製備斑蝥酸鈉的工藝的製作方法
2023-10-06 10:20:44 1
專利名稱：製備斑蝥酸鈉的工藝的製作方法
技術領域：
木發明涉及一種腫瘤治療藥物的製備工藝，特別涉及一種斑蝥酸鈉的製備工藝。
背景技術：
我國的中醫很早就開始使用斑蝥蟲治療腫瘤早在十三世紀《仁齋直指方》中就記載了 斑蝥有治療乳癌及腹部癌的作用。古人常用"斑蝥煮雞蛋，棄斑蝥食蛋"的偏方治療肝癌及 其它消化系統癌症，至今仍在民間沿用。該藥性味辛，熱；有大毒，可攻毒蝕瘡，歸肝、胃、 腎經。有破血消{徵}，功毒蝕瘡，引赤發泡的功能，用於{徵}瘕腫塊，積年頑癬，瘰癧，贅 疣，癰疽不潰，惡瘡死肌的治療。但毒副作用很大。近年發現其抗癌有效成分是體內天然存 在的斑蝥素。我國對斑蝥素的臨床研究表明，斑蝥素及其衍生物等對治療原發性肝癌療效顯 著，明顯優於手術治療或放療。此外，它還能治療慢性肝炎和神經性皮炎白細胞減少等。另 有報導證明，斑蝥素及其衍生物對乳腺癌、食道癌、肺癌、腸癌、肝硬化等疾病也有一定療
效；同時可用於治療疥癬、消瘰病；還可以通利水道，是一種很強的利尿劑。外用為皮膚刺激
藥，有引赤發泡、生毛之功效，並能治惡瘡潰痛、癰疽拔膿、積年癬瘡、疣痣黑子等。經科 學提取得到的斑蝥素雖然服用方便，但是毒副作用仍然很大，斑蝥素的有效劑量與毒性劑量 很接近。而斑蝥酸鈉是斑蝥素的衍生物，在保持了斑蝥素的藥理活性外，降低了其毒副作用。 其分子量小，易入細胞內，產生細胞毒作用，具有較強的抗腫瘤作用，是一種較為理想的抗癌 藥物，具有抗腫瘤、免疫調節、升高白細胞等藥理活性，在臨床上主要用於用於晚期原發性 肝癌及晚期肺癌的治療。斑蝥酸鈉作為抗腫瘤的先鋒藥物，使應用現代生物技術從斑蝥蟲中 提取其有效成分，結合藥物合成技術，經過斑蝥蟲體的處理，斑蝥素的提取、純化精製，斑 蝥酸鈉的合成、斑蝥酸鈉的純化精製而成，其抗腫瘤機理主要是通過抑制癌細胞的蛋白質合
成，影響其RNA及DNA，抑制癌細胞的生長分裂，從而達到治療的目的。
公告號為CN1166669C的中國專利公開了一種斑蝥酸鈉的製備工藝，包括斑蝥素提取、結 晶，製備斑蝥酸鈉的幾個步驟，具體方法為將斑蝥蟲體粉末加入鹽酸浸潤24小時，再加入丙 酮冷浸，過濾，分取有機相，回收丙酮至油膏狀，加入石油醚與無水乙醇混合溶液洗滌，得 黃白色斑蝥素粗品；取斑蝥素粗品按l: 30重量的比例加入丙酮，回流30分鐘，趁熱抽濾，
得無色澄明濾液，回收丙酮，冷卻後抽濾，得白色結晶，得斑蝥素精品；再取斑蝥素精品按 1: 20重量的比例加入丙酮溶液，回流溶解，再取與斑蝥素摩爾比為l: 2的氫氧化鈉20%的
溶液，反應1小時，然後蒸餾，加入活性炭回流，濃縮，乾燥，得白色斑蝥酸鈉結晶粉末。 然而，該方法使用了大量的丙酮，成本高，且丙酮為毒性溶劑，對操作者易產生危害。
3公開號為CN1586500A中國專利申請公開了一種斑蝥酸鈉注射劑及其製備方法，其中也公 開了斑蝥酸鈉的製備步驟，其中包括斑蝥蟲粉碎、斑蝥素提取、斑蝥素脫脂、斑蝥酸鈉合成 等步驟。該申請在提取、脫脂等步驟中，也採用了大量的丙酮，因此存在著與CN1166669C同 樣的缺點。
現有技術仍然需要一種操作簡便、汙染少、對操作人員危害小的製備斑蝥酸鈉的製備方法。
發明內容
申請人經大量研究發現，在斑蝥素提取步驟中，採用乙酸乙酯來替代丙酮作為溶劑進行 提取，可以使操作時間縮短，而且達到更好的提取效果。
同時，在斑蝥素純化步驟中，僅用石油醚進行脫脂洗滌，也能達到較好的純化效果。
