阿樸芬及酮基阿樸芬化合物及其藥物用途的製作方法
2023-10-27 18:07:37 2
專利名稱：阿樸芬及酮基阿樸芬化合物及其藥物用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種可用於治療局部缺血性疾病的化合物，特別是關於一種由於其保存或增加內皮性一氧化氮合成酶(eNOS)的機制而可被用來製備預防及治療局部缺血性疾病藥物的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物。
背景技術：
隨著社會的進步，科技的日新月異，使得人們的壽命越來越長，但是也因為年齡、飲食、肥胖、缺乏運動或生活壓力太大等許多原因而產生疾病，其中，缺血性疾病做為人類死亡的主因之一，更是造成殘障的主要因素，使個人、家庭、社會及國家蒙受重大衝擊與損失，所以對於缺血性疾病的預防更顯得重要。
在缺血性疾病中的缺血性中風因具有發病率高、死亡率高、致殘率高、復發率高等特點，進而成為中老年人的多發病、常見病。缺血性中風是指供應腦部血液的顱外或顱內動脈發生閉塞性病變，造成腦組織缺血缺氧，出現一系列的急性臨床症狀，若未能及時恢復供血，神經細胞、膠質細胞和血管將壞死，形成腦梗死，包括腦血栓形成和腦栓塞。
對於缺血性中風而言，真正能「打通血管」的藥物一血栓溶解劑(TissuePlasminogen Activator)，是目前美國食品和藥品管理局批准的唯一有效的血栓栓塞中風治療劑，臺灣在2001年已通過衛生署的核准。然而，其容易伴有腦出血的併發症，且在治療時效上有非常嚴格的限制，即所謂「黃金時段」，於中風後三小時內可以採取靜脈注射，或六小時內配合腦血管攝影在動脈內注射直接將血栓溶解。其它傳統「通血路」的藥物，如抗凝血劑，血小板抑制劑，作用僅是防止血栓繼續生成擴大，無法將已阻塞的血栓溶解掉而打通血路。此外，腦組織保護劑的使用(如Piracetam)也是一種相當有希望的治療方法，不過這種藥劑最好也是在中風後六小時內立刻給予，才有明顯的療效。近年來的研究發現，血栓溶解劑可增強N-甲基D-天冬氨酸(NMDA)受體的信息傳遞，引起神經細胞死亡，使病人出現記憶喪失，體溫下降等副作用，使得利用血栓溶解劑來治療缺血性中風的功效大打折扣。
發明內容
因此，本發明針對上述技術現狀的困擾，提出一類以保存或增加內皮性一氧化氮合成酶(eNOS)的機制用來製備治療局部缺血性疾病藥物的化合物，以有效克服現有技術的缺憾。
本發明的目的在於提供一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，該化合物具有保存或增加內皮性一氧化氮合成酶(eNOS)作用機制，可用以製備預防及治療局部缺血性疾病的藥物，以達到有效治療缺血性疾病的功效。
為達到上述目的，本發明提供的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物具有式I結構 其中，R1、R2、R6、R7選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、OiPr；R3、R5選自H、OH、O-acyl(氧醯基)、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN；R4選自allyl(烯丙基)或CnH2n+1且n≥0；R8選自H、OH、OMe。
本發明提供的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，也可具有式II結構 其中，R1、R3選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN；R2選自allyl或CnH2n+1且n 0；R4、R5選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、OiPr；R6選自H、OH、O-acyl、OMe。
本發明的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，也可具有式III結構 其中，R1、R2選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、OiPr；R3、R5選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN；R4選自allyl或CnH2n+1且n≥0；R6選自H、OH、O-acyl、OMe。
本發明還提供了具有式IV結構的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物
其中，R1、R2、R5、R6選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、OiPr；R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN；R7選自H、OH、O-acyl、OMe。
