一種治療銀屑病的口服藥物的製作方法

2023-10-26 05:05:42 2

專利名稱：一種治療銀屑病的口服藥物的製作方法
技術領域：
本發明屬於含有原料或其與不明結構之反應產物的醫用配製品，具體涉及到來源於植物的材料。
背景技術：
銀屑病是一種發病率較高且易復發的慢性炎症性皮膚病，在我國分布的特點是男性患病率高於女性，以青壯年為多，城市高於農村，北方多於南方，截止1997年，我國銀屑病患者人數已超過280萬人。有資料表明在自然人群中的發病率約為1％～3％左右，具有一定的遺傳傾向，15％～30％的患者中，有家族發病史。在國外，銀屑病發病率亦很高，如根據1995年的調查，美國銀屑病發病率高達2.6％，僅美國現有的銀屑病患者就多達600萬～700萬人；法國Vaillant等報告指出，到2000年為止，根據收集的SUVIMAX群體(生活在法國的60歲以下健康成人的國家樣本)資料，銀屑病終生流行者，男性佔5.8％，女性佔3.5％，銀屑病發病的年齡中位數是30歲，且其研究還發現，銀屑病發病與教育水平、職業類型、或住所之間無相關意義。現代醫學對本病確切的病因至今尚無定論，存在遺傳、感染、代謝障礙、內分泌影響、神經精神因素及免疫紊亂等多種學說。銀屑病對與健康相關的生活質量有極大的影響，如在2000年第9屆歐洲皮膚病及性病學術會議上，美國Fleischer等指出，銀屑病對患者的健康相關生活質量(HRQOL)有很深的影響，包括身體功能、性功能、精神功能的影響。長期以來，如何治癒銀屑病已成為世界醫學領域的一大難題，是國內外皮膚領域重點研究防治的疾病之一，目前對其尚無特效藥物，而中醫藥在預防、治療及康複方面具有一定的優勢。

發明內容
本發明所要解決的技術問題在於提供一種療效顯著而無毒副作用的治療銀屑病的口服藥物。
解決上述技術問題所採用的技術方案它是以下述組分及其配比(用量為重量份)製成的藥劑槐花8～25份 土茯苓8～25份 鳳尾草6～20份 苦參7～20份紫草7～20份 徐長卿2～16份 松香1～8份 青黛1～8份製備本發明藥物的優選重量配比是槐花10～20份 土茯苓10～20份 鳳尾草10～15份 苦參10～15份紫草10～15份 徐長卿5～15份 松香3～6份 青黛3～6份製備本發明藥物的最佳重量配比是槐花15份 土茯苓15份 鳳尾草12份 苦參13份紫草13份 徐長卿8份 松香4份 青黛4份將上述各組分按常規方法製成的固體口服藥劑是製劑學上所說的散劑或膠囊劑或片劑。
本發明藥物散劑的製備工藝如下1、藥物有效成分的提取(1)槐花、紫草有效成分的提取取槐花、紫草混勻，分別加8倍量90％乙醇提取2次，每次2小時，濾過，濾液合併，備用。
(2)徐長卿有效成分的提取取徐長卿加12倍量水，採用水蒸氣蒸餾法提取，收集9倍量餾出液，加鹽酸調pH為1，冷藏24小時，濾過，加少量水冼滌，收集結晶，40℃烘乾，備用。
(3)將苦參、土茯苓、鳳尾草、松香四味藥材與槐花、紫草藥渣以及徐長卿藥渣混勻，分別加水11、10、10倍量煎煮三次，每次2.0小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.10(60℃)，加入乙醇使含醇量達60％，攪拌，室溫靜置24小時，濾過，備用。
2、將(3)製備的濾液與(1)製備的醇提液合併，回收乙醇至無醇味，餘液濃縮，減壓乾燥(70℃，0.09Mpa)，粉碎，加入(2)中收集的結晶、青黛，用攪拌機攪拌混勻，60℃烘乾，粉碎成100目細度，加入糊精賦形劑，至每克本發明藥物散劑中含原生藥0.815g，充分攪拌混合均勻，加入85％的乙醇，整粒，50℃乾燥。
3、按本發明藥物散劑的質量標準檢驗，經紫外線滅菌後裝入塑膠袋，封裝，入庫。每袋6g，每克含原生藥0.815g。
本發明藥物膠囊劑的製備工藝如下1、藥物有效成分的提取
(1)槐花、紫草有效成分的提取取槐花、紫草混勻，分別加8倍量90％乙醇提取2次，每次2小時，濾過，濾液合併，備用。
(2)徐長卿有效成分的提取取徐長卿加12倍量水採用水蒸氣蒸餾法提取，收集9倍量餾出液，加鹽酸調pH為1，冷藏24小時，濾過，加少量水冼滌，收集結晶，40℃烘乾，備用。
(3)將苦參、土茯苓、鳳尾草、松香四味藥材與槐花、紫草藥渣以及徐長卿藥渣混勻，分別加水11、10、10倍量煎煮三次，每次2.0小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.10(60℃)，加入乙醇使含醇量達60％，攪拌，室溫靜置24小時，濾過，備用。
2、將(3)製備的濾液與(1)製備的醇提液合併，回收乙醇至無醇味，餘液濃縮，減壓乾燥(70℃，0.09Mpa)，粉碎，加入(2)中收集的結晶、青黛和澱粉，澱粉加至每克本發明藥物膠囊劑含原生藥5.82g，混勻，用85％7醇溶液制軟材，用14目篩制粒，40℃烘乾，用20目篩整粒，裝膠囊，即得。
