含有益生菌的紅曲製造方法

2023-12-10 10:08:57

專利名稱：含有益生菌的紅曲製造方法
技術領域：
本發明屬於藥品或者是健康食品的製造領域，特別是涉及一種含有Monacolin K 等活性物質亦含有益生菌的紅曲製造方法。
背景技術：
紅曲菌(Monascus spp.)是我國重要的微生物資源，在我國已有上千年的使用歷 史，被廣泛用於食品發酵劑、食品著色劑和中藥配伍的生產。紅曲菌在發酵過程中能產生多 種具有生理活性的代謝產物如紅曲色素、Monacolin類物質、Y -氨基丁酸以及多種酶類。 自1979年，日本學者在紅曲的發酵液中發現具有降血脂效果的Monacolin K以來。紅曲這 一中華民族先民智慧結晶的產物，便開始成為國際生物領域學術研究的熱點。這從另一個 方面又促進了紅曲的產業化發展與普及。而今，我們國家生產的功能性紅曲已經遠銷歐洲， 美洲，非洲等等多個國家和地區，其卓越的效果和極低的副作用，正受到越來越多國家消費 者的喜愛。對功能性紅曲的研究是從降血脂開始的，關於功能性紅曲降血脂效果，已為中國、 美國、德國、挪威等等許多國家的動物試驗和臨床試驗所證實。但近年來的研究結果表明， 功能性紅曲的效果不僅局限於降低血脂，在防治心腦血管疾病方面，功能性紅曲在抗癌、抗 氧化、抗疲勞、降血壓、抗炎症、防治骨質疏鬆等方面也有相當不錯的表現。益生菌作為人體腸道內的有益菌，隨著研究的不斷深入日益為人民所熟知， 它在癌症、冠心病、孤僻症、老年痴呆、乳糖不耐受症，糖尿病、腸道易激綜合症、唐氏綜合症 等方面均有良好的效果。(《益生菌是最好的藥》，美，馬克·Α 布魯奈克著，王麗譯，2008年 1月出版)。如今益生菌已經發展成世界菌類的第一大產業。帶有益生菌的各種產品更是層 出不窮益生菌酸奶、益生菌豆奶，益生菌奶片等等。益生菌通常都是以液態發酵，濃縮，加入抗凍劑，再進行冷凍乾燥後獲得的， 所獲得的都是單純的益生菌，如公開號為CN101559082A，CN101028289A, CN101028290A和 CN101045903A等的中國發明。雖然也有固態發酵獲得益生菌的報導，但均是以單一獲得益 生菌為目的的單一發酵，如王天雲等對嗜酸乳桿菌固態發酵進行了研究(王天雲等，生命科 學研究，2002年6月第6卷第2期)，周劍忠等對嗜熱鏈球菌固態培養的研究(周劍忠等，中 國釀造2004年第4期)，季偉等利用乳酸鏈球菌固態發酵豆粕的研究(季偉等，利用乳酸鏈 球菌固態發酵豆粕的研究，糧食與飲料工業，2006年第五期)，鄭裴等對植物乳桿菌固態發 酵豆粕的研究(鄭裴等，植物乳桿菌發酵豆粕及其抗營養因子的研究，安徽農學通報，2009， 15(10))。此外，還有公開號為CN101671637A的中國發明公開「一種腸道益生菌固態營養 載體培養方法」等。公開號為CN1974782A的中國發明提供了「一種固態發酵生產富含益生 菌多肽製品的方法」，其雖然以同時獲得多肽和益生菌為目的，但是多肽是作為益生菌的產 物而獲得的。就目前來說，在獲得紅曲有效成分的同時，獲得一定數量益生菌的方法未見報 道。

發明內容
紅曲以其對中老年人「三高」，以及骨質疏鬆等老年性慢性疾病的良好的功效，已 經為人們所認同。而體內益生菌的減少作為引起中老年相關疾病的原因之一，也已經為眾 多試驗所證實。如何將二者有機的結合起來，在獲得紅曲療效的同時，低成本的補充體內的 益生菌，達到更好的健康效果是本發明要解決的問題。本發明提供一種含有益生菌的紅曲製造方法，通過二次發酵技術，在先接種紅曲 菌進行發酵的情況下，進行滅活後，再接入益生菌進行二次發酵，最後進行乾燥，獲得含有 益生菌的紅曲，利用本發明的方法在以紅曲中活性物質Monacolin K為評價指標的情況，接 種益生菌後，對Monacolin K含量沒有影響，且獲得的紅曲中，益生菌的數量均在IXlO8個
/克(乾重)以上。本發明採用的技術方案是
一種含有益生菌的紅曲製造方法，包括
