一種從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸的方法
2023-10-25 16:34:17 1
專利名稱：一種從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸的方法
技術領域：
本發明涉及鴨腳樹葉鹼和熊果酸的提取技術，具體地，涉及從鴨腳 樹葉經酸水超聲輔助(或鹼液)提取鴨腳樹葉鹼(或熊果酸)及其藥渣 可進一步提取熊果酸(或鴨腳樹葉鹼)，提高了鴨腳樹葉的利用率，降低 生產成本。屬於天然產物活性成分的提取分離領域。
背景技術：
本發明所選用的原料為廣東產天然鴨腳樹葉屬於夾竹桃科
(Apocynaceae)雞骨常山屬植物，不同地區有不同的名稱，分別被稱作 燈臺葉、糖膠樹、買別擔、橡皮木、大樹理肺散和麵條樹等,。在兩廣和 雲南西雙版納地區傣族作為止咳、退燒藥而廣泛應用。從民間應用歷史、 藥理研究表明鴨腳樹葉療效確切，然而，現有技術和藥理研究報導的結 果停留在植物的水提取物上，其有效活性成分沒有報導。中國專利"燈 臺樹提取物及其製備方法和應用"(CN00113130.3)，以雲南生長的燈 臺樹為原料，經水煎煮，過濾，溶液濃縮，再用醇浸提而得，存在提取 物成分不清，藥材和製劑之間無活性成分的相關性；中國專利"治療呼 吸道相關疾病的藥物及其製備方法和應用"(CN200610010940.4)說明 糖膠樹葉對呼吸道相關疾病起治療作用的主要成分為鴨腳樹葉鹼，該專 利只說明從糖膠樹葉提取鴨腳樹葉鹼一種活性成分的方法；中國專利"一 種從糖膠樹提取熊果酸的方法"(CN200610010940.4),說明糖膠樹含 豐富的熊果酸，但該專利也只是說明了從糖膠樹提取熊果酸一種活性成 分的方法。以上專利要麼存在提取物成分不清，要麼從一批材料只提取 一種活性物質(鴨腳樹葉鹼或熊果酸)，並未涉及從同一批鴨腳樹葉材 料是否可以提取兩個以上成分清晰的功能性物質和同時提取兩種以上活 性成分的技術。因此，針對現有技術的缺陷，進一步研究鴨腳樹葉中的 活性物質，研究鴨腳樹葉鹼和熊果酸為其中主要活性物質，在此基礎上進一步研^:利用同一批材料同時提取兩種活性成分的工藝，是本發明的 主要目標。
發明內容
本發明的目的是提供一種由同一批鴨腳樹葉分兩步分別提取分離制 備鴨腳樹葉鹼和熊果酸的方法
為了完成本發明的目的，本發明提供了如下技術方案: 一種從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸的方法，其特徵在於 將鴨腳樹葉用酸水溶液浸泡超聲輔助提取，攪拌，合併酸水層，揮幹溶 液，得酸水超聲輔助提取物；酸水超聲輔助提取物用鹼水調節PH值，氯 仿萃取，氯仿層減壓濃縮回收溶劑，乾燥後得鴨腳樹葉鹼化合物。
所述酸水沉澱部分用沸乙醇溶解後的溶液在0—5QC低溫中放置，進 行沉澱結晶。
所述以鴨腳樹葉經酸水超聲輔助提取鴨腳樹葉鹼後的藥渣為原料， 加入乙醇，.熱提取2 —4次，合併提取液，回收溶劑得浸膏，然後加入酸 水溶解，充分攪拌，分離酸水溶液和沉澱，取沉澱部分，加入乙醇溶解， 低溫中沉澱結晶即可。
所述將鴨腳樹葉提取鴨腳樹葉鹼後的藥渣用1:3 — 10倍V/V工業乙 醇加熱回流提取4次，每次1一2小時。
所述向浸膏中加入0. 2 — 2%硫酸或磷酸水溶液浸泡4次進行溶解。
所述沉澱部分用乙醇溶解後的溶液在0—5。C低溫中放置，進行沉澱 結晶。
所述沉澱結晶可進行多次重結晶。
所述以鴨腳樹葉經鹼液提取熊果酸後的藥渣為原料，用工業乙醇回 流提取4次，減壓濃縮得浸膏，浸膏用0.2-2%酸水(鹽酸、硫酸或磷酸) 浸泡多次，所得酸液用鹼水(包括氨水、NaOH或Na2C03水溶液等)調 節pH9 10之間，以有機溶劑(氯仿、正丁醇或乙酸乙酯:)萃取，減壓濃 縮回收溶劑後，萃取物含有經HPLC法含量測定不低於鴨腳樹葉材料總量 0. 5%的鴨腳樹葉鹼(Picrinine)化合物。
