一種複方桑黃口服液及其製備方法
2024-03-01 02:29:15 1
一種複方桑黃口服液及其製備方法
【專利摘要】本發明公開了一種複方桑黃口服液及其製備方法，是應用生物工程發酵技術，以桑黃菌為出發菌株，經液體發酵、微波提取獲得富含桑黃多糖的粗多糖濃縮液，再加上絞股藍粗多糖濃縮液、蘆薈粗多糖濃縮液、黨參粗多糖濃縮液、枸杞粗多糖濃縮液（多糖濃度均達10mg/ml），經調配、裝瓶、鎖蓋、殺菌後製得複方桑黃口服液。經動物實驗研究表明，本發明的複方桑黃口服液具有增強單核-巨噬細胞功能、增強自然殺傷細胞活力，提示本複方桑黃口服液具有增強免疫功能的作用，可顯著提高機體特異性和非特異性免疫功能。
【專利說明】一種複方桑黃口服液及其製備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於保健品領域，具體涉及一種複方桑黃口服液及其製備方法。
【背景技術】
[0002]秦黃{PhelIinus igniarius (L.ex Fr.) Quel),屬擔子菌綱、多孔菌目、多孔菌科、針層孔菌屬，俗稱火木層孔菌、針層孔菌、桑耳、桑臣、胡孫眼等。桑黃是一種珍貴的藥用真菌，在我國傳統中醫藥領域中主要用以治療淋病、崩漏、帶下、疵瘕積聚、癖軟、脾虛洩瀉等，在日本則作為利尿劑使用。近年來，國內外學者對桑黃的藥理作用作了較為深入的研究，證實桑黃子實體及其提取物除了具有傳統認知的藥理作用以外，還具有抗癌、抗腫瘤、抗誘變、免疫調節、保肝和抗肝硬化等作用。
[0003]桑黃加工品在國際醫藥市場上價格昂貴，但由於野生桑黃越來越稀少，且外銷需求量大，往往出現供不應求的局面。在我國，桑黃的人工栽培研究才剛剛起步，無法滿足市場的需求，且主要針對桑黃子實體及其提取物，較少以桑黃液體發酵提取物進行研究。現代研究表明，桑黃中具有抗癌作用的物質是桑黃多糖，它能通過細胞調節和體液免疫來提高免疫力而抑制腫瘤細胞的生長和轉移，並且無毒副作用。因此，研究桑黃液體發酵提取物——桑黃多糖，對於保護天然資源、解決資源缺乏，具有十分重要的意義。劉斌等的發明專利(CN 103405639A)介紹了一種桑黃多糖與中藥複方降血糖口服液及其製備方法，它以桑黃液體菌為出發菌，進行巨菌草固體發酵，獲得大量的桑黃菌絲；採用熱水浸提法提取桑黃多糖，去雜、醇沉、濃縮後冷凍乾燥成多糖粉末；最後將多糖粉末與中藥複方濃縮液(玉竹、黃芪、桑葉、三七、枸杞子)混合配製成不同劑量的複合物。桑黃多糖與中藥複方降血糖複合物經藥效學實驗，表明高劑量組的血糖下降率高達44.62%，具有很強的降血糖效果。
[0004]但目前尚未見以桑黃多糖作為主要成分，結合其它增強免疫的藥食兩用材料的提取物多糖，經複方調配製成具有增強免疫功能的口服液的報導。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在於提供一種複方桑黃口服液，製備工藝穩定可靠，可操作性強，生產周期短，降低生產能耗；通過與其他藥食兩用原料的協同作用，可達到較好的保健效果。經動物試驗表明，本複方桑黃口服液具有增強單核-巨噬細胞功能、增強自然殺傷細胞活力，提示本複方桑黃口服液具有增強免疫功能的作用，可顯著提高機體特異性和非特異性免疫功能。
[0006]為實現上述目的，本發明採用如下技術方案:
一種複方桑黃口服液中的組分及各組分重量百分數為:桑黃粗多糖濃縮液60%，絞股藍粗多糖濃縮液10%，蘆薈粗多糖濃縮液10%，黨參粗多糖濃縮液10%，枸杞粗多糖濃縮液10%。
[0007]所述複方桑黃口服液的製備方法，是以桑黃菌為出發菌株，經液體發酵、微波提取獲得富含桑黃多糖的粗多糖濃縮液，再加上絞股藍粗多糖濃縮液、蘆薈粗多糖濃縮液、黨參粗多糖濃縮液、枸杞粗多糖濃縮液調製而成。
[0008]所述複方桑黃口服液的具體製備方法包括以下步驟:
O桑黃菌的液體發酵:
按專利文件CN 100438882C中的桑黃菌液體發酵方法進行發酵，得發酵醪；
2)桑黃粗多糖濃縮液的製備:
將發酵醪經板框壓濾後，得到發酵液和富含菌絲的濾渣A ;將濾渣A加入其重量1-5倍的水，微波功率480W處理lOmin，再經板框壓濾得第一次提取液和濾渣B ;將濾渣B再重複提取、過濾，得第二次提取液；將發酵液和兩次提取液合併，50-7(TC，0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%-20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10_20h後離心得沉澱物，再加水溶解得桑黃粗多糖濃縮液，其多糖含量為IOmg/
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[0009]3)絞股藍粗多糖濃縮液的製備:
取絞股藍洗淨、粉碎，加入絞股藍重量10-30倍水，微波功率250W處理1-2 min，經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，50-70°C，0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%_20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10-20h後離心得沉澱物，再加水溶解得絞股藍粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL ；
4)蘆薈粗多糖濃縮液的製備:
將新鮮蘆薈葉洗淨、去皮取凝膠體，按凝膠體重量10-20倍加入水，微波功率250W處理1-2 min，經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，50-70°C，0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%-20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10-20h後離心得沉澱物，再加水溶解得蘆薈粗多糖濃縮液，其多糖含量為lOmg/mL ；
5)黨參粗多糖濃縮液的製備:
取黨參洗淨、切碎，按黨參重量10-30倍加入水，微波功率480W處理5-10 min，經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，50-70°C，0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%_20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10-20h後離心得沉澱物，再加水溶解得黨參粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL ；
6)枸杞粗多糖濃縮液的製備:
取枸杞洗淨，按枸杞重量5-15倍加入水，微波功率480W處理5-10 min,經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，50-70°C,0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%_20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10-20h後離心得沉澱物，再加水溶解得枸杞粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL ；
7)口服液的調製:
將所得桑黃粗多糖濃縮液、絞股藍粗多糖濃縮液、蘆薈粗多糖濃縮液、黨參粗多糖濃縮液和枸杞粗多糖濃縮液按所述比例混合均勻後，經裝瓶、鎖蓋、殺菌後即為成品。
[0010]本發明的顯著優點在於:本發明複方桑黃口服液的製備工藝穩定可靠，而且採用微波結合熱水浸提法進行提取，可操作性強，生產周期短，降低了生產能耗；通過與其他藥食兩用原料的協同作用，生產成本更低的同時可達到較好的保健效果。經動物試驗表明，本發明複方桑黃口服液的高劑量組(40ml/kg)能明顯增強小鼠碳廓清能力，中(20ml/kg)、高劑量組能明顯提高小鼠巨噬細胞對雞紅細胞的吞噬百分率和吞噬指數，低(10ml/kg)、中、高劑量組能明顯增強小鼠NK細胞活力，表明本複方桑黃口服液具有增強單核-巨噬細胞功能、增強NK細胞活力，提示本複方桑黃口服液具有增強免疫功能的作用，可顯著提高機體特異性和非特異性免疫功能。
【具體實施方式】
[0011]一種複方桑黃口服液，是以桑黃菌為出發菌株，經液體發酵、微波提取獲得富含桑黃多糖的提取液，再經醇析後製成桑黃粗多糖濃縮液，再加上絞股藍粗多糖濃縮液、蘆薈粗多糖濃縮液、黨參粗多糖濃縮液、枸杞粗多糖濃縮液，經調配、裝瓶、鎖蓋、殺菌後製得所述複方桑黃口服液。
[0012]其製備包括以下步驟:
O桑黃菌的液體發酵:
桑黃菌種由福建農林大學生命科學學院微生物保藏室提供，編號為/?.7 0001 ；
將桑黃保存種用馬鈴薯培養基(PDA培養基)進行活化、復壯，置28°C恆溫箱靜止培養15天，得到生產斜面種，置冰箱中冷藏備用；所述的PDA培養基的配方為(g/L):去皮馬鈴薯200，葡萄糖20，瓊脂20，加水定容至所需體積，pH自然；
將生產斜面種用搖瓶培 養基進行擴大培養，得到生產搖瓶一級種；所述的搖瓶培養基的配方為(g/L):玉米粉50、麩皮粉30、KH2PO4 3、MgSO4.7H20 1.5、VB1 0.1，加水定容至所需體積，pH自然；培養條件為:以160mL/500mL裝量，接入Icm2的斜面菌種，旋轉式搖床140rpm培養8d，溫度28°C ;將生產搖瓶一級種按15%的接種量，按上述搖瓶培養基的配方和培養條件再次用搖瓶培養基進行擴大培養5天，得到生產搖瓶二級種；