固態培養基經滅菌處理後，接種紅曲菌進行發酵，發酵結束後作滅活處理，然後接種 益生菌進行二次發酵，二次發酵結束後再經乾燥處理得到含有益生菌的紅曲，其中，所述接 種紅曲菌發酵為接種量2-25 % (v/w，即體積重量比)，30-35°C下培養3-5天，然後轉入 20-24°C下培養5-30天；接種益生菌進行二次發酵為接種量2-10 %(v/w，即體積重量比)， 28-37 °C下培養2-5天。作為優選方案，根據本發明所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其中，所述的紅 曲菌選自紫色紅曲菌(Monascus purpureus)、紅曲紅曲菌(Monascus anka)、叢毛紅曲菌 (Monascus pilosus)或紅色紅曲菌(Monasucs ruber)。作為優選方案，根據本發明所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其中，所述 的益生菌選自植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、釀酒酵母(Sccharomyces cerevisiae)、嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)、乳酸鏈球菌(Streptococcus lactis)、產朊假絲酵母(Cadida atilis)、乳 酸克魯維酵母(Kluyveromyces lactis)或乾酪乳桿菌(Lactobacillus Casei)中的一種或 它們之間的任意組合物。作為優選方案，根據本發明所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其中，所述的固態 培養基主要是以大米、麩皮、大豆、米糠中的一種或者是它們之間的任意組合物作為固態基 質，加入營養液調整含水量為30-50%，營養液中的大豆蛋白腖含量為2-5% (g/mL)、蔗糖含 量為2-5% (g/mL)。大米、大豆一般需要粉碎處理後過20目篩再使用。作為優選方案，根據本發明所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其中，所述的紅曲 菌菌種是經過液態菌種擴培後獲得紅曲液態菌種。這樣既可以獲得足夠的紅曲菌種，有利 於縮短發酵時間，又可以給固態培養基補充水分。所述的液態培養基中包括紅曲菌生長的 各種碳源、氮源、微生素以及微量元素。本領域技術人員根據現有技術不需要付出創造性勞 動，選用通用的液態培養基都可實現本發明的目的。作為優選方案，根據本發明所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其中，所述的益生 菌菌種是經過液態菌種擴培後獲得益生菌液態菌種。這樣既可以獲得足夠的益生菌菌種， 有利於縮短發酵時間，又可以給固態培養基補充水分。所述的液態培養基中包括益生菌生 長的各種碳源、氮源、微生素以及微量元素。本領域技術人員根據現有技術不需要付出創造性勞動，選用通用的液態培養基都可實現本發明的目的。作為優選方案，根據本發明所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其中，所述的二次 發酵結束後乾燥處理的溫度在45°C以下，優選冷凍真空乾燥，這樣可以保證益生菌的存活。 所述的冷凍真空乾燥採用本領域通用的冷凍乾燥機即可，溫度控制在-50 -10°C之間，真 空度控制在1.3 13帕之間。作為優選方案，根據本發明所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其中，所述的含有 益生菌的紅曲中益生菌數量大於IXlO8個/g (乾重)，同時紅曲產品中亦含有Monacolin K等活性物質，因此本發明所得的含有益生菌的紅曲乾粉，可以用作具有調節腸道和降低血 脂的藥物或者是健康食品原料。本發明具有以下優點
