一種有效去除人免疫球蛋白多聚體的方法

2023-11-01 02:06:37 1

一種有效去除人免疫球蛋白多聚體的方法
【專利摘要】本發明公開了一種有效去除人免疫球蛋白多聚體的方法。免疫球蛋白提純工藝中降低多聚體，十分必要。目前公開報導能去除人免疫球蛋白多聚體的方法有聚乙二醇法和柱層析法，但這兩種方法存在添加物難以去除、處理量小、設備昂貴的問題，推廣應用較困難。本發明利用辛酸鈉沉澱法，選取在溶液pH值5.4,辛酸鹽濃度6-8mmol/L的條件下，沉澱去除IgG多聚體，能夠有效地去除多聚體60%以上，使多聚體降低到3%以下，免疫蛋白的損失甚微，多聚體含量穩定，放置2年後仍可以達到《中國藥典》和國外相關藥典的要求。
【專利說明】一種有效去除人免疫球蛋白多聚體的方法
[0001]

【技術領域】
[0002] 本發明涉及生物製藥領域，特別是一種有效去除人免疫球蛋白多聚體的方法。

【背景技術】
[0003] 免疫球蛋白是一組具有抗體活性的蛋白質，分為186、1§八、1§11、1 §0、1§￡五類。經 輸注後，能迅速提高受者血液中的IgG水平，增強機體的抗感染能力和免疫調節功能。現公 開報導人免疫球蛋白提取方法大都採用E. J. Cohn教授創立的低溫乙醇分級沉澱技術，或 在Cohn氏工藝分級基礎上結合一步或多步離子交換層系統，或結合辛酸沉澱-層析達到提 純而成；病毒滅活方法大都採用經典的巴氏滅活法、有機溶劑法、低PH孵放法等。但無論採 用哪種方法，在製備過程由於乙醇的作用，或加熱等步驟等影響，都會產生多聚體。IgG多 聚體為Clq提供兩個以上的結合位點，在沒有結合抗原的情況下，激活了補體造成補體的 消耗，使機體的免疫防禦能力下降。同時，由於補體系統的激活，產生大量過敏毒素、過敏介 質，引起炎症反應，從而引起少數患者出現不良反應，頭疼、潮紅、噁心、休克等症狀，所以產 品中多聚體含量的多少決定了免疫球蛋白的質量。為此在各國藥典中，人免疫球蛋白明確 規定了多聚體的含量要求：

【權利要求】
1. 一種有效去除人免疫球蛋白多聚體的方法，其特徵在於包括如下步驟： (1) 調整蛋白液蛋白質含量4?7g/L，調整溶液pH值5. 35?5. 55 ; (2) 加入辛酸鈉溶液，使辛酸鈉最終含量達到6?8mmol/L，加入速度10?15L/h，加畢 攪拌4小時以上，複測溶液pH值為5. 35?5. 55,否則用pH4. 0醋酸緩衝液調整至該範圍 內，溫度控制在15?25 °C ; (3) 靜置2小時後壓濾分離沉澱，收集上清液，進行超濾透析即為原液，稀釋配製後除 菌分裝。
2. 根據權利要求書1中所述的一種有效去除人免疫球蛋白多聚體的方法，其特徵在 於：步驟（1)所述的蛋白液，為FII沉澱經溶解後或巴氏滅活後的蛋白液經超濾透析後的溶 液。
3. 根據權利要求書1中所述的一種有效去除人免疫球蛋白多聚體的方法，其特徵在 於：步驟（2)所述的辛酸鈉溶液為濃度為lmol/L的水溶液。
【文檔編號】C07K1/30GK104356231SQ201410626556
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年11月10日 優先權日:2014年11月10日
【發明者】莫麗影, 吳志捷, 袁小琴 申請人:北海開元生物科技有限公司