一種促進羊肚菌菌絲生長的培養基的製作方法

2024-04-04 22:54:05

本發明涉及食藥用菌栽培領域，具體涉及一種通過優化培養基來促進羊肚菌菌絲生長的方法。

背景技術：

羊肚菌是一種珍貴的多年生大型藥用真菌，由於大多生長在桑屬植物上且子實體為黃褐色而得名。羊肚菌的藥物功效最早見於《本草綱目》、《藥性論》記載羊肚菌味苦、性寒。在我國傳統中醫藥中用於治療痢疾、盜汗、血崩、脫肛瀉血等症狀。最新研究表明，羊肚菌還具有獨特的抗癌功效，是目前國際公認的生物治癌藥劑中有效率最高的一種藥用真菌。羊肚菌的主要藥理活性成分是羊肚菌多糖，對羊肚菌進行人工培養的主要目的是獲得羊肚菌多糖入藥或用於保健品製劑生產，羊肚菌多糖一般通過發酵液、菌絲體和子實體提取途徑獲得。由於羊肚菌的使用量日益加大，加上日韓兩國對我國野生羊肚菌掠奪式的收購，導致野生羊肚菌的資源瀕臨枯竭；而我國對於羊肚菌的研究才剛剛起步，現階段針對羊肚菌菌的合適的母種培養基、液體培養基配方以及人工栽培技術還亟待完善。

技術實現要素：

本發明的目的在於克服現有培養基配方的缺陷，提供一種能夠促進羊肚菌菌菌絲生長的方法，以解決羊肚菌菌菌絲供應不足的缺陷，提高羊肚菌多糖的產量。

為實現上述目的，本發明採用如下技術方案：

一種促進羊肚菌菌絲生長的培養基，所述培養基配方如下：麥芽糖16-20g/l；酒石酸銨0.25-0.30g/l；kh2po40.8-1.2g/l；mgso4•7h2o0.3-0.5g/l；vb18-12mg/l；瓊脂18-22g/l。

其配置方法為：稱取麥芽糖、酒石酸銨、kh2po4、mgso4•7h2o、vb1，溶解於1l水中加入，充分攪拌均勻，加入瓊脂後加熱攪拌直至瓊脂融化；分裝入三角瓶中，在瓶口用封口膜密封好，121℃滅菌30min備用。

本發明的另一目的在於提供一種利用上述促進羊肚菌菌絲生長的培養基進行羊肚菌培養的方法，其具體步驟如下：

（1）接種：待培養基溫度降至36-40℃時，接種羊肚菌，按菌絲與培養料體積為1：50接種封口膜密封后放入培養箱培養；

（2）菌絲生長：羊肚菌在上述培養基上共生長10天，接種第三天開始劃線用籤字筆在培養皿上描繪最外圈的菌絲並用尺子測量直徑，之後每24小時劃一次線，共劃6次線；同時，觀察菌絲顏色、粗細、濃密程度和菌落長勢。

本發明的優點在於：

本發明優化了羊肚菌培養基的碳源和氮源使其更符合羊肚菌生長所需營養需求，加快了羊肚菌菌菌絲生長速率，降低生產羊肚菌多糖的成本；

採用麥芽糖作為培養羊肚菌菌絲培養基的碳源，其來源廣泛、價格低廉，且麥芽糖作為一種可食用多糖添加到培養基中安全無有害物質。酒石酸銨不僅可以提供豐富的氮源，還可以有效的控制培養基中的碳氮比，使羊肚菌處於一種最佳的生長環境。

採用優化後的培養基不僅可以提高羊肚菌菌菌絲生長速度還可防止由於菌絲生長時間過長導致的菌種退化。

具體實施方式

實施例1碳源、氮源的優化試驗

碳源：在基礎培養基中分別添加2％的葡萄糖、果糖、麥芽糖、蔗糖、可溶性澱粉、玉米粉、麵粉作為碳源，配成七種不同碳源的培養基以基礎培養基作為無碳源對照組，研究不同碳源對羊肚菌菌絲生長的影響。