本發明以紅曲中活性物質Monacolin K作為評價指標的情況，接種益生菌後，對 Monacolin K含量沒有影響，且獲得的紅曲中，益生菌的數量均在1 X IO8個/克(乾重)以 上。本發明的另一優勢在於不添加任何設施設備的情況下，僅利用一條紅曲生產線， 就能完成紅曲和益生菌兩條生產線的作用，極大的節約了生產成本。
具體實施例方式下面結合實施例，更具體地說明本發明的內容。應當理解，本發明的實施並不局 限於下面的實施例，對本發明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落入本發明保護範圍。在本發明中，若非特指，所有的份、百分比均為重量單位，所有的設備和原料等均 可從市場購得或是本行業常用的。下述實施例中的方法，如無特別說明，均為本領域的常規 方法。設備說明
LZG冷凍真空乾燥機，常州市科龍乾燥機械設備有限公司。實施例1
植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)的液態培養
液態培養基的組成(均為重量百分比)葡萄糖4%、乳糖1%、大豆蛋白腖2%、酵母膏1%， 乳清粉1%，碳酸鈣1%、MgSO4 0. 2%、KH2PO4 0. 2%、ZnSO4 0. 1%，餘量為蒸餾水，pH值自然。 500mL三角瓶裝量300mL，然後將液態培養基於121°C下滅菌處理20分鐘，待冷卻到40°C下 後，用接種環接種植物乳桿菌3環，然後置於37°C下靜止培養48小時後，作為二次發酵用的 益生菌液態種。紫色紅曲菌(Monasucs purpureus)的液態培養
液態培養基的組成(均為重量體積比)葡萄糖2%、蔗糖2%、大米粉1%、黃豆粉1%、 MgSO4 0. 1%,ZnSO4 0. 1%,KH2PO4 0. 2%，餘量為蒸餾水，pH 值自然。500mL 三角瓶裝量 250mL， 然後將液態培養基於121°C下滅菌處理20分鐘，待冷卻到40°C下後，接種從斜面上洗脫下 來的紫色紅曲菌孢子大於IO8個/mL的紅曲孢子懸液10mL，然後於溫度為32°C和180r/min 下培養72h後作為紅曲液態種。取經粉碎過20目篩的大米lkg，黃豆粉100克，米糠100克，混合均勻後，加入營
5養液(含蔗糖40g/L，大豆蛋白腖40g/L，酵母膏20g/L)273 mL，使含水量為30%，得到固態 培養基。將固態培養基質裝到塑料瓶中，121°C滅菌45分鐘後，冷卻到30°C以下，接種入上 述紫色紅曲菌(Monasucs purpureus)液態種，接種量為20% (mL/g)。接種後轉入32°C下 培養3天，扣瓶轉入23°C下培養14天後，放入滅菌鍋內121°C滅菌10分鐘，待冷卻到40°C 後接種入植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)液態種，接種量為5% (mL/g)，37°C發酵 72個小時。最後將發酵產物置於冷凍真空乾燥機乾燥後，低溫粉碎(40°C以下)得到粉狀紅 曲產品，測定粉狀紅曲產品中的植物乳桿菌數量為3 X IO8個/g (乾重)，測定Monacolin K 含量為6. 01mg/g。而未接種植物乳桿菌的紅曲Monacolin K含量為6. 12mg/g。實施例2
酉良酒酵母(Sccharomyces cerevisiae)液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比)葡萄糖2%，蔗糖2%，大豆蛋白腖2%，MgSO4 0. 2%， KH2PO4 0. 2%, ZnSO4 0. 1%，餘量為蒸餾水，pH值自然。500mL三角瓶裝量250mL，然後將液態 培養基於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C後，用接種環接種釀酒酵母3環，然後於28°C 和160r/min下培養48個小時後，作為二次發酵用的益生菌液態種。紅曲紅曲菌(Monasucs anka)的液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比)葡萄糖2%，蔗糖2%，大米粉1%，黃豆粉1%，MgSO4 0. 