3、按本發明藥物膠囊劑的質量標準檢驗，經紫外線滅菌消毒後裝入膠囊內，製成本發明膠囊劑。膠囊所用的原料配比以及製備工藝按製劑學膠囊原料配比按常規的製備工藝製作。
膠囊劑每粒重0.28g，每克藥粉含原生藥5.82g。
本發明藥物片劑的製備工藝如下本發明片劑所用的中藥原料的配比以及有效成分的提取與本發明藥物膠囊劑所用中藥原料的配比以及有效成分的提取完全相同，所用的輔料及用量按片劑的常規工藝進行。每片重0.6g，每克含原生藥3.056g。
本發明藥物膠囊劑經過衛生部指定的藥理試驗基地進行了藥效學試驗，試驗結果證明本發明藥物膠囊對心得安所致豚鼠耳表皮過度不全形化有明顯減少作用，模型組10例中有8例出現過度不全形化，本發明藥物膠囊4.89g生藥/kg、2.44g生藥/kg及1.22g生藥/kg分別有3例、4例及6例過度不全形化；對乙烯雌酚所致小鼠陰道黏膜基底細胞層細胞有絲分裂有明顯的抑制作用，其中正常對照組、模型組、本發明藥物膠囊7.33g生藥/kg及3.67g生藥/kg組基底細胞分裂指數分別為1.8±0.84、5.0±1.63、2.1±1.10(P＜0.01)、2.5±1.18(p＜0.01)；明顯促進小鼠尾部顆粒層的形成，其中對照組、本發明藥物膠囊7.33g生藥/kg、3.67g藥/kg組每100個鱗片中有顆粒層的鱗片數分別為14.6±2.63、23.7±4.52(P＜0.01)、20.40±4.46(P＜0.01)。對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有明顯減輕作用。對照組、本發明藥物膠囊7.33g生藥/kg、3.67g生藥/kg組的腫脹度分別為3.72±1.10、2.19±1.24(P＜0.01)、2.38±1.8(P＜0.05)。對角叉菜膠所致大鼠足蹠腫脹4.89g生藥/kg、2.44g生藥/kg組在致炎後1h、2h、3h、4h均表現有明顯減輕作用。體外抗菌試驗表明，本發明藥物對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、斷髮毛癬菌、白色念珠菌、酵母菌，MIC分別為0.582g生藥/ml、0.873g生藥/ml、0.873g生藥/ml、2.328生藥/ml、0.582g生藥/ml、0.291g生藥/ml，對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸埃希氏菌有明顯的抑制和殺滅作用，其MIC和MBC分別為0.045g生藥/ml和0.364g生藥/ml，0.045g生藥/ml和0.182g生藥/ml及0.002g生藥/ml和0.091g生藥/ml。對乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌也有較強的抑制和殺滅作用，其MIC和MBC分別為0.182g生藥/ml和0.728g生藥/ml，0.364g生藥/ml和1.455g生藥/ml，對綠膿假單孢菌也有一定的作用。對磷酸組織胺致癢反應有明顯抑制作用，模型對照組、本發明藥物膠囊4.89g生藥/kg、2.44g生藥/kg及1.22g生藥/kg劑量組的致癢閾分別為54.58±43.22、128.56±68.72(P＜0.01)、105.23±41.65(p＜0.05)、87.54±38.25(p＞0.05)。對高血粘度大鼠的血液流變性有一定改善作用，其中對高切粘度、血漿粘度、還原粘度、血沉、紅細胞壓積有明顯降低作用。對小鼠耳廓微循環有明顯改善作用，其中7.33g生藥/kg，3.67g生藥/kg，1.83g生藥/kg均可顯著增加毛細血管開放量及血流速度，顯著增大血管輸入管徑，7.33g生藥/kg、3.67g生藥/kg顯著增大毛細血管輸出管徑。
本發明藥物可進入初步臨床觀測試驗。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明進一步詳細說明，但本發明不限於這些實施例。
實施例1以生產本發明散劑產品1000g為例所用的原料及其配比為槐花 145.54g土茯苓 145.54g鳳尾草 116.43g苦參 126.13g
紫草126.13g徐長卿 77.62g松香38.81g青黛38.81g糊精加至1000g其製備工藝按本發明散劑的製備工藝進行。每袋重6g，每克含原生藥0.815g，每天服三次，每次1袋。
以生產本發明膠囊劑產品1000粒為例所用的原料及其配比為槐花 291.00g土茯苓 291.00g鳳尾草 232.80g苦參 252.20g紫草 252.20g徐長卿 155.20g松香 77.60g青黛 77.60g澱粉 加至280g其製備工藝按本發明膠囊劑的製備工藝進行。每粒重0.28g，每克含原生藥5.82g，每天服三次，每次3粒。
在其配比中，中藥原料各組分的重量份為槐花15份 土茯苓15份 鳳尾草12份苦參13份紫草13份 徐長卿8份松香4份 青黛4份實施例2以生產本發明散劑產品1000g為例所用的原料及其配比為槐花 163g土茯苓 163g鳳尾草 122.25g苦參 142.63g紫草 142.63g徐長卿 40.75g