本發明進一步提供了一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，所述化合物具有式V結構 其中，R1、R2選自H、acyl、Me、Et、nPr或iPr；R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN。
本發明還提供了一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，所述化合物具有式VI結構
其中，R1、R2選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NO2或CN；R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、或OiPr；及R5選自H、OH、O-acyl、OMe。
本發明還提供了一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，所述化合物具有式VII結構 其中，R1、R2、R5、R6選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr或OiPr；R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NO2或CN；R7選自H、OH、O-acyl、OMe。
本發明還提供了一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，所述化合物具有式VIII結構 其中，R1、R2選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr或OiPr；R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NO2或CN；R5選自H、OH、O-acyl、OMe。
本發明的化合物可用於製備治療哺乳動物或人類的缺血性疾病的藥物，具體地，所述缺血性疾病包括缺血性腦中風、缺血性腦血栓症、缺血性腦栓塞症、缺氧缺血性腦症、缺血性心臟病及缺血性腸病變等疾病。
本發明提供了上述用以製備預防及治療局部缺血性疾病藥物的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，該化合物利用使血管放鬆並擴張的方法，比現有技術利用將已阻塞的血栓溶解掉而打通血路的方法更有效。所述的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物在治療缺血性疾病時，不會使病人出現記憶喪失、體溫下降等副作用，使治療過程可達到更完美的功效。
本發明還揭示了上述阿樸芬及酮基阿樸芬化合物預防和治療局部缺血性疾病中的藥物用途，更進一步揭示上述阿樸芬及酮基阿樸芬化合物用於治療哺乳動物或人類的缺血性疾病的藥物用途。
本發明還提供了可用於預防及治療局部缺血性疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的上述阿樸芬及酮基阿樸芬化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
下面藉由具體實施方案對本發明的內容詳加說明，以利閱讀者更容易了解本發明的目的、技術內容、特點及其功效，但不應理解為對本發明的可實施及保護範圍的任何限定。
圖1為藥效實驗中第一組及第二組的實驗結果比較曲線圖。
圖2為藥效實驗中第一組及第三組的實驗結果比較曲線圖。
圖3為使用本發明的力瑞得寧(liriodenine)於局部缺血30分鐘後且經2小時再灌流作用後的eNOS蛋白與α-微管素表現的效果示意圖。
圖4為使用本發明的力瑞得寧(liriodenine)於人的臍帶靜脈血管內皮細胞(HUVEC)的eNOS蛋白表現的效果示意圖。
具體實施例方式
人體血管組織能自行合成一氧化氮(nitric oxide，NO)，而一氧化氮可使血管擴張，因此與血壓調節有密切關係。其中，內生性一氧化氮在血管平滑肌的舒張作用中扮演了重要的角色，在離體主動脈環、局部血管床及全身實驗中，急性阻斷NO生成均會導致血管收縮及血壓升高。而在哺乳動物的體內中，一氧化氮的製造過程是由L-精胺酸(L-arginine)在一氧化氮合成酶(NOS)的催化下，經過中間產物轉換成L-西瓜胺酸(L-citrulline)和NO，如下所示 NOS主要分成三類，包含神經性(neuronal NOS，或nNOS、type I NOS)、誘導性(inducible NOS，或iNOS、type II NOS)及內皮性(endothelialNOS，或eNOS、type III NOS)，其中，eNOS負責調節血管張力，而一氧化氮傳導信息的功能和作用機制因其出自的地方而不同。eNOS主要功能有三種(1)在神經突觸是當作神經傳導因子，和腦部學習及記憶有關；(2)在血管內皮是使血管的平滑肌細胞鬆弛而擴張血管，可以降低血壓；及(3)在巨噬細胞可損壞腫瘤細胞而將其殺死或停止其繁殖。另外，nNOS和eNOS是組合式，需要鈣離子和調鈣蛋白首先組合，然後再與nNOS或eNOS組合產生催化作用；iNOS是誘髮式，不需要鈣離子和調鈣蛋白，細胞素可直接誘發iNOS產生催化作用。由於不需要鈣離子和調鈣蛋白，iNOS常開始誘發就不可停止，可以作用幾個小時，造成製造一氧化氮過度，使一氧化氮變成有害物質。本發明之前的一些化合物利用保存或增加eNOS的機制的研究大多集中於治療心臟血管疾病(如心律不齊，Su MJ，et al，Drug Development Research，2001，52446-453)，而在本發明中，將透過一些新型化合物，利用此機制應用在預防及治療中風等缺血性疾病方面，以下將說明利用此機制治療缺血性疾病的方法與結果。
