一種治療乳腺增生的藥物組合物及其製備方法

2023-11-04 13:40:47 2

專利名稱：：一種治療乳腺增生的藥物組合物及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及一種藥物組合物及其製備方法，特別涉及一種治療乳腺增生的藥物組合物及其製備方法。乳腺疾病包括乳房發育不良、乳腺炎、乳腺增生、乳腺癌、乳腺纖維瘤、導管瘤等，據統計，乳腺病的發病率佔成年女性的48%,若長期得不到治療，容易引發乳腺癌。5060年代，我國乳腺疾病發病率為10%左右，8090年代上升到30%40%。癌變程度也呈上升趨勢，5060年代癌變率為7.9/10萬，8090年代為43.4/10萬。其中乳腺增生病是中青年婦女常見病、多發病，是一種常見非炎性非腫瘤性疾病，其發病率佔育齡婦女的40%左右，佔全部乳房病的75%,是最常見的乳房疾病，其中約有2%4%的患者可發生囊性增生而癌變，故不少婦女患了此病後，迫切要求診治和排除乳腺癌。因此，提高本病療效至關重要。近年來，對乳腺增生病的實驗研究越來越深入，也取得了不少成果，現代醫學認為其與內分泌功能紊亂有關，以乳房疼痛和乳房腫塊為主要特徵。中醫則認為乳腺增生病的發生總由肝鬱氣滯，或肝腎虛損，衝任失調，或痰凝血瘀而成，以乳房有形狀大小不一的腫塊，疼痛，與月經周期相關為主要表現的乳房病類疾病。本發明的一個目的在於公開一種治療乳腺增生的藥物組合物；本發明的另一個目的在於公開製備一種治療乳腺增生的藥物組合物的方法。本發明目的是通過如下技術方案實現的本發明藥物組合物的原料藥組成為
背景技術：
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發明內容柴胡12-18重量份延胡索12-18重量份王不留行12-18重量份白朮12-18重量份香附12-18重量份茯苓12-18重量份山慈菇12-18重量份鬱.金12-18重量份肉蓯蓉2-18重量份2-18重量份。t份t份t份池池:份。7重量份當歸19-26重量份皂角剌7-11重量份本發明藥物組合物的原料藥組成優選為:柴胡15重量份香附延胡索15重量份茯苓王不留行15重量份山慈菇白朮15重量份鬱金當歸22.5重量份肉蓯蓉皂角刺9重量份淫羊藿本發明藥物組合物的原料藥組成優選為柴胡14重量份香附延胡索17重量份茯苓王不留行14重量份山慈菇白朮17重量份鬱金當歸19重量份肉蓯蓉皂角刺10重量份淫羊藿本發明藥物組合物的原料藥組成優選為柴胡17重量份香附延胡索13重量份茯苓王不留行17重量份山慈菇白朮13重量份鬱金當歸25重量份肉蓯蓉皂角刺8重量份淫羊藿所述香附優選為醋制香附，王不留行優選為炒王不留行。取上述組合物原料藥，加入常規輔料，按照常規工藝，製成臨床接受的劑型，包括但不限於丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體製劑或凍乾粉針劑。本發明藥物組合物的製備方法包括如下步驟取一半量延胡索粉碎，過100目篩，得延胡索細粉，備用；取柴胡、香3重量份7重量份7重〗7重二7重]t份t份t份t份t份〖份<附、白朮、鬱金、當歸五味藥材蒸餾提取揮髮油，收集揮髮油，揮髮油用e-環糊精包合，備用，蒸餾後的水溶液另器收集；將藥渣、剩餘延胡索及茯苓、王不留行、山慈菇、肉蓯蓉、皂角刺、淫羊藿加6-10倍量水，煎煮l-3次，每次l一3小時，將每次煎液與上述蒸餾後的水溶液合併，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.01.1，加乙醇使含醇量達30_50%，靜置40—55小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，再加乙醇使含醇量達40—60%,靜置40—55小時，濾過，濾液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.201.25的稠膏，加入延胡索細粉，真空乾燥，粉碎，制粒，乾燥後與經e-環糊精包合後的揮髮油混合，經常規工藝加入常規輔料製成臨床接受的丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體製劑、貼劑或凍乾粉針劑。