松香20.38g青黛20.38g糊精加至1000g其製備工藝按本發明散劑的製備工藝進行。每包重6g，每克含原生藥0.815g。
以生產本發明膠囊劑產品1000粒為例所用的原料及其配比為槐花325.92g土茯苓 325.92g鳳尾草 244.44g苦參285.18g紫草285.18g徐長卿 81.48g松香40.74g青黛40.74g澱粉加至280g其製備工藝按本發明膠囊劑的製備工藝進行。每粒重0.28g，每克含原生藥5.82g。
在其配比中，中藥原料各組分的重量份為槐花8份 土茯苓8份 鳳尾草6份苦參7份紫草7份 徐長卿2份 松香1份 青黛1份實施例3以生產本發明散劑產品1000g為例所用的原料及其配比為槐花143.49g土茯苓 143.49g鳳尾草 114.79g苦參114.79g紫草114.79g徐長卿 91.83g松香45.92g青黛45.92g糊精加至1000g
其製備工藝按本發明散劑的製備工藝進行。每包重6g，每克含原生藥0.815g。
以生產本發明膠囊劑產品1000粒為例所用的原料及其配比為槐花286.90g土茯苓 286.90g鳳尾草 229.52g苦參229.52g紫草229.52g徐長卿 183.62g松香91.81g青黛91.81g澱粉加至280g其製備工藝按本發明膠囊劑的製備工藝進行。每粒重0.28g，每克含原生藥5.82g。
在其配比中，中藥原料各組分的重量份為槐花25份 土茯苓25份 鳳尾草20份苦參20份紫草20份 徐長卿16份 松香8份 青黛8份以上給出了本發明散劑和膠囊劑所用中藥原料的配比實施例，同樣可適用製備相同重量本發明藥物片劑所用中藥原料的配比，製備本發明藥物片劑所用輔料的選擇和輔料的配比、以及製備工藝，按常規製劑法片劑的製備工藝進行。每片重0.6g，每克含原生藥3.056g，每日服兩次，每次4片。
為了驗證本發明藥物對銀屑病的治療效果，申請人所在單位將採用本發明實施例1配比製備的本發明藥物(試驗時名稱為銀屑寧)膠囊劑委託衛生部指定的藥理試驗基地陝西省中醫藥研究院進行了藥效學試驗，各種試驗情況如下一、實驗材料1.儀器全自動血液流變分析儀0uth990，重慶南方醫療設備公司。
WX-9型多部位微循環顯微儀，蘇藥器監(準)字96第222037號，徐州光學儀器總廠。
2、試劑心得安(鹽酸普萘洛爾片)晉衛藥準字(1996)第035016號，批號020501，有效期至2005年4月。
乙烯雌酚注射液津衛藥準字(1981)第001598號，批號0204231，有效期至2006年3月。
鹽酸腎上腺素滬衛藥準字(1995)第010049號，上海禾豐製藥有限公司生產，批號0208017，有效期至2004年7月。
3、陽性藥鬱金銀屑片(以下簡稱鬱金片)ZZ-523-陝衛藥準字(1995)第01210號，批號20020602，有效期至2005年06月。
醋酸潑尼松片(強的松)陝衛藥準字[1 993]第000532號，西安利君製藥股份公司出品，批號020315，有效期至2004年3月。
阿斯匹林腸溶片陝衛藥準字 第001031號，陝西白鹿製藥股份有限公司生產，批號020327，有效期至2005年3月。
息斯敏國藥準字XF19992015號，西安楊森製藥有限公司生產，批號020707025，有效期至2007年6月。
多貝斯國藥準字X2000073，西安利君製藥有限公司生產，批號0209036，有效期至2004年9月。
4、動物SD大白鼠體重250-300g，陝西省中醫藥研究院實驗動物中心提供，合格證號，陝醫動字第08-25號。
ICR小白鼠體重18-22g，陝西省中醫藥研究院實驗動物中心提供，合格證號，陝醫動字第08-24號。
豚鼠體重300-400g，西安交大實驗動物中心提供。
5.受試藥物本發明藥物膠囊(以下簡稱本發明藥物)。
5.1來源西安尚益康醫藥研究所。
5.2批號20020819。
5.3含量每粒含藥粉0.28g，每克含生藥5.82g。
5.4臨床人用量每日3次，每次3粒，人日用量約為0.24g生藥/kg。
5.5配製將本發明藥物藥粉用去離子水配成12.6％濃度混懸液，放入4℃冰箱待用，用時根據需要稀釋。
6、劑量設置
6.1豚鼠、大鼠給藥量大劑量4.89g生藥/kg，中劑量2.44g生藥/kg，小劑量1.22g生藥/kg，分別相當於臨床人用量的20、10及5倍。
6.2小鼠給藥量大劑量7.33g生藥/kg，中劑量3.67g生藥/kg，小劑量1.83g生藥/kg，分別相當於臨床人用量的30、15及7.5倍。
7.給藥方式採用灌胃或餵服給藥。