1%，ZnSO4 0. 1%，KH2PO4 0. 2%，餘量為蒸餾水，pH值自然。500mL裝量250mL，然後將液態 培養基於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C下後，接種從斜面上洗脫下來的紅曲紅曲菌 孢子大於IO8個/mL的紅曲孢子懸液15mL，然後於32°C和180r/min下培養72h後作為紅 曲液態種。取經粉碎過20目篩的大米lkg，黃豆粉50克，米糠100克，麩皮200混合均勻後， 加入營養液(含蔗糖40g/L，大豆蛋白腖40g/L，酵母膏20g/L)，使含水量為50%，得到固 態培養基。將固態培養基裝到塑料瓶中，121°C滅菌45分鐘後，冷卻到30°C以下，接種上述 紅曲液態菌種，接種量為25%(mL/g)，接種後轉入30°C下培養5天，再扣瓶轉入24°C下培養 5天後，放入滅菌鍋內121°C滅菌10分鐘，待冷卻到40°C後接種入釀酒酵母(Sccharomyces cerevisiae)，接種量為5% (mL/g)，28°C下發酵48個小時，最後將發酵產物在40°C進行 乾燥，經低溫粉碎(40°C以下)得到粉狀紅曲產品。測定粉狀紅曲產品中酵母菌體數量為 5X IO9個/克(乾重)，Monacolin K為2. 53mg/g，而未接種釀酒的酵母的紅曲Monacolin K 經測定含量為2. 56mg/g。實施例3
乳酸鏈球菌(Sti^ptococcus lactis)液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比):葡萄糖2%，麥芽糖2%，大豆蛋白腖2%，酵母膏1%， 碳酸鈣1%，MgSO4 0. 2%，KH2PO4 0. 2%，ZnSO4 0. 1%，餘量為蒸餾水，pH值自然。500mL三角瓶 裝量300mL，然後將液態培養基於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C後，用接種環接種乳 酸鏈球菌3環，置於37°C下靜止培養48小時後，作為二次發酵用的益生菌液態種。紫色紅曲菌(Monasucs purpureus)的液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比)葡萄糖2%，大米粉1%，黃豆粉1%，MgSO4O. 1%, ZnSO4 0. 1%, KH2PO4 0. 2%，餘量為蒸餾水，pH值自然。500mL裝量250mL，然後將液態培養基 於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C下後，接種從斜面上洗脫下來的紫色紅曲菌孢子大於IO8個/mL的紅曲孢子懸液10mL，於32°C和180r/min下培養72h後作為紅曲液態種。取經粉碎過20目篩的大米1kg，黃豆粉100克，米糠100克，麩皮100混合均勻 後，加入營養液(含蔗糖40g/L，大豆蛋白腖40g/L，酵母膏20g/L)，使含水量為40%，得到 固態培養基。將固態培養基裝到塑料瓶中，121°C滅菌45分鐘後，冷卻到30°C以下，接種紫 色紅曲菌(Monasucs purpureus)液態種，接種量為5%(mL/g)，接種後轉入35°C下培養3天， 再扣瓶轉入20°C下培養30天後，放入滅菌鍋內121°C滅菌10分鐘，待冷卻到40°C後接種入 上述已培養好的液態乳酸鏈球菌(Str印tococcus lactis)，接種量為2%(mL/g)，於37°C下 發酵120個小時。最後將發酵產物進行真空冷凍乾燥(冷凍溫度為-30°C，真空度5Pa)，經 低溫粉碎(40°C以下)得到粉狀紅曲產品。測定粉狀紅曲產品中鏈球菌菌體數量為3X IO8 個/g (乾重)，Monacolin K為5. 78mg/g。而未接種乳酸鏈球菌的紅曲的Monacolin K含量 為 5. 56mg/g.