與現有技術相比，本發明的優益效果在於本發明的技術方案是基於長期對不同種類天然產物功能性成分含量 及生產方法的研究研製出來的。本發明所選用的技術工藝的效果可將目
前技術的經濟效益提高30%以上。 一個生產工藝流程生產的鴨腳樹葉鹼 為鴨腳樹葉材料的0. 1% 0. 2%,熊果酸的含量在2. 2%—3. 6%之間。鴨 腳樹在不同地區有不同的名稱，廣東多稱作鴨腳樹，廣西和雲南稱做糖 膠樹(Alstonla scholaris (L. )R. Br.)屬於夾竹桃科(Apocynaceae) 雞骨常山屬植物，別名燈臺樹。在兩廣和雲南西雙版納地區傣族作為止 咳藥而廣泛應用。燈臺葉曾收載於地方藥志如《陸川本草》、《雲南中 草藥選》中，並為《雲南省藥品標準》(1974)和《中華人民共和國藥 典》(1977年版一部)所收載。燈臺葉"可清熱化痰止咳，用於痰熱阻 肺所致的咳嗽，咯痰，及慢性支氣管炎，百日咳見上述證候者"。
本發明所選取的生產鴨腳樹葉鹼和熊果酸的原料為廣東產天然鴨腳 樹葉，鴨腳樹葉有較高含量的鴨腳樹葉鹼和熊果酸，本發明技術分兩步 提取，從同一批鴨腳樹葉材料得到鴨腳樹葉鹼和熊果酸， 一個生產工藝 流程生產的鴨腳樹葉鹼為鴨腳樹葉材料總量的0. 1% 0.2%，簾果酸的含 量在2.2% 3.6%之間，經濟效益比現有技術提高了30%以±。從鴨腳 樹葉中提取分離的熊果酸的純度在30—98%之間。
本發明提供的從鴨腳樹葉中提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸的方法主要用 水和乙醇為提取溶劑，為工業生產鴨腳樹葉鹼和熊果酸提供了一種工藝 簡單，成本低廉，鴨腳樹葉鹼和熊果酸產品得率高的方法。因此，本發 明的技術工藝，提高了藥材原料利用率，降低了成本，達到安全有效， 符合中藥現代化要求。
圖1鴨腳樹葉酸水超聲輔助提取物的HPLC圖譜； 圖2鴨腳樹葉酸水超聲輔助提取氯仿萃取物的HPLC圖譜； 圖3鴨腳樹葉酸水超聲輔助提取鴨腳樹葉鹼後藥渣乙醇提取物的 HPLC圖譜。
具體實施方式
下面結合附圖，用本發明的實施例來進一步說明本發明的實質性內 容，但並不以此限制本發明。
實施例l:含鴨腳樹葉鹼的活性提取物的製備
提取第一步，以鴨腳樹的葉1000g為原料，用0.2%-2%鹽酸浸泡， 超聲輔助提取4次。所得酸水溶液濃縮並乾燥得到125g的提取物，以鴨 腳樹葉鹼標準品為對照，經HPLC檢測，實施例1所得到的活性提取物 的鴨腳樹葉鹼含量相當鴨腳樹葉原料的0.125%，可以認為實施例1能夠 得到鴨腳樹葉鹼活性提取物(見圖1)。
儀器BFRL SY-8200型高效液相色譜儀，UV/VIS DETECTOR SY-8200 紫外分光檢測器，HPLCPUMP SY-8200高壓輸液泵。
色譜條件色譜柱DIAMONSIL-C18柱(4. 6mraX250mm , 5um);流 動相甲醇-0.05%冰醋酸溶液(90:10);流速1.0ml/min;柱溫35。C;
經過HPLC的含量檢測，分析鴨腳樹葉鹼的含量在0. 1%-0. 2%的範 圍內。鴨腳樹葉酸水超聲輔助提取物的鴨腳樹葉鹼純度為1%-2%，鴨腳 樹葉酸水超聲輔助提取物經氯仿萃取得純度為10%的鴨腳樹葉鹼(見圖 2)。
提取第二步，取經酸水超聲輔助提取鴨腳樹葉鹼後烘乾的鴨腳樹葉 為原料，將烘乾的鴨腳樹葉用1:8倍V/V鹼性工業乙醇回流提取3次， 每次加熱回流2小時，合併提取難，回收溶劑得到浸膏67g。向浸膏中加 入0.2%鹽酸水溶液進行溶解，充分攪拌，分離酸水溶液和沉澱，共用 0.2%鹽酸水溶液浸泡4次，合併酸水層，沉澱為熊果酸粗品43.6g。得 到的沉澱中加入乙醇200mL進行溶解，溶液放置於0°C低溫中進行沉澱結 晶， 一次結晶可得24. lg熊果酸提取物，多次重結晶後得純度〉98%的 熊果酸，可以認為實施例1能夠提取得到熊果酸物(見圖3)。將得到的 熊果酸成品進行檢測，所用儀器、條件及結果如下
