一種鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝的製作方法
2023-10-11 11:34:24
一種鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝的製作方法
【專利摘要】本發明提供了一種鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝，所述工藝中使用原材料包括鐵皮石斛，纖維素酶(生化試劑)，葡萄糖，苯酚，丙酮，石油醚，無水乙醇，本發明利用纖維素酶法聯合提取鐵皮石斛中多糖與石斛鹼，在獲得石斛多糖的同時獲得石斛鹼，且保持了酶法單一提取多糖的高效率，提供了可有效破除細胞壁的影響，促進多糖等的溶出，過程條件溫和，在一定程度上提高了提取率，具有較高的經濟效益。
【專利說明】一種鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝
【技術領域】
[0001]本發明涉及石斛加工領域，更具體的說是一種鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝。
【背景技術】
[0002]現代藥理研宄證明，石斛屬植物具有抗腫瘤、增強機體免疫力、抗血小板聚集、治療白內障等作用，其中石斛多糖具有提高免疫力、抗腫瘤作用；可改善造血、凝血功能；對治療中樞神經系統、肝臟、腎臟、胃腸道病變有效；對燙傷、病毒、細菌感染也有顯著療效；石斛生物鹼可用於預防和治療關節炎，保護消化道黏膜急性或慢性損傷，特別用於防治急性的慢性消化道潰瘍。石斛多糖的提取多採用傳統的水提醇沉方法:先用石油醚除脂，乙醇除醇溶性糖，再加水熱提，濃縮提取液後加醇沉澱出多糖。該方法採用的提取溫度比較高，時間較長，成本高，提取率較低。
【發明內容】
[0003]本發明提供一種鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝，為實現本發明的目的，本發明的技術方案如下:
[0004]一種鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝，所述工藝中使用原材料包括鐵皮石斛，纖維素酶(生化試劑)，葡萄糖，苯酚，丙酮，石油醚，無水乙醇。
[0005]優選的，其具體步驟包括:
[0006](I)乾燥、粉碎、酶解及過濾。乾燥的鐵皮石斛經粉碎後過80目篩，用石油醚脫脂，脫脂後的鐵皮石斛加入溫水，緩緩加入己活化的纖維素酶液，並輕輕攪拌，恆溫酶解一定時間後立即升溫至90°C滅酶，迅速冷卻過濾#濾渣加入90%乙醇浸提0.5h，過濾，濾渣再加入一半量90%乙醇浸提0.5h，過濾；
[0007](2)重複過濾。合併二次過濾濾液，回收乙醇，剩餘液中加入氯仿，萃取石斛鹼，回收氯仿得總石斛鹼，經90%乙醇提取後的殘渣加入水，在一定溫度下浸提一定時間，過濾，再加入一半量水重複浸提一次，過濾；
[0008](3)提取、純化、合併二次濾液，濃縮，加入無水乙醇，使體系乙醇濃度達到80%(體積比)，在冷庫中靜置過夜，過濾，濾渣經真空乾燥得石斛多糖，石斛鹼浸膏和石斛多糖分別用相應溶劑溶解，定容，石斛鹼浸膏經矽膠柱層析進一步純化，粗石斛多糖經DEAE纖維素柱或葡聚糖凝膠柱進一步純化。
[0009]優選的，所述鐵皮石斛多糖含量的測定採用苯酚蒽酮-硫酸法。
[0010]有益效果:本發明利用纖維素酶提取鐵皮石斛中多糖與石斛鹼，在獲得石斛多糖的同時獲得石斛鹼，且保持了酶法單一提取多糖的高效率，提供了可有效破除細胞壁的影響，促進多糖等的溶出，過程條件溫和，在一定程度上提高了提取率，具有較高的經濟效益。
【具體實施方式】