實施例4
乾酪乳桿菌(Lactobacillus Casei)液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比)葡萄糖2%，麥芽糖1%，大豆蛋白腖1%，酵母膏1%， 碳酸鈣1%，MgSO4 0. 2%，KH2PO4 0. 2%，ZnSO4 0. 1%，餘量為蒸餾水，pH值自然。500mL三角瓶 裝量300mL，然後將液態培養基於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C後，用接種環接種幹 酪乳桿菌3環，置於35°C下靜止培養48小時後，作為二次發酵用的益生菌液態種。紫色紅曲菌(Monasucs purpureus)的液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比):葡萄糖2%，蔗糖2%，大米粉1%，黃豆粉1%，大豆蛋 白腖 2%, MgSO4, ZnSO4 0. 1%, KH2PO4 0. 2%，餘量為蒸餾水，pH 值自然。500mL 裝量 250mL，然 後將液態培養基於121°C下滅菌20分鐘，冷卻到40°C下後，接種從斜面上洗脫下來的紫色 紅曲菌孢子大於IO8個/mL的紅曲孢子懸液20mL，於32°C和180r/min下培養72h後作為 紅曲液態種。取經粉碎過20目篩的大米1kg，黃豆粉50克，米糠100克，麩皮100混合均勻後， 加入營養液(含蔗糖40g/L，大豆蛋白腖40g/L，酵母膏20g/L)，使含水量為45%，得到固 態培養基。於121°C滅菌45分鐘後，冷卻到30°C以下，接種上述紅曲液態菌種，接種量為 20% (mL/g)，接種後轉入32°C下培養3天，再扣瓶轉入22°C下培養20天後，放入滅菌鍋內 121°C滅菌10分鐘，待冷卻到40°C後接種入上述已培養好的乾酪乳桿菌(Lactobacillus Casei)液態種，接種量為6% (mL/g)，於37°C下發酵60個小時。最後將發酵物進行冷凍幹 燥，低溫粉碎(40°C以下)，得到粉狀紅曲產品。測定粉狀紅曲產品中乳桿菌數量4X IO9個/ g (乾重)，M0naC0lin K為10. 24mg/g。同樣的條件下，未接種乾酪乳桿菌的紅曲，經乾燥測 定 Monacolin K 含量為 10. 53mg/g.
實施例5
嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比)葡萄糖2%，蔗糖1%，麥芽糖1%，大豆蛋白腖2%，酵 母膏 1%，碳酸鈣 1%,MgSO4 0. 2%,KH2PO4 0. 2%, ZnSO4 0. 1%，餘量為蒸餾水，pH 值自然。500mL 三角瓶裝量300mL，然後將液態培養基於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C後，用接種環 接種嗜酸乳桿菌3環，置於35°C下靜止培養48小時後，作為二次發酵用的益生菌液態種。紫色紅曲菌(Monasucs purpureus)的液態培養基葡萄糖2%，蔗糖2%，大米粉1%，牛肉浸膏1%，黃豆粉1%，MgSO4O. 1%，ZnSO4 0. 1%，KH2PO4 0. 2%，餘量為蒸餾水，pH值自 然。500mL裝量250mL，然後將液態培養基於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C下後，接 種從斜面上洗脫下來的紫色紅曲菌孢子大於IO8個/mL的紅曲孢子懸液20mL，於32°C和 180r/min下培養72h後作為紅曲液態種。取經粉碎過20目篩的大米1kg，黃豆粉50克，米糠200克，混合均勻後，加入營養 液(含蔗糖40g/L，大豆蛋白腖40g/L，酵母膏20g/L)，使含水量為40% (wt)，得到固態培 養基。