2.30*MC10 1.94±1.27高劑量10 2.98±1.75△中劑量10 4.48±2.67***低劑量10 2.99±1.90△*與模型組相比P＜0.05；***與模型組相比P＜0.01；△與模型組相比P＞0.05模型組與正常對照組相比，血漿皮質醇含量顯著減少，P＜0.05，表明腎上腺皮質功能已明顯減退；高劑量給藥組及低劑量給藥組血漿皮質醇含量與模型組相比無顯著增高，P＞0.05；中劑量給藥組血漿皮質醇含量與模型組相比增高，具有極顯著性差異，P＜0.01，表明中劑量配伍可提高和保護大鼠腎上腺皮質功能，對激素抑制腎上腺皮質功能的作用具有對抗效應。
上述結果表明，高、中、低三個劑量配比均可顯著提高大鼠體重、腎上腺指數；中、低劑量配比可顯著提高大鼠胸腺指數；中劑量配比可顯著增加血漿皮質醇含量；由此可見，中劑量配比具有較為全面的保護激素作用下的HPAT軸的效應。同時，三個劑量配比均對皮質酮大鼠的淋巴細胞轉化率無顯著影響，表明三個劑量配比均不幹預激素免疫抑制的正作用。因此，通過本實驗，明確了有效的劑量配比，即中等劑量的三味藥配比具有更為合理、全面的拮抗激素副作用的效應。
實施例8製備組合物No.2-8按實施例4相同的方法，製備組合物No.2-8，不同點在於用下表所示的配比。
表組合物No.2-8
用實施例7相同的方式，以中劑量(150mg/kg)施用於大鼠，從而測試這些組合物的效果。
結果表明，這些組合物同樣可以顯著降低糖皮質激素的副作用同時又不幹預激素免疫抑制的正作用。
在本發明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻被單獨引用作為參考那樣。此外應理解，在閱讀了本發明的上述講授內容之後，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落於本申請所附權利要求書所限定的範圍。
權利要求
1.一種組合物，其特徵在於，它含有藥學上可接受的載體以及以下活性成分(a)1-5重量份淫羊藿總黃酮；(b)1-8重量份知母總皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸。
2.如權利要求1所述的組合物，其特徵在於，按組合物的總重量計，淫羊藿總黃酮的濃度為5.53％-41.66％，知母總皂苷的濃度為8.24％-44.4％，或甘草次酸的濃度為1.92×10-3％-1.22％。
3.一種組合物，其特徵在於，它含有選自下組的必要組份30-90重量份數的淫羊藿；60-120重量份數的知母；15-90重量份數的甘草或0.0005-0.05重量份數的甘草次酸；以及50-1000重量份數的藥學上可接受的載體。
4.如權利要求1或3所述的組合物，其特徵在於，它是粉劑、口服液、片劑或膠囊製劑。
5.如權利要求1或3所述的組合物，其特徵在於，它是藥物組合物、食物組合物、或飲食補充劑。
6.一種製備權利要求1所述的組合物的方法，其特徵在於，包括下述步驟將(a)1-5重量份淫羊藿總黃酮；(b)1-8重量份知母總皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸與藥學上可接受的載體混合，從而得到權利要求1所述的組合物。
7.如權利要求6所述的方法，其特徵在於，所述的淫羊藿總黃酮以總黃酮含量≥50％的淫羊藿總黃酮提取物形式加入，知母總皂苷以總皂苷含量≥50％的知母總皂苷提取物形式加入。
8.權利要求1所述的組合物在製備減輕激素副作用的藥物中的應用。
9.一種組合物，其特徵在於，它由以下組分構成(a)1-5重量份淫羊藿總黃酮；(b)1-8重量份知母總皂苷；(c)0.0005-0.05重量份甘草次酸。
10.如權利要求9所述的組合物的用途，其特徵在於，用於製備減輕激素副作用的藥物。
全文摘要
本發明公開了一種減輕激素副作用的中藥組合物。所述的組合物包括淫羊藿總黃酮提取物，知母總皂苷提取物和甘草次酸。本發明還公開了製備減輕激素副作用的藥物的方法。本發明提供的組合物具有減輕激素副作用同時又不幹預激素免疫抑制的正作用。
文檔編號A61P43/00GK1733244SQ20051002923
公開日2006年2月15日 申請日期2005年8月31日 優先權日2005年8月31日
發明者沈自尹, 吳志軍, 傅大煦 申請人:上海新藥研究開發中心