本發明藥物組合物的製備方法優選如下取一半量延胡索粉碎，過100目篩，得延胡索細粉，備用；取柴胡、香附、白朮、鬱金、當歸五味藥材蒸餾提取揮髮油，收集揮髮油，揮髮油用3-環糊精包合，備用，蒸餾後的水溶液另器收集；將藥渣、剩餘延胡索及其餘茯苓、王不留行、山慈菇、肉蓯蓉、皂角刺、淫羊藿加8倍量水，煎煮2次，每次2小時，將2次煎液與上述蒸餾後的水溶液合併，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.01.1，加乙醇使含醇量達40%,靜置48小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，再加乙醇使含醇量達50%，靜置48小時，濾過，濾液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.201.25的稠膏，加入延胡索細粉，真空乾燥，粉碎，制粒，乾燥後與經e-環糊精包合後的揮髮油混合，經常規工藝加入常規輔料製成臨床接受的丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體製劑、貼劑或凍乾粉針劑。本發明藥物組合物具有很好的調理衝任、疏肝解鬱、散結止痛作用；具有抗炎、鎮痛、活血化瘀和改善乳腺增生模型大鼠性激素水平，治療婦女乳腺增生的作用；口服安全，在製劑上，工藝成熟，質量可控。本發明藥物組合物能明顯地抑制實驗性乳腺增生大鼠乳頭直徑；對實驗性乳腺增生大鼠乳頭高度、乳房重量和體積具有抑制作用，對實驗性乳腺增生大鼠乳腺腺泡直徑、乳腺小葉平均直徑、乳腺小葉腺泡數量增大和增多具有抑制作用，對實驗性乳腺增生大鼠乳腺導管腔分泌物增多和導管上皮增生具有抑制作用，對大鼠慢性增生性炎症有抑制作用，綜上，說明本發明藥物組合物有抗小鼠急性炎症作用，並對小鼠熱刺激引起的疼痛有鎮痛作用。實驗結果說明，本發明藥物組合物具有抗炎、鎮痛、活血化瘀和改善乳腺增生模型大鼠性激素水平，治療婦女乳腺增生的作用。以上重量份與體積份的關係是克每毫升的關係。下面實驗和實施例用於進一步說明但不限於本發明實驗例l藥效學實驗1.試驗藥物本藥物組合物膠囊製劑0.38g/粒，相當於生藥2.Olg(每克藥粉相當於生藥5.3g),由陝西中醫學院藥物研究所提供，批號20071201，以蒸餾水配成所需濃度的溶液。2.對照藥和試劑乳癖消片，遼寧好護士藥業(集團)有限責任公司國藥準字Z21021823，批號070926;苯甲酸雌二醇，上海通用藥業股份有限公司，批號070104;黃體酮，浙江仙琚製藥股份公司，批號070402;氫化可的松注射液，西安利君製藥有限責任公司，國藥準字H61021633，批號070531;阿司匹林片，西安利君製藥有限公司，國藥準字H61021710，批號0712520。雌二醇、孕酮和人垂體泌乳素等測定試劑盒，天津九鼎醫學生物工程有限公司，批號分別為TRG60806，TRG50804、TRG30804和TRG40804;雌激素受體(BA0345)、孕激素受體(BA2221)、DAB顯色試劑盒(AR1022)和SABC(SA2005)試劑盒，武漢博士德生物工程有限公司。3.試驗器材FM-2000Y免疫計數器，西安凱普機電有限責任公司；FA1004型電子天平，上海良平儀器儀表有限公司；HH-4數顯恆溫水浴鍋，國華電器有限公司；DP71型-OLYMPUS光學顯微鏡(日本)。4.試驗動物:ICR品系小白鼠，III級(SPF級)，雌性，體重1822g，質量合格證"SCXK(陝2007-001)";SD品系大白鼠，III級(SPF級)，雌性，體重200250g,質量合格證"SCXK(陝2007_001)"，由西安交通大學醫學院實驗動物中心提供。動物分籠飼養，食固體飼料，食水自由，詞料由西安交通大學醫學院實驗動物中心提供。室溫182(TC,相對溼度60%70%。5、統計處理進行組間比較t檢驗；自身比較的多次測量的方差分析;等級資料使用非參數檢驗(Mann-WhitneyU)分析。6、實驗方法及結果(1)對乳腺增生模型大鼠的乳腺組織形態學的影響①對乳腺增生模型大鼠乳頭直徑、高度、乳房體積和重量的影響大鼠60隻，雌性，隨機分為6組，每組10隻。第一組為正常對照組，給等容積蒸餾水；第二組為模型對照組，給等容積蒸餾水；第三組為陽性對照組，給乳癖消片O.96g/kg(成藥)；第四、五、六組為本發明藥物組合物組，分別給本發明藥物組合物1.91、3.82、7.64g生藥/kg。試驗期間正常對照組大鼠給予等容積蒸餾水，除空白對照組外，其餘各組大鼠肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg，每天1次，連續25天後改用黃體酮4mg/kg，每天1次，連續5天，在此基礎上，用夾尾方式激怒大鼠，製成肝鬱脾虛證乳腺增生病大鼠病理模型。然後用遊標卡尺測量每隻大鼠胸部第2對乳頭直徑，並開始灌胃給藥l次/日，連續30天。實驗過程中每天觀察動物一般狀況，於造模前、給藥前、給藥後15、30天分別稱測量大鼠乳頭直徑。末次給藥後24小時，測量第2對乳頭直徑、高度；以8mm打孔器取下第2對完整乳房，電子天平稱重、計算乳腺體積(最大徑X最小徑X厚度)。