治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑及其製備方法
2023-10-21 03:03:07 3
專利名稱：治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及中藥製劑製備方法，具體涉及一種治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑及製備方法。
歷史上將男性性功能障礙症稱之為「陽痿」。近年來醫學界改稱其為「勃起功能障礙」，英文為Erectile Dysfunction，簡稱ED。治療ED的方法很多，目前，臨床上以理療和藥物治療為主，而藥物治療中以口服藥物較受歡迎。枸櫞酸昔多酚(Sildenafil citrate，商品名為Viagra，俗稱偉哥)原是1992年美國輝瑞公司開發的治療心絞痛的新藥，在臨床試驗中，其心絞痛療效平平，而對ED卻療效顯著，為一種陰莖動脈擴張劑。經重新申報新用途，美國FDA於1997年3月批准上市。目前，該藥為世界上公認的、較成功的ED治療藥物。德國的Bayer、Schering-Plough和Zonagen lnc.及Eli Lily和ICOS Corp.也在合作開發ED治療藥物。可以預料，今後幾年內類似於偉哥的產品將相繼上市。
儘管偉哥的起效快、有效率較高，較受消費者歡迎，但它同樣存在其它合成藥所具有的弱點。在上市以來的兩年中相繼有500多例死亡的報導，故醫學界認為偉哥有毒、副作用。英國等國家對偉哥的銷售採取嚴格的管制，對消費者來說，這無疑是一種負面影響。顯然，尋找功效類似於偉哥，而又無副作用或低副作用的藥物，尤其是天然藥物倍受矚目。
毛冬青(Ilex pubescens Hook.et Arm.)是一種生長於我國南方的常綠灌木，以根等入藥。為傳統中藥，藥用歷史久遠。毛冬青主含黃酮、皂甙等成份，有擴張血管及抗菌消炎作用，主要用於冠狀動物硬化性心臟病，血管閉塞性脈管炎，中心性視網膜炎，小兒肺炎等。到目前為止，毛冬青未見其有明顯毒、副反應，更無治療ED的文獻報導。
本發明的目的是要提供一種治療勃起功能障礙症的高活性成份含量的毛冬青提取物製劑。
本發明公開的高活性成份含量的毛冬青提取物製劑是由5～80％毛冬青提取物浸膏和95～20％藥用輔料組成的顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射劑，其中毛冬青提取物含總黃酮和總皂甙≥50％。
本發明所述的藥用輔料為常用藥用輔料如糊精、澱粉、乳糖、碳酸鈣、乙二醇、苯甲酸、氯化鈉、蔗糖、山梨酸、阿斯巴甜、甜蜜素、檸檬酸、低取代羥丙纖維素、膨速、硬脂酸鎂、白碳黑、滑石粉、鈦白粉、改良澱粉、羥丙基甲基纖維素、水、乙醇等。
本發明的另一目的是要公開上述毛冬青提取物製劑的製備方法。
本發明毛冬青提取物製劑的製備包括下列步驟(1)活性成份浸膏的製備將乾燥的毛冬青根切製成飲片，加原生藥量10-20倍量的水或親水性溶劑，浸漬2小時後，加熱回流，熱提1-2次，每次1小時，冷卻後，靜置24小時，過濾，濾液通過以不帶離子交換基團的分離介質為載體的層析柱1-2次，再用水及水-醇混合溶劑洗脫，收集洗脫液，於＜60℃溫度下減壓濃縮，乾燥後製得含總黃酮和總皂甙≥50％的浸膏，浸膏提取得率為1.5～3％。
(2)含毛冬青提取物製劑的製備取5～80％上述活性成份浸膏和95～20％藥用輔料按常規製劑方法製成顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射液。