在斑蝥酸鈉的合成步驟中，申請人還另人驚訝地發現，先用異丙醇將斑蝥素溶解，然後 再採用5%-20%,優選15%的氫氧化鈉溶液，可以使斑蝥酸鈉的合成時間縮短，產率增加。其 中，斑蝥素與異丙醇的重量比可以是1:5 200，優選1:10 100，最優選1:30 70。
因此，本發明的目的是提供一種新的符合國家藥典要求的斑蝥酸鈉的製備方法，該方法 包括採用斑蝥蟲體，經蟲體前處理、提取、純化精製得到斑蝥素精品，再經半合成而得到斑 蝥酸鈉精品的工藝。該方法中沒有採用丙酮等毒性溶劑，工藝簡單、安全、方便、快捷、經 濟，產品質量穩定，純度高，且能達到良好的收率。
本發明是採用以下技術方案實現的，具體包括斑蝥蟲體的處理，斑蝥素的提取、純化精 制，斑蝥酸鈉的合成、斑蝥酸鈉的純化精製步驟
(1) 斑蝥蟲體的處理。 將符合國家藥典標準的乾燥斑蝥蟲體進行挑揀，除去土塊等雜物，粉碎。
(2) 斑蝥素的提取。
將斑蝥蟲體粉加入預先用鹽酸飽和的乙酸乙酯，浸泡10 20小時。將浸出液放出至儲 藏罐中，再加入預先用鹽酸飽和的乙酸乙酯浸泡提取一次。放出浸出液合併至回收器中蒸汽 加熱至5(TC濃縮。其中斑蝥蟲體粉與鹽酸飽和的乙酸乙酯的重量比為1: 7 9。
(3) 斑蝥素的純化精製。
將濃縮液轉移至旋轉瓶中，水浴加熱至50'C加入約1倍量石油醚(bp: 60°C 90°C)， 共熱5分鐘，倒入以綢布為濾材的布氏漏鬥中，減壓抽濾至幹，用約2.5倍量石油醚淋洗至 得到白色斑蝥素結晶，常溫減壓乾燥，即得到斑蝥素精品(純度97%以上)。
(4) 斑蝥酸鈉的合成。
將斑蝥素加入異丙醇稍加熱使其溶解，將氫氧化鈉和水按比例配成5%-20%溶液，以斑蝥素與氫氧化鈉摩爾比1: 2加入到以上斑蝥素異丙醇溶液中，在水浴中加熱至7(TC 75'C反 應1至2小時。減壓蒸出溶劑，得到斑蝥酸鈉粗品。其中斑蝥素與異丙醇的重量比為1: 30 70。(5)斑蝥酸鈉的純化精製。將斑蝥酸鈉粗品加入純化水，再加入0. 4%左右的活性炭，在60'C水浴中保溫1至1. 5 小時，減壓蒸出水份，乾燥，即得斑蝥酸鈉成品。採用本發明方法製備的斑蝥酸鈉，純度高，性質穩定，可用於大針劑、大輸液、片劑、 顆粒劑、膠囊劑、口服液、軟膏劑等劑型以及多種緩控釋製劑的生產。
具體實施例方式
實施例1:(1) 斑蝥蟲體的處理。將符合國家藥典標準的乾燥斑蝥蟲體進行挑揀，除去土塊等雜物，粉碎，使斑蝥蟲體粉末的細度在20目 40目。(2) 斑蝥素的提取。將斑蝥蟲體粉100公斤，加入預先用鹽酸飽和的乙酸乙酯700公斤至2000升的不鏽鋼 提取罐中，浸泡16小時，前IO個小時每隔半小時攪拌一次。將浸出液放出至儲藏罐中。重 復以上操作，再加入預先用鹽酸飽和的乙酸乙酯700公斤浸泡提取一次。放出浸出液合併至 回收器中蒸汽加熱至5(TC濃縮，停止加熱，回收的溶劑作為下一次提取用。浸出液放幹後， 取出蟲渣，集中收集統一處理。(3) 斑蝥素的純化精製。將濃縮液轉移至旋轉瓶中，水浴加熱至50'C加入1倍量石油醚(bp: 6(TC 9(TC)，共 熱5分鐘，倒入以綢布為濾材的布氏漏鬥中，減壓抽濾至幹，用2. 5倍量石油醚淋洗至得到 白色斑蝥素結晶，常溫減壓乾燥，即得到斑蝥素精品(純度99.3%)。(4) 斑蝥酸鈉的合成。在1000毫升至5000ml的圓底燒瓶中加入斑蝥素，加入約50倍量的異丙醇稍加熱使其 溶解，按比例將氫氧化鈉和水配成溶液後，倒入燒瓶中，在水浴中加熱至7CTC 75'C反應1至2小吋。