結果見表l、2。表l本發明藥物組合物對乳腺增生大鼠乳頭直徑的影響G±s)tableseeoriginaldocumentpage10與正常對照組比較P〈0.01;與模型對照組比較P<0.05，P〈0.05，**P〈0.01由表2可見，本發明藥物組合物明顯地抑制實驗性乳腺增生大鼠乳頭高度、乳房重量和體積，與模型對照組比較，中、大劑量組的乳頭高度均有顯著性差異(P<0.01)，三個劑量組的乳房重量和體積均有顯著性差異(P<0.05或P〈0.01)。說明本發明藥物組合物對實驗性乳腺增生大鼠乳頭高度、乳房重量和體積具有抑制作用。陽性對照藥乳癖消片也同樣具有抑制作用。②對乳腺增生模型大鼠乳腺腺泡直徑、數量和分泌物的影響分組、造模和給藥方式與上述相似，末次給藥後24小時，乙醚麻醉下手術，取胸部第3對乳房的乳腺，固定於10%中性福馬林溶液內。實驗時將乳腺組織脫水、透明、包埋、切片，OLYMPUS光學顯微鏡下觀察其病理形態學變化，利用圖像採集軟體DPController採集圖像，圖像分析軟體IPP進行乳腺腺泡直徑、乳腺小葉平均直徑、乳腺小葉數測量和分析。腺泡和導管腔分泌物按分泌物量分4級"一"為腔內無分泌物；"+"為有分泌物，佔腔內體積l/4以下；"++"為分泌物佔腔內體積的l/4一l/2;"+++"為有分泌物，佔腔內體積l/2以上。導管上皮增生按增生程度分4級"一"為無增生；"+"為上皮細胞層次2層；"++"為導管上皮增生3層以上或呈乳頭狀突起；"+++"為實性增生，上皮細胞充滿腔內。結果表3、4。表3本發明藥物組合物對乳腺增生大鼠乳腺腺泡直徑、數量的影響(；士s)組別劑量動物數乳腺腺泡直徑乳腺小葉腺泡數乳腺小葉平均直徑(生藥g/kg)(只)(nra)量(個)正常對照組913.83±4.676.22±2.49據86.19±19.68助模型對照組824.81±6.2416.38±3.99169.98±29.95乳癖消片0.96918.98±5.61*9.44±3.32**141.98±36.33本發明藥物組合7.641014.33±3.05"9.40±3.11"117.22±19.89"物大劑量本發明藥物組合物3.82914.11±3.52"12.00±4.18*144.04±44.67中劑量本發明藥物組合物1.91818.91±8,24'11.63±5.55*149.10±21.14小劑量與正常對照組比較，〈0.01，與模型對照組比較卞<0.05，**P〈0.01由表3可見，本發明藥物組合物明顯地抑制實驗性乳腺增生大鼠乳腺腺泡直徑、乳腺小葉平均直徑，減少乳腺小葉腺泡數量。與模型對照組比較，各劑量組對乳腺腺泡直徑、乳腺小葉腺泡數量抑制作用均有顯著性差異(P〈0.05或P〈0.01)，大劑量組對乳腺小葉平均直徑抑制作用有顯著性差異(P〈0.01)。說明本發明藥物組合物對實驗性乳腺增生大鼠乳腺腺泡直徑、乳腺小葉平均直徑、乳腺小葉腺泡數量增大和增多具有抑制作用。陽性對照藥乳癖消片對乳腺腺泡直徑、乳腺小葉腺泡數量也同樣具有抑制作用。表4本發明藥物組合物對乳腺增生大鼠導管分泌物和上皮細胞增生的影響組別劑量動物數分泌物導管上皮增生(只)_++++++P—++++++P正常對照組9110*"7110**模型對照組803410251乳癖消片0.9691341171o料本發明藥物組合物大劑量7.64102710*3700承求本發明藥物組合物中劑量3.82925021440本發明藥物組合物小1.9180332.0530劑量與正常對照組比較,〈0.01，與模型對照組比較卞<0.05，**P<0.0112由表4可見，本發明藥物組合物明顯地抑制實驗性乳腺增生大鼠乳腺導管腔分泌物和導管上皮的增生。與模型對照組比較，大劑量組均有顯著性差異(P〈0.05或P〈0.01)，說明本發明藥物組合物對實驗性乳腺增生大鼠乳腺導管腔分泌物增多和導管上皮增生具有抑制作用。陽性對照藥乳癖消片僅對導管上皮增生具有抑制作用。(2)抗炎試驗①大鼠慢性增生性炎症試驗大鼠50隻，隨機分為5組，每組10隻。第一組為陰性對照組，給等容積蒸餾水；第二組為陽性對照組，給氫化可的松注射液皮下注射20mg/kg;第三、四、五組為本發明藥物組合物組，分別給本發明藥物組合物1.91、3.82、7.64g生藥/kg。在乙醚淺麻下，剪毛消毒，於下腹部正中切開皮膚，將重50mg的滅菌棉球植入兩側腹股溝皮下，然後縫合皮膚，消毒，整個過程為無菌操作。從手術前3天開始按2ml/100g體積灌胃給藥，每天1次，連續10天。第ll天處死大鼠，小心剝離取出棉球及包裹的肉芽組織，6(TC乾燥12小時後稱重，減去原棉球重量即為肉芽組織重量，結果表示為每100g體重所含肉芽組織重量(雙側)。