本發明方法中所述的親水性溶劑為脂肪族低級醇或低級酮；不帶離子交換基團的分離介質為大孔吸附樹脂、矽膠、氧化鋁、聚醯鞍矽、硅藻土、活性炭或纖維素等，這些介質可以單一使用也可混合使用。
本發明方法中所述的水-醇混合劑中的醇為脂肪族低級醇，水與醇的混合比例為水∶醇＝99-1∶1-99的任意比例。
本發明的再一目的是公開毛冬青活性成份提取物製劑在治療勃起功能性障礙症中的應用。
用本發明的含毛冬青活性成份提取物製劑進行動物試驗和臨床研究表明，和偉哥一樣，毛冬青提取物低、中、高劑量組去勢大鼠的陰莖勃起潛伏期顯著縮短(P＜0.01)，給藥後大鼠陰莖對外部刺激的興奮性顯著提高。40例ED患者經毛冬青製劑一個療程的治療後，臨床症狀明顯好轉，國際勃起功能障礙指數顯著提高，總有效率為82.5％。
本發明產品的治療劑量為每日口服相當於毛冬青活性成份浸膏1.5～3g的製劑，連續服用1個月為1個療程。
毛冬青為冬青科冬青植物毛冬青(Ilex pubescens Hook.Et Arn.)的根，具有活血通脈，清熱解毒，消腫止痛的功效。為心血管疾病用藥，有擴張血管及抗菌消炎作用。該植物含黃酮類、皂甙類、甾醇、胺基酸、酚性化合物、鞣質、三萜類化合物等，它常用於冠狀動脈硬化性心臟病、血栓閉塞性脈管炎、中心性視網膜炎和小兒肺炎的治療。
據報導，昔多酚的藥理作用機理是，通過抑制磷酸二酯酶-5(PDE-5)，減少環鳥苷酸(cGMP)降解，引起陰莖海綿體血管平滑肌舒張，血流增加，從而使陰莖勃起。我們的實驗結果提示，毛冬青提取物的藥理機理既有對陰莖血管的作用，還可能通過其它途徑起效。
現有的毛冬青製劑有片劑、膠囊劑、注射劑等，所用的毛冬青提取物均為水提醇沉工藝，一些有效成份隨大分子化合物沉澱而大量流失，其主要活性成份總黃酮＜30％。本發明工藝為水提液經柱層吸附，富集小分子有效成分，然後，用一定比例的醇性溶媒洗脫、解吸有效成分，經乾燥後，配以適量輔料，混合後製成片劑、膠囊、顆粒劑或注射劑。柱層吸附法能有效地克服有效成分的流失，從而提高了提取物中有效成分的含量。使主要活性成份黃酮和皂甙的含量大大提高，可達到≥50％水平。
用本發明的毛冬青提取物浸膏進行藥理和臨床試驗，具體結果如下一、藥理試驗(一)實驗材料I動物SD大鼠，雄性，體重180-200g，由上海西普爾-必凱公司提供，合格證號滬動合證字152號。ICR小鼠，雌雄各10隻，體重18-22g，由上海西普爾-必凱公司提供，合格證號滬動合證字153號。飼養條件按純系動物要求飼養。II儀器JL-B型電刺激器上海嘉龍教儀廠製造。III藥物(I)毛冬青浸膏粉為淡棕黃色粉末狀固體，批號20000428，使用時用水配成適當濃度的溶液備用。(II)丙酸睪丸素注射液上海第九製藥廠；批號990401；花生油稀釋後備用。(III)枸櫞酸昔多酚(Sildenafil citrate)純度99.12％，使用前用1％CMC配置成混懸液。(二)實驗方法與結果1、對去勢大鼠陰莖勃起潛伏期的影響動物在戊巴比妥鈉(4％，40mg/kg，ip)麻醉下消毒陰囊皮膚，摘除雙側睪丸，術後肌注青黴素G鉀2萬/kg。
去勢手術3日後，將大鼠隨機分為6組。丙睪組皮下注射丙酸睪丸素1.25mg/1ml/kg，作陽性對照；3組給藥組分別灌胃給與毛冬青浸膏0.15、0.45和1.35/10ml/kg；模型組灌胃蒸餾水10ml/kg。以上5組動物均連續給藥20天，每日1次。偉哥組於測試前約40分鐘給與枸櫞酸昔多酚，作為陽性對照。另取10隻未去勢大鼠同期飼養，作為正常對照組。
7組動物均於第21日，用電刺激器的電極置於大鼠陰莖部位，給與局部電刺激，電流強度為4mA。記錄從刺激開始至陰莖勃起的時間(勃起潛伏期)。