將固態培養基裝到塑料瓶中，121°C滅菌45分鐘後，就熱打散後，冷卻到30°C以下，接 種紫色紅曲菌(Monasucs purpureus)液態種，接種量為20% (mL/g)，接種後轉入32°C下培 養3天，再扣瓶轉入23°C下培養12天後，放入滅菌鍋內121°C滅菌10分鐘，待冷卻到40°C 後接種入已發酵好的上述液態嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)菌種，接種量為 5%(mL/g)，於37°C下發酵60個小時。最後將發酵產物真空冷凍乾燥，低溫粉碎(40°C以下) 得到粉狀紅曲產品。測定粉狀紅曲產品中菌體數量為5X IOltl個/g(乾重)，Monacolin K 為4. 98mg/g。同樣條件下，未接種嗜酸乳桿菌的紅曲中Monacolin K含量為4. 87mg/g。實施例6
產朊假絲酵母(Cadida atilis)液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比)葡萄糖2%，蔗糖2%，大豆蛋白腖2%，酵母膏1%， MgSO4 0. 2% KH2PO4 0.2%，ZnSO4 0. 1%，餘量為蒸餾水，pH 值自然。500mL 三角瓶裝量 250mL， 然後將液態培養基於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C後，用接種環接種產朊假絲酵母 3環，置於28°C和160r/min下培養48個小時後，作為二次發酵用的益生菌液態種。紅曲紅曲菌(Monasucs anka)的液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比):葡萄糖1%，蔗糖4%，大米粉1%，黃豆粉1%，酵母膏 2%, MgSO4O. 1%，ZnSO4 0. 1%，KH2PO4 0. 2%，餘量為蒸餾水，pH 值自然。500mL 裝量 250mL，然 後將液態培養基於121°C下滅菌20分鐘，冷卻到40°C下後，接種從斜面上洗脫下來的紅曲 紅曲菌孢子大於IO8個/mL的紅曲孢子懸液20mL，於32°C和180r/min下培養72h後作為 紅曲液態種。取經粉碎過20目篩的大米lkg，黃豆粉100克，米糠100克，混合均勻後，加入營 養液(含蔗糖40g/L，大豆蛋白腖40g/L，酵母膏20g/L) 273 mL，使含水量為30%，得到固 態培養基。將固態培養基裝到塑料瓶中，121°C滅菌45分鐘後，就熱打散後，冷卻到30°C以 下，接種上述紅曲液態菌種，接種量為20% (mL/g)，接種後轉入32°C下培養3天，再扣瓶轉 入23°C下培養12天後，放入滅菌鍋內121°C滅菌10分鐘，待冷卻到40°C後接種入產朊假絲 酵母(Cadida atilis)液態種，接種量為5% (mL/g)，於28°C下發酵48個小時。最後將發 酵產物於40°C下乾燥處理，粉碎得到粉狀紅曲產品。測定粉狀紅曲產品中菌體數量7X IO9 個/g (乾重)，Monacolin K為5. 34mg/g。而未接種產朊假絲酵母的紅曲中Monacolin K含 量為 5. 42mg/g。實施例7
乳酸克魯維酵母(Kluyveromyces lactis)液態培養
液態培養基組成(重量百分比)葡萄糖4%，蔗糖2%，大豆蛋白腖2%，MgSO4 0. 2%，KH2PO4 0. 2%，ZnSO4 0. 1%，餘量為蒸餾水，pH值自然。500mL三角瓶裝量250mL，然後將液態培養基 於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C後，用接種環接種乳酸克魯維酵母3環，置於28°C和