以肉芽組織重量代表慢性炎症程度，結果見表5。表5本發明藥物組合物對大鼠慢性增生性炎症的影響(；士s)tableseeoriginaldocumentpage13與陰性對照組比較**P<0.01由表5可見，本發明藥物組合物抑制棉球剌激的大鼠肉芽組織增生，減輕肉芽組織的重量，與陰性對照組比較，中、大劑量組有顯著性差異(P〈0.01),說明本發明藥物組合物對大鼠慢性增生性炎症有抑制作用。陽性對照藥氫化可的松能顯著性抑制棉球剌激的大鼠肉芽組織增生。②小鼠急性炎症的試驗(小鼠耳殼腫脹法)小鼠50隻，雌性，隨機分為5組，每組10隻。第一組為陰性對照組，給等容積蒸餾水；第二組為陽性對照組，給阿司匹林片0.2g/kg;第四、五、六組為本發明藥物組合物組，分別給本發明藥物組合物2.76、5.52、11.04g生藥/kg。每天以0.2ml/10g體積灌胃給藥l次/日，連續7天。末次給藥後0.5小時在每隻動物左耳廓內外以二甲苯均勻塗抹一遍(約0.2ml)，以引起耳廓急性滲出性炎症，每隻動物右耳廓不加處理作為自身對照。致炎30min後處死小鼠，用直徑9mm的打孔器取下雙側耳片，分別稱其重量，以兩耳片重量之差作為腫脹度，按下式計算抑制率。結果見表6。對照組腫脹度_給藥組腫脹度抑制率(%)xlOO對照組腫脹度表6本發明藥物組合物對小鼠急性炎症的影響G士s)組別劑量(g/kg)動物數(只)腫脹度(mg)抑制率(％)陰性對照組1011.81±1.86阿司匹林片0.2104.48±1.23"62.07本發明藥物組合物大劑量11.04108.78±1.23**25.66本發明藥物組合物中劑量5.521010.37±2.2012.19本發明藥物組合物小劑量2.761010.89±1.817.79與陰性對照組比較林P〈0.01由表6可見，本發明藥物組合物抑制二甲苯刺激小鼠耳部誘發的急性滲出性炎症反應，使腫脹度減小，與陰性對照組比較，大劑量組有顯著性差異(p〈o.oD，說明本發明藥物組合物有抗小鼠急性炎症作用。陽性對照藥阿司匹林片也能抑制二甲苯刺激小鼠耳部誘發的急性炎症反應。(3)鎮痛試驗①物理剌激引起的鎮痛試驗(熱板法)用恆定水溫55"C，以小鼠舔後足作為疼痛表現，從小鼠接觸熱板到舔後足所需時間為痛閾指標。預先測定二次痛閾，取平均痛閾為1030s的小鼠參加實驗。取雌性小鼠50隻，隨機分為5組，每組10隻。第一組為陰性對照組，給等容積蒸餾水；第二組為陽性對照組，給阿司匹林片0.2g/kg，第三、四、五組為本發明藥物組合物小、中、大劑量組，分別給本發明藥物組合物2.76、5.52、11.04g生藥/kg。各藥物組每天.以O.2ml/10g體積灌胃給藥l次，連續7天。給藥前及灌胃給藥後0.5、1、1.5、2、4小時(腹腔注射30min後)分別測定小鼠痛閾，如痛閾大於60s，以60s計算。結果見表7。表7本發明藥物組合物對小鼠痛閾的影響G土s)tableseeoriginaldocumentpage15物小劑量_給藥前後自身比較*P〈0.05，**P〈0.01由表7可見，本發明藥物組合物可輕度提高小鼠痛閾，給藥前後自身比較，中劑量30分鐘、大劑量3090分鐘給藥後有顯著性差異(P〈0.05或P〈0.01),說明本發明藥物組合物對小鼠熱刺激引起的疼痛有鎮痛作用。陽性對照藥阿司匹林片也能提高小鼠痛閾。②化學刺激引起的鎮痛試驗(扭體法)小鼠50隻，雌性，隨機分為5組，每組10隻。第一組為陰性對照組，給等容積蒸餾水；第二組為陽性對照組，給阿司匹林片0.2g/kg;第三、四、五組為本發明藥物組合物小、中、大劑量組，分別給本發明藥物組合物2.76、5.52、11.04g生藥/kg。各組皆以0.2ml/10g體積灌胃給藥，每天1次，連續7天。末次給藥lh後腹腔注射iy。冰醋酸溶液0.lml/10g，觀察記錄15min內小鼠扭體反應(小鼠腹部貼地、內凹、伸展後肢、扭曲)次數，結果見表8。表8本發明藥物組合物對小鼠扭體反應的影響G土s)組別劑量動物數扭體反應扭體反應率(g/kg)(只)(次/15min))陰性對照組1020.9±5.36阿司匹林片0.2102.5士0.97"88.04本發明藥物組合物大劑量11.04103.5±1.27—83.25本發明藥物組合物中劑量5.52105.8士1.93"72.25本發明藥物組合物小劑量2.76109.7士2.2廣53.59與陰性對照組比較**P<0.01由表8可見，本發明藥物組合物明顯地抑制醋酸剌激的小鼠扭體反應，與陰性對照組比較，各劑量組均有顯著性差異(P〈0.01)，說明本發明藥物組合物對醋酸刺激的疼痛有較強的鎮痛作用。陽性對照藥阿司匹林片也能抑制醋酸刺激的小鼠扭體反應。