結果顯示(見表1)，在局部電刺激作用下，與陽性對照丙酸睪丸素和昔多酚一樣，毛冬青浸膏低、中、高劑量組去勢大鼠的陰莖勃起潛伏期顯著縮短(P＜0.01)，給藥後大鼠陰莖對外部刺激的興奮性顯著提高。
表1毛冬青浸膏對電刺激去勢大鼠陰莖勃起潛伏期的影響組別 動物數劑量潛伏期(n)(mg/kg)(mean±SDs)正常對照組 105.50±1.71*去勢模型組 826.13±5.38丙睪組 91.254.80±0.73*昔多酚組 890 7.64±1.32*給藥組 9150 12.77±4.13*8450 7.60±1.76*813506.42±1.60**與去勢模型組比較，P＜0.01。2、對大鼠交配的影響①雌性大鼠準備取體重為200-300g的性成熟大鼠120隻，雌雄各半。60隻雌性大鼠在乙醚麻醉下，行雙側卵巢切除術，術後肌注青黴素2萬U/kg，共3天以抗感染。卵巢切除二周後可進行實驗。實驗48小時前皮下注射苯甲酸雌二醇20μg/只，4小時前再次注射黃體酮注射液500μg/只。
②雄性大鼠準備60隻雄性大鼠隨機均分成6組，每日灌胃給藥1次，連續7天。
③交配實驗觀察方法將雄性大鼠單獨放入54.5×39.5×20cm籠中，使其適應環境後，每籠加入1隻雌鼠，開始記時並記錄撲捉潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠第一次撲捉雌鼠之間的時間)、射精潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠發生第一次射精之間的時間)、20分鐘內雄鼠撲捉雌鼠的次數、20分鐘內雄鼠射精的次數。上述觀察結果進行統計學(組間t-test)處理。
結果表明，與空白組比較，給與毛冬青提取物後，大鼠的撲捉潛伏期和射精潛伏期明顯縮短，撲捉次數和射精次數明顯增加。尤其是射精次數的增加具有顯著性意義(P＜0.01)。提示毛冬青提取物能提高大鼠的性慾和交配能力。
表2毛冬青提取物對大鼠交配的影響藥物劑量動物數撲捉潛伏期撲捉次數射精潛伏期射精次數
(mg/kg) (n) (min) (次) (Min) (次)空白92.73±1.60 17.6±9.6 7.92±7.56 2.56±2.19昔多酚 3082.24±1.60 22.0±10.43.56±3.35 5.50±4.81丙酸睪酮6 80.56±0.39**23.5±8.2 0.97±0.50*6.50±3.63*120 91.65±0.88 20.3±5.6 2.70±1.38 8.00±3.50**毛冬青提取物 240 92.00±2.06 23.0±6.5 3.25±2.24 8.33±4.90**480 82.49±2.24 22.3±12.92.96±2.60 8.63±5.15***P＜0.05，**P＜0.01.二、毛冬青浸膏的急性毒性試驗挑選並稱重健康小鼠，雌雄各10隻，灌胃給與54％濃度的毛冬青浸膏水溶液0.4ml/10g，給藥劑量為21.6g/kg，相當於臨床劑量的360倍。觀察小鼠灌胃後的反應情況，連續7天。
結果給藥後小鼠的飲食和活動均正常，未見異常的反應，在7天的觀察期內亦未見動物死亡。提示毛冬青浸膏的毒性較低。三、毛冬青治療陰莖勃起功能障礙的臨床療效觀察(1)對象與方法I觀察對象男性病，年齡20-59歲(平均39.65±10.25歲)，病程1月-17年(平均3.35±4.32月)。II用藥方法每日口服浸膏1次，每次3.6g，連續1個月為1療程。