本發明提供了一種用以預防及治療局部缺血性疾病的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，其利用保存或增加內皮性一氧化氮合成酶(eNOS)的機制來達到預防及治療局部缺血性疾病的功效，此化合物可為力瑞得寧(liriodenine)，在此作為式VI化合物的其中之一作為驗證本發明功效的優選實施例，如下所示 將此liriodenine化合物施用在雄性大鼠(Male Sprague Dawley rats)身上，觀察liriodenine對大鼠腦動脈阻塞性的腦缺血的作用。首先，將大鼠經由中腦血管動脈阻塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)製造永久性腦缺血，接著於中腦動脈阻塞後的0、6、24、48及54小時，靜脈注射(IV途徑)5ml/kg的溶媒(0.9％NaCl)作為第一實驗組(賦形劑對照組)、由靜脈注射0.1mg/kg的liriodenine作為第二實驗組(PT#1010853-ADD(NTU-12)(NTU-106))，以及由靜脈注射0.1mg/kg的N-甲基D-天冬氨酸(NMDA)受體阻斷劑MK-801作為第三實驗組，每組均利用六隻大鼠進行實驗，每隻大鼠在注射藥物前及注射藥物後15分鐘由肛門量測體溫，且在中腦動脈阻塞後第4天將每隻大鼠斷頭處死並進行腦部切片，再以2％的甲酚紫染色，記錄每片切片因缺血損傷的面積及體積，結果如表1、表2及表3所示，將三者數據整理比較如表4所示，也可將實驗結果利用曲線來表示，如圖1所示，為本實驗中第一組及第二組之實驗結果比較曲線圖，如第二圖所示，為本實驗中第一組及第三組的實驗結果比較曲線圖。由這些表及曲線圖的揭示可以發現利用本發明進行缺血性中風治療具有明顯減少缺血損傷體積及面積的功效，而且與現正大力研究的中風治療劑MK-801減少的量比較要大得多。體溫方面結果如表5、表6及表7所示，和第一組的實驗結果比較，本發明不會造成體溫的大幅改變，而MK-801卻產生了體溫下降的不良反應。
接著，利用圖3及圖4所示實驗結果驗證化合物liriodenine可保護eNOS或促進eNOS的產生，進而達到預防及治療局部缺血性疾病的目的。
如圖3所示，為使用本發明的liriodenine對大鼠心臟局部缺血30分鐘後，再經2小時灌流作用後的eNOS蛋白所表現的效果示意圖，並有α-微管素(α-tubulin)的表現做為標準量化的指標。在此圖式中，a圖表示公鼠心臟在正常狀態下的eNOS表現與α-微管素表現；b圖表示將心臟左前降枝冠狀動脈(LAD)結紮並以含賦形劑(vehicle)溶液再灌流的非阻塞區域的eNOS表現與α-微管素表現；c圖為將心臟左前降枝冠狀動脈結紮並以賦形劑再灌流的阻塞區域的eNOS表現與α-微管素表現；d圖為將心臟左前降枝冠狀動脈結紮並以含1μM的liriodenine溶液再灌流的非阻塞區域的eNOS表現與α-微管素表現；以及e圖則為將心臟左前降枝冠狀動脈結紮並以含1μM的liriodenine溶液再灌流的阻塞區域的eNOS表現與α-微管素表現。由該等eNOS相對於α-微管素的表現即可得知，利用含liriodenine溶液進行再灌流可使心臟eNOS的表現接近正常值，足以證明本發明化合物如liriodenine有促進eNOS的表現或使其表現量維持恆定的功效。
如圖4所示，此為在去除血清後使用本發明的liriodenine對於人臍帶靜脈血管內皮細胞(HUVEC)的eNOS蛋白表現的效果示意圖。其中的SD不等數分離(segregation distorter，SD)現象，SD指的是自然族群裡出現的一個染色體。其為利用密度影像軟體對相關蛋白增加級數進行定量，圖中顯示的結果為具有相同結果的三個獨立實驗的代表圖形，並以α-微管素表現量做為標準量化後，去除血清的HUVEC eNOS的量化恆定為1，其中P＜0.05，意思為相比較於去除血清的HUVEC eNOS有顯著性差異。由圖4的實驗結果可知經由liriodenine 0.3及1μM濃度處理的臍帶靜脈血管內皮細胞的eNOS可明顯增加，此結果證明liriodenine有保護eNOS或促進eNOS產生的功效。