減壓蒸出溶劑，得到斑蝥酸鈉粗品。其中，斑蝥素精品異丙醇氫氧化鈉 蒸餾水二1.96: 50: 0. 8: 4 (重量比)。(5) 斑蝥酸鈉的純化精製。將斑蝥酸鈉粗品投入到3000毫升至5000毫升的燒瓶中，加入10倍量的純化水，再加入0.4%左右的活性炭，在6(TC水浴中保溫1至L5小時，減壓蒸出水份，乾燥，即得斑蝥酸鈉成品。實施例2:(1) 斑蝥蟲體的處理。將符合國家藥典標準的乾燥斑蝥蟲體進行挑揀，除去土塊等雜物，粉碎，使斑蝥蟲體粉 末的細度在20目 30目。(2) 斑蝥素的提取。將斑蝥蟲體粉100公斤，加入預先用鹽酸飽和的乙酸乙酯800公斤至2000升的不鏽鋼 提取罐中，浸泡16小時，前IO個小時每隔半小時攪拌一次。將浸出液放出至儲藏罐中。重 復以上操作，再加入預先用鹽酸飽和的乙酸乙酯700公斤浸泡提取一次。放出浸出液合併至 回收器中蒸汽加熱至5(TC濃縮，停止加熱，回收的溶劑作為下一次提取用。浸出液放幹後， 取出蟲渣，集中收集統一處理。(3) 斑蝥素的純化精製。將濃縮液轉移至旋轉瓶中，水浴加熱至5(TC加入2倍量石油醚，共熱5分鐘，倒入以 綢布為濾材的布氏漏鬥中，減壓抽濾至幹，用1.5倍量石油醚淋洗至得到白色斑蝥素結晶， 常溫減壓乾燥，即得到斑蝥素精品(純度98.6%)。(4) 斑蝥酸鈉的合成。在1000毫升至5000ml的圓底燒瓶中加入斑蝥素，加入約20倍量的異丙醇稍加熱使其 溶解，按比例將氫氧化鈉和水配成溶液後，倒入燒瓶中，在水浴中加熱至7(TC 75'C反應1至2小時。減壓蒸出溶劑，得到斑蝥酸鈉粗品。其中，斑蝥素精品異丙醇氫氧化鈉蒸餾水=1.96: 77: 0. 80: 5.50 (重量比)(5) 斑蝥酸鈉的純化精製。將斑蝥酸鈉粗品投入到3000毫升至5000毫升的燒瓶中，加入8倍量的純化水，再加入 0.4%左右的活性炭，在60。C水浴中保溫1至1.5小時，減壓蒸出水份，千燥，即得斑蝥酸 鈉成品。 實施例3:(1) 斑蝥蟲體的處理。將符合國家藥典標準的乾燥斑蝥蟲體進行挑揀，除去土塊等雜物，粉碎，使斑蝥蟲體粉 末的細度在30目 40目。(2) 斑蝥素的提取。 配方比例為將斑蝥蟲體粉100公斤，加入預先用鹽酸飽和的乙酸乙酯900公斤至2000升的不鏽鋼提 取罐中，浸泡16小時，前IO個小時每隔半小時攪拌一次。將浸出液放出至儲藏罐中。重複 以上操作，再加入預先用鹽酸飽和的乙酸乙酯700公斤浸泡提取一次。放出浸出液合併至回 收器中蒸汽加熱至50'C濃縮，停止加熱，回收的溶劑作為下一次提取用。浸出液放幹後，取 出蟲渣，集中收集統一處理。(3) 斑蝥素的純化精製。將濃縮液轉移至旋轉瓶中，水浴加熱至5(TC加入1倍量石油醚，共熱5分鐘，倒入以 綢布為濾材的布氏漏鬥中，減壓抽濾至幹，用2.5倍量石油醚淋洗至得到白色斑蝥素結晶， 常溫減壓乾燥，即得到斑蝥素精品(純度98.8°/。)。(4) 斑蝥酸鈉的合成。在1000毫升至5000ml的圓底燒瓶中加入斑蝥素，加入約65倍量的異丙醇稍加熱使其 溶解，按比例將氫氧化鈉和水配成溶液後，倒入燒瓶中，在水浴中加熱至70'C 75i:反應1至2小時。減壓蒸出溶劑，得到斑蝥酸鈉粗品。其中，斑蝥素精品異丙醇氫氧化鈉蒸餾水=1.96: 107.55: 0.8: 16 (重量比)(5) 斑蝥酸鈉的純化精製。將斑蝥酸鈉粗品投入到3000毫升至5000毫升的燒瓶中，加入12倍量的純化水，再加 入0.4%左右的活性炭，在6(TC水浴中保溫1至1.5小時，減壓蒸出水份，乾燥，即得斑蝥 酸鈉成品。