二、實驗方法與結果1、本發明藥物對心得安致豚鼠耳部過度不全形化的影響按文獻[1]方法選取健康豚鼠48隻，體重300-400g，雌雄不限，均勻分為6組，每組8隻。第1組為正常對照組，正常飼養每日餵服去離子水10ml/kg，第2-6組，每日每隻豚鼠右耳廓塗5％心得安乳劑2次，連續8日，同時第2組餵服去離子水10ml/kg，作為模型對照組；第3組餵服鬱金片0.96g/kg(為臨床用量的20倍)；第4-6組分別餵服銀屑寧4.89g/kg，2.44g/kg及1.22g/kg。第9日將豚鼠用3.5％戊巴比妥鈉麻醉，取右耳廓，浸泡於10％甲醛溶液中，做病理切片。結果表明，正常對照組10例上皮的角化層較薄，顆粒層約1-3層，棘層約為3-7層，真皮層無血管擴張，無炎細胞浸潤等；模型組10例皮膚上皮增厚，其中8例表層為過度不全形化，8例真皮層血管輕度擴張，真皮層有炎細胞浸潤，2例角化層內有微膿腫形成；陽性對照組8例皮膚表層呈復層鱗狀上皮增厚，其中4例表層為過度不全形化，3例真皮層血管輕度擴張，有少量炎細胞浸潤；大劑量組，7例皮膚表層呈復層鱗片上皮增厚，其中3例表層為過度不全形化，2例真皮層血管輕度擴張有炎細胞浸潤；中劑量有4例表層為過度不全形化，4例真皮層血管輕度擴張有炎細胞浸潤，小劑量有6例表層過度不全形化6例真皮層血管輕度擴張，有炎細胞浸潤。說明本發明藥物能明顯抑制上皮組織過度不全形化、真皮層血管擴張及炎細胞浸潤。
2、本發明藥物對小鼠陰道黏膜基底細胞層細胞有絲分裂的影響按文獻[2]方法，選健康ICR小鼠60隻，雌性，體重18-22g，隨機分為6組，每組10隻。第1組正常對照組，灌胃去離子水10ml/kg，第2-6組均腹腔注射乙烯雌酚0.2mg/只，每天1次，連續3天。並且第2組灌胃去離子水10ml/kg，為模型對照組，第3組陽性對照組灌胃鬱金片0.96g/kg，為臨床用量的20倍，第4-6組分別灌胃本發明藥物7.33g/kg，3.67g/kg及1.83g/kg。連續8天。第8日給藥後4小時，脫頸處死小鼠，取陰道組織，10％甲醛固定，做病理切片。並計數300個基底細胞中有絲分裂細胞數，計算分裂指數(％)見表1，結果進行組間比較，t檢驗。
表1本發明藥物對小鼠陰道黏膜基底細胞有絲分裂指數的影響(X±S)組別 劑量動物數基底C分裂指數P值正常對照組 -10 1.80±0.84模型對照組 -10 5.00±1.63鬱金片組0.96g/kg10 2.30±1.16＜0.01本發明藥物組7.33g/kg10 2.10±1.10＜0.01本發明藥物組3.67g/kg10 2.50±1.18＜0.01本發明藥物組1.83g/kg10 3.70±1.34＞0.05從表1可見，本發明藥物7.33g/kg及3.67g/kg劑量組能明顯抑制小鼠陰道黏膜基底細胞有絲分裂。
3、本發明藥物對小鼠尾部表皮顆粒層的影響按文獻[2]方法，選健康ICR小鼠50隻，體重18-22g，雌雄各半，按體重大小分為5組，每組10隻，♀♂各半。第1組為正常對照組，每日灌胃去離子水10ml/kg，第2組陽性對照組灌胃鬱金片1.44g/kg(相當於臨床用人量30倍)，第3-5組分別每日灌胃本發明藥物7.33g/kg、3.67g/kg及1.83g/kg，連續給藥21天，第21日給藥後4小時，脫頸處死小鼠，截取從尾根往下2cm的一段鼠尾，10％甲醛浸泡，做病理切片，並計數100個鱗片中有顆粒層的鱗片數(見表2)。組間比較，t檢驗。
表2本發明藥物對小鼠尾部顆粒層形成的影響組別 劑量動物數 鱗片數/100個 P值正常對照組 -10 14.6±2.63鬱金片 1.44g/kg10 21.3±5.08＜0.01本發明藥物組7.33g/kg10 23.7±4.52＜0.01本發明藥物組3.67g/kg10 20.4±4.46＜0.01本發明藥物組1.83g/kg10 17.2±5.07＞0.05
從表2可見，本發明藥物7.33g/kg及3.67g/kg劑量組能明顯促進小鼠尾部顆粒層的形成。
4、體外抗菌試驗4.1本發明藥物提取液對致病性淺部真菌的抑菌作用[3，4]。
1、實驗材料1.1藥物本發明藥物批號20020819由西安尚益康醫藥研究所提供。
準確稱取本發明藥物200g藥粉，加蒸餾水2000ml，浸泡1h後，煎煮30min，倒出濾液，藥渣中再加水1000ml，煎煮20min後，合併濾液，加熱濃縮至200ml，即成每1ml含有相當於原生藥5.82g，10磅20min高壓消毒後置冰箱備用。
1.2菌種紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、斷髮毛癬菌、白色念珠菌、酵母菌。
以上均為西安交通大學第一醫院王剛主管檢驗師分離鑑定之臨床株。
1.3培養基沙氏葡萄糖瓊脂培養基，按《實驗醫學檢驗學》配製。
2、實驗方法採用試管藥基法，為較準確地測定本發明藥物MIC和MBC，避免倍比釋稀濃度跨度太大，故採用50％的濃度為起點濃度，以5％遞減稀釋。
2.1取100％藥液100ml，以蒸餾水為稀釋液，分別配成50％、45％、40％、35％、30％、25％、20％、15％、10％、5％不同濃度藥液，然後以各藥液為基質，分別加入4％葡萄糖、1％蛋白腖、2％瓊脂，配成不同濃度的藥物培養基。10磅20min高壓消毒，常規倒成每管4ml的斜面培養基。對照管用蒸餾水代替藥液配製。