因此，本發明利用另一機制即增加內皮型NO合成酶(eNOS)以維持內皮功能完整，包括抑制白細胞和血小板粘附及調節血張力等。轉基因動物模型更明確地顯示了它們各自在腦缺血中的作用，在局部性腦缺血情況下，eNOS基因剔除(knockout)的小鼠形成的梗塞大，而缺少iNOS基因的小鼠與野生型相比梗塞大為縮小，nNOS基因剔除2(knockout2)的小鼠形成的梗塞也小。使得本發明在減少公鼠腦缺血體積和面積的同時，並不會造成如NMDA受體阻斷劑MK801的這些副作用。
再者，上述化合物除了可用於治療公鼠外，對於其它哺乳動物及人類等的缺血性疾病也有相同的功效，而在缺血性疾病中除了缺血性腦中風外，對於缺血性腦血栓症、缺血性腦栓塞症、缺氧缺血性腦症、缺血性心臟病或缺血性腸病變等疾病亦同樣具有相同的功效。
表1
表2
表3
表4
*P＜0.05表5
表6
表7
另外，前述用以保存或增加內皮性一氧化氮合成酶(eNOS)的機制，並用以預防及治療局部缺血性疾病的式VI化合物 除了R1、R2、R3、R4及R5皆為H之外，R1及R2可為OH、OMe、F、Cl、Br、NO2或CN；R3及R4可為OH、OEt、OnPr、OiPr或O-acyl；且R5可為OH或OMe，以上不同的化合物皆可達到對於人類或其它哺乳類動物預防與治療缺血性疾病的功效。
除了上述式VI化合物之外，用以預防及治療局部缺血性疾病的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物亦可為式I化合物 其中，R1、R2、R6、R7為H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr或OiPr；R3、R5為H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN；R4為allyl或CnH2n+1且n≥0；R8為H、OH、OMe。
用以預防及治療局部缺血性疾病的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物亦可為式II化合物
其中，R1、R3為H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN；R2為allyl或CnH2n+1且n≥0；R4、R5為H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr或OiPr；及R6為H、OH、O-acyl、OMe等。
用以預防及治療局部缺血性疾病的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物又可為式III化合物 其中，R1、R2為H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr或OiPr；R3、R5為H、OH、O-acyl、OMe、Cl、Br、NH2、NO2或CN；R4為allyl或CnH2n+1且n≥0；及R6為H、OH、O-acyl、OMe。
用以預防及治療局部缺血性疾病的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物又可為式IV化合物
其中，R1、R2、R5、R6為H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、OiPr；R4為H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN；R7為H、OH、O-acyl、OMe。
用以預防及治療局部缺血性疾病的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物又可為式V化合物 其中，R1、R2為H、acyl、Me、Et、nPr或iPr；及R3、R4為H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN。
用以預防及治療局部缺血性疾病的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物又可為式VII化合物 其中，R1、R2、R5、R6為H、OH、OAc、OMe、OEt、OnPr或OiPr；R3、R4為H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NO2或CN；R7為H、O-acyl、OMe。
用以預防及治療局部缺血性疾病的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物又可為式VIII化合物
其中，R1、R2為H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr或OiPr；R3、R4為H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NO2或CN；及R5為H、OH、O-acyl、OMe。
其中，前述式I至式VIII所示的化合物可與藥學上可接受的載體或賦形劑共存其中，且此載體或賦形劑通常為乳醣。