7、試驗結論本發明藥物組合物灌胃給藥，明顯抑制醋酸刺激的小鼠扭體反應，對小鼠熱刺激引起的疼痛有鎮痛作用；抑制二甲苯刺激小鼠耳部誘發的急性炎症反應；抑制乳腺增生模型大鼠乳頭直徑、乳頭高度、乳房重量、乳房體積、乳腺腺泡直徑、乳腺小葉平均直徑、乳腺小葉腺泡數量、乳腺導管腔分泌物的增多和導管上皮的增生；抑制乳腺增生模型大鼠雌二醇受體和孕酮受體表達和血清雌二醇濃度，提高血清孕酮水平，並增加乳腺增生大鼠的胸腺係數；抑制乳腺增生模型大鼠全血粘度、血漿粘度。結果說明，本發明藥物組合物具有抗炎、鎮痛、活血化瘀和改善乳腺增生模型大鼠性激素水平，治療婦女乳腺增生的作用。實驗例2本發明藥物組合物製劑毒性研究一急性毒性試驗急性毒性研究結果表明，本發明藥物組合物小鼠灌胃給藥後，未發現明顯急性毒性，小鼠一日最大給藥量為540.6g生藥/kg，相當於臨床成人每日用量1790倍。.二長期毒性試驗用本發明藥物組合物大、中、小三個劑量(42.45、14.15、4.72g生藥/kg/日，分別相當於成人用量的140.35、46.84、15.61倍)給大鼠連續灌胃六個月，對大鼠的一般狀況、血液學、血液生化學、尿常規、心電圖、系統解剖、臟器係數和組織病理學均無明顯影響，未發現毒性反應，恢復期亦無延遲性毒性反應，提供大鼠無毒性反應劑量為42.45g生藥/kg/日。實驗例3製劑優選工藝研究一、揮髮油包合工藝研究1、試驗設計本工藝擬採用e-環糊精為包合材料，以飽和水溶液法，選取對e-環糊精包合的影響大如P-環糊精與水之比、3-環糊精與油之比、包合溫度和攪拌時間為考察因素，並結合預試驗和生產實際，每個因素選擇3個水平，用L9(34)正交表安排試驗，並以揮髮油轉移率與包合物收率的綜合評分為考察指標。油轉移率是衡量包合效果的重要指標，油轉移率越高，包合效果越好，可作為主要篩選指標，權重係數定為0.7。收得率在實際生產中也有意義，也作為次要篩選指標，權重係數定為O.3。因素水平見表9。表9因素水平表因素水平P-環糊精油(g/ni1)e-環糊精:水(g/g)包合溫度('C)攪拌時間(h)ABcD14:11:10601.026:11:20501.538:11:30402.0注綜合評分=(0.7X油轉移率/最大油轉移率)+(0.3X包合物收率/最大包合物收率)2、試驗方法與結果稱取柴胡、白朮、香附、鬱金各lkg及當歸1.5kg，共5.5kg，用上述優選的最佳工藝提取揮髮油，備用。根據表4選擇U(34)正交設計、安排試驗，採用飽和水溶液法，取一定量P-環糊精共9份，分別加入相應量的水，加熱溶解製成飽和溶液，自然冷卻至一定溫度，置平底燒瓶內，以恆定的轉速(1000轉/分鐘)攪拌,緩緩滴入相應量的揮髮油，攪拌一定時間(從滴加完揮髮油開始計時)，然後置冰箱冷藏放置24h，抽濾至幹，用少量蒸餾水洗滌，40"C真空乾燥3h，即得白色疏鬆狀包合物粉末，稱重，用下式計算包合物收率;同時，取各包合物10g，精密稱定，置500ml燒瓶中，加水300ml連接揮髮油測定器，按《中國藥典》2005版(一部)附錄XD(附錄57)項下方法提取揮髮油。放置lh後，讀取揮髮油的體積，按包合物中實際包油含量，用下式計算即得油轉移率。結果見表IO。油轉移率(％)二包合物中實際含油量(ml)/投油量(ml)X10(F。包合物收率(％)二包合物重(g)/(P-環糊精+揮髮油)重(g)X1009表10正交試驗表及結果因素試驗號e-環糊精:油e-環糊精:水包合溫度攪拌時間油轉移率包合物收率綜合(g/ml)A(g/g)B('C)C(h)D(%)(%)評分111■1164.571.60.7732122266.275.80.8023133374.372.30.8554212381.774.00.9205223183.676.90.9466231278.078.90.908313281.985.30.9628321386.683.30.9939332179.977.50.918、2.4302.6552.6742.637k22.7742.7412.6402.672G=8.077k32.8732.6812.7632.768CT=7,2487R0.14770.02870.0410.04373、方差分析.將正交實驗結果進行方差分析，結果見表ll。_表11揮髮油提取正交試驗方差分析表_誤差來源_^_^_^_^_^_A0.0360020.0180028.125D>C>B。對各因素進行直觀分析，A因素K3>K2〉K1;B因素K2>K3〉K1;C因素K3〉Id〉K2;D因素K3〉K2〉Id。而表ll方差分析結果表明A因素各水平之間差異具有顯著性(P0.05)，故揮髮油e-環糊精包合的最佳工藝為A3B2C3D3，即揮髮油與e-環糊精比例為1:8，P-環糊精與水的比例為1:20，包合溫度為4(TC，攪拌時間2小時。