8160r/min下培養48個小時後，作為二次發酵用的益生菌液態種。紅色紅曲菌(Monasucs ruber)的液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比)葡萄糖2%，蔗糖2%，大米粉1%，黃豆粉1%， MgSO4O. 1%，ZnSO4 0. 1%，KH2PO4 0. 2%，餘量為蒸餾水，pH 值自然。500mL 裝量 250mL，然後將 液態培養基於121°C下滅菌20分鐘，冷卻到40°C下後，接種從斜面上洗脫下來的紅色紅曲 菌孢子大於IO8個/mL的紅曲孢子懸液15mL，於32°C和180r/min下培養72h後作為紅曲 液態種。取經粉碎過20目篩的大米1kg，黃豆粉100克，米糠100克，麩皮50克混合均勻 後，加入營養液(含蔗糖40g/L，大豆蛋白腖40g/L，酵母膏20g/L)，使含水量為35%，得到 固態培養基。將固態培養基裝到塑料瓶中，121°C滅菌45分鐘後，就熱打散後，冷卻到30°C 以下，接種上述紅曲液態菌種，接種量為20% (mL/g)，接種後轉入32°C下培養3天，再扣瓶 轉入23°C下培養12天後，放入滅菌鍋內121°C滅菌10分鐘，待冷卻到40°C後接種入乳酸 克魯維酵母(Kluyveromyces lactis)液態種，接種量為5% (mL/g)，於28°C下發酵60個小 時。最後將發酵產物於37°C下乾燥處理，粉碎得到粉狀紅曲產品。測定粉狀紅曲產品中菌 體數量為5X IOki個/g (乾重)，Monacolin K為4. 76mg/g。未接種乳酸克魯維酵母的紅曲 Monacolin K 含量為 4. 64mg/g。實施例8
嗜熱鏈球菌(Sti^ptococcus thermophilus)液態培養
液態培養基組成(重量體積百分比)乳糖2%，葡萄糖2%，脫脂乳粉1%，大豆蛋白腖2%， 碳酸鈣1%，MgSO4 0. 2%，KH2PO4 0. 2%，ZnSO4 0. 1%，餘量為蒸餾水，pH值自然。500mL三角瓶 裝量300mL，然後將液態培養基於121°C下滅菌20分鐘，待冷卻到40°C後，用接種環接種嗜 熱鏈球菌3環，置於37°C下靜止培養48小時後，作為二次發酵用的益生菌液態種。叢毛紅曲菌(Monascus pilosus)的液態培養
液態培養基組成(重量體積分比)葡萄糖2%，蔗糖2%，大米粉1%，黃豆粉1%，MgSO4 0. 1%，ZnSO4 0. 1%，KH2PO4 0. 2%，餘量為蒸餾水，pH值自然。500mL裝量250mL，然後將液態 培養基於121°C下滅菌20分鐘，冷卻到40°C下後，接種從斜面上洗脫下來的叢毛紅曲菌孢 子大於IO8個/mL的紅曲孢子懸液10mL，於32°C和180r/min下培養72h後作為紅曲液態 種。取經粉碎過20目篩的大米lkg，黃豆粉100克，米糠100克，麩皮100克，混合均勻 後，加入營養液(含蔗糖40g/L，大豆蛋白腖40g/L，酵母膏20g/L)，使含水量為35%，得到 固態培養基。將固態培養基裝到塑料瓶中，121°C滅菌45分鐘後，就熱打散後，冷卻到30°C 以下，接種上述紅曲液態菌種，接種量為15%(mL/g)，接種後轉入32°C下培養3天，再扣瓶轉 入23°C下培養16天後，放入滅菌鍋內121°C滅菌10分鐘，待冷卻到40°C後接種入嗜熱鏈球 菌(Streptococcus thermophilus)液態菌種，接種量為8%(mL/g)，於37°C下發酵60個小 時。最後將發酵產物於40°C下乾燥處理，低溫粉碎得到粉狀紅曲產品。測定粉狀紅曲產品 中菌體數量為6X IO8個/g(乾重)，Monacolin K為8. 32mg/g。未接種嗜熱鏈球菌的紅曲 經測定，其Monacolin K含量為8. 21mg/g。工業實用性
本發明以紅曲中活性物質Monacolin K作為評價指標的情況，接種益生菌後，對Monacolin K含量沒有影響，且獲得的紅曲中，益生菌的數量均在1 X IO8個/克以上，因此 本發明所得的含有益生菌的紅曲乾粉，可以用作具有調節腸道和降低血脂的藥物或者是健 康食品原料。本發明的在不添加任何設施設備的情況下，僅利用一條紅曲生產線，就能完成 紅曲和益生菌兩條生產線的作用，可極大的節約生產成本。 儘管發明人已經對本發明的技術方案做了較為詳細的闡述和列舉，應當理解，對 於本領域一個熟練的技術人員來說，對上述實施例作出修改或變通或者採用等同的替代方 案是顯然的，都不能脫離本發明精神的實質，本發明中出現的術語用於對本發明技術方案 的闡述和理解，並不能構成對本發明的限制。