實施例4 產品質量研究斑蝥酸鈉國家藥品標準[標準號WS-10001-(HD-0044)-2002]規定斑蝥酸鈉含量按照幹 燥品計算，不得少於85%，而按照上述實施例製得的斑蝥酸鈉進行含量測定和純度檢査，結 果均在98%以上。說明按照本發明製得的斑蝥酸鈉質量要明顯優於市售產品，含量測定和純 度檢查具體方法如下 1含量測定色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇一水(51 : 49) 為流動相；流速為1. Oml/min;檢測波長為227nm;靈敏度為0. 005AUFS。理論塔板數按斑蝥 素峰計算，應不低於2000。對照品溶液的製備取斑蝥素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每lml含斑蝥素0. 15mg 的溶液，作為對照品溶液。供試品溶液的製備精密稱取本品10mg，至100ml燒瓶中，加50ml水溶解，再加 lmol/LH2S04溶液10ml，搖勻，置65'C水浴中回流30分鐘，稍冷後移於分液漏鬥中，用氯仿725ml、 15ral、 10ml萃取三次，每次10分鐘，合併萃取液，置70。C水浴中揮幹溶劑，殘渣用 甲醇轉容至50ml量瓶中，定容，搖勻，即為供試品溶液。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20W，注入液相色譜儀，記錄色譜圖， 以外標法計算斑蝥素含量，再乘以1.316，即得斑蝥酸鈉含量。結果斑蝥酸鈉實際含量在98%以上。 2純度檢査色譜條件與系統適用性試驗以辛烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇一O. 5%三乙胺(28 : 72)為流動相；流速為1. Oml/min;檢測波長為210nm;靈敏度為0. 005AUFS。理論塔板數按 斑蝥酸鈉峰計算，應不低於2000。供試品溶液製備精密稱取本品10mg，至10ml量瓶中，加水溶解並定容，搖勻，即為 供試品溶液。測定精密吸取供試品溶液20W，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以面積歸一化法檢査 斑蝥酸鈉的純度。結果斑蝥酸鈉純度大於98%。 3測定結果^ 含量(％) 純度《)實施例1 9^7§實施例2 99.8 99.2實施例3 99. 1 98.權利要求
1、一種斑蝥酸鈉的製備方法，其特徵在於包括將斑蝥蟲體加入預先用鹽酸飽和的乙酸乙酯浸泡提取斑蝥素的步驟。
2. 根據權利要求l的製備方法，其中斑蝥蟲體粉與鹽酸飽和的乙酸乙酯的重量 比為1: 7 9。
全文摘要
本發明公開了一種製備斑蝥酸鈉的工藝，它是由斑蝥蟲體的處理，斑蝥素的提取、純化精製，斑蝥酸鈉的合成、斑蝥酸鈉的純化精製等步驟。本發明具有工藝簡單實用、安全性好、製備的成品純度高，性質穩定，生產成本低等優點。可用於大針劑、大輸液、片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液及軟膏劑等多種劑型的生產。
文檔編號C07D493/08GK101633661SQ20091016937
公開日2010年1月27日 申請日期2007年2月13日 優先權日2007年2月13日
發明者郝守祝 申請人:北京世紀博康醫藥科技有限公司