4、包合工藝驗證實驗精密量取揮髮油5ml，按優選最佳包合工藝條件進行驗證實驗，結果測得包合物的收得率為78.2%，揮髮油的轉移率為84.7%。結果表明，最佳工藝具有可行性。5、包合物包合效果考察O)薄層色譜鑑別法取揮髮油0.5ml，，加2ml乙醚溶解製成供試液A;取包合物8g加乙醇25ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液置4(TC水浴上蒸乾，殘渣加乙醚lml，溶解，取上清液作供試液B;取3-環糊精4g，加乙醚15ml，超聲處理15分鐘，製成供試液C;取包合物8g，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液置4(TC水浴上蒸乾，殘渣加乙醚lml，溶取上清液作供試液D。吸取上述各供試液，分別點樣於矽膠G薄層板，以醋酸乙酯-正己烷-三氯乙烷(1:9:5)為展開劑，展開，取出晾乾，噴以5%香草醛濃硫酸溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。結果，供試液A和B圖譜揮髮油在包合前後斑點幾乎一致，說明成分也未發生變化，而供試液C和D圖譜未見斑點，說明揮髮油已形成穩定的包合物。②紫外可見分光光度法將上述揮髮油、揮髮油和P-環糊精混合物、0-環糊精、揮髮油e-環糊精包合物的石油醚溶液做紫外掃描，掃描範圍200400nm。結果表明，該揮髮油已與P-環糊精形成包合物，純揮髮油的紫外吸收峰在其P-環糊精包合物中己消失。綜上所述，本工藝採用P-環糊精對其揮髮油進行包合，其工藝穩定、可行，能達到預期目的。下述實施例均能實現上述實驗例的效果。具體實施例方式實施例l:本發明藥物組合物丸劑柴胡15kg香附15kg延胡索15kg茯苓15kg王不留行15kg山慈菇15kg白朮15kg鬱金15kg當歸22.5kg肉蓯蓉15kg皂角刺9kg淫羊藿15kg;取7.5kg延胡索粉碎，過100目篩，得延胡索細粉，備用；取柴胡15kg、香附15kg、白朮15kg、鬱金15kg、當歸22.5kg五味藥材蒸餾提取揮髮油，收集揮髮油，揮髮油用3-環糊精包合，備用，蒸餾後的水溶液另器收集；將藥渣、剩餘的延胡索7.5kg及茯苓15kg、王不留行15kg、山慈菇15kg、肉灰蓉15kg、皂角刺9kg、淫羊藿15kg加8倍量水，煎煮2次，每次2小時，將每次煎液與上述蒸餾後的水溶液合併，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為l.O，加乙醇使含醇量達40%，靜置48小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，再加乙醇使含醇量達50%，靜置48小時，濾過，濾液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.20的稠膏，加入延胡索細粉，真空乾燥，粉碎，制粒，乾燥後與經環糊精包合後的揮髮油混合，經常規工藝加入常規輔料製成丸劑。實施例2:本發明藥物組合物片劑柴胡14kg香附17kg延胡索17kg茯苳13kg王不留行14kg山慈菇17kg白朮17kg鬱金13kg當歸19kg肉蓯蓉17kg皂角刺10kg淫羊藿13kg;取延胡索8.5kg粉碎，過100目篩，得延胡索細粉，備用；取柴胡14kg、香附17kg、白朮17kg、鬱金13kg、當歸19kg五味藥材蒸餾提取揮髮油，收集揮髮油，揮髮油用P-環糊精包合，備用，蒸餾後的水溶液另器收集；將藥渣、剩餘的延胡索8.5kg及茯苓13kg、王不留行14kg、山慈菇17kg、肉灰蓉17kg、皂角刺10kg、淫羊藿13kg加6倍量水，煎煮3次，每次1小時，將每次煎液與上述蒸餾後的水溶液合併，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.1，加乙醇使含醇量達30%,靜置40小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，再加乙醇使含醇量達60%，靜置40小時，濾過，濾液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.25的稠膏，加入延胡索細粉，真空乾燥，粉碎，制粒，乾燥後與經0-環糊精包合後的揮髮油混合，經常規工藝加入常規輔料製成片劑。