將生產搖瓶二級種轉接入裝有發酵培養基的200L種子罐進行擴大培養得到發酵一級種；所述的發酵培養基的配方為(kg/100L):黃豆粉4、玉米粉3、麩皮粉0.5、酵母粉0.4、CaSO4 UK2SO4 0.UNa2HPO4 0.15、ZnSO4.7H20 0.0UFeSO4.7H20 0.05、VB1 0.01，加水定容至100L，pH 7;培養條件為:接種量4L，罐溫28°C，罐壓0.05MPa，攪拌轉速100 rpm，通氣量1:0.5 v/v.min，發酵培養4 d ;按上述發酵培養基的配方和培養條件將發酵一級種轉接入裝有2500L發酵培養基的5000L發酵罐培養，發酵6 d放罐，得發酵醪；
2)桑黃粗多糖濃縮液的製備:
將發酵醪經板框壓濾後，得到發酵液和富含菌絲的濾渣A ;將濾渣A加入其重量3倍的水，微波功率480W處理lOmin，再經板框壓濾得第一次提取液和濾渣B ;將濾渣B再重複提取、過濾，得第二次提取液；將發酵液和兩次提取液合併，60°C，0.0SMPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為16%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為75%，冷卻靜置15h後離心得沉澱物，再加水溶解得桑黃粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL。
[0013]3)絞股藍粗多糖濃縮液的製備:
取絞股藍洗淨、粉碎，加入絞股藍重量20倍水，微波功率250W處理2 min,經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，60°C,0.08MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為75%，冷卻靜置15h後離心得沉澱物，再加水溶解得絞股藍粗多糖濃縮液，其多糖含量為 10mg/mL ；
4)蘆薈粗多糖濃縮液的製備:
將新鮮蘆薈葉洗淨、去皮取凝膠體，按凝膠體重量10倍加入水，微波功率250W處理Imin，經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，60°C，0.08MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為75%，冷卻靜置15h後離心得沉澱物，再加水溶解得蘆薈粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL ；
5)黨參粗多糖濃縮液的製備:
取黨參洗淨、切碎，按黨參重量30倍加入水，微波功率480W處理8 min,經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，65°C，
0.09MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為75%，冷卻靜置15h後離心得沉澱物，再加水溶解得黨參粗多糖濃縮液，其多糖含量為IOmg/mL ；
6)枸杞粗多糖濃縮液的製備:
取枸杞洗淨，按枸杞重量10倍加入水，微波功率480W處理10 min,經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，70°C，
0.09MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為18%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為75%，冷卻靜置15h後離心得沉澱物，再加水溶解得枸杞粗多糖濃縮液，其多糖含量為IOmg/mL ；
7)口服液的調製:
將桑黃粗多糖濃縮液60 wt%，絞股藍粗多糖濃縮液10 wt%，蘆薈粗多糖濃縮液10 wt%,黨參粗多糖濃縮液10 wt%和枸杞粗多糖濃縮液10 wt%混合均勻後，經裝瓶、鎖蓋、殺菌後即為複方桑黃保健口服液。
[0014]將本實施例的複方桑黃保健口服液，按衛生部《保健食品檢驗與評價技術規範》(2003年版)所述方法進行增強免疫的藥效學試驗，其結果如下:
1.樣品對小鼠體重的影響
分別將不同劑量的複方桑黃口服液與專利文件CN 100438882C中的桑黃保健口服液作為樣品，以生理鹽水作為陰性對照，對灌胃小鼠2周，研究其對小鼠體重的影響，結果如表1、表2所不。
[0015]表I樣品(免疫I組)對小鼠體重的影響(g，X 土S)
【權利要求】