2.2被試菌種定量菌液濃度5×105個/ml，每管接種100μl。每一菌種，每一濃度各接種兩管，另各設兩個陽性及兩個空白對照管。
2.3培養條件油電兩用恆溫培養箱內，27℃。
3.觀察方法每3天觀察記錄一次，最長觀察21天。
4.結果試驗結果見表3。
表3本發明藥物對6種真菌的抑制試驗結果MIC菌株MIC(g生藥/ml)紅色毛癬菌0.582須癬毛癬菌0.873犬小孢子菌0.873斷髮毛癬菌2.328酵母菌0.291白色念珠菌0.582結果表明本發明藥物在體外能明顯抑制紅色毛癬菌、白色念珠菌和酵母菌的生長，其MIC分別為0.582g生藥/ml、0.582g生藥/ml、0.291g生藥/ml，對須癬毛癬菌、犬小孢子菌也有較強的抑制作用，其MIC均為0.873g生藥/ml，對斷髮毛癬菌也有一定的抑制作用。
4.2本發明藥物提取液對細菌的抑制和殺滅作用[5]1、實驗材料1.1藥物本發明藥物批號20020819由西安尚益康醫藥研究所提供。
準確稱取本發明藥物20g藥粉，加水200ml，浸泡1h後，煎煮30min，倒出濾液，藥渣中再加水100ml，同法煎煮20min，合併二次濾液，加熱濃縮成20ml，即成1∶1濾液，8磅20min消毒後置冰箱備用。
1.2試驗菌株大腸埃希氏菌 ATCC 25922株金黃色葡萄球菌ATCC 25923株綠膿假單孢菌 ATCC 27853株表皮葡萄球菌 26069株乙型溶血性鏈球菌 000034株肺炎鏈球菌 31001株以上標準菌株凍幹菌株購自中國醫學科學院北京藥品生物製品鑑定所中國細菌保藏中心，2002年11月復甦，試驗前傳代備用。
1.3試驗菌液配製大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、綠膿假單孢菌接種於MH肉湯，置普通培養箱37℃、18小時培養；麥氏標準比濁管調整菌液濃度為1×108，再稀釋100倍即成1×106CFU/ml後備用。
1.4試驗儀器CO2培養箱，普通培養箱。
1.5培養基MH培養基，由北京陸橋技術有限責任公司生產，批號020710。
5％羊血肉湯，95ml肉湯中加入5ml無菌脫纖維羊血。
血平板培養基，按《實用醫學檢驗學》製備。
2、實驗方法採用試管二倍稀釋法測定MIC，平板轉種法測定MBC。
2.1對大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、綠膿假單孢菌於培養箱37℃、18小時培養，觀察最低抑菌濃度(MIC)，再依次將未見細菌生長各管的培養物0.1ml分別加入到MH培養基中，置普通培養箱37℃，18小時培養，平板上菌落數小於5個的平板中所含最小藥物濃度為最小殺菌濃度(MBC)。
2.2對乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌的MIC、MBC測定。
將本發明藥物提取液用MH肉湯由50％(W/V)為起點進行2ml/2ml連續2倍梯度稀釋，依次加入濃度為106CFU/ml的試驗菌液0.05ml。同時設立細菌以及培養基對照。置4℃冰箱作用12小時。置5％CO2培養箱37℃、24小時培養，平板上菌落數小於5個的平板中所含最小藥物濃度為最小殺菌濃度(MBC)。
2.結果試驗結果見表4。
表4本發明藥物提取液對7株標準菌株的MIC和MBC菌株 MIC(g生藥/ml) MBC(g生藥/ml)金黃色葡萄球菌ATCC 25923株0.045 0.364綠膿假單孢菌 ATCC 27853株0.728 1.455大腸埃希氏菌 ATCC 25922株0.002 0.091表皮葡萄球菌 26069株0.045 0.182乙型溶血性鏈球菌 000034株 0.182 0.728肺炎鏈球菌 31001株0.364 1.455結果表明，本發明藥物能夠有效地抑制和滅活皮膚常見致病菌。
5、抗炎實驗5.1對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響按文獻[6]方法，取健康ICR小鼠50隻，體重18-22g，隨機分為5組，每組10隻，♀♂各半。分別為模型對照組，灌胃去離子水10ml/kg，陽性對照組，灌胃強的松10mg/kg，本發明藥物三個劑量組，7.33g/kg組、3.67g/kg組、1.83g/kg組。連續給藥3天，第3天給藥後30min。給小鼠右耳前後兩面，塗二甲苯約30μl，左耳做正常對照。60min後，將小鼠拉頸處死，剪下雙耳，用5mm打孔器在左右耳同一位置打孔，在精密扭力天平上稱重，右耳重量減去左耳重量即為該鼠的腫脹度，結果見表5。