研究發現麥芽糖為羊肚菌菌最適碳源。以麥芽糖作為碳源的作用效果最好，菌絲生長速率為2,89mm/d，菌絲直徑為42.59mm，菌絲生長指數有13.50。從菌絲生長指數上分析，麥芽糖的菌落直徑比對照組有明顯的增長。

氮源：在基礎培養基中分別添加0.3％的蛋白腖、酵母粉、黃豆粉、酒石酸銨、硫酸銨、硝酸銨作為氮源，配成六種不同氮源的培養基，以基礎培養基作為無氮源對照組，研究不同氮源對羊肚菌菌絲生長的影響。

發現酒石酸銨為羊肚菌最適氮源。以酒石酸銨作為氮源時，菌絲生長速率可為2.52mm/d。

實施例2

一種促進羊肚菌菌絲生長的培養基，其培養基配方如下：麥芽糖16g/l；酒石酸銨0.25g/l；kh2po40.8g/l；mgso4•7h2o0.3g/l；vb18mg/l；瓊脂18g/l。

其配置方法為：稱取麥芽糖、酒石酸銨、kh2po4、mgso4•7h2o、vb1，溶解於1l水中加入，充分攪拌均勻，加入瓊脂後加熱攪拌直至瓊脂融化；分裝入三角瓶中，在瓶口用封口膜密封好，121℃滅菌30min備用。

羊肚菌培養：

（1）接種：待培養基溫度降至36℃時，接種羊肚菌，封口膜密封后放入培養箱培養；

（2）菌絲生長：羊肚菌在上述培養基上共生長10天，接種第三天開始劃線，之後每24小時劃一次線，共劃6次線；同時，觀察菌絲顏色、粗細、濃密程度和菌落長勢。

實施例3

一種促進羊肚菌菌絲生長的培養基，其培養基配方如下：麥芽糖18g/l；酒石酸銨0.28g/l；kh2po41.0g/l；mgso4•7h2o0.4g/l；vb110mg/l；瓊脂20gg/l。

其配置方法為：稱取麥芽糖、酒石酸銨、kh2po4、mgso4•7h2o、vb1，溶解於1l水中加入，充分攪拌均勻，加入瓊脂後加熱攪拌直至瓊脂融化；分裝入三角瓶中，在瓶口用封口膜密封好，121℃滅菌30min備用。

羊肚菌培養：

（1）接種：待培養基溫度降至38℃時，接種羊肚菌，封口膜密封后放入培養箱培養；

（2）菌絲生長：羊肚菌在上述培養基上共生長10天，接種第三天開始劃線，之後每24小時劃一次線，共劃6次線；同時，觀察菌絲顏色、粗細、濃密程度和菌落長勢。

實施例4

一種促進羊肚菌菌絲生長的培養基，其培養基配方如下：麥芽糖20g/l；酒石酸銨0.30g/l；kh2po41.2g/l；mgso4•7h2o0.5g/l；vb112mg/l；瓊脂22g/l。

其配置方法為：稱取麥芽糖、酒石酸銨、kh2po4、mgso4•7h2o、vb1，溶解於1l水中加入，充分攪拌均勻，加入瓊脂後加熱攪拌直至瓊脂融化；分裝入三角瓶中，在瓶口用封口膜密封好，121℃滅菌30min備用。

本發明的另一目的在於提供一種利用上述促進羊肚菌菌絲生長的培養基進行羊肚菌培養的方法，其具體步驟如下：

（1）接種：待培養基溫度降至40℃時，接種羊肚菌，封口膜密封后放入培養箱培養；

（2）菌絲生長：羊肚菌在上述培養基上共生長10天，接種第三天開始劃線，之後每24小時劃一次線，共劃6次線；同時，觀察菌絲顏色、粗細、濃密程度和菌落長勢。

以上所述僅為本發明的較佳實施例，凡依本發明申請專利範圍所做的均等變化與修飾，皆應屬本發明的涵蓋範圍。