實施例3:本發明藥物組合物膠囊劑柴胡17kg延胡索13kg王不留行17kg白朮13kg當歸25kg皂角刺8kg香附13kg茯苳17kg山慈菇13kg鬱金17kg肉灰蓉13kg淫羊藿17kg;取延胡索6.5kg粉碎，過100目篩，得延胡索細粉，備用；取柴胡17kg、香附13kg、白朮13kg、鬱金17kg、當歸25kg五味藥材蒸餾提取揮髮油，收集揮髮油，揮髮油用e-環糊精包合，備用，蒸餾後的水溶液另器收集；將藥渣、剩餘的延胡索6.5kg及茯苓17kg、王不留行17kg、山慈菇13kg、肉灰蓉13kg、皂角刺8kg、淫羊藿17kg加10倍量水，煎煮3次，每次3小時，將每次煎液與上述蒸餾後的水溶液合併，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.1，加乙醇使含醇量達50%,靜置50小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，再加乙醇使含醇量達50%，靜置50小時，濾過，濾液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.25的稠膏，加入延胡索細粉，真空乾燥，粉碎，制粒，乾燥後與經環糊精包合後的揮髮油混合，經常規工藝加入常規輔料製成膠囊劑。實施例4:本發明藥物組合物顆粒劑柴胡15kg延胡索15kg王不留行15kg白朮15kg當歸22.5kg皂角刺9kg香附15kg茯苳15kg山慈菇15kg鬱金15kg肉蓯蓉15kg淫羊藿15kg;取上述原料藥，加入常規輔料按照常規工藝製成顆粒劑。21實施例5:本發明藥物組合物口服液柴胡14kg香附17kg延胡索17kg茯苓13kg王不留行14kg山慈菇17kg白朮17kg鬱金13kg當歸19kg肉蓯蓉17kg皂角刺10kg淫羊藿13kg;取上述原料藥，加入常規輔料按照常規工藝製成口服液。實施例6:本發明藥物組合物凍乾粉針劑柴胡17kg延胡索13kg王不留行17kg白朮13kg當歸25kg皂角剌8kg香附13kg茯苓17kg山慈菇13kg鬱金17kg肉蓯蓉13kg淫羊藿17kg;取上述原料藥，加入常規輔料按照常規工藝製成凍乾粉針劑,2權利要求1、一種治療乳腺增生的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物的原料藥組成為柴胡12-18重量份香附12-18重量份延胡索12-18重量份茯苓12-18重量份王不留行12-18重量份山慈菇12-18重量份白朮12-18重量份鬱金12-18重量份當歸19-26重量份肉蓯蓉12-18重量份皂角刺7-11重量份淫羊藿12-18重量份。2、如權利要求1所述的藥物l藥組成為柴胡15重量份延胡索15重量份王不留行15重量份白朮15重量份當歸22.5重量份皂角刺9重量份物，其特徵在於該藥物組合物的原料香附15重量份茯苳15重量份山慈菇15重量份鬱金15重量份肉蓯蓉15重量份淫羊藿15重量份。3、如權利要求1所述的藥物鄉」藥組成為柴胡14重量份延胡索17重量份王不留行14重量份白朮17重量份當歸19重量份皂角刺10重量份物，其特徵在於該藥物組合物的原料香附17重量份茯苓13重量份山慈菇17重量份鬱金13重量份肉蓯蓉17重量份淫羊藿13重量份。4、如權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物的原料組成為5、如權利要求1-4任一所述的藥物組合物，其特徵在於所述香附為醋制香附，王不留行為炒王不留行。6、如權利要求1-4任一所述的藥物組合物的製備方法，其特徵在於該方法為取一半量延胡索粉碎，過100目篩，得延胡索細粉，備用；取柴胡、香附、白朮、鬱金、當歸五味藥材蒸餾提取揮髮油，收集揮髮油，揮髮油用0-環糊精包合，備用，蒸餾後的水溶液另器收集；將藥渣、剩餘延胡索及茯苓、王不留行、山慈菇、肉蓯蓉、皂角刺、淫羊藿加6-10倍量水，煎煮l-3次，每次l一3小時，將每次煎液與上述蒸餾後的水溶液合併，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.01.1，加乙醇使含醇量達30—50%，靜置40—55小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，再加乙醇使含醇量達40—60%，靜置40—55小時，濾過，濾液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.201.25的稠膏，加入延胡索細粉，真空乾燥，粉碎，制粒，乾燥後與經e-環糊精包合後的揮髮油混合，經常規工藝加入常規輔料製成臨床接受的丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體製劑、貼劑或凍乾粉針劑。柴胡延胡索王不留行白朮當歸皂角刺17重i13重i17重|13重j25重i8重量:份:份份份份香附13重量份茯茶17重量份山慈菇13重量份鬱金17重量份肉蓯蓉13重量份淫羊藿17重量份。