表5本發明藥物對小鼠耳腫的影響(X±S)組別 劑量 腫脹度P值正常對照組 -3.72±1.10強的松組10mg/kg 1.73±0.99＜0.01本發明藥物組7.33g/kg2.19±1.24＜0.01本發明藥物組3.67g/kg2.38±1.18＜0.05本發明藥物組1.83g/kg3.12±1.32＞0.05從表5可以看出，本發明藥物7.33/gkg及0.81g/kg劑量組能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳腫。
5.2對角叉菜膠致大鼠足蹠腫脹的影響按文獻[6]方法，選取健康SD大鼠40隻，體重200-250g，隨機分為5組，每組8隻，♀♂各半。分別為模型對照組，灌胃去離子水10ml/kg，陽性對照組灌胃阿斯匹林0.2g/kg，本發明藥物三個劑量組4.89g/kg、2.44g/kg及1.22g/kg。連續給藥3天，於第3日給藥後測量大鼠右足蹠圍。測量時要保持在同一位置，用手術絲線纏繞兩周，纏繞時保持鬆緊一致，從絲線交叉處根部用眼科剪刀剪斷，用米尺測量剪下絲線長度，即為大鼠正常足蹠圍。然後給每隻大鼠右足足蹠皮下同一位置注射1％角叉菜膠0.1ml/只，測量致炎後1h、2h、3h、4h時大鼠足蹠圍，減去致炎前的正常足蹠圍即為大鼠足蹠的腫脹度，進行組間比較，t檢驗。結果見表6。
表6本發明藥物對大鼠足蹠腫脹的影響(X±S)n＝8足蹠腫脹度組別劑量給藥前足蹠圍1h 2h 3h 4h模型對照組 40.75±2.4811.68±1.38 17.87±3.00 20.50±2.68 23.75±2.56阿斯匹林組0.2g/kg 41.38±1.798.0±2.05**11.12±3.10**12.56±2.61**16.38±5.64**本發明藥物組 4.89g/kg 41.69±2.199.06±1.64**11.44±1.66**13.88±1.80**16.25±1.66**本發明藥物組 2.44g/kg 40.63±1.989.12±1.48**12.75±2.07**14.75±1.51**17.00±1.28**本發明藥物組 1.22g/kg 41.00±1.3110.52±1.60 17.06±2.46 18.75±2.71 21.50±2.44與模型對照組比較**p＜0.01。
從表6可見，從致炎後第1h開始，大、中劑量大鼠足蹠腫脹度明顯低於模型對照組足蹠腫脹度，表現出明顯抑制足蹠腫脹的作用。
6、止癢試驗按文獻[7]方法選取健康豚鼠50隻，體重300-350g，分為5組，每隻10隻，♀♂兼用。第1組模型對照組，餵服去離子水10ml/kg；第2組陽性對照組，餵服去離子水10ml/kg；第3-5組分別餵服本發明藥物4.89/kg，2.44g/kg及1.22g/kg連續5天，第5天給藥後1h開始測定致癢閾。陽性組第5天餵服息斯敏3.3mg/kg，1h後測致癢閾。測定時，先用粗砂紙擦傷左右足背，面積大約1cm2，然後在創傷面塗0.01％磷酸組織胺0.05ml/只，以後每隔3min成倍遞增濃度，每次均0.05ml/只，直至出現豚鼠回頭舔後足，這時所給予的磷酸組織胺總量為致癢閾(mg)，致癢閾越高，止癢作用越強，計算每組動物平均致癢閾，組間比較，t檢驗，結果見表7。
表7本發明藥物對豚鼠致癢閾的影響(X±S)組別 劑量 動物數 致癢閾(mg) P值模型對照組 10 54.58±43.22息斯敏組3.3mg/kg10 143.75±57.79＜0.01本發明藥物組4.89g/kg10 128.56±68.72＜0.01本發明藥物組2.44g/kg10 105.23±41.65＜0.05本發明藥物組1.22g/kg10 87.54±38.25 ＞0.05從表7可見，本發明藥物4.89/gkg及2.44g/kg明顯提高豚鼠致癢閾，表明有止癢作用。
7、本發明藥物對大鼠血液流變性的影響按文獻[8]方法，選健康SD大鼠54隻，體重♀180-220g，♂250-300g，按體重大小分為6組，每組9隻，♀♂兼用。第1組正常對照組，第2組模型對照組，均灌胃去離子水10ml/kg；第3組陽性對照組，灌胃多貝斯0.5g/kg；第4-6組分別灌胃本發明藥物4.89g/kg、2.44g/kg及1.22g/kg，均連續給藥或水7日，於第7日給藥或水後1h，除正常對照組外，均皮下注射0.15ml鹽酸腎上腺素，共2次，間隔4h，於第一次注射後2h，將大鼠浸入4℃冰水中5min，然後擦乾大鼠毛髮，並用吹風機烘乾，禁食不禁水18h。次日，10％烏拉坦腹腔注射(1ml/100g)麻醉，分離頸總A，插管取血5ml自然流入內含少量肝素鈉的試管，邊流邊搖使血抗凝，每取10管立即送檢驗科，在全自動血液流變分析儀outh990上檢測，室溫28℃，樣品恆溫25℃，結果見表8(附後)。
從表8可見，本發明藥物大、中、小三個劑量均能明顯降低高粘大鼠高切粘度，大、中劑量能明顯降低全血還原粘度，大劑量能明顯降低血漿粘度及血沉，中劑量能明顯降低電泳時間。