III療效判斷標準根據中醫辨證(表3)國際勃起功能障礙指數標準(表4)等，判斷療效標準如下表3中醫辯證症狀輕中 重性慾淡漠 性慾降低偶有性要求 陽痿射精無力偶有 經常發作 持續出現腰膝酸軟偶有發作 反覆發作持續發作，不易緩解精神萎靡精神不振 精神萎靡精神萎靡，反應遲鈍表4國際勃起功能障礙指數標準評分標準0分1分2分3分4分5分對獲得和維持 很低低中等 高 很高勃起的自信度受性刺激勃起後 無性活動 幾乎沒有或 遠少於 約一半 多於一半 幾乎總是多少次能插入 完全沒有一半或總是性交時，多少次 沒有嘗試 幾乎沒有或 遠少於 約一半 多於一半 幾乎總是能維持勃起狀態 性交 完全沒有一半或總是維持勃起直至性 沒有嘗試 困難極大困難很大 困難 有點困難 不困難交完成困難程度 性交性交有多少次沒有嘗試 幾乎沒有或 遠少於約一半 多於一半 幾乎總是感到滿足性交 完全沒有一半或總是近期治癒經一療程後，臨床症狀消失，陰莖勃起大於90°，性交成功率＞70％，國際勃起功能障礙指數＞20。
顯效經一療程治療後，臨床症狀明顯改善(二級以上)，陰莖勃起＞90°，性交成功率＞50％，國際勃起功能障礙指數＞20。
有效經一療程治療後，臨床症狀好轉，陰莖勃起有改善，性交成功率＞25％。
無效症狀無改善。(2)結果I臨床療效經一個療程的治療，治癒8例，佔20.0％；顯效11例，佔27.5％；有效14例，佔35.0％；無效7例，佔17.5％。總有效率為82.5％(見表5)。
表5臨床總療效(例％)組別例數臨床痊癒 顯效有效 無效總有效率治療組 40 8/20.0 11/27.5 14/35.07/17.5 33/82.5II臨床症狀變化經一個療程的治療後，患者的臨床症狀明顯好轉(見表6)。表6 40例患者治療前後臨床症狀變化(例)治療前治療後P值性慾淡漠247 ＜0.01射精無力1815＜0.05腰膝酸軟153 ＜0.01精神萎靡2712＜0.05III國際勃起功能障礙指數40例病人經治療國際起功能障礙指數顯著提高(見表7)。
表7國際勃起功能障礙指數變化情況(mean±SD)治療前治療後指數分值13.38±6.36 22.48±2.85**與治療前比較，P＜0.01。
ED的發生與年齡增長有關，美國一項調查研究表明，40-50歲的男性中，40％的人曾發生過ED；而70-80歲的男性則為70％。但ED並非老齡的必然結果，而是其它年齡相關疾病，包括心身疾病導致的結果。最近估計美國約有4千萬ED患者，全球約有一億以上患者。可以預測，隨著生活節奏的加快和社會老齡化，ED患者將逐年增長。
本發明含毛冬青活性浸膏的製劑治療勃起功能障礙症的療效與昔多酚相當，但長期使用未發現任何毒副作用，是一種安全、價廉、療效可靠的全天然藥物，具有巨大的社會和經濟效益。
實施例1、取毛冬青飲片20kg，加水200kg，加熱，回流，回流提取2小時，放出藥液，殘渣內再加水150kg，回流提取1小時，然後合併提取液，經部分濃縮後，過一裝有大孔樹脂(D-101)的不鏽鋼柱(Φ200×1000mm)，用10kg純水洗滌後，分別用20％、50％和95％乙醇各20kg洗滌，收集50％和95％乙醇洗脫，經濃縮、乾燥，得到提取物0.4kg。
實施例2、取毛冬青10kg，加50％乙醇100kg，加熱回流2小時，放出藥液，殘渣內再加50％乙醇80kg，加熱回流2小時，然後合併提取液，經部分濃縮後，過一裝有聚醯胺的不鏽鋼柱(Φ150×800mm)，依次用20％、40％和95％乙醇洗滌，收集95％乙醇洗脫液，經濃縮、乾燥，得到提取物0.2kg。
實施例3、取實施例1方法得到的提取物1kg，內加乳糖0.75kg和澱粉0.75kg，經充分混合後，過60目篩，然後幹壓制粒，整粒，得到顆粒均勻的顆粒劑2.5kg，包裝成袋，每袋為1.5g。
實施例4、
取實施例2方法得到的提取物1kg，內加糊精0.5kg，澱粉0.5kg，經充分混合後過60目篩，然後溼法制粒，乾燥後裝填膠囊，製成每粒重0.4g的膠囊劑。