1.一種複方桑黃口服液，其特徵在於:所述複方桑黃口服液中的組分及各組分重量百分數為:桑黃粗多糖濃縮液60%，絞股藍粗多糖濃縮液10%，蘆薈粗多糖濃縮液10%，黨參粗多糖濃縮液10%，枸杞粗多糖濃縮液10%。
2.一種如權利要求1所述複方桑黃口服液的製備方法，其特徵在於:以桑黃菌為出發菌株，經液體發酵、微波提取獲得富含桑黃多糖的粗多糖濃縮液，再加上絞股藍粗多糖濃縮液、蘆薈粗多糖濃縮液、黨參粗多糖濃縮液、枸杞粗多糖濃縮液調製而成。
3.根據權利要求2所述複方桑黃口服液的製備方法，其特徵在於:將經液體發酵得到的發酵醪經板框壓濾後，得到發酵液和富含菌絲的濾渣A ;將濾渣A加入其重量1-5倍的水，微波功率480W處理lOmin，再經板框壓濾得第一次提取液和濾渣B ;將濾渣B再重複提取、過濾，得第二次提取液；將發酵液和兩次提取液合併，50-7(TC，0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%-20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10_20h後離心得沉澱物，再加水溶解得桑黃粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL。
4.根據權利要求2所述複方桑黃口服液的製備方法，其特徵在於:所述絞股藍粗多糖濃縮液的製備方法為:取絞股藍洗淨、粉碎，加入絞股藍重量10-30倍水，微波功率250W處理1-2 min，經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，50-700C，0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%-20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10-20h後離心得沉澱物，再加水溶解得絞股藍粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL。
5.根據權利要求2所述複方桑黃口服液的製備方法，其特徵在於:所述蘆薈粗多糖濃縮液的製備方法為:將新鮮蘆薈葉洗淨、去皮取凝膠體，按凝膠體重量10-20倍加入水，微波功率250W處理1-2 min，經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，50-7(TC，0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%-20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10-20h後離心得沉澱物，再加水溶解得蘆薈粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL。
6.根據權利要求2所述複方桑黃口服液的製備方法，其特徵在於:所述黨參粗多糖濃縮液的製備方法為:取黨參洗淨、切碎，按黨參重量10-30倍加入水，微波功率480W處理5-10 min,經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，50-70°C，0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%-20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10-20h後離心得沉澱物，再加水溶解得黨參粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL。
7.根據權利要求2所述複方桑黃口服液的製備方法，其特徵在於:所述枸杞粗多糖濃縮液的製備方法為:取枸杞洗淨，按枸杞重量5-15倍加入水，微波功率480W處理5-10 min,經板框壓濾得第一次提取液和濾渣；將濾渣再重複提取、過濾，得第二次提取液；合併兩次提取液，50-70°C，0.05-0.095MPa下低溫真空濃縮至可溶性固形物含量為15%_20%，加入乙醇，使醇析時的乙醇濃度為70%-75%，冷卻靜置10-20h後離心得沉澱物，再加水溶解得枸杞粗多糖濃縮液，其多糖含量為10mg/mL。
8.根據權利要求2所述複方桑黃口服液的製備方法，其特徵在於:將所得桑黃粗多糖濃縮液、絞股藍粗多糖濃縮液、蘆薈粗多糖濃縮液、黨參粗多糖濃縮液和枸杞粗多糖濃縮液按比例混合均勻後，經裝瓶、鎖蓋、殺菌後即為成品。
【文檔編號】A23L1/09GK103876014SQ201410122454
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2014年3月31日 優先權日:2014年3月31日
【發明者】傅海慶, 傅華英, 林希 申請人:福建農林大學