8、本發明藥物對小鼠耳廓微循環的影響按文獻[6]方法，選健康ICR小鼠50隻，體重25±2g，隨機分成5組，每組10隻，♀♂各半。將小鼠用1％戊巴比妥鈉0.05ml/10g腹腔注射麻醉(嚴格消毒)，腹向下固定在小鼠觀察臺上，使耳廓平展在耳託上，並選定耳邊界某處用苦味酸標記，在耳託上和耳廓表面滴加少許香柏油，將觀察臺置於WX-9型多部位微循環顯微儀的顯微鏡載物臺上，調節泛光源適當亮度，在50倍鏡下觀察，啟動微循環軟體，調整鏡下視野，使由攝像機傳輸到電腦屏幕上的圖像清晰，在標記點附近選定某一邊界，畫出血管分布草圖(以備下次觀測時找到原測血管部位)，測量其毛細血管開放管、血液速度(微米/秒)，血管輸入口徑(微米)及血管輸出口徑(微米)。然後從第2日開始，連續給藥或去離子水3日，第1組為正常對照組灌胃去離子水0.1ml/10g，第2組灌胃多貝斯0.5g/kg，第3-5組灌胃本發明藥物7.33g/kg，3.67g/kg及1.83g/kg。第3次給藥後1h，測量小鼠相同部位的血管開放量，血液速度，血管輸入口徑及血管輸出口徑，減去給藥前的相應值即為血管開放量變化值，血流速度變化值，血管輸入輸出口徑變化值，結果見表9、表10(附後)，組間對比，t檢驗。
從表9、10可見，本發明藥物大中小劑量均可顯著增加毛細血管開放量及血流速度，顯著增大毛細血管輸入管徑，大中劑量顯著增大毛細血管輸出管徑。
三、實驗結論銀屑病的基本病理特點是表皮增殖過快和角化不全。小鼠尾部鱗片表皮缺少顆粒層，為天然銀屑病模型，本發明藥物能顯著促進表皮顆粒層形成。小鼠在乙烯雌酚刺激下，陰道黏膜基底細胞層細胞有絲分裂加快，類似銀屑病表皮增殖過快，本發明藥物能明顯抑制小鼠陰道黏膜基底細胞層細胞有絲分裂。豚鼠塗抹心得安表皮造成過度不全形化、顆粒層變、真皮層血管輕度擴張，並有炎細胞浸潤，本發明藥物可明顯減少表皮過度不全形化，使顆粒層明顯，明顯減少真皮層血管輕度擴張和炎細胞浸潤。以上三種銀屑病動物模型可說明本發明藥物具有一定的治療銀屑病的作用。另外，本發明藥物對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、斷髮毛癬菌、酵母菌、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌、綠膿假單孢菌、大腸埃希氏菌有不同程度的抑制和殺滅作用；對二甲苯所致小鼠耳腫及角叉菜膠所致大鼠足蹠腫脹有明顯抑制作用，明顯提高豚鼠的致癢閾；並對高粘大鼠血液流變性有一定改善作用及明顯改善小鼠耳廓微循環的作用。
本發明的功能清熱涼血，除溼解毒。
本發明主治銀屑病。
本發明的規格本發明散劑每包重6g，每克含原生藥0.815g；本發明膠囊劑每粒0.28g，每克含原生藥5.82g；本發明片劑每片重0.6g，每克含原生藥3.056g。
本發明的用法用量本發明散劑或本發明膠囊劑，每日服三次，每次服散劑1包或每次服膠囊劑3粒；本發明藥物片劑，每日服兩次，每次4片。
本發明的儲藏密封陰涼乾燥處儲藏。
本發明的有效期兩年。
參考文獻1、心得安塗藥造成豚鼠耳部銀屑病病樣病理變化，黃畋等.中華皮膚科雜誌.1991，24(2)96-972、愈銀片藥理作用研究成雪花等.陝西中醫.1999，20(11)5243、實用醫學檢驗學.朱忠勇等.人民軍醫出版社.1992.5204、祛癬洗劑及其拆方對致病性淺部真菌的抑菌試驗研究謝淑霞等.中國實驗方劑學雜誌.2001.1(6)19
5、細菌藥物敏感性試驗測定手冊.桂炳東等主編6、中藥藥理實驗方法學.李儀奎主編.上海科學技術出版社298-3007、中藥新藥研究指南(藥學、藥理學、毒理學)中華人民共和國衛生部.藥政管理局1798.中藥藥理研究方法學陳奇主編人民衛生出版社表8銀屑寧對高血粘度大鼠血液流變性的影響 (X±S)(N＝9)組別劑量 纖維蛋白原全血高切粘度全血中切粘度 全血低切粘度血漿粘度(g/L) (200/s) (30/s) (1/s)(mPa.s)正常對照組-3.05±0.44**5.20±0.42**6.52±0.58**15.91±1.94**1.40±0.20**模型對照組-4.73±0.526.42±0.48 8.33±0.5421.74±2.02 2.11±0.32多貝斯組0.5g/kg3.77±0.63**5.77±0.37**7.84±0.7720.08±2.36 1.78±0.13*銀屑寧組4.89g/kg 4.29±0.755.67±0.79*7.75±0.8420.58±3.04 1.78±0.28*銀屑寧組2.44g/kg 4.40±0.855.90±0.31*8.10±0.5021.2±1.53 1.80±0.35銀屑寧組1.22g/kg 4.50±0.975.80±0.48*8.10±0.5221.4±1.52 2.0±0.14組別劑量 紅細胞壓積全血還原粘度 紅細胞聚集指數 紅細胞電泳時間 血沉(Hct) (1/s) (AI) (s)(mm/h)正常對照組-0.48±0.02**19.38±2.35**3.07±0.36**18.19±1.46**2.40±0.70**模型對照組-0.52±0.0323.14±3.03 