實施例5、取實施例1方法得到的提取物2kg內加微晶纖維素0.667kg、澱粉0.333kg和膨速0.167，經充分混合後，過細篩，制粒。然後在顆粒內加入硬脂酸鎂和白碳黑各33g，混合後製成0.49異型片，經薄膜包衣後得到重為0.5g的片劑。
實施例6、取實施例1方法得到的提取物1kg，加注射用水使每ml含提取物50mg，調節pH值，濾過、灌封、滅菌，即得每支2ml裝注射劑。
權利要求
1.一種治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑，其特徵在於該製劑是由5～80％，毛冬青提取物浸膏和95～20％藥用輔料組成的顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射劑，其中毛冬青提取物含總黃酮和總皂甙≥50％。
2.一種如權利要求1所述的治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑的製備方法，其特徵在於該方法包括下列步驟(1)活性成份浸膏的製備將乾燥的毛冬青根切製成飲片，加原生藥量10-20倍量的水或親水性溶劑，浸漬2小時後，加熱回流，熱提1-2次，每次1小時，冷卻後，靜置24小時，過濾，濾液通過以不帶離子交換基團的分離介質為載體的層析柱1-2次，再用水及水-醇混合溶劑洗脫，收集洗脫液，於＜60℃溫度下減壓濃縮，乾燥後製得含總黃酮和總皂甙≥50％的浸膏；(2)含毛冬青提取物製劑的製備取5～80％上述活性成份浸膏和95～20％藥用輔料按常規製劑方法製成顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射液。
3.一種如權利要求2所述的治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑的製備方法，其特徵在於其中所述的親水性溶劑為脂肪族低級醇或低級酮。
4.一種如權利要求2所述的治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑的製備方法，其特徵在於其中所述的不帶離子交換基團的分離介質為大孔吸附樹脂、矽膠、氧化鋁、聚醯鞍矽、硅藻土、活性炭或纖維素等，這些介質可以單一使用也可混合使用。
5.一種如權利要求2所述的治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑的製備方法，其特徵在於其中所述的水-醇混合劑中的醇為脂肪族低級醇，水與醇的混合比例為水∶醇＝99-1∶1-99的任意比例。
6.一種如權利要求1所述的毛冬青提取物製劑在治療勃起功能障礙症中的應用，其特徵在於該製劑可用於治療勃起功能障礙症，治療劑量為每日口服相當於毛冬青活性成份浸膏1.5～3g的製劑，連續服用1個月為1個療程。
全文摘要
本發明涉及一種治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑及製備方法。本發明治療勃起功能障礙症的毛冬青提取物製劑是由5～80%毛冬青提取物浸膏和95～20%藥用輔料組成的顆粒劑、膠囊劑、片劑、口服液和注射劑,其中毛冬青提取物含總黃酮和總皂甙≥50%。本發明毛冬青製劑療效與偉哥相當,但長期使用未發現任何毒副作用,是一種安全、價廉、療效可靠的全天然藥物,具有巨大的社會和經濟效益。
文檔編號A61P15/00GK1355028SQ0012759
公開日2002年6月26日 申請日期2000年11月28日 優先權日2000年11月28日
發明者周國偉, 王寧, 張國明 申請人:上海市中藥研究所