儀器BFRL SY-8200型高效液相色譜儀，UV/VIS DEFECTOR SY-8200 紫外分光檢測器，HPLCPUMP SY-8200高壓輸液泵。
色譜條件色譜柱Ultimate XB-C18柱(4. 6mraX 250咖，5 y m〉；
流動相乙氰-0.04%冰醋酸；檢測波長215腿；流速1. Oml/m化；柱 溫25"C;經過HPLC的含量檢測，分析熊果酸的含量在39-98%的範圍內。一 次結晶得純度為39%的熊果酸，多次重結晶後得純度>卵％的熊果酸。
實施例2:含鴨腳樹葉鹼的活性提取物的製備
提取第一步，以鴨腳樹的葉1000g為原料，用0.2%-2%硫酸浸泡， 超聲輔助提取4次。所得酸水溶液濃縮並乾燥得到n5g的提取物，以鴨 腳樹葉鹼標準品為對照，經HPLC檢測，實施例2所得到的活性提取物 的鴨腳樹葉鹼含量相當鴨腳樹葉原料的0.115%，可以認為實施例2能夠 得到鴨腳樹葉鹼活性提取物(見圖1)。
經過HPLC的含量檢測，分析鴨腳樹葉鹼的含量在1%-2%的範圍內。 鴨腳樹葉酸水超聲輔助提取物含1%-2%的鴨腳樹葉鹼，鴨腳樹葉酸水超 聲提取物經氯仿萃取得純度達10%的鴨腳樹葉鹼粗品(見圖2)。
提取第二步，取經酸水超聲輔助提取鴨腳樹葉鹼後烘乾的鴨腳樹葉 為原料，將烘千的鴨腳樹葉用1:10倍V/V鹼性工業乙醇回流提取3次， 每次加熱回流2小時，合併提取液，回收溶劑得到熊果酸粗提物71g。向 熊果酸粗提物中加入1.0%硫酸水溶液進行溶解，充分攪拌，分離酸水溶 液和沉澱，共用1.0%硫酸水溶液浸泡4次，合併酸水層，沉澱為熊果酸 粗品48.6g。得到的沉澱中加入乙醇200mL進行溶解，溶液放置於0°C低 溫中進行沉澱結晶， 一次結晶可得25. 7g熊果酸，多次重結晶後得純度 達98%的熊果酸。將得到的熊果酸成品進行檢測所用儀器、條件及結果:
經過HPLC的含量檢測，分析熊果酸的含量在42-98%的範圍內。一 次結晶得純度為42%的熊果酸，多次重結晶後得純度達98%的熊果酸。
實施例3:含熊果酸的活性提取物的製備
提取第一步，以鴨腳樹的葉1000g為原料，用ly。-10n/。NaOH8(TC浸 泡4次。所得鹼液濃縮並乾燥得到78.3g的熊果酸粗提物，以熊果酸標準 品為對照，經HPLC檢測，實施例3所得到的活性提取物的熊果酸的純 度為41%，可以認為實施例3能夠得到熊果酸活性提取物(見圖3)。
經過HPLC的含量檢測，分析熊果酸的含量在2. 5%-i 5%的範圍內。 鴨腳樹葉鹼液粗提物含純度為41%的熊果酸。
提取第二步，取經鹼液提取熊果酸後烘乾的鴨腳樹葉為原料，將烘 幹的鴨腳樹葉用1:12倍V/V用0.2%-2%鹽酸浸泡超聲輔助提取4次。所 得酸水溶液濃縮並乾燥得到7.5g的提取物，以鴨腳樹葉鹼標準品為對照，經HPLCr檢測，實施例3所得到的活性提取物的鴨腳樹葉鹼含量相當鴨 腳樹葉原料的0.121%，可以認為實施例3提取熊果酸後的鴨腳樹藥渣能 夠提取得到鴨腳樹葉鹼活性提取物(見圖1)。 實施例4:含熊果酸的活性提取物的製備
提取第一步，以鴨腳樹的葉l000g為原料，用1。/。-10。/。NaOH8(TC浸 泡4次。所得鹼液濃縮並乾燥得到81.1g的熊果酸粗提物，以熊果酸標準 品為對照，經HPLC檢測，實施例4所得到的活性提取tf的熊果酸的純 度為41%，可以認為實施例4能夠得到熊果酸活性提取物(見圖3)。
經過HPLC的含量檢測，分析熊果酸的含量在2. 5%-3. 5%的範圍內。 鴨腳樹葉鹼液熊果酸提取物含純度為41%的熊果酸。 .