3.72±0.3222.46±1.67 3.40±0.70多貝斯組0.5g/kg0.50±0.0219.75±2.51*3.50±0.3020.64±1.88*2.88±0.83銀屑寧組4.89g/kg 0.50±0.0319.35±3.39*3.41±0.3220.08±3.14 2.10±0.74**銀屑寧組2.44g/kg 0.51±0.0119.30±3.08*3.50±0.2620.9±1.00*2.80±0.92銀屑寧組1.22g/kg 0.52±0.0319.80±4.42 3.50±0.2721.1±2.55 2.90±0.74與模型對照組比較**P＜0.01，*P＜0.05
表9銀屑寧對小鼠耳廓毛細血管開放量及血流速度的影響(X±S)(N＝10)毛細血管開放量(個) 血流速度(μm/s)組別 劑量給藥前 給藥後 變化量 給藥前 給藥後 變化量正常對照組- 4.9±0.99 4.5±1.27 -0.4±0.70 1774.1±365.2 1724.8±324.5 -49.3±133.0多貝斯組0.5g/kg 4.2±1.14 5.2±0.92 0.8±0.79**1682.6±291.6 1972.3±342.3 289.7±120.0*銀屑寧 7.33g/kg 4.9±1.37 5.6±0.97 0.7±0.67**1914.6±349.9 2198.3±281.1 283.7±107.4*銀屑寧 3.67g/kg 4.5±1.08 5.0±1.42 0.5±0.94*1826.4±318.5 2060.3±341.8 233.9±113.3*銀屑寧 1.83g/kg 4.4±1.05 4.7±0.87 0.3±0.741755.7±347.1 1822.8±385.7 208.1±188.7與正常對照組比較**P＜0.01，*P＜0.05表10銀屑寧對小鼠耳廓毛細血管輸入管徑、輸出管徑的影響(X±S)(N＝10)輸入管徑(μm) 輸出管徑(μm)組別 劑量給藥前 給藥後 變化量 給藥前 給藥後 變化量正常對照組- 12.3±3.56 11.6±2.66 -0.7±1.96 11.8±3.8812.3±3.440.5±2.89多貝斯組0.5g/kg 11.3±6.07 15.4±4.28 4.1±2.96**11.9±4.9716.6±4.214.7±3.18**銀屑寧 7.33g/kg 12.9±6.01 16.6±4.24 3.7±3.54**13.5±4.1217.4±2.553.9±2.14**銀屑寧 3.67g/kg 12.8±4.52 16.0±3.06 3.2±2.86**12.4±3.2815.9±4.263.4±1.86*銀屑寧 1.83g/kg 12.5±4.90 14.7±4.43 2.2±2.56*14.5±3.0316.7±4.602.2±1.17與正常對照組比較**P＜0.01，*P＜0.0權利要求
1.一種治療銀屑病的口服藥物，其特徵在於它是由下述重量份配比的原料按常規製劑方法製備的藥劑槐 花8～25份 土茯苓8～25份 鳳尾草6～20份苦 參7～20份紫 草7～20份 徐長卿2～16份 松 香1～8份 青 黛1～8份
2.按照權利要求1所述的治療銀屑病的口服藥物，其中各原料的重量配比是槐 花10～20份 土茯苓10～20份 鳳尾草10～15份 苦 參10～15份紫 草10～15份 徐長卿5～15份 松 香3～6份 青 黛3～6份
3.按照權利要求1所述的治療銀屑病的口服藥物，其中各原料的重量配比是槐 花15份 土茯苓15份 鳳尾草12份 苦 參13份紫 草13份 徐長卿8份 松 香4份青 黛4份
4.按照權利要求1、2或3所述的治療銀屑病的口服藥物，其特徵在於所說的藥劑是製劑學上所述的散劑或膠囊劑或片劑。
全文摘要
一種治療銀屑病的口服藥物，它是由下述重量份製成的藥劑槐花8～25份、土茯苓8～25份、鳳尾草6～20份、苦參7～20份、紫草7～20份、徐長卿2～16份、松香1～8份、青黛1～8份。本發明藥物經藥效試驗，能顯著促進表皮顆粒層形成，能抑制小鼠陰道黏膜基底細胞層細胞有絲分裂，可減少表皮過度不全形化，使顆粒層明顯，減少真皮層血管輕度擴張和炎細胞浸潤。本發明藥物對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、斷髮毛癬菌、酵母菌、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、綠膿假單孢菌等有抑制和殺滅作用；對二甲苯所致小鼠耳腫及角叉菜膠所致大鼠足蹠腫脹有抑制作用，提高豚鼠的致癢閾；並對高粘大鼠血液流變性有改善作用。
文檔編號A61K9/48GK1522736SQ0313457
公開日2004年8月25日 申請日期2003年9月12日 優先權日2003年9月12日
發明者竇建衛, 馬耀茹 申請人:竇建衛