7、如權利要求5所述的藥物組合物的製備方法，其特徵在於該方法為取一半量延胡索粉碎，過100目篩，得延胡索細粉，備用；取柴胡、香附、白朮、鬱金、當歸五味藥材蒸餾提取揮髮油，收集揮髮油，揮髮油用P-環糊精包合，備用，蒸餾後的水溶液另器收集；將藥渣、剩餘延胡索及茯茶、王不留行、山慈菇、肉蓯蓉、皂角刺、淫羊藿加6-10倍量水，煎煮l-3次，每次l一3小時，將每次煎液與上述蒸餾後的水溶液合併，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.01.1，加乙醇使含醇量達30—50%，靜置40—55小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，再加乙醇使含醇量達40—60%，靜置40—55小時，濾過，濾液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.201.25的稠膏，加入延胡索細粉，真空乾燥，粉碎，制粒，乾燥後與經環糊精包合後的揮髮油混合，經常規工藝加入常規輔料製成臨床接受的丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體製劑、貼劑或凍乾粉針劑。8、如權利要求6所述的藥物組合物的製備方法，其特徵在於該方法為取一半量延胡索粉碎，過100目篩，得延胡索細粉，備用；取柴胡、香附、白朮、鬱金、當歸五味藥材蒸餾提取揮髮油，收集揮髮油，揮髮油用3-環糊精包合，備用，蒸餾後的水溶液另器收集；將藥渣、剩餘延胡索及其餘茯苓、王不留行、山慈菇、肉蓯蓉、皂角刺、淫羊藿加8倍量水，煎煮2次，每次2小時，將2次煎液與上述蒸餾後的水溶液合併，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.01.1，加乙醇使含醇量達40%，靜置48小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，再加乙醇使含醇量達50%，靜置48小時，濾過，濾液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.201.25的稠膏，加入延胡索細粉，真空乾燥，粉碎，制粒，乾燥後與經e-環糊精包合後的揮髮油混合，經常規工藝加入常規輔料製成臨床接受的丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體製劑、貼劑或凍乾粉針劑。9、如權利要求7所述的藥物組合物的製備方法，其特徵在於該方法為取一半量延胡索粉碎，過IOO目篩，備用；取柴胡、香附、白朮、鬱金、當歸五味藥材蒸餾提取揮髮油，收集揮髮油，揮髮油用0-環糊精包合，備用，蒸餾後的水溶液另器收集；將藥渣、剩餘延胡索及其餘茯苓、王不留行、山慈菇、肉蓯蓉、皂角刺、淫羊藿加8倍量水，煎煮2次，每次2小時，將2次煎液與上述蒸餾後的水溶液合併，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.01.1，加乙醇使含醇量達40%，靜置48小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至無醇味，再加乙醇使含醇量達50%，靜置48小時，濾過，濾液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.201.25的稠膏，加入延胡索細粉，真空乾燥，粉碎，制粒，乾燥後與經e-環糊精包合後的揮髮油混合，經常規工藝加入常規輔料製成臨床接受的丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體製劑、貼劑或凍乾粉針劑。10、如權利要求l-4任一所述的藥物組合物在製備治療乳腺增生的藥物中的應用。11、如權利要求5所述的藥物組合物在製備治療乳腺增生的藥物中的應用。全文摘要本發明公開了一種治療乳腺增生的藥物組合物及其製備方法。該藥物組合物由柴胡、香附、延胡索、茯苓、王不留行、山慈菇、白朮、鬱金、當歸、肉蓯蓉、皂角刺、淫羊藿組成，該組合物的製備方法中採用蒸餾提取揮髮油、包合、煎煮、減壓濃縮、乾燥等步驟，最終加入常規輔料，經常規方法，製成臨床接受的劑型。實驗表明該藥物組合物具有抗炎、鎮痛、活血化瘀和改善乳腺增生模型大鼠性激素水平，治療婦女乳腺增生的作用。文檔編號A61K36/88GK101461926SQ200910076680公開日2009年6月24日申請日期2009年1月15日優先權日2009年1月15日發明者慧鬱申請人:慧鬱