[0011]為使本發明實現的技術手段、創作特徵、達成目的與功效易於明白了解，下面結合【具體實施方式】，進一步闡述本發明。
[0012]一種鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝，所述工藝中使用原材料包括鐵皮石斛，纖維素酶(生化試劑)，葡萄糖，苯酚，丙酮，石油醚，無水乙醇，其具體步驟包括:(I)乾燥、粉碎、酶解及過濾。乾燥的鐵皮石斛經粉碎後過80目篩，用石油醚脫脂，脫脂後的鐵皮石斛加入溫水，緩緩加入己活化的纖維素酶液，並輕輕攪拌，恆溫酶解一定時間後立即升溫至90°C滅酶，迅速冷卻過濾#濾渣加入90%乙醇浸提0.5h，過濾，濾渣再加入一半量90%乙醇浸提0.5h，過濾；(2)重複過濾。合併二次過濾濾液，回收乙醇，剩餘液中加入氯仿，萃取石斛鹼，回收氯仿得總石斛鹼，經90 %乙醇提取後的殘渣加入水，在一定溫度下浸提一定時間，過濾，再加入一半量水重複浸提一次，過濾；(3)提取、純化、合併二次濾液，濃縮，加入無水乙醇，使體系乙醇濃度達到80 % (體積比)，在冷庫中靜置過夜，過濾，濾渣經真空乾燥得石斛多糖，石斛鹼浸膏和石斛多糖分別用相應溶劑溶解，定容，石斛鹼浸膏經矽膠柱層析進一步純化，粗石斛多糖經DEAE纖維素柱或葡聚糖凝膠柱進一步純化，所述鐵皮石斛多糖含量的測定採用苯酚蒽酮-硫酸法。
[0013]本發明工藝所述纖維素酶法提取石斛多糖與石斛鹼的最佳工藝條件是:纖維素酶用量0.55%，酶解時間1.6h，酶解溫度48°C，酶解PH值5.3。在此條件下，石斛多糖收率達到20%以上，石斛鹼收率達到0.4%以上。
[0014]以上所述僅為本發明的實施例，並非因此限制本發明的專利範圍，凡是利用本發明說明書內容所作的等效結構或等效流程變換，或直接或間接運用在其他相關的【技術領域】，均同理包括在本發明的專利保護範圍內。
【權利要求】
1.一種鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝，其特徵在於，所述工藝中使用原材料包括鐵皮石斛，纖維素酶(生化試劑)，葡萄糖，苯酚，丙酮，石油醚，無水乙醇。
2.根據權利要求1所述的鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝，其特徵在於，其具體步驟包括: (1)乾燥、粉碎、酶解及過濾，乾燥的鐵皮石斛經粉碎後過80目篩，用石油醚脫脂，脫脂後的鐵皮石斛加入溫水，緩緩加入己活化的纖維素酶液，並輕輕攪拌，恆溫酶解一定時間後立即升溫至90 °C滅酶，迅速冷卻過濾#濾渣加入90%乙醇浸提0.5h，過濾，濾渣再加入一半量90%乙醇浸提0.5h，過濾； (2)重複過濾，合併二次過濾濾液，回收乙醇，剩餘液中加入氯仿，萃取石斛鹼，回收氯仿得總石斛鹼，經90%乙醇提取後的殘渣加入水，在一定溫度下浸提一定時間，過濾，再加入一半量水重複浸提一次，過濾； (3)提取、純化、合併二次濾液，濃縮，加入無水乙醇，使體系乙醇濃度達到80%(體積比)，在冷庫中靜置過夜，過濾，濾渣經真空乾燥得石斛多糖，石斛鹼浸膏和石斛多糖分別用相應溶劑溶解，定容，石斛鹼浸膏經矽膠柱層析進一步純化，粗石斛多糖經DEAE纖維素柱或葡聚糖凝膠柱進一步純化。
3.根據權利要求1所述的鐵皮石斛中石斛多糖與石斛鹼的提取工藝，其特徵在於，所述鐵皮石斛多糖含量的測定採用苯酚蒽酮-硫酸法。
【文檔編號】C07D491/08GK104448013SQ201410586453
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年10月27日 優先權日:2014年10月27日
【發明者】張軍 申請人:霍山縣天下澤雨生物科技發展有限公司