細胞缺氧前處理裝置製造方法
2023-10-05 03:31:59
細胞缺氧前處理裝置製造方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種細胞缺氧前處理裝置，包括三通管及其連接的氮氣源連接管、培養箱連接管和氮氣進氣管，所述的氮氣進氣管連接裝有缺氧緩衝液的封閉圓形瓶，並且伸入缺氧緩衝液面下方；所述圓形瓶上還有氮氣排氣管，在缺氧緩衝液面上與大氣聯通，所述圓形瓶上還有液體軟管，插入到缺氧緩衝液面以下。利用三通開關位置改變氮氣氣流方向。本實用新型減少了緩衝液的溶解氧濃度，縮短了細胞在非缺氧環境中的時間，降低了總體的實驗費用。
【專利說明】細胞缺氧前處理裝置
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及一種細胞缺氧前處理裝置，屬於醫療器械領域。
【背景技術】
[0002]目前細胞水平的缺氧復氧損傷已經成為一個研究熱點，在國內外已經大量文獻報導細胞缺氧復氧的損傷機制，Webster於1992年研究了心肌細胞缺氧復氧損傷的分子機制，他用N2飽和的D-Hanks液作為緩衝液,加入細胞後置於無菌密閉容器中，在恆溫水浴箱內保持37°C，進氣口通人N2，經出氣口流出，使容器內保持無氧狀態2 h。1998年，Yonemochi,將培養3?4 d的心肌細胞更換經缺氧處理(預先用IS氣飽和)、無糖無血清的緩衝液，並在培養孔中灌注高純度氬氣飽和2 h模擬缺氧；2 h後更換含糖和血清的培養基，開放培養板在二氧化碳培養箱中飽和4 h模擬復氧(氬氣灌注方法:培養板外周用膠封住，兩側鑽小孔。然後從一側充人氬氣120 S，以驅除培養板中的氧氣而充滿氬氣。迅速封閉出入充氣口，置於37°C恆溫培養箱中)。
實用新型內容
[0003]本實用新型所要解決的技術問題在於提供一種簡單易操作的細胞缺氧前處理裝置。
[0004]本實用新型的技術方案是:
[0005]一種細胞缺氧前處理裝置，包括三通管及其連接的氮氣源連接管、培養箱連接管和氮氣進氣管，所述的氮氣進氣管連接裝有缺氧緩衝液的封閉圓形瓶，並且伸入缺氧緩衝液面下方；所述圓形瓶上還有氮氣排氣管，在缺氧緩衝液面上與大氣聯通，所述圓形瓶上還有液體軟管，插入到缺氧緩衝液面以下。
[0006]使用中,利用三通管的開關位置改變氮氣氣流方向。
[0007]進一步地優選，
[0008]所述的氮氣源採用濃度為99.999%的高純氮氣。
[0009]所述氮氣進氣管伸入到缺氧緩衝液的管壁上有小孔，孔徑為1.0?2.0mm。
[0010]所述的氮氣源連接管、培養箱連接管、氮氣進氣管和氮氣排氣管採用具有較好強度的塑膠管。
[0011]所述的氮氣源連接管、培養箱連接管、氮氣進氣管的管徑分別為10.0?14.0mm,
7.0 ?9.0mm, 3.0 ?5.0mm0
[0012]本實用新型的細胞缺氧前處理裝置適用於各種細胞的缺氧前處理技術，是在封閉的裝置內，將五根導管與圓形瓶連接起來，並利用三通開關改變氮氣氣流的方向，形成一個高效的引流系統，使氮氣充入降低培養箱的氧濃度和緩衝液中的溶解氧，達到理想的缺氧效果。該裝置能夠在降低缺氧緩衝液中溶解氧的同時，迅速降低缺氧培養箱中的氧濃度使之達到缺氧狀態(小於1% O2)。