以上所述的幾種不同結構的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物皆可用於治療哺乳動物或人類的缺血性疾病，該缺血性疾病包括缺血性腦中風、缺血性腦血栓症、缺血性腦栓塞症、缺氧缺血性腦症、缺血性心臟病或缺血性腸病變等。
在詳述了阿樸芬及酮基阿樸芬化合物的各種類型及其所達成目的和功效之後，接續以下列幾個具體實施例來說明該阿樸芬及酮基阿樸芬化合物的製備方法。
實施例12，9-二異丙氧基1，10-二甲氧基7-酮基阿樸芬(3)(2，9-Diisopropyloxy-1，10-dimethoxy-7-oxoaporphine，式VII的化合物，其中R1＝R6＝OMe，R2＝R5＝OiPr，R3＝R4＝R7＝H)及9-羥基2-異丙氧基1，10-二甲氧基7-酮基阿樸芬(4)(9-Hydroxy-2-isopropyloxy-1，10-dimethoxy-7-oxoaporphine，式VII的化合物，其中R1＝R6＝OMe，R2＝OiPr，R3＝R4＝R7＝H，R5＝OH)的製備1、2，9-二異丙氧基1，10-二甲氧基N-甲基阿樸芬(2)(2，9-Diisopropyloxy-1，10-dimethoxy-N-methylaporphine，式I的化合物，其中R1＝R7＝OMe，R2＝R6＝OiPr，R3＝R5＝R8＝H，R4＝Me)的製備將波爾定鹼(Boldine)(1，1.6 3克，5毫摩爾)、無水酒精(50毫升)及無水碳酸鉀(3.0克)依序加入250毫升的圓底瓶中，在70℃油浴中攪拌，再於1小時內逐滴加入碘化異丙烷(3.4克20毫摩爾)的無水酒精(10毫升)溶液，反應8小時後冷卻至室溫，濾除無機沉澱物，再以酒精洗滌沉澱物，將濾液與洗滌液減壓濃縮後的殘留物溶於氯仿(150毫升)，以10％氫氧化鈉水溶液(50毫升)及水(50毫升×3)連續抽提雜質，氯仿層再以無水硫酸鈉脫水、減壓濃縮，所得殘留物再以鹼性鋁礬膠管柱層析分離，以氯仿衝提得2，9-diisopropyloxy-1，10-dimethoxy-N-methylaporphine(2)(1.54克，75％產率)1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.40(6H，d，J＝6.1Hz，2x CH3)，1.43(6H，d，J＝6.2Hz，2x CH3)，2.52(3H，s，NCH3)，3.64(3H，s，1-OCH3)，3.85(3H，s，1O-OCH3)，4.54(1H，m)and 4.59(1H，m)(2x OCH)，6.56(1H，s，H-3)，6.76(1H，s，H-8)，8.06(1H，s，H-11)。
2、2，9-二異丙氧基1，10-二甲氧基7-酮基阿樸芬(3)(2，9-diisopropy1oxy-1，10-dimethoxy-7-oxoaporphine，式VII的化合物，其中，R1＝R6＝OMe，R2＝R5＝OiPr，R3＝R4＝R7＝H)的製備將四乙酸鉛(95％，483毫克，1.09毫摩爾)加入化合物(2)(137毫克，330微摩爾)的乙酸溶液(5毫升)中，在室溫下攪拌反應12小時。反應液加入水(150毫升)，以氯仿(50毫升×4)連續抽提，氯仿層再以飽和碳酸氫鈉水溶液(50毫升)、10％硫代硫酸鈉水溶液(50毫升)及水(50毫升×2)連續洗滌，再以無水硫酸鈉脫水、減壓濃縮，所得殘留物再以矽膠管柱層析分離，以氯仿衝提得2，9-diisopropyloxy-1，10-dimethoxy-7-oxoaporphine(3)(68毫克，50％產率)m.p.82-84℃；
IR(KBr)γmax2976，2933，1654，1590，1563，1508，1459，1431，1416，1359，1296，1275，1241，1216，1138，1110，1057，1009，9956，925，887，864，782cm-1；1H NMR(200MHz，CDCl3)δ1.44(6H，d，J＝6.1Hz，2x CH3)，1.53(6H，d，J＝6.1Hz，2x CH3)，4.01(3H，s，1-OCH3)，3.85(3H，s，10-OCH3)，4.87(2H，m)(2x OCH)，7.79(1H，d，J＝5.4Hz，H-4)，7.96(1H，s，H-8)，8.75(1 H，s，H-11)，8.86(1H，d，J＝5.4Hz，H-5)；13C NMR(50MHz，CDCl3)δ21.7(2C，q)，21.9(2C，q)，56.0(q)，60.4(q)，70.9(d)，71.2(d)，107.2(d)，110.6(d)，112.2(d)，120.2(s)，121.3(s)，123.2(d)，126.7(s)，128.8(s)，135.4(s)，14.59d)，145.3(s)，147.8(s)，151.5(s)，154.6(s)，154.8(s)，181.3(s)；ESI MS(positive)[M+H]+408。