權利要求
一種含有益生菌的紅曲製造方法，包括固態培養基經滅菌處理後，接種紅曲菌進行發酵，發酵結束後作滅活處理，然後接種益生菌進行二次發酵，二次發酵結束後再經乾燥處理得到含有益生菌的紅曲，其中，所述接種紅曲菌發酵為接種量2 25%(v/w)，30 35℃下培養3 5天，然後轉入20 24℃下培養5 30天；接種益生菌進行二次發酵為接種量2 10%(v/w)，28 37℃下培養2 5天。
2.根據權利要求1所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其特徵在於，所述的紅曲菌選 自紫色紅曲菌、紅曲紅曲菌、叢毛紅曲菌或紅色紅曲菌。
3.根據權利要求1所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其特徵在於，所述的益生菌選 自植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、釀酒酵母、嗜熱鏈球菌、乳酸鏈球菌、產朊假絲酵母、乳酸克魯 維酵母或乾酪乳桿菌中的一種或它們之間的任意組合物。
4.根據權利要求1所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其特徵在於，所述的固態培養 基主要是以大米、麩皮、大豆、米糠中的一種或者是它們之間的任意組合物作為固態基質， 加入營養液調整含水量為30-50%，營養液中的大豆蛋白腖含量為2-5%(g/mL)、蔗糖含量為 2-5% (g/mL)。
5.根據權利要求1所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其特徵在於，所述的紅曲菌菌 種是經過液態菌種擴培後獲得紅曲液態菌種。
6.根據權利要求1所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其特徵在於，所述的益生菌菌 種是經過液態菌種擴培後獲得益生菌液態菌種。
7.根據權利要求1所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其特徵在於，所述的二次發酵 結束後乾燥處理的溫度在45°C以下。
8.根據權利要求1所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其特徵在於，所述的乾燥處理 採用冷凍真空乾燥。
9.根據權利要求1所述的含有益生菌的紅曲製造方法，其特徵在於，所述的含有益生 菌的紅曲中益生菌數量以乾重計大於1 X IO8個/g。
全文摘要
本發明屬於藥品或者是健康食品的製造領域，特別是涉及一種含有益生菌的紅曲製造方法，包括固態培養基經滅菌處理後，接種紅曲菌進行發酵，發酵結束後作滅活處理，然後接種益生菌進行二次發酵，二次發酵結束後再經乾燥處理得到含有益生菌的紅曲，其中，所述接種紅曲菌發酵為接種量2-25%(v/w)，30-35℃下培養3-5天，然後轉入20-24℃下培養5-30天；接種益生菌進行二次發酵為接種量2-10%(v/w)，28-37℃下培養2-5天。本發明的紅曲產品中益生菌的數量均在1×108個/克(乾重)以上，使紅曲和益生菌二者有機結合，在獲得紅曲療效的同時，低成本的補充體內的益生菌，可達到更好的健康效果。
文檔編號A61K36/064GK101912423SQ201010213999
公開日2010年12月15日 申請日期2010年7月1日 優先權日2010年7月1日
發明者馮永剛, 方俊, 邵群慧, 陳小林, 陳平華 申請人:杭州千島湖星遙實業有限公司