[0013]本實用新型裝置操作簡單，易於推廣。其減少了緩衝液的溶解氧濃度，使得缺氧的效果更佳；縮短了加入緩衝液的細胞在非缺氧環境中的時間；減少了科研人員的工作量，無需經常接換高純氮氣導管，只需檢查確認三通開關的位置；總體上降低了實驗費用，可應用於心肌細胞、腎小管上皮細胞、肝細胞、腦星形膠質細胞等。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014]圖1細胞缺氧前處理裝置的結構示意圖，
[0015]其中1-氮氣進氣管，2-氮氣排氣管，3-液體軟管，4-氮氣源連接管，5-培養箱連接管，6-三通管，7-圓形瓶。
【具體實施方式】
[0016]本實用新型公開了一種細胞缺氧前處理裝置，包括三通管6及其連接的氮氣源連接管4、培養箱連接管5和氮氣進氣管1，所述的氮氣進氣管I連接裝有缺氧緩衝液的封閉圓形瓶7，並且伸入缺氧緩衝液面下方；所述圓形瓶7上還有氮氣排氣管2，在缺血緩衝液面上與大氣聯通，所述圓形瓶上還有液體軟管3，插入到缺氧緩衝液面以下。
[0017]實驗使用時，將缺氧緩衝液通過圓形瓶液體入口注入圓形瓶內，然後密閉。氮氣進氣管I和氮氣排氣管2的末端分別處於緩衝液面下方和上方3?5cm處，起到進氣、出氣的作用。液體軟管3的末端伸入緩衝液面以下4?5cm處。三通管的另兩端分別用氮氣源連接管連接於高純氮氣，培養箱連接管連接培養箱。
[0018]首先，旋轉三通管6開關，使得氮氣進氣管I處於開放狀態，然後打開氮氣開關，氣體沿著導流管壁的方向，會一邊流向缺氧培養箱，使裡面的氧氣壓力不斷降低，達到理想狀態(小於1% O2);同時，高純氮氣通過氮氣進氣管1，吹入密封的含有缺氧緩衝液的圓形瓶7，圓形瓶7中的氣體壓力會不斷增大，並通過氮氣排氣管2排出。20?25分鐘過後，培養箱中的氧氣分壓已基本降到理想狀態(小於1% 02)，且圓形瓶中的緩衝液經過氮氣的飽和，溶解氧已基本消失。此時，用一次性注射器經過液體軟管3，吸入經過處理的緩衝液，加到培養細胞中，並立即將其置入缺氧培養箱中，進行3-4個小時的缺氧處理。旋轉三通管6開關，關閉流向氮氣進氣管I的方向，高純氮氣經過三通管後僅流向培養箱。
[0019]為了便於和高純氮氣、缺氧培養箱和密閉的圓形瓶連接，所述引流管應具有可彎曲性。為了在氣體引流過程中，保持管道通暢，導流管還要有一定的強度。所述的氣體引流管可採用較好強度的塑膠管。
[0020]本實用新型主要應用於各種組織細胞的缺氧復氧損傷研究，例如心肌細胞、腎小管上皮細胞、肝細胞、腦星形膠質細胞等。
【權利要求】
1.一種細胞缺氧前處理裝置，其特徵在於，包括三通管(6)及其連接的氮氣源連接管(4)、培養箱連接管(5)和氮氣進氣管(I )，所述的氮氣進氣管(I)連接裝有缺氧緩衝液的封閉圓形瓶(7)，並且伸入缺氧緩衝液面下方；所述圓形瓶(7)上還有氮氣排氣管(2)，在缺氧緩衝液面上與大氣聯通，所述圓形瓶上還有液體軟管(3)，插入到缺氧緩衝液面以下。
2.如權利要求1所述的細胞缺氧前處理裝置，其特徵在於，所述氮氣進氣管(I)伸入到缺氧緩衝液的管壁上有小孔，孔徑為1.0?2.0mm。
3.如權利要求1所述的細胞缺氧前處理裝置，其特徵在於，所述的氮氣源連接管(4)、培養箱連接管(5)、氮氣進氣管(I)的管徑分別為10.0?14.0mm, 7.0?9.0mm, 3.0?`5.0mm0
【文檔編號】C12M1/00GK203513664SQ201320615593
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年10月8日 優先權日:2013年10月8日
【發明者】王磊, 萬珊珊, 陳暉 , 陳志遠, 翁小東, 邱濤, 劉修恆, 劉林 申請人:武漢大學