3、9-羥基2-異丙氧基1，10-二甲氧基7-酮基阿樸芬(4)(9-hydroxy-2-i sopropyloxy-1，10-dimethoxy-7-oxoaporphine，式VII的化合物，其中Ri＝R6＝OMe，R2＝R5＝OiPr，R3＝R4＝R7＝H)的製備取化合物(3)(50毫克)的乙酸-硫酸溶液(964，5毫升)，此反應液在氮氣下加熱回流1小時。於冷卻至室溫後減壓濃縮、中和(氨水)、氯仿抽提(100毫升×2)，氯仿層再以水(50毫升×2)洗滌、無水硫酸鈉去水、減壓濃縮，所得殘留物再以矽膠管柱層析分離，以氯仿-甲醇(973)衝提得棕色9-hydroxy-2-isopropyloxy-1，10-dimethoxy-7-oxoaporphine(4)(10毫克，22％產率)m.p.240-242℃；IR(KBr)γmax3422，3008，2977，2932，1728，1651，1593，1513，1461，1417，1380，1351，1280，1247，1213，1149，1116，1059，1013，932，894，866，822cm-1；1H NMR(200MHz，CD3OD)δ1.51(6H，d，J＝6.0Hz，2x CH3)，4.01(3H，s，OCH3)，4.02(3H，s，OCH3)，4.87(1H，m，OCH)，7.25(1H，s，H-3)，7.74(1H，s，H-8)，7.83(1H，d，J＝4.8Hz，H-4)，8.63(1H，d，J＝4.8Hz，H-5)，8.68(1H，s，H-11)；ESI MS(positive)[M+H]+366。
實施例21，10-二甲氧基7-酮基阿樸芬(7)(1，10-Dimethoxy-7-oxoaporphine，式VII化合物，其中R1＝R6＝Me，R2＝R3＝R4＝R5＝R7＝H)的製備1、1，10-二甲氧基N-甲基阿樸芬(6)(1，10-dimethoxy-N-methylaporphine，式I化合物，其中R1＝R7＝OMe，R2＝R3＝R5＝R6＝R8＝H，R4＝Me)的製備於圓底瓶(500毫升)中依序加入波爾定鹼(boldine，(1)，10.0克，30.58毫摩爾)、氰乙烷(350毫升)、無水碳酸鉀(8.4克，61毫摩爾)及5-chloro-1-phenyltetrazole(TzCl，12.14克，33.64毫摩爾)，此混合物加熱回流反應24小時。冷卻後濾除無機鹽，再以氰乙烷洗滌沉澱物，將濾液與洗滌液減壓濃縮後的殘留物溶於氯仿(400毫升)，以水(200毫升×2)抽提雜質，氯仿層再以無水硫酸鈉脫水、減壓濃縮，所得殘留物再以矽膠(500克)管柱層析分離，以氯仿-甲醇(99∶1)衝提得2，9-0-bis(1-phenyltetrazol-5-yl)-1，10-dimethoxy-N-methylaporphine(5)(18克，96％產率)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.55(3H，s，NCH3)，3.46(3H，s，1-OCH3)，3.76(3H，s，10-OCH3)，7.19(1H，s，H-3)，7.31(1H，s，H-8)，7.42-7.60(6H，m)and 7.83-7.87(4H，m)(C6H5×2)，8.04(1H，s，H-11)。
於化合物(5)(8克)的乙酸溶液(55毫升)中，加入10％鈀/活性碳(1克)，於120psi氫氣及50℃下反應三天。冷卻後，以硅藻土濾除鈀/活性碳，用氯仿洗滌濾除物，將濾液與洗滌液減壓濃縮後的殘留物溶於氯仿(200毫升)，以10％氫氧化鈉水溶液(50毫升×2)及水(100毫升×2)抽提雜質，氯仿層以無水硫酸鈉去水、減壓濃縮，殘留物以矽膠管柱層析分離，以氯仿-甲醇(98∶2)衝提得1，10-dimethoxy-N-methylaporphine(6)(4.12克，90％產率)1H NMR(200MHz，CDCl3)δ2.55(3H，s，NCH3)，3.82(3H，s，1-OCH3)，3.85(3H，s，10-OCH3)，6.76(1H，dd，J＝2.7，8.3Hz，H-9)，6.87(1H，d，J＝8.5Hz，H-2)，7.04(1H，d，J＝8.5Hz，H-3)，7.16(1H，d，J＝8.3Hz，H-8)，7.89(1H，d，J＝2.7Hz，H-11)；13C NMR(50MHz，CDCl3)δ28.3(t)，33.6(t)，43.7(q)，53.1(t)，55.3(q)，55.7(q)，63.1(d)，110.9(d)，112.1(d)，114.7(d)，121.9(s)，125.2(s)，128.1(d)，128.3(s)，128.6(d)，133.0(s)，136.2(s)，155.0(s)，158.1(s)。