提取第二步，取經鹼液提取熊果酸後烘乾的鴨腳樹葉為原料，將烘 幹的鴨腳樹葉用1:12倍V/V用0.2%-2%磷酸浸泡，超聲輔助提取4次。 所得酸水溶液濃縮並乾燥得到7.5g的提取物，以鴨腳樹葉鹼標準品為對 照，經HPLC檢測，實施例4所得到的活性提取物的鴨腳樹葉鹼含量相 當鴨腳樹葉原料的0.121%，可以認為實施例4提取熊果酸後的鴨腳樹藥 渣能夠提取得到鴨腳樹葉鹼活性提取物(見圖l)。
權利要求
1、一種從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸的方法，其特徵在於將鴨腳樹葉用酸水溶液浸泡超聲輔助提取，攪拌，合併酸水層，揮幹溶液，得酸水超聲輔助提取物；酸水超聲輔助提取物用鹼水調節pH值，氯仿萃取，氯仿層減壓濃縮回收溶劑，乾燥後得鴨腳樹葉鹼化合物。
2、 根據權利要求1所述的從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸 的方法，其特徵在於所述酸水沉澱部分用沸乙醇溶解後的溶液在0—5QC 低溫中放置，進行沉澱結晶。
3、 根據權利要求1所述的從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸 的方法，其特徵在於所述以鴨腳樹葉經酸水超聲輔助提取鴨腳樹葉鹼後的藥渣為原料，加入乙醇，熱提取2 — 4次，合併提取液，回收溶劑得 浸膏，然後加入酸水溶解，充分攪拌，分離酸水溶液和沉澱，取沉澱部 分，加入乙醇溶解，低溫中沉澱結晶即可。
4、 根據權利要求3所述的從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸 的方法，其特徵在於所述將鴨腳樹葉提取鴨腳樹葉鹼後的藥渣用1:3 —10倍V/V工業乙醇加熱回流提取4次，每次l一2小時。
5、 根據權利要求4所述的從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸 的方法，其特徵在於所述向浸膏中加入0.2—2%硫酸或磷酸水溶液浸泡 4次進行溶解。
6、 根據權利要求5所述的從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸 的方法，其特徵在於所述沉澱部分用乙醇溶解後的溶液在0 — 5。C低溫 中放置，進行沉澱結晶。
7、 根據權利要求6所述的從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸 的方法，其特徵在於所述沉澱結晶可進行多次重結晶。
8、 根據權利要求1所述的從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸 的方法，其特徵在於所述以鴨腳樹葉經鹼液提取熊果酸後的藥渣為原 料，用工業乙醇回流提取4次，減壓濃縮得浸膏，浸膏用0.2-2%酸水(鹽 酸、硫酸或磷酸)浸泡多次，所得酸液用鹼水(包括氨水、NaOH或Na2C03 水溶液等)調節pH9 10之間，以有機溶劑(氯仿、正丁醇或乙酸乙酯) 萃取，減壓濃縮回收溶劑後，萃取物含有經HPLC法含量測定不低於鴨腳 樹葉材料總量0.5%的鴨腳樹葉鹼(Picrinine)化合物。
全文摘要
本發明公開了一種從鴨腳樹葉同時提取鴨腳樹葉鹼和熊果酸的方法，其特徵在於將鴨腳樹葉用酸水溶液浸泡超聲輔助提取，攪拌，合併酸水層，揮幹溶液，得酸水超聲輔助提取物；酸水超聲輔助提取物用鹼水調節pH值，氯仿萃取，氯仿層減壓濃縮回收溶劑，乾燥後得鴨腳樹葉鹼化合物。本發明具有可以由同一批鴨腳樹葉分兩步分別提取分離製備鴨腳樹葉鹼和熊果酸的優點。
文檔編號C07D491/00GK101538271SQ200810219419
公開日2009年9月23日 申請日期2008年11月21日 優先權日2008年11月21日
發明者馮翠蘭, 劉嬡姬, 劉富來, 吳偉萍, 姚映如, 建 張, 潘燕飛 申請人:劉富來