一種鐵皮石斛組織培養培養基及其鐵皮石斛組織培養方法

2024-02-27 17:46:15 1

一種鐵皮石斛組織培養培養基及其鐵皮石斛組織培養方法
【專利摘要】本發明提供了一種鐵皮石斛組織培養培養基，包括第一階段--種子萌發形成綠色的原球莖階段所用的培養基a，第二階段--原球莖成長為小植株階段所用的培養基b，第三階段--原球莖成長為小植株階段所用的培養基三個階段的不同培養基，並用此培養基培養鐵皮石斛組織的方法。本發明的培養基能高效提高鐵皮石斛種子組培萌發率及促進原球莖分化，培養基中不含激素，培養成本低，培養處的石斛組織品質高。
【專利說明】一種鐵皮石斛組織培養培養基及其鐵皮石斛組織培養方法

【技術領域】
[0001] 本發明涉及中草藥培養領域，具體涉及鐵皮石斛組織培養培養基及其組織培養方 法

【背景技術】
[0002] 鐵皮石斛
[0003] 鐵皮石斛（學名：Dendrobium officinale Kimura et Migo)屬微子目，蘭科多年 生附生草本植物。莖直立，圓柱形，長9-35釐米，粗2-4毫米，萼片和花瓣黃綠色，近相似， 長圓狀披針形，長約I. 8cm，寬4?5mm，花期3?6月，分布於我國秦嶺、淮河以南諸省區， 生長在高山峻岭懸崖峭壁和巖石縫隙或深山古樹上，鐵皮石斛的功能與主治："益胃生津， 滋陰清熱。用於陰傷津虧，口乾煩渴，食少乾嘔，病後虛熱，目暗不明。"《中華人民共和國藥 典》2010年版第一部收載作為石斛藥用。鐵皮石斛為我國傳統珍貴藥材，《道藏》、《神農本 草經》、《本草綱目》、《現代中藥大辭典》等均有記載，享有"中國九大仙草之首"的美譽，屬於 國家優先發展【技術領域】的重點新產品，是推動中藥產業結構優化升級和提高中藥產業競爭 力的有力品種，因其資源緊缺、用量大，所以鐵皮石斛是珍稀瀕危、高附加值野生藥材規模 化野生變家種品種。
[0004] 植物組織培養技術
[0005] 植物組織培養是以植物生理學為基礎發展起來的一項新興的應用型現代生物技 術。植物組織培養的概念分為廣義概念和狹義概念兩種，廣義上的植物組織培養是指在無 菌和人工控制條件下，將離體的植物器官（根、莖、葉、花、果實、種子等）、組織（分生組織、 花葯組織、胚乳等）、細胞（體細胞和生殖細胞）或原生質體等接種到人工配製的培養基上 進行培養，使之再生新細胞或生長發育成完整再生植株的過程。狹義上的植物組織培養是 指對植物各種組織進行培養，並使其生長發育成完整再生植株的過程。由於植物組織培養 中的培養材料脫離了植物母體，所以又稱為植物離體培養。
[0006] 組織培養技術是農業高新技術中最重要、最活躍的領域之一，它不僅是農業持續 發展的基礎，而且是生物技術中應用最廣、最具現實意義的領域，被譽為農業發展史上的第 4次綠色革命。其對解決經濟和社會發展所面臨的人口增長、農業資源匱乏、環境汙染等重 大問題，具有戰略意義。我國植物快速繁殖和無病毒種苗生產的研究始於20世紀70年代。 組織培養技術在藥用植物培養、突變體選育及種質資源保存等方面也有了新的進展。有研 究表明，全世界有75 %的人口以植物作為治療、預防疾病的藥物來源。
[0007] 培養基
[0008] 在植物組織培養過程中，新陳代謝是培養物生命存在和形態建成的基礎。培養基 是培養物生長發育的基質，一方面它為培養物的生長發育提各種營養需求，另一方面還控 制調節著培養物生長的速度和細胞分化的方向。
[0009] 經過多年的研究，目前人們已經比較清楚地了解了培養植物所需要的培養基主要 由水、無機營養物質、有機營養物質、植物生長調節劑、凝固劑等幾類物質構成。
[0010] 培養基是決定植物組培成敗的關鍵因素之一。培養基的種類和成分直接影響著培 養物的生長和分化，不同的植物材料對培養基的要求不一樣，且不同的培養階段需要加入 的添加物也不同。因此，根據培養物的種類、部位以及不同培養目的篩選適宜的培養基，是 植物離體培養工作的重要環節。
[0011] 現有技術主要是採用石斛的根、莖、葉作為外植體，本發明通過對種子進行組培， 保證了種源的地道性。
[0012] 現有的石斛組織培養基，基培養方法成本高，效率底，耗時間等類似問題，大多含 有激素，所培養出來的石斛品質不是特別好。


【發明內容】

[0013] 一種鐵皮石斛組織培養培養基及其組織培養方法，本發明的培養基能高效提高鐵 皮石斛種子組培萌發率及促進原球莖分化，培養基中不含激素，培養成本低，培養處的石斛 組織品質商。
[0014] 本發明採用的技術方案如下：
[0015] 一種鐵皮石斛組織培養培養基，其特徵在於，包括第一階段--種子萌發形成綠色 的原球莖階段所用的培養基a，第二階段--原球莖成長為小植株階段所用的培養基b，第三 階段一原球莖成長為小植株階段所用的培養基三個階段的不同培養基，三個培養基的配 方如下：
[0016] 培養基a的配方為：

【權利要求】
1. 一種鐵皮石斛組織培養培養基，其特徵在於，包括第一階段--種子萌發形成綠色的 原球莖階段所用的培養基a，第二階段一原球莖成長為小植株階段所用的培養基b，第三階 段一原球莖成長為小植株階段所用的培養基三個階段的不同培養基，三個培養基的配方 如下：

2. -種採用權利要求1的培養基培養鐵皮石斛組織的方法，其特徵在於，包括以下步 驟： (1) 第一階段：將引進的石斛蒴果進行消毒處理，採用1%。HgCl浸泡9-llmin，處理好 的蒴果在無菌條件下，將其內部的種子接種到培養基a上，培養一個月，萌發形成綠色的原 球莖，培養溫度23-27°C，光照度1500-20001x，光照時間10-12h/d ; (2) 第二階段：將第一階段種子萌發生成的原球莖，接種到培養基b上，誘導培養2-3 個月，原球莖成長為小植株，培養溫度23-27°C，光照度1500-20001X，光照時間10-12h/d。 (3) 第三階段：將已經由原球莖分化成的小植株接種到生根培養基c上，培養3-4個 月，培育出高5cm的大苗，隨進行煉苗移栽，煉苗時保證在75 % -80 %的含水量，保證空氣溼 潤，溫度不宜過高，在25°C左右；培養溫度23-27°C，光照度1500-20001X，光照時間10-12h/ d〇
3. 根據權利要求2所述的鐵皮石斛組織培養的方法，其特徵在於：所述的石斛蒴果為 霍山石斛蒴果。
【文檔編號】A01H4/00GK104322371SQ201410598370
【公開日】2015年2月4日 申請日期:2014年10月29日 優先權日:2014年10月29日
【發明者】王夢雲, 王國旗, 姚偉, 宋志威, 黃學文, 徐飛 申請人:安徽牧龍山生態旅遊開發股份有限公司