2、1，10-二甲氧基7-酮基阿樸芬(7)(1，10-Dimethoxy-7-oxoaporphine，式VII化合物，其中R1＝R6＝Me，R2＝R3＝R4＝R5＝R7＝H)的製備將三乙酸鉈(thallium triacetate)(816毫克，2毫摩爾)加入化合物(6)(148毫克，0.5毫摩爾)的乙酸溶液(10毫升)中，在70℃下攪拌反應1小時。反應液加入水(150毫升)，以氯仿(50毫升×4)連續抽提，氯仿層再以飽和碳酸氫鈉水溶液(50毫升)、10％硫代硫酸鈉水溶液(50毫升)及水(50毫升×2)連續洗滌，再以無水硫酸鈉脫水、減壓濃縮，所得殘留物再以矽膠管柱層析分離，以氯仿-甲醇(99∶1)衝提得1，10-dimethoxy-7-oxoaporphine(7)(100毫克，69％產率)m.p.162-164℃；
IR(KBr)γmax2934，2839，1644，1617，1584，1540，1484，1455，1406，1373，1351，1325，1255，1169，1119，1048，1025，985，859，810cm-1；1H NMR(400MHz，CDCl3-CD3OD，δCHCl37.24)δ3.79(3H，s，10-OCH3)，4.04(3H，s，1-OCH3)，6.88(1H，dd，J＝2.4，8.8Hz，H-9)，7.47(1H，d，J＝9.2Hz，H-2)，7.73(1H，d，J＝4.7Hz，H-4)，7.77(1H，d，J＝9.2Hz，H-3)，8.29(1H，d，J＝8.8Hz，H-8)，8.35(1H，d，J＝2.4Hz，H-11)，8.64(1H，d，J＝4.7Hz，H-5)；13C NMR(100MHz，CDCl3-CD3OD，δCDCl377.0)δ55.2(q)，56.3(q)，112.3(s)，113.5(d)，113.8(d)，119.7(d)，124.9(d)，125.0(s)，125.9(s)，130.7(d)，130.8(d)，132.3(s)，136.6(s)，141.8(d)，144.6(s)，159.0(s)，164.2(s)，180.7(s)；ESI MS(positive)[M+Na]+314。
本發明提供一種利用保存或增加內皮性一氧化氮合成酶(eNOS)的機制用以預防及治療局部缺血性疾病的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，其使所有缺血性疾病都可藉由eNOS的保存與增加來有效達到預防及治療的功效；且在治療缺血性疾病時，不會使病人有記憶喪失、體溫下降等現象的副作用，使本發明可達到更完善、無副作用的功效；而利用使血管放鬆並擴張的方式，比現有技術利用將已阻塞的血栓溶解掉而打通血路的方法具有更佳功效。
以上描述了本發明的優選實施方式，然其並非用以限定本發明。本領域技術人員對在此公開的實施方案可進行並不偏離本發明範疇和精神的改進和變化。
權利要求
1.一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，為具有式I結構的化合物 其中，R1、R2、R6、R7選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、OiPr，R3、R5選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN，R4選自Allyl(烯丙基)或CnH2n+1且n≥0，R8選自H、OH、OMe。
2.一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，為具有式II結構的化合物 其中，R1、R3選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN，R2選自allyl或CnH2n+1，且n≥0，R7選自H、OH、OMe，R4、R5選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、OiPr，R6選自H、OH、O-acyl、OMe。
3.一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，為具有式III結構的化合物 其中，R1、R2選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、OiPr，R3、R5選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN，R4選自Allyl或CnH2n+1且n≥0，R6選自H、OH、O-acyl、OMe。
4.一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，為具有式IV結構的化合物 其中，R1、R2、R5、R6選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、OiPr，R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN，R7選自H、OH、O-acyl、OMe。
5.一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，為具有式V結構的化合物 其中，R1、R2選自H、acyl、Me、Et、nPr或iPr，R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2或CN。
6.一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，為具有式VI結構的化合物 其中，R1、R2選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NO2或CN，R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr、或OiPr，及R5選自H、OH、O-acyl、OMe。
7.一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，為具有式VII結構的化合物 其中，R1、R2、R5、R6選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr或OiPr，R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NO2或CN，R7選自H、OH、O-acyl、OMe。
8.一種阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，為具有式VIII結構的化合物 其中，R1、R2選自H、OH、O-acyl、OMe、OEt、OnPr或OiPr，R3、R4選自H、OH、O-acyl、OMe、F、Cl、Br、NO2或CN，R5選自H、OH、O-acyl、OMe。
9.權利要求1-8任一項所述阿樸芬或酮基阿樸芬化合物在製備用於預防和治療局部缺血性疾病的藥物中的用途。
10.權利要求1-8任一項所述阿樸芬或酮基阿樸芬化合物在製備用於治療哺乳動物或人類的缺血性疾病的藥物中的用途。
11.權利要求10所述的用途，其中，所述缺血性疾病包括缺血性腦中風、缺血性腦血栓症、缺血性腦栓塞症、缺氧缺血性腦症、缺血性心臟病及缺血性腸病變。
12.用於預防及治療局部缺血性疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的式I的化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
13.用於預防及治療局部缺血性疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的式II的化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
14.用於預防及治療局部缺血性疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的式III的化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
15.用於預防及治療局部缺血性疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的式IV的化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
16.用於預防及治療局部缺血性疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的式V的化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
17.用於預防及治療局部缺血性疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的式VI的化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
18.用於預防及治療局部缺血性疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的式VII的化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
19.用於預防及治療局部缺血性疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的式VIII的化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。
全文摘要
本發明提供一種用以製備預防、治療局部缺血性疾病的藥物的阿樸芬及酮基阿樸芬化合物，該化合物的藥用機制為保存或增加內皮性一氧化氮合成酶(eNOS)，因而可用以製備預防、治療哺乳動物或人類的局部缺血性疾病的藥物，所述的缺血性疾病包括缺血性腦中風、缺血性腦血栓症、缺血性腦栓塞症、缺氧缺血性腦症、缺血性心臟病或缺血性腸病變等。
文檔編號A61K31/4353GK1566100SQ0313738
公開日2005年1月19日 申請日期2003年6月19日 優先權日2003年6月19日
發明者蘇銘嘉, 李